Enfoques transgénicos para mejorar la tolerancia a la sal y la sequía en las plantas

resumen
Las tensiones abióticas como la sequía, la salinidad, las temperaturas extremas y el estrés por metales pesados son las
responsables de reducción de los rendimientos de los cultivos en todo el mundo. La situación puede empeorar aún más con
la reducción de la tierra cultivable en países de Asia debido a la explosión demográfica. Aunque los programas de
mejoramiento convencionales desarrollaron variedades tolerantes al estres, el ritmo fue muy lento debido a la complicación
en el estrés abiótico por los rasgos multigénicos complejos y procedimientos engorrosos de fenotipado. Con el comienzo de
la biotecnología vegetal, se han realizado enormes esfuerzos para diseñar la tolerancia al estrés en cultivos principales y
plantas modelo. Se ha identificado una cantidad sustancial de genes sensibles al estrés y / o regulados por el estrés. Abordar
estas limitaciones nos ayudaría a comprender mejor cómo las plantas transgénicas toleran la sequía y la salinidad. Una
visión general de las metodologías actuales y futuras nos permitiría obtener más información para comprender los enfoques
transgénicos de la tolerancia al estrés abiótico.
1. Introduction
Los estreses abióticos siguen siendo las mayores limitaciones para la producción de cultivos ya que las plantas están
constantemente expuestas a una amplia gama de estreses como la sequía, la salinidad y la temperatura extrema. Se ha
estimado que aproximadamente el 70% de la reducción del rendimiento es predominantemente debido a estreses abióticos,
(Wild, 2003). Afectan negativamente el crecimiento de las plantas, la productividad de los cultivos y, posteriormente, la
muerte de la planta. El estrés salino en las plantas conduce predominantemente al cierre de estomas y trae sobre una fuerte
caída en la relación dióxido de carbono / oxígeno. La relación reducida da como resultado la generación de altas cantidades
de especies reactivas de oxígeno (ROS) que contribuyen al estrés oxidativo. En condiciones aeróbicas normales, las ROS
se neutralizan efectivamente, pero en condiciones de estrés abiótico, existe un exceso de producción de ROS que es
perjudicial para el crecimiento y la supervivencia de la planta (Das y Roychoudhury, 2014).
La sequía, la salinidad, los cambios climáticos y el envenenamiento por metales pesados han dificultado el cultivo de
cultivos al afectar el crecimiento de las plantas, minimizar la calidad de las semillas y reducir el rendimiento de los cultivos
(Cattivelli et al., 2008). En total, la sequía y la sal afectaron las áreas de cobertura del suelo de 60 y 10.5 millones de km2,
respectivamente (Qadir et al., 2014; FAO, 2010). La pérdida de tierras cultivables debido a la salinidad o la sequía ha
planteado un desafío importante para mantener el suministro de alimentos para la población en crecimiento exponencial.
Además, el cambio climático ha acelerado la frecuencia y la gravedad de muchos estreses abióticos, en particular la sequía
y las altas temperaturas. Debido al cambio climático, se informaron reducciones significativas en el rendimiento de las
principales especies de cereales, como el trigo, el maíz y la cebada (Jaleel et al., 2009). El cambio climático hizo que las
precipitaciones fueran menos predecibles junto con el cambio en el patrón general de precipitaciones. Todos estos factores
se combinan para tener un efecto adverso en los cultivos agrícolas.
Durante el último siglo, los mejoradores de plantas lograron un progreso significativo a través de la mejora convencional
desarrollando cultivares tolerantes a la sequía y tolerantes a la sal (Wani et al., 2012). Para satisfacer las necesidades de una
población creciente, los científicos desarrollaron criadores asistidos por marcadores (MAB) (QTL) tecnologías (Flowers et
al., 2000). MAB es un enfoque más eficiente, que identifica miles de regiones genómicas efectivas de un cultivo bajo
condiciones de estrés. El MAB se ha utilizado con éxito para mejorar la tolerancia al registro de agua y mejorar el
crecimiento y la productividad de las plantas en el maíz (Lone et al., 2016). El análisis de QTL se realiza para identificar
las regiones específicas en el ADN genómico de una especie de planta que se correlaciona con los genes expresados en
condiciones de estrés abiótico. La técnica MAB es costosa y es menos eficiente para el análisis de los rasgos fenotípicos.
QTL para la tolerancia a la sequía y la sal se han identificado para una variedad de rasgos en diferentes cultivos. Sin embargo,
existe una gran preocupación con respecto a la exactitud y precisión en el análisis de QTL.
Para superar estos problemas, existe una necesidad urgente de desarrollar variedades que puedan mantener niveles óptimos
de producción bajo estrés abiótico. En tales circunstancias, un enfoque transgénico parece más convincente y práctico. Se
está llevando a cabo ampliamente en todo el mundo para mejorar los rasgos cualitativos y cuantitativos que incluyen la
tolerancia al estrés por sal y sequía (Wani et al., 2016). En resumen, el objetivo es desarrollar plantas transgénicas que
puedan conferir tolerancia a estreses abióticos como así como alto rendimiento y biomasa.
Los enfoques transgénicos implican la transferencia de genes diana específicos que incluyen los genes que codifican los
factores transcripcionales, la regulación de la producción de metabolitos y también los cofactores implicados en la
modificación de proteínas. El transgén puede derivarse de especies vegetales o de otra fuente, como las bacterias. La
expresión del transgén en la planta puede lograrse mediante integración estable del transgén deseado que conduce a la
transformación del genoma nuclear o mediante el uso de vectores vegetales modificados.
Las plantas transgénicas que se han desarrollado para mejorar el rendimiento del grano, la sequía y la tolerancia a la salinidad
incluyen arroz (Wani y Sah, 2014), cebada, tomate, maíz (Dar et al., 2016), tabaco, etc. (Dwivedi et al., 2010) . En esta
revisión, discutimos varios enfoques transgénicos desarrollados y empleados para mejorar la tolerancia al estrés abiótico,
en particular a la sequía y el estrés salino.
2. Antecedentes de estrés por sal y sequía
La alta salinidad y la sequía son los principales problemas ambientales que causan pérdidas significativas en la producción
mundial de cultivos. La superficie de la tierra está cubierta predominantemente por casi un 70% de agua salina. Los
principales iones responsables de la salinidad incluyen Na + , Ca 2 + , Mg 2 + , K + , Cl - , SO 4 2 - , HCO 3 - , CO 3 2 - y
NO 3 2 - ( Flowers et al., 2000 ). El exceso de acumulación de sales en el suelo o en el agua se denomina salinización. La
erosión mineral, el polvo, la precipitación y el movimiento hacia adentro de la sal hacia la superficie de la tierra junto con
el agua subterránea son la causa principal de la salinización. A veces las actividades antropogénicas como el uso de agua
salina para irrigación, la acuicultura y el uso de potasio como fertilizante, que forma sal sylvite, una sal natural que puede
conducir a la salinización.
La sequía es una condición en la que las plantas reciben menos que óptimos niveles de agua necesarios para su
supervivencia. Menos lluvia, interrupción en el patrón de lluvia, prácticas de riego defectuosas conducen a la sequía (
Tuberosa y Salvi, 2006 ). En consecuencia, esto lleva a la marchitez y la pérdida de la capacidad fotosintética en las plantas
sometidas a estrés hídrico. Las condiciones severas de sequía resultan en un rendimiento reducido y muerte de la planta.
2.1. Tolerancia a la sal: respuesta y mecanismo
La respuesta a estreses abióticos como la sequía, la salinidad, las temperaturas extremas y el estrés oxidativo a menudo
están interconectados e inducen un daño celular similar. El efecto de la salinidad y la sequía son-ex presionado por una serie
de características morfológicas, fisiológicas, metabólicas y cambios moleculares en plantas. Por ejemplo, la sequía y / o la
salinidad conducen al estrés osmótico y da como resultado la alteración de la homeostasis y la distribución iónica en la
célula ( Bhattachrjee, 2005; Serrano et al., 1999 ). La respuesta bifásica - La primera fase (interrupción de la homeostasis)
y la segunda fase (interrupción de la distribución de iones) de las plantas se ha atribuido a la inhibición del crecimiento de
las plantas bajo estrés salino.
La respuesta bifásica en plantas fue propuesta inicialmente por Munns y Termaat (1986) , Munns et al. (1995) , Munns
(2002) . El osmótica (f i RST) La fase de respuesta al crecimiento se debe a la gran acumulación de sal fuera de la planta.
Los niveles de Na + y Cl - fuera de la célula están alterados (concentraciones elevadas) mientras que los niveles de Na + y
Cl - en el interior de la célula no se alteran. Esto reduce el agua i Ntake capacidad de las plantas que llevan a-de agua cit fi
y se caracteriza por la hoja reducida y crecimiento de las raíces. Las respuestas iniciales de la planta observadas durante
estos procesos son el cierre de los estomas. Las respuestas de las plantas en términos de los pro-cesos celulares y metabólicos
son similares a las de un ff ected por la sequía.
La (segunda) fase iónica de la respuesta de crecimiento se induce por el tóxico e ff ect de iones de sal. La exposición
prolongada de las plantas a una alta salinidad conduce a la entrada de sales en las plantas que se acumulan en las hojas más
viejas, dando como resultado iones citosólicos muy altos de Na + y Cl - . Posteriormente, el aumento de las concentraciones
de iones de sal interrumpe la estructura de la membrana y los organelos celuloides; alterar la tasa fotosintética y de
transpiración; inhibir la actividad de la enzima; y finalmente la muerte de las hojas. Como la tasa de muerte de la hoja
excede la tasa de formación de nuevas hojas, la supervivencia de la planta es minimizado ( Gilroy et al., 2014 ).
El modelo bifásico ha sido ampliamente estudiado y validado en maíz (Zea mays L.) ( Fortmeier y Schubert, 1995 ), trigo (
Wakabayashi et al., 1997 ), tomate ( Maggio et al., 2007 ), arroz ( Negrão et al., 2011 ), cebada ( Adem et al., 2014 ) y algo
más importante cultivos. El modelo de respuesta bifásica de las plantas bajo salinidad ha permitido comprender las
conversaciones cruzadas entre diversos factores de estrés abióticos, así como la alteración de la expresión génica implicada
en la respuesta al estrés. Fortmeier y Schubert (1995) observado la respuesta de inhibición del crecimiento bifásica para las
sales (NaCl y Na 2 SO 4) en dos variedades de maíz (Zea mays cv. Pioneer 3906 y cv. Al otro lado de 8023). Maggio et al.
(2007) estudiaron la respuesta bifásica en tomate cuando se sometió a su nivel umbral de tolerancia a la salinidad. Respuestas
similares de dos fases también se dieron a conocer en la cebada bajo estrés salino ( Adem et al., 2014 ). Adem et al. (2014)
estudiado tres cultivares de cebada y concluyeron que la inicial la respuesta osmótica al estrés fue rápida y condujo a una
reducción drástica de tres a cinco veces la biomasa (peso) y la inhibición del crecimiento de la planta. Además, la exposición
prolongada a la salinidad (4 semanas) inició la segunda fase. Los cultivares de cebada mostraron un contenido reducido de
clorofila, concentraciones iónicas celulares alteradas caracterizadas por una alta acumulación de Na + y un aumento del
estrés oxidativo. J. Li y col. (2015) observó la inhibición del crecimiento bifásico en A. thaliana bajo estrés salino. La
sobreexpresión del gen RAV1 del algodón en A. thaliana confirió tolerancia a la salinidad y a la sequía (XJ. Li et al., 2015).
Las plantas han desarrollado gradualmente tres estrategias fundamentales para superar la inhibición del crecimiento bifásico
y prosperar en condiciones de alta salinidad. Las tres estrategias empleadas por las plantas para mantener una baja
concentración de sodio citosólico son la exclusión iónica, la compartimentalización y la osmoprotección. La exclusión de
iones implica la exclusión neta de iones acumulados que son tóxicos para las plantas a través de intercambiadores de iones
(NHX). La compartimentación de iones tóxicos (Na + ) en vacuolas a través de canales iónicos (V-PPasas, V-ATPasas, Na
+ / K + antiportadores) puede mejorar la tolerancia del tejido. El ajuste osmótico y la osmoprotección de las células incluye
la regulación positiva de genes candidatos para sintetizar osmolitos, aquaporinas y enzimas antioxidantes para aumentar la
tolerancia al estrés salino ( Chakraborty y Roychoudhury, 2013 ).
2.2. Tolerancia a la sequía:
respuesta y mecanismo La respuesta de crecimiento inicial al estrés por sequía es idéntica a la os- fase motriz como se ve
en plantas bajo estrés salino. Hay un general déficit fisiológico de agua que afecta las actividades metabólicas de las plantas.
El inicio de la sequía cambia inmediatamente el estado celular, altera la fluidez de la membrana y la composición lipídica,
e inicia la señalización cascadas que finalmente conducen a la acumulación de transcripciones de genes codificación de
actividades de protección y acompañante. Este estrés osmótico conduce marchitamiento asociado con la pérdida de la
presión de la turgencia, y en última instancia, desecación completa Disminución en la presión de turgencia reduce la difusión
de CO 2 a través de los estomas y las células del mesófilo dando como resultado el cierre estomático. Las tasas fotosintéticas
se reprimen ya que el suministro de CO 2 se limita a enzima RUBISCO, inhibiendo así la conversión de CO 2 inorgánico
en formas orgánicas, que es el primer paso de la fotosíntesis. El mayor los efectos perjudiciales de la sequía son la pérdida
de la función del fotosistema II que conduce a la disminución de la actividad fotosintética y la desestabilización de Enzima
RUBISCO ( Nishiyama y Murata, 2014; Pandey et al., 2015 )
Los mecanismos de tolerancia a la sequía incluyen resistencia al follaje y hoja reducción de área. Ambos mecanismos están
involucrados en la reducción de la tasa de la absorción de luz y radiaciones excesivas minimizando la ex- área planteada a
la luz. El cierre estomático de la respuesta inicial de la planta es regulado por las señales hidráulicas y químicas (ABA).
Aparte de controlando el cierre estomático también regulan el crecimiento de la planta durante el suelo secado ( Wasilewska
et al., 2008; Tardieu et al., 2010 ) y reducen las intercambio de matal a la pérdida de agua y difusión de CO 2 .
Los sensores celulares inicialmente perciben y responden a la sequía emitió señalización, desencadenando la expresión
génica para sintetizar señales como ABA. ABA juega el papel más fundamental en la inducción de tolerancia al estrés por
sequía. Los genes que están involucrados en aliviar Las tensiones osmóticas están reguladas a través de un ABA-dependiente
o por un ABA- vía de transducción de señal sensible al estrés osmótica e independiente ( Roychoudhury et al., 2013 ). Más
cascadas de señalización son entonces para señalar nuevos patrones de expresión genética que se proponen para jugar un
papel en la adaptación celular al estrés hídrico ( Bray, 2002 ). los la hormona vegetal etileno también está involucrada en la
regulación de la planta proceso evolutivo en respuesta al estrés por sequía. Señalización de etileno juega un papel vital en
el cierre de los estomas. La enzima 1-aminociclopropano La oxidasa del ácido 1-carboxílico (ACC) convierte el ACC en
etileno y se convierte en ... asociado a la tolerancia al estrés por sequía. El etileno contribuye a la sequía tolerancia al limitar
el consumo de energía y la disipación e inducción senescencia de la hoja
 Estudios recientes sobre el trigo ( Keles y Oncel, 2002 ), cebada ( Rollins) et al., 2013 ), pastizales alpinos ( De Boeck et
al., 2015 ) y cítricos ( Zandalinas et al., 2016 ) sugirieron que la sequía en combinación con el estrés por calor obstaculiza
gravemente el crecimiento y la productividad de las plantas. los estudios anteriores concluyeron que hay subconjuntos de
genes inducidos en combinación de calor y estrés por sequía, que no fueron inducidos por cualquiera de los dos enfatiza
independientemente.
3) Genes candidatos involucrados en la respuesta al estrés por sal y sequía
Las plantas responden a las condiciones limitantes del agua alterando la expresión sion de una compleja gama de genes.
Cuando una planta encuentra sal y condiciones de estrés por sequía, la tolerancia es conferida por el estrés sensible genes.
Estos genes alivian el efecto del estrés al regular la tasa de homeostasis de iones y la absorción de osmolitos del suelo y su
transporte a través de la planta ( Figura 1 ) Por lo tanto, mantienen la iónica y homeostasis osmótica ( Hossain et al., 2016)
) y monitorizar la hoja desarrollo y el inicio de la senescencia ( Cuartero et al., 2010 ).
Los genes sensibles al estrés se pueden categorizar en tres grupos: genes que codifican proteínas implicadas en la percepción
de la señal y la transcripción control tional Munns y Tester, 2008; Surekha et al., 2015 ), genes codificación de proteínas y
productos que confieren directamente protección a la células vegetales ( Zhu, 2001; Surekha et al., 2015 ) y genes que están
en la homeostasis iónica de las células regulando el agua y la ionización tomar y transportar ( Bray, 1997; Surekha et al.,
2015 ).
Los genes implicados en la percepción de la señal y el control de la transcripción incluye proteína quinasas activadas por
mitógeno (MAPK) quinasas, SOS ki- nases ( Bray, 1997 ), fosfolipasas y factores de transcripción (TF). Los factores de
transcripción pertenecen a varias familias de genes como APETALA2, proteínas de unión a elementos sensibles al etileno,
transcripción de choque térmico factores funcionales (HSF), CBF / DREB (C-repeat-binding / deshidratación-re- elemento
esponsor), bZIP (cremallera de leucina de dominio básico), NAC, MYB / MYC, motivos de dedo de cinc Cys2 / His2 y
WRKY ( Bray, 1997) ; Umezawa et al., 2006 ).
Los genes que confieren directamente protección a los códigos de células vegetales para proteínas relacionadas con el
soporte de la integridad de las estructuras celulares, o destrucción de estructuras dañadas por estrés osmótico. Embrionario
tardío proteínas abundantes eses (LEA), proteínas de choque térmico (HSP) ( Zhu, 2001 ), osmolitos y osmoprotectores (
Surekha et al., 2014) ), antioxidante zymes caen bajo la segunda categoría ( Blokhina et al., 2003; Neelapu et al., 2015 ) La
tercera categoría incluye las acuaporinas y el ion transportadores.
Hasta la fecha se han llevado a cabo extensas investigaciones y ensayos de campo. Algunos de los ensayos de campo
exitosos de plantas y cultivos transgénicos incluyen: arroz ( Nakashima et al., 2007; Xiao et al., 2009 ), maíz ( Nelson, 2007;
Castiglioni, 2008 ), trigo ( Sivamani et al., 2000 ), tomate ( Hsieh et al., 2002 ), etc., ( Tabla 1 ) Los cultivares transgénicos
exhibieron alta relativa contenido de agua (RWC), alta eficiencia de uso de agua (WUE), mejor espiguilla fertilidad, tasa
mejorada de fotosíntesis y germinación que su contrapartes de tipo salvaje. Se está trabajando más para mejorar tolerancia
a la sal y la sequía mediante la manipulación de genes únicos o múltiples de vía de señalización / regulación conocida.
3.1. Los genes implicados en la percepción de la señal y el control transcripcional
La percepción de la señal y la transducción son los primeros eventos en la planta respuesta al estrés abiótico La cascada
de respuestas moleculares comienza con la percepción de la señal de estrés, seguida de la transducción de señal a cito-
plasma y núcleo para la expresión génica de los genes sensibles al estrés. Estos genes confieren tolerancia al estrés a la
planta ( Wang et al., 2003 ) En general, cuando una planta encuentra sal y / o estrés por sequía citosólica La concentración
de iones Ca 2+ aumenta. El Ca 2+ citosólico es percibido por sensores de proteínas que tienen una gran afinidad por la
unión al calcio. Existen cuatro familias principales de proteínas de unión a Ca 2+ en plantas, que incluye calmodulinas
(CaM) y proteínas similares a CaM (CML); Ca 2+ dependiente
tabla 1

Las plantas transgénicas de los cultivos y árboles bajo ensayos campo para mejorar la sal y la tolerancia al estrés
por sequía.
 Plantas /
Si. Tolerancia al árboles de
No. estrés abiótico Transgene Anfitrión cultivo objetivo Observaciones Referencia

Tasa mejorada de germinación, Castiglioni,

1 Sequía CspB B. subtilis Z. mays plántulas y rendimiento 2008
ABA-hipersensible; cierre Nakashima et
2 Sequía y sal AtSNAC1 A. thaliana O. sativa L estomático; oxidativo al., 2007
protección contra el estrés
Barley Hordeum High RWC; alta protección de Sivamani et al.,
3. Sequía y sal HVA1 vulgare T. aestivum membrana WUE; alto 2000
fertilidad de espiguillas
Alta fertilidad de espiguillas; alto Xiao et al.,
4 Sequía AtZat10 A. thaliana. O. sativa L rendimiento 2009
Estrés oxidativo Solanum Cierre estomático rápido; alta Hsieh et al.,
5 y frío AtDREB1A A. thaliana. lycopersicum prolina; espiguilla alta 2002
fertilidad y rendimiento
A. E. Acumulación GB mejorada, estrés Kikuchi et al.,
6. sal codA globiformis camaldulensis oxidativo reducido 2009
Mayor fertilidad de
espiguillas; mayor rendimiento de Xiao et al.,
7 Sequía OsLEA-3 O. sativa L O. sativa L grano 2007
Xiao et al.,
9. Sequía y ABA AtLOS5 A. thaliana O. sativa L - 2009
biosíntesis

Tabla 2

Los genes candidatos participan en el control transcripcional para mejorar la tolerancia a la sal y la sequía.

Nombre del gen Fuente Recipiente aplicacion Referencia

Proteínas de enlace del elemento Broussonetia papyrifer Tolerancia al frío, la sequía y la
sensible a la deshidratación a O. sativa L sal
( DREBs )
Mayor tolerancia a la sequía y la
SsDREB Salsa Suaeda Nicotiana tabacum salinidad
StDREB1 Solanum lycopersicum Solanum lycopersicum Mejorado sal tolerancia
Mayor tolerancia a la sequía y la
OsDREB1B O. sativa L T. aestivum salinidad
Erianthus Arundinaceu Saccharum o fficinaru Mayor tolerancia a la sequía y la
EaDREB2 s m salinidad
Variedad Mayor tolerancia a la sequía y la
NAC sensible al estrés (SNAC) 2 de arrozUpland O. sativa L salinidad
Proteínas como Calcineurin B (CBL) Mejorado germinación y mejora
ZmCBL4 Zea mays A. thaliana da
tolerancia a salinidad
Mayor tolerancia a la sequía y la
AtMKK2 A. thaliana A. thaliana salinidad
Tolerancia al frío, la sequía y la
OsMAPK5a O. sativa L. O. sativa L sal
 Factores transcripcionales de choque Tolerancia al frío, la sequía y la
térmico (HSF)OsHsfs O. sativa L. - sal
Proteína de choque térmico (HSP)
Familia de genes HSP70 Glicina max L. - Mejorado sequía tolerancia
Tolerancia al frío, la sequía y la
StHsfs Solanum tuberosum L. - sal
9-cis-
Epoxycarotenoid dioxygenase (NCE
D) A. thaliana Solanum lycopersicum Mejorado sequía tolerancia
Zinc WRKY dedo OsWRKY11 O. sativa L. O. sativa L. Estrés mejorado de sal y sequía
EAR zinc dedo AtZat10 A. thaliana O. sativa L. Mejorado sequía tolerancia
Sequía mejorada y tolerancia al
GmMYBJ1 Glicina max L. A. thaliana frío
BnNAC Brassica napus A. thaliana Mejorado sal tolerancia
Salinidad mejorada y tolerancia
YAP1 Levadura Arabidopsis thaliana al estrés oxidativo

proteína quinasas (CDPK); y proteínas similares a calcineurina B (CBL) ( Snedden y Fromm, 2001; Luan et al., 2002;
Sanders et al., 2002 ). El estudio de homología gen-secuencia de todo el gen reveló 5 supuestas CaMs y 32 proteínas CML
en el arroz ( Boonburapong y Buaboocha, 2007 ). La presencia de un conjunto tan grande de proteínas putativas subraya
su importancia en la respuesta al estrés de las plantas. Los genes candidatos implicados en la percepción de la señal y el
control transcripcional para mejorar la tolerancia a la sal y la sequía se enumeran en la Tabla 2 .

Wang et al. (2007) y sus colegas clonaron y realizaron con éxito la caracterización funcional de ZmCBL4, un nuevo gen
CBL del maíz. El gen ZmCBL4 codifica para el homólogo de la proteína CBL4 / SOS3 de Arabidopsis. En condiciones
normales, la expresión de la proteína ZmCBL4 fue baja en varios órganos de las plantas de maíz y su expresión se reguló
mediante tratamientos de NaCl, LiCl, ABA y PEG. Sin embargo, cuando los cultivos de maíz se sometieron a alta
salinidad (concentración de sal 200 mM), la expresión de ZmCBL4 se reguló positivamente en el mutante SOS3 de
Arabidopsis cuando se comparó con las plantas WT de Arabidopsis durante las etapas de germinación y plántula. Por lo
tanto, se concluyó que el gen CBL del maíz funciona en la señalización del calcio provocada por el estrés de la sal que
confiere tolerancia a la salinidad.

Las cascadas de proteína quinasa activada por mitógeno (MAPK) también juegan un papel importante en la fisiología del
estrés de la planta. Perciben los esti-mulos de estrés a través de una cascada de fosforilación reversible. MAP quinasa ki-
nasa quinasas (MAPKKK) se activan mediante receptores de membrana de señal de plasma y activan quinasas quinasas
de MAP corriente abajo (MAPKK), que a su vez activan MAPK. La MAPK regula los TF, las fosfolipasas y las proteínas
celulares ( Rodriguez et al., 2010 ). Transducción de señales por MAPK

cascada se ha representado esquemáticamente en la Fig. 2 . Teige et al. (2004) identificó un estrés salino MAPK cascada
de respuesta en Arabidopsis y observó que la sobreexpresión de AtMKK2 induce tolerancia a la sal y la sequía. Además,
dos proteínas MAPK (AtMPK4 y AtMPK6) y un potencial aguas arriba MAPKKK (AtMEKK1) fueron también
identificados en A. thaliana. El análisis de microarrays representó la sobreexpresión de AtMKK2 que se debe a la
activación combinada de AtMPK4 y AtMPK6, lo que finalmente dio como resultado una mayor tolerancia a la sal y la
sequía ( Xiong y Yang, 2003 ). En arroz, OsMAPK5a es un gen candidato potencial para abiótico tolerancia al estrés cuya
sobreexpresión aumenta la tolerancia a la sal, la sequía y el estrés por frío ( Ouyang et al., 2010 ).

Recientemente, se informó una quinasa similar a un receptor dependiente de Mn 2 + (RLK), Os-SIK1, inducida por
tratamientos con sal, sequía y H 2 O 2 . El papel de este gen en el estrés vía de señalización con respecto a los basureros y
la desintoxicación de especies reactivas de oxígeno (ROS) se estudió ( Saibo et al., 2009 ). La sobreexpresión de este gen
indujo tolerancia a la salinidad y sequía al aumentar la actividad antioxidante en el arroz.

Los factores de transcripción (TF) son una clase de proteínas que tienen una propiedad de unión al ADN específica de la
secuencia. Poseen la capacidad de activar y / o reprimir la expresión génica. Con los recientes avances en la ingeniería
genética, muchas familias y subfamilias TFS se han identificado fi con participación fi específico en respuesta de la planta
para hacer frente a condiciones de estrés abiótico, tales como alta salinidad, sequía ( Joshi et al., 2016 ), el calor, y baja
temperaturas ( Yamaguchi-Shinozaki y Shinozaki, 2006; Dubouzet et al., 2003; Banerjee y Roychoudhury, 2017 ).

Entre las familias de TF presentes en las plantas, AP2 / EREBP

(Apetala2 / Proteína de unión al elemento sensible al etileno),
NAC (NAM, ATAF y CUC), ZF-HD (zinc homeodominio dedo),
AREB / ABF (elemento de ABA-sensible de unión al factor de
unión a proteína / ABA), y MYC (myelocyto-matosis oncogén) /
MYB (mieloblastosis oncogén) han sido identi- fi ed con las
respuestas de estrés abiótico ( Fig. 3 ). Varias proteínas DREB,
pertenecientes a la familia AP2 / EREBP se informó que regulan
la respuesta al estrés salino en el arroz. Liu et al. (2007)
observaron que OsDREB1A y OsDREB1F son inducidos por la
alta salinidad y OsDREB2A es inducido por la sal, la sequía y la
alta temperatura.

Las proteínas de choque térmico (Hsps) funcionan como

chaperonas moleculares y evitan la agregación y
desnaturalización de las proteínas. En respuesta al estrés abiótico
(temperatura), se observó acumulación de pequeñas Hsps en
todos los eucariotas y plantas ( DeMaio, 1999 ). Estos genes Hsp
están regulados transcripcionalmente por los factores de
transcripción de choque térmico (Hsfs). Los Hsfs aislados de
tomate, arroz, Arabidopsis, trigo, etc., indujeron calor ( Lopez-
Matas et al., 2004 ), salinidad ( Zou et al. 2012 ) y tolerancia al
estrés oxidativo ( Kim et al., 2014 ) cuando se sobreexpresa en
plantas transgénicas. Una exploración de todo el genoma de
Sorghum bicolor L. dio como resultado la identi fi cación de 25
genes SbHsf ( Nagaraju). et al., 2015 ). Se realizó un análisis
genómico similar en papa ( Tang et al., 2016 ), arroz ( Chauhan
et al., 2011 ) y Triticum urartu ( Yang et al., 2014 ) identi fi cado 27 StHsfs, 25 OsHsfs, y 13 TuHsfs respectivamente.
De forma similar a Hsps, las proteínas de choque frío (Csps) bajo control transcripcional también mostraron tolerancia al
estrés por sequía. Castiglioni (2008) desarrolló con éxito el maíz transgénico con el gen CspB de Bacillus subtilis para el
estrés por sequía ( USDA-APHIS, 2011 ). La sobreexpresión de CspB resultó en un mejor rendimiento (en términos de
rendimiento que el tipo salvaje) del cultivar transgénico, MON 87460 bajo estrés de agua cuando se somete a senderos de
campo. Sin embargo, el
MON87460 mostró resultados
similares en términos de
crecimiento, desarrollo y
características fenotípicas.

Se han realizado muchos

estudios mediante la
manipulación de los genes CBF
/ DREB para mejorar la
tolerancia al estrés abiótico. Por
ejemplo, las plantas
transgénicas to mato que
expresan el gen CBF1 / DREB
mostraron una tolerancia
mejorada a la deshidratación y
al estrés salino. Además, las
plantas mantuvieron un
crecimiento normal y un
rendimiento óptimo en
comparación con las plantas WT ( Lee et al., 2003 ). La sobreexpresión de HvCBF4 en arroz transgénico dio como
resultado un aumento en la tolerancia a la sequía, alta salinidad con crecimiento normal de la planta.

Los TF NAC pertenecen a una gran familia de proteínas de genes de alrededor de 100 miembros con un dominio de unión
a ADN N-terminal altamente conservado y un dominio C-terminal diverso. Los NAC TF son específicos de la planta y
juegan un papel integral en el desarrollo de la planta en condiciones de estrés abiótico. La familia NAC de TFS ha sido
explotada para desarrollar cultivos tolerantes a la sal.
Hu et al. (2006) aislado y manipuló un NAC sensible al estrés gen llamado SNAC2 de arroz de secano conocida por su
papel fi específico en la tolerancia al estrés abiótico. El análisis de la actividad del promotor Northern blot y SNAC2
demostró que la expresión de SNAC2 estaba regulada positivamente por la sequía, la salinidad y las heridas. El gen
SNAC2 también se prensó en exceso en arroz japónica para probar su potencial en la mejora de la tolerancia al estrés
salino. En condiciones de salinidad y estrés hídrico, semillas transgénicas-lings crecieron más rápido y sus brotes eran
significativamente más largo que WT después de 20 días. Hu et al. (2008) también evaluó la capacidad de germinación de
líneas transgénicas bajo condiciones de estrés salino. El 70% de las semillas transgénicas germinaron en 4 días en medio
MS suplementado con NaCl 150 mM, mientras que las semillas WT germinaron menos (40%).
SNAC1 es otro gen NAC sensible al estrés cuya expresión se regula positivamente durante el estrés por sequía. El arroz
con sobreexpresión de SNAC1 produjo una reducción en la apertura estomática ( Hu et al., 2006 ). En condiciones
moderadas de campo sequía fi, plantas SNAC1 transgénicas exhiben 17 - fertilidad 22% mayor que las plantas no
transgénicas, mientras que en condiciones de campo bien regadas las plantas transgénicas mostraron un crecimiento
similar como las plantas de tipo salvaje.
Tran et al. (2004) aislado Tres Arabidopsis Genes NAC (ANAC019, ANAC055 y ANAC072) en función de su unión a la
secuencia de reconocimiento de NAC (CATGTG) presente en el promotor del gen de respuesta temprana a la
deshidratación 1 (ERD1). Estos tres genes NAC son inducibles por sequía, alta salinidad y ABA.
Otra familia TF denominado tipo TFIIIA proteínas para los dedos de zinc fi eran primera ed identi fi en Xenopus ( Miller
et al., 1985 ). Hasta ahora más de 40 de tipo TFIIIA genes de proteína de zinc dedo se han identificado fi de diversas
plantas, incluyendo Petunia, soja, Arabidopsis y arroz ( Sugano et al., 2003; Kim y otros, 2001; Sakamoto y otros, 2004;
Huang y Zhang, 2007 ) y Se ha demostrado que estos genes son inducidos por diversos estreses abióticos
predominantemente sal y sequía. Xu et al. (2008) y sus colaboradores llevaron a cabo el análisis funcional de ZFP252
(una sal y sequía estrés sensible de tipo TFIIIA zinc dedo proteína del gen de arroz). Desconocieron que la sobreexpresión
de ZFP252 en el arroz aumentó la cantidad de prolina libre y azúcares solubles y mejoró la tolerancia del arroz a las
tensiones de sal y sequía en comparación con las plantas de arroz WT.
Tres genes codifican las proteínas de zinc dedos han sido reportados como sensible a la alta salinidad ( Huang et al, 2008;.
Sun et al., 2010 ). Los transcritos de ZFP179 y ZFP182 están regulados positivamente, mientras que SRZ1 está regulado
negativamente por el estrés salino. Además, cuando SRZ1 se sobreexpresó en el tabaco, hubo una mayor sensibilidad de
la planta a la sal y el estrés por frío, mientras que la sobreexpresión de ZFP179 y ZFP182 mejoró la tolerancia al estrés.
Otro FT denominado gen HARDY (HRD) ha sido manipulado con éxito para mejorar la tolerancia de la planta cultivada.
El gen HARDY (HRD) se ha encontrado que el aumento de FFI ciencia de transpiración e en agua subrayó plantas.
Karaba et al. (2007) aislado el gen HRD y ex-presionan en Arabidopsis bajo la regulación de la cauli fl ower virus del
mosaico (CaMV) 35S promotor. En condiciones de estrés hídrico, las plantas exhibieron hojas más gruesas, una mayor
resistencia a las raíces, una mayor densidad de raíces y un aumento en el cloroplasto. Además, las plantas transgénicas
mostraron más proliferación de raíces en comparación con las plantas WT. Karaba et al. (2007) expresaron el gen HRD en
el arroz. Las plantas transgénicas mostraron un patrón de crecimiento y rendimiento de semilla similares a las plantas de
arroz WT. Las plantas transgénicas también exhibieron una mayor cobertura foliar que ayudó a reducir la pérdida de agua
debido a la transpiración.

3.2. Los genes implicados en la biosíntesis de ABA y el control transcripcional

El ácido abscísico (ABA) juega un papel integral en las respuestas de adaptación a la sequía. Además, también regula los
procesos de desarrollo tales como la maduración de la semilla, la latencia y la senescencia ( Finkelstein, 2013; Wang et
al., 2003 ). Los genes implicados en la biosíntesis de ABA, el catabolismo y la red de señalización representan genes
candidatos interesantes para una mejor tolerancia a la sequía ( Wani y Kumar, 2015 ).
El paso limitante de la velocidad de la biosíntesis de ABA es la formación de xan-thoxin a través de la escisión oxidativa
por la enzima 9-cis-epoxicarotenoide dioxigenasa (NCED). La sobreexpresión de NCED conduce a niveles más altos de
ABA, una reducción de la tasa de transpiración en las hojas y, por lo tanto, una mayor tolerancia a la sequía ( Shinozaki y
Yamaguchi-Shinozaki, 1996 ). El aumento de la tolerancia al estrés por sequía se atribuyó a un mayor desarrollo de la raíz
foliar y lateral, raíces primarias más largas, mayor peso fresco y mayor supervivencia en comparación con las plantas
testigo.
Transcripcional respuestas al estrés por sequía se clasifican fi cados en ABA-dependiente, independiente de ABA, o
ambos. ABA regula la expresión de muchos genes que son inducidos por la sequía, el frío y el estrés salino ( Wang et al.,
2003 ). Hay dos tipos de transcripción dependiente de ABA. los La vía " directa " implica elementos ABA que responden
a la acción cis (ABRE), que se activan directamente uniéndose a TF tales como las proteínas de unión al ADN de tipo
cremallera de leucina de dominio básico (bZIP) ( Shinozaki y Yamaguchi-Shinozaki, 1996; Kobayashi et al. al., 2008;
Banerjee y Roychoudhury, 2017 ). Alternativamente, la vía de transcripción dependiente de ABA " indirecta " implica
otros elementos que actúan en cis, tales como MYC y MYB. Estos elementos se activan a través de la unión con TFs
inducibles por ABA o sequía, tales como la proteína AtMYC2 relacionada con hélice - bucle - hélice básica (bHLH) y una
proteína relacionada con MYB, AtMYB2 ( Abe et al., 2003 )
3.3. Genes implicados en ajustes osmóticos y osmoprotección

La salinidad y el estrés por sequía conducen a la pérdida de agua intracelular de la célula. Esta condición se denomina
deshidratación celular. Para prevenir esto y proteger las proteínas celulares, las plantas acumulan muchos compuestos
orgánicos llamados osmolitos. Los osmolitos incluyen prolina, betaína, polioles, alcoholes de azúcar y azúcares solubles.
La glicina betaína y la treha-lose actúan como osmoprotectores estabilizando las membranas y las estructuras cuaternarias
de las proteínas. Manitol sirve como un carroñero de radicales libres. Proline sirve como un sumidero de almacenamiento
de carbono y nitrógeno, así como un eliminador de radicales libres. También estabiliza estructuras subcelulares
(membranas y proteínas), y Bu ff ers potenciales redox celular bajo estrés. Por lo tanto, estos osmolitos orgánicos se
conocen como osmoprotectores ( McNeil y otros, 1999; Bohnert y Jensen, 1996; Chen y Murata, 2000; Surekha et al.,
2014; Roychoudhu ry et al., 2015 ).
Por lo tanto, la osmoprotección implica la regulación positiva de los soles (osmolitos) compatibles que funcionan
principalmente para mantener la turgencia celular, pero también participan en la oxidación y la chaperonación a través de
la estabilización directa de membranas y / o proteínas ( Zhu, 2002; McNeil et al. , 1999; Yancey et al., 1982 ). Estos
osmolitos tienen un peso molecular bajo y son compuestos altamente solubles. Muchos genes implicados en la síntesis de
estos osmoprotectores han sido explorados por su potencial en la tolerancia al estrés abiótico de plantas generadoras ( Lee
et al., 1997 ) como se enlista en la Tabla 3 .
La glicina betaína (GB) es un osmolito importante que se puede sintetizar en plantas transgénicas usando genes que
codifican para cualquiera de las enzimas (colina monooxigenasa, betaína aldehído deshidrogenasa y colina oxidasa) (
Wani et al., 2013; Roychoudhury y Banerjee, 2016 ). La acumulación de GB conduce a una mayor tolerancia a la sequía y
al estrés salino ( Sakamoto y Murata, 2000; Rontein et al., 2002 ). Varias otras plantas que han sido genéticamente
diseñadas para obtener sal, sequía, congelación y tolerancia al calor a través de la acumulación de GBS incluyen
thaliana, Brassica napus, Brassica juncea, Gossypium hirsutum, Lyco-persicon esculentum, Nicotiana tabacum, Solanum
tuberosum y Zea mays ( Rontein et al., 2002 ).
Mohanty et al. (2002) demostrado ese La transformación mediada por Agrobacterium del gen de cod A (codifica para
colina oxidasa) en cultivar de arroz aumentó la síntesis de GlyBet para potenciar la tolerancia a la sal. Sobreexpresión de
genes que codifican las enzimas pyrroline-5-carboxylate
Tabla 3

Los genes candidatos participan en la osmoprotección para mejorar la tolerancia a la sal y la sequía.

Nombre del gen Fuente Recipiente Solicitud

Mayor acumulación de prolina y
P5CSF129A Vigna aconitifolia Cajanus Cajan tolerancia a la sal
Mayor acumulación de prolina y
1-Pyrroline-5-carboxylate reductase A. thaliana Glicina max L. tolerancia a la sequía
(P5CR)
La acumulación
de trehalosa mejorada y tolerancia a la
ots A y ots B E. coli O. sativa L. sal
Acumulación mejorada de manitol que
mtlD E. coli Triticum aestivum conduce a la sal y
sequía tolerancia
Mayor acumulación de GB y tolerancia
Cod A Spinacia oleracea O. sativa a la sal
Solanum tuberosum L Mayor acumulación de BADH y
Betaína aldehído deshidrogenasa (BADH) Spinacia oleracea L. tolerancia a la sequía
Solanum tuberosum L acumulación de trehalosa mejorada y
Trehalosa-fosfato sintasa 1 (TPS1) Saccharomyces cerevisiae tolerancia a la sequía

Tabla 4

Los genes candidatos participan en la síntesis de enzimas antioxidantes para mejorar la tolerancia a la sal y la
sequía.
 Nombre de el gen Fuente Recipiente Solicitud Referencia

Schizosaccharomyces pomb Mayor acumulación de Zhao et al.,

SOD2 e O. sativa L. SOD, sequía y sal 2006
tolerancia
Producción mejorada Prodhan et
katE E. coli O. sativa L. de catalasa al., 2008
aumentado sal toleranci
a
Producción mejorada Kaku et al.,
katE E. coli O. sativa japonica de catalasa 2000
aumentado sal toleranci
a
Reduce el estrés
oxidativo y mejora la Lee y Jo,
BcGR1 chino repollo Nicotiana tabacum sequía 2004
y sal tolerancia
Aldehído miembro de
la familia de A. thaliana ; Solanu Mayor tolerancia al Rodrigues e
ladeshidrogenasa7 Glicina max L. m H 2 O 2 , sal y sequía t al., 2006
(GmPP55) tuberosum L estrés
Metabolismo
Ascorbate peroxidasa (APX de H 2 O 2 mejorado y Badawi et
) A. thaliana Nicotiana tabacum reducido al., 2004
estrés oxidativo

(P5C) sintetasa (P5CS) y P5C reductasa (P5CR) dieron como resultado una producción excesiva de prolina y una mayor
tolerancia al estrés salino. La sobreexpresión de P5CS en el tabaco transgénico elevó la prolina libre ( Szabados y
Savoure, 2010 ) y la planta transgénica mostró una germinación mejorada y crecimiento de plántulas bajo estrés salino.
Las plantas Petunia transgénicas transformadas con el gen P5CS de Arabidopsis mostraron resistencia a las condiciones
de sequía durante más tiempo que las plantas control ( Kishor et al., 1995 ). La sobreexpresión del gen Vigna aconitifolia
P5CSF129A en Cajanus cajan aumentó la acumulación de prolina y la tolerancia a la sal ( Surekha et al., 2014 ).

Las plantas de arroz transformadas con los genes que codifican para la colina oxidasa (codA), delta - pirrolina-5-
carboxilato sintasa (P5CS), alcohol Dehy-drogenase (ADH) y piruvato descarboxilasa (PDC) genes signi fi cativamente
mejorada tolerancia a la sequía en el arroz transgénico variedades en comparación con las plantas de arroz WT ( Datta,
2002; Soren et al., 2010 ).

La trehalosa es un disacárido no reductor y sirve como un e ff ECTI ve osmoprotector ( Goddijn y Van Dunn, 1999 ). Las
plantas transgénicas que sobreexpresan genes biosintéticos de trehalosa mostraron una mayor tolerancia a las condiciones
de estrés por sal y sequía ( Goddijn y Van Dunn, 1999; Penna, 2003; Sah et al., 2016 ). Garg y sus colegas
sobreexpresaron genes biosintéticos de E. coli trehalosa (otsA y otsB) bajo el control del promotor sensible al estrés en
plantas de arroz transgénico. Las plantas transgénicas acumuladas 3 - 10 veces más trehalosa que muestra un mejor
crecimiento, menos daño fotooxidativo y un balance mineral favorable en condiciones de estrés por sal, sequía y baja
temperatura. Después de someter las plantas de arroz a 8 o 12 d de retención de agua, se observó enrollamiento de hojas y
marchitez en las variedades de arroz no transgénicas, mientras que el arroz transgénico exhibió un crecimiento óptimo de
brotes en condiciones normales. Más-over, las variedades de arroz transgénico fueron menos un ff ected por el estrés
oxidativo. Yeo et al. (2000) también transformaron papa con los genes de síntesis de trehalosa similares . Se encontró que
las plantas de patata transgénicas aumentan la tolerancia a la sequía.

El manitol es un producto fotosintético primario que está asociado con la tolerancia a la sal. En el apio, el metabolismo
manitol es un ff ected por estrés salino. Sickler et al. (2007) mostró ese Plantas de Arabidopsis transformadas con gen de
manosa 6-fosfato reductasa (M6PR) del apio producido
manitol y las plantas transgénicas crecieron normalmente bajo estrés salino. La sobreexpresión del gen mtlD de E. coli
condujo a la síntesis de manitol en las células de plantas de trigo transgénicas ( Abebe et al., 2003 ) y la acumulación
moderada de manitol mostró una mayor tolerancia al agua y a las tensiones salinas.

3.4. Genes involucrados en la síntesis de enzimas antioxidantes

Se ha demostrado que las plantas bajo estrés por sequía y sal expresan niveles elevados de ROS celulares. Tales altos
niveles de ROS son perjudiciales para la supervivencia de la planta. Se requieren antioxidantes para degradar estas drogas
libres y mantener las ROS celulares a niveles no tóxicos. Di ff Erent en-Zymes como la catalasa, superóxido dismutasa
(SOD), y la función de la glutatión reductasa como antioxidantes para degradar t stos ROS especies ( Wang et al., 2003 ).
La búsqueda de ROS por niveles aumentados de enzimas antioxidantes activadas mejoró la tolerancia a la sequía y la sal
en Arabidopsis, arroz ( Dionisio-Sese y Tobita, 1998; Alscher et al., 2002 ), guisante ( Hernandez et al., 2000 ), tomate,
soja y maíz ( Azevedo-Neto) et al., 2006 ). La Tabla 4 contiene la lista de genes candidatos para la producción mejorada
de enzimas antioxidantes.

La descomposición de los radicales superóxido es catalizada por la superóxido dismutasa. Funciona como la fi primera l
nea de defensa contra el oxígeno toxi-ciudad. Están involucrados en la resistencia al estrés, la longevidad y el sustento de
la vida aeróbica ( Carlioz y Touati, 1986 ; Orr y Sohal, 1994 ). Zhao et al. (2009) aislaron YAPI, un factor de
transcripción aislado de levadura y introducido en Arabidopsis thaliana. Las plantas transgénicas se dejaron crecer en
diversas concentraciones de NaCl y se sometieron a retención de agua de 8 a 12 días. Las plantas transgénicas produjeron
un aumento de las actividades de las enzimas antioxidantes catalasa, superóxido dismutasa, ascorbato poroxidasa,
peroxidasa, glutatión S-transferasa y glutatión reciductasa en comparación con la Arabidopsis de tipo salvaje. También
mantienen más altos niveles fotosintéticos y bajo nivel de H 2 O 2 lo que sugiere que la producción de ROS se redujo con
el incremento de antioxidante enzima acumu-lación.

Las catalasas (CAT) son enzimas que contienen hemo y están compuestas por cuatro subunidades. Están involucrados en
la eliminación de H 2 O 2 ( Guan y Scandalios,
Tabla 5

Los genes candidatos participan en la proteína de embriogénesis tardía abundante (LEA) para mejorar la
tolerancia a la sal y la sequía.

Nombre del gen Fuente Recipiente Solicitud Referencia

Mayor tolerancia a la
Me-LEAn4 Brassica napus Lactuca sativa sequía y la salinidad
Mayor tolerancia a la
Me-LEAn4 Brassica napus col china sequía y la salinidad
Hordeum Mayor tolerancia a la
HVA1 vulgare Morus indica sequía y la salinidad
Hordeum Mayor tolerancia a la
HVA1 vulgare O. sativa L. sequía y la salinidad
Triticum Mayor tolerancia a la
DHN-5 aestivum A. thaliana sequía y la salinidad

1996; Canvin, 1990 ) y la fotorrespiración ( Willekens et al., 1995 ). Kaku et al. (2000) aislaron el gen de la catalasa katE
de E. coli y sobreexpresado en variedad de arroz japónica. Las variedades de arroz transgénico prosperaron a una
concentración de NaCl 100 mM y exhibieron un crecimiento y una germinación normales en comparación con las plantas
WT. Prodhan et al. (2008) introdujeron el mismo katE, aislado de E. coli, en el cultivar de arroz Kasalath. El arroz
transgénico fue capaz de crecer durante 15 días en NaCl 100 mM y durante 7 días en solución de NaCl 250 mM durante
siete días, mientras que las plantas control murieron dentro de cinco días a 100 mM y siete días en NaCl 50 mM.
La glutatión reductasa (GR) participa en el ciclo de ascorbato-glutatión, que degrada los radicales superóxido y H 2 O 2 (
Asada, 1999 ). Lee y Jo (2004) introdujeron BcGR1, aislado de repollo chino en plantas de tabaco a través de la
transformación mediada por Agrobacterium. El gen BcGR1 codifica para GR citosólico. Para diez días plántulas de
tabaco transgénicas fueron tratados con 50 - 200 concentraciones de NaCl mM, mostró sig-ni fi cativamente tolerancia
mejorada a 150 concentración de NaCl mM en comparación con las plantas de semillero WT.

3.6. Los genes implicados en la homeostasis iónica

Especies sensibles a la sal carecen de la capacidad de controlar Na + transporte a alta salinidad donde iónico e ff ECTS
dominan el osmótica e ff células ect y vegetales necesitan para mantener una alta K + (100 - 200 mM) y baja Na + (menos
de 10 - 20 mM) niveles ( Flowers y Dalmond, 1992; Carden et al., 2003 ). Por lo tanto, la tolerancia al estrés por salinidad
debe implicar el mantenimiento o el restablecimiento rápido de la homeostasis iónica ( Munns and Tester, 2008 ). El
aumento de los niveles celulares de proteínas (como las proteínas vacuolares antiportadores) mejora la tolerancia al estrés
abiótico.

El e ff compartimentación reflexivo de sodio se lleva a cabo a través de la operación de vacuolar Na + / H + antiporter

canales, la membrana vacuolar H + -ATPasa y H + -pyrophosphatase proteínas que Chan-nelizes potencialmente iones
nocivos desde el citosol en grandes vacuolas Bou ND por un tonoplast rígido ( Munns and Tester, 2008; Suneetha et al.,
2016 ). Se ha investigado más a fondo que estos iones a su vez funcionan

Tabla 6

Lista de genes candidatos implicados en la homeostasis iónica para mejorar la tolerancia a la sal y la sequía.

Nombre del gen Fuente Recipiente Solicitud Referencia

Arabidopsis Solanum Mayor tolerancia a la

AtNHX1 thaliana lycopersicum sal
Mayor tolerancia a la
NHX1 Atriplex gmelinii O. sativa L. sequía y la salinidad
Arabidopsis Triticum aestivum Mayor tolerancia a la
AtNHX1 thaliana L. sequía y la salinidad
Arabidopsis Gossypium Mayor tolerancia a la
AtNHX1 thaliana arboreum L. sequía y la salinidad

Tabla 7

Lista de genes candidatos involucrados en la absorción de agua para mejorar la tolerancia a la sal y la sequía.

Nombre del gen Fuente Recipiente Solicitud Referencia

Mejora de la absorción de agua

que conduce a la tolerancia a la
BnPIP1 Brassica napus N. tabacum sequía
Mejora de la absorción de agua
que conduce a la tolerancia a la
VfP1P1 Vicia faba A. thaliana sequía
Mejora de la absorción de agua
Galega que conduce a la tolerancia a la
GoPIP1 orientalis A. thaliana sequía
 Mejora de la absorción de agua
Musa que conduce a la tolerancia a la
MaPIP1; 1 acuminata A. thaliana sequía

como un agente osmótico dentro de la vacuola en el mantenimiento del agua óptimo fl OW en la célula. La Tabla 6
contiene los posibles genes candidatos para la homeostasis iónica que conduce a la tolerancia a la sal y la sequía.
El gen AtNHX1 de A. thaliana se sobreexpresó en algodón, lo que permitió que las plantas crecieran y soportaran una
concentración de NaCl 200 mM, pero los tipos salvajes se dañaron severamente. AtNHX1 se introdujo en el tomate y
mostró el mismo resultado, es decir, las plantas sobrevivieron en presencia de NaCl 200 mM ( Leidi et al., 2010 ). Se
realizaron estudios similares en B. napus, trigo, papa, tabaco, etc. ( Munns and Tester, 2008 ).

AtSOS de Arabidopsis codifica una membrana plasmática Na + / H + an-tiporter (NHX) con una similitud de secuencia
significativa con el respectivo antiportador de bacterias y hongos ( Shi et al., 2000 ). La expresión del gen vacuolar Na + /
H + antiporter (NHX1) o AVP1 (A. thaliana vacuolar H + -translocating pirofosfatasa) potencia el bombeo de Na + en la
vacuola y aumenta la acumulación y la tolerancia a Na + en Arabidopsis ( Gaxiola et al. ., 2001 ). Más e FFI ciente
secuestro de Na + iones en vacuola también podría mejorar t Emitir tolerancia a la salinidad reduciendo las
concentraciones de Na + citosólico . Los antiportadores Na + / H + juegan un papel importante en el mantenimiento de la
homeostasis de iones celulares, la regulación del pH citoplásmico y la turgencia celular que conduce a la tolerancia a la sal
y la sequía en las plantas ( Zhang y Blumwald, 2001 ).

Ohta et al. (2003) utilizaron un gen NHX1 de un halófito Atriplex gmelinii para generar líneas de arroz transgénico que
mostraron una actividad ocho veces mayor en comparación con el arroz silvestre. Estas líneas transgénicas sobrevivieron
en NaCl 300 mM durante tres días, pero los tipos silvestres no sobrevivieron. Sobreexpresión del gen vacuolar Na + / H +
antiportadores, OsNHX1 aumentó la tolerancia a la sal en el arroz, mientras que la sobreexpresión del mismo gen del trigo
junto con la H + -pirophosphatase (TVP1) mejoró la tolerancia a la sal y la sequía en Arabidopsis ( Gaxiola et al ., 2001 ).
Las líneas de trigo transgénico que expresaban el gen AtNHX1 exhibían un mayor rendimiento de grano, granos más
pesados y más grandes en condiciones salinas y había menos Na + y más acumulación de K + en las hojas en líneas
transgénicas en comparación con las líneas no transgénicas ( Brini et al., 2007b ). Una concentración de sal de 300 mM es
equivalente al 40% de la concentración de sal de agua de mar. La actividad me-tabolic y el crecimiento de casi todos los
cultivos cultivables se inhiben a concentraciones tan altas. Las plantas transgénicas en comparación con el tipo salvaje
fueron capaces de mantener esta alta dosis de concentración de sal. Estas plantas exhibieron un crecimiento normal y más
notablemente produjeron fruta. Además, las plantas transgénicas mostraron un alto contenido de iones de sodio y cloruro
en sus hojas, lo que sugiere la acumulación vacuolar mejorada de iones Na + mediada por la sobreexpresión del transgén
AtNHX1 en condiciones de estrés.

He et al. (2005) crearon plantas de algodón transgénicas expresando AtNHX1 y encontraron que las plantas transgénicas
generan más biomasa y produjo más fi bras bajo estrés salino. Se sugirió que el in-arrugado fi rendimiento BER era
debido al rendimiento fotosintético superior y tasas de asimilación de nitrógeno superiores observadas en las plantas
transgénicas en comparación con WT. Zhao et al. (2006) demostraron que la expresión de la membrana plasmática Na + /
H + antiporter SOS2 de levadura (Schizo-saccharomyces pombe) en arroz transgénico también aumentaba la tolerancia a
la sal y la sequía. Las plantas transgénicas acumularon más K + , Ca2 + y Mg2 + y menos Na + en sus brotes en
comparación con los controles no transformados.

En todos los experimentos realizados, las plantas transgénicas pudieron expresar una resistencia superior a la sequía y / o
la salinidad en comparación con las plantas WT. La tolerancia se indujo debido al aumento en H + vacuolar que a su vez
facilitó la captación secundaria de iones en la vacuola y desarrollo de sistemas raíz más mejorados y dinámicos.

3.7. Genes involucrados en la absorción de agua

Las acuaporinas se denominan canales de agua intercelulares incrustados en las membranas y facilitan el transporte de
agua y otros pequeños solutos e iones a través de las membranas ( Aharon et al., 2003; Porcel et al., 2005 ). Se está
llevando a cabo una amplia investigación en todo el mundo para identificar los genes candidatos responsables de la
expresión de las acuaporinas ( Yu et al., 2005; Zhang et al., 2008 ) y manipular los genes para mejorar la tolerancia a la
sequía en las plantas. Los genes enlistados en la Tabla 7 , como Arabidopsis Rd28, y arroz RWC3, están regulados al alza
cuando se los somete a agua de fi cit, donde como otras aquaporinas, por ejemplo, NtQP1 y AtPIP1 están reguladas por
incremento o reguladas negativamente bajo estrés por sequía ( Cui et al., 2008 ). Se ha demostrado que Vicia faba PIP1,
Panax ginseng PgTIP1, B. napus BnPIP1 y B. juncea BjPIP1 mejoran la tolerancia a la sequía ( Aharon et al., 2003;
Porcel et al., 2005; Peng et al., 2006 ). Otro ejemplo de un gen AQP de alto impacto se informó en plantas de banano
(Musa acuminata), donde los niveles de transcripción de MaPIP1 fueron elevados durante el estrés por sequía ( Xu et al.,
2014 ). Las plantas transgénicas exhibieron una alta capacidad de retención de agua y un crecimiento óptimo que el WT.

3.8. Los genes implicados en la vía de la glioxalasa

El estrés abiótico como la salinidad y la sequía genera un exceso de ERO que conduce al estrés oxidativo. También se
observó e informó que junto con ROS, las plantas acumulan altos niveles de metilglioxal (MG) ( Thornalley, 2003 ). MG
es químicamente un dicarbonil cetoaldehído, generado como un subproducto de la ruta de la glucólisis y los intermedios
fotosintéticos ( Yadav et al., 2005a, b ). Muchas plantas terrestres han mostrado 2 - 6 pliegues acumulación de MG bajo la
salinidad y la sequía en comparación con condiciones de crecimiento normales (Yadav et al, 2005a, b;. Thornalley, 2008).

La acumulación de ROS y MG conduce a la oxidación de los componentes celulares, como la peroxidación de los lípidos,
la degradación de las proteínas y, a menudo, causa mutaciones en el ADN ( Apel y Hirt, 2004 ). MG tiene cetona y al-
dehído como grupos funcionales que reaccionan con los residuos de desoxiguanosina del ADN y las proteínas
glucosiladas que forman productos finales de glicación avanzada (AGEs) ( Rabbani y Thornalley, 2012, 2014 ). Estos
residuos AGE inactivan proteínas funcional y biológicamente activas y causan daño oxidativo.

Para superar los e perjudiciales ff ECTS de MG, plantas y otros organismos vivos evolucionaron un Detoxi fi sistema
catión llama el sistema glyoxalase para proteger el ADN y la proteína mediante la conversión de la citotóxico MG en D-
lactato. La vía para Detoxi fi cación de MG se lleva a cabo por una enzima de dos pasos catalizada sistema glyoxalase,
que comprende GlyI (glyoxalase

I) y GlyII (glioxalasa II) ( Espartero et al., 1995 ). La vía de la glioxalasa en las plantas funciona tanto en el citosol como
en la mitocondria, siendo las enzimas GlyI exclusivamente citosólicas, ya que su sustrato MG se produce principalmente
como un subproducto de la vía de glucólisis basada en citosol. Las enzimas GlyII están presentes tanto en el citosol como
en la mitocondria ( Hasanuzzaman et al., 2017 ).

Las dos enzimas glioxilasa junto con el glutatión (GSH) desintoxican colectivamente la MG acumulada en dos pasos. La
fi paso primero implica una reacción espontánea entre MG y GSH que produce un hemitioacetal. Hemitioacetal se
convierte en s- D -lactoil-glutatión (SLG) a través de 1, 2-transferencia de hidrógeno, que es catalizado por el GlyI

Tabla 8

Lista de genes candidatos implicados en la vía de la glioxalas para mejorar la tolerancia a la sal y la sequía.

Nombre del gen Fuente Recipiente Solicitud Referencia

Mayor
tolerancia a la
GLYI Brassica napus N. tabacum sal
Confiere
tolerancia a la
GLYI Brassica napus O. sativa L. sal
Mayor
tolerancia a la
GLYI Brassica napus Vigna mungo sal
Mayor
Brassica GLYI + arroz Brassica napus, O. tolerancia a la
GLYII sativa L. N. tabacum sal
 Mayor
Brassica GLYI + Brassica napus, P. Solanum tolerancia a la
Pennisetum GLYII setaceum lycopersicum sal
Mayor
tolerancia a la
GLYII O. sativa L. N. tabacum sal

enzima. En el segundo paso, la enzima GlyII cataliza la conversión de SLG a D-lactato por hidrólisis, junto con la
regeneración de GSH ( Kaur et al., 2014 ). Por lo tanto, la sobreexpresión de enzimas glyoxalase es un correo ff caz
manera de desintoxicar MG y mejorar la tolerancia al estrés. Recientes de-velopments tienen identi fi ed una enzima
GSH-independiente glyoxalase (GlyIII) en plantas ( Ghosh et al., 2016 ). GlyIII ha informado para llevar a cabo Detoxi fi
cación de MG i na solo paso sin la formación de SLG. Este especí fi enzima c glyoxalase es capaz de funcionar
independientemente sin GSH y otros cofactores que son capaces de MG Detoxi fi catión en un solo paso.

Muchos informes han demostrado que la sobreexpresión de GlyI o GlyII conduce a niveles de MG endógenos reducidos,
lo que mejora la tolerancia al estrés. Los transgenes desarrollados que albergan los genes GlyI o GlyII se han enumerado
en la Tabla 8 . Wani y Gosal (2011) introdujeron el gen OsglyII en el arroz (Oryza sativa L. cv PAU 201 ) mediante el
método de bombardeo de partículas. Los cultivares transformados mostraron biomasa mejorada y crecimiento normal en
comparación con cultivares no transformados (que no sobrevivieron) cuando se sometieron a una concentración de NaCl
150 mM. La sobreexpresión del gen O. sativa GlyI en tabaco transgénico mostró una mejor tolerancia a la salinidad que la
planta normal ( Reddy y Sopory, 1999). ) La sobreexpresión del gen Brassica GlyII en el arroz transgénico mostró una
mejor tolerancia a los altos niveles de MG ( Singla-Pareek et al., 2008 ). Las plantas de arroz transgénico mantuvieron el
crecimiento y mantuvieron un equilibrio de iones más favorable en comparación con las plantas no transformadas y la
senescencia retrasada contribuyendo a la tolerancia a la salinidad.

La sobreexpresión de los genes GlyI y GlyII mostró una mejor tolerancia al estrés en el tabaco transgénico ( Yadav et al.,
2005a, b ). Plantas transgénicas que sobreexpresan la vía completa de la glioxalasa (Brassica GlyI + Rice GlyII) también
mostró una mejor respuesta que cualquiera de las líneas transformadas de un solo gen y también las plantas no
transformadas en condiciones de estrés por salinidad y metales pesados ( Singla-Pareek et al., 2003, 2006 ). El aumento de
las actividades de GlyI y GlyII también confirió tolerancia al estrés en tomate ( Alvarez Viveros et al., 2013 ), arroz y
frijol mungo ( Nahar et al., 2016 ) al reducir los niveles de MG en condiciones de estrés abiótico. La introducción del gen
Brassica GlyI bajo el control de CaMV 35S pro-moter se ha llevado a cabo en tomate ( Wienstroer et al., 2012 ) y Vigna
mungo ( Bhomkar et al., 2008 ). Las plantas transgénicas exhibieron 2 - 3 pliegues upregulation de GlyI en raíz, hojas y
tallos cuando se trata con NaCl, manitol y ABA. Las plantas de tabaco transgénicas fueron capaces de crecer, fl ower y
establecer semillas viables normales bajo condiciones de estrés de salinidad continuas.

4. Conclusión

El estrés abiótico causa pérdidas extensas en muchas partes del mundo. La mejora de la tolerancia a la salinidad y la
sequía es un objetivo importante para los fitomejoradores para garantizar el suministro de alimentos para la creciente
población mundial en el futuro cercano.

El enfoque actual de la ingeniería genética de plantas para desarrollar plantas transgénicas tolerantes al estrés salino
incluye la alteración de los niveles de expresión de genes nativos o la incorporación de genes extraños para osmolitos,
transportadores de iones, factores de transcripción y otras moléculas de señalización. Hasta la fecha, la mayoría de estos
estudios se han limitado a transferencias de un solo gen dentro de vías multigénicas conocidas. Sin embargo, es
importante centrarse en las transferencias de genes múltiples a medida que las plantas experimentan más de un tipo de
condiciones de estrés abiótico simultáneamente.

Un gran número de genes candidatos implicados en di ff sal Erent y mecanismos de tolerancia a la sequía de diversas
fuentes Se han identificado fi ed. Signi fi se han hecho progresos en la comprensión de peralte los complejos mecanismos
que regulan la tolerancia al estrés abiótico en plantas de cultivo. Sin embargo, todavía estamos lejos de identificar la
activación génica responsable de la tolerancia a una condición de estrés abiótico particular. Un ideal genéticamente mod-i
fi cultivo ed debe poseer una capacidad de respuesta al estrés altamente regulado que no hace un ff rendimiento de los
cultivos ect cuando el estrés está ausente. Por lo tanto unders Los mecanismos fisiológicos y moleculares que intervienen
en las cascadas de señalización en respuesta a las tensiones producidas por la sal y la sequía ayudarán a manipular las
plantas de cultivo y aumentar la productividad agrícola en el futuro cercano.