Experiencia en ayunas

Procedimiento
Se tomó una muestra de sangre por puntura venosa de una integrante del grupo en
ayunas (aproximadamente 4 horas sin haber consumido alimento), que seraincubada a
37°C por 10 minutos.
Se procedió a centrifugar la sangre para obtener el suero donde se podrá identificar
analítos como la glucosa ya que en el suero no está presente el anticoagulante que puede
alterar los resultados.
Se hará una dilución del suero de 1/20, por ende se prepara 4 mLdonde 0.2 mL serán de
suero y 3.8 mLde agua destilada que será mezclado hasta homogenizarse.
Luego se añadirá 0.3 mL agua y 1 mL de reactivo enzimático.
Se prepara también un estándar que tendrá 0.2 mL de glucosa a una concentración del 5
mg% mas 0,3 mLde agua destilada y 1 mLde reactivo enzimático.
También se prepara un blanco donde no habrá sustrato donde actúe el reactivo
enzimático.
B St MPA
St glucosa 5mg% -- 0.2
MP diluida -- 0.2
Agua destilada 0.5 0.3 0.3
Rvo enzimático 1 1 1

Los tubos que contengan el estándar y la muestra en ayunas se llevara a baño maría de
37°C por 10 minutos.
Dentro de cada tubo se dará la reacción de Trinder.
2 Glucosa + 2 O2 ----GOD -------> 2 ac. Glucónico + 2 H2O2
2 H2O2 + 4-aminoantipirina + fenol ----POD ------> Quinoneimina + 4 H2O
GOD y POD son parte de la solución de enzimas.
Luego se llevara al espectrofotómetro para obtener las absorbancias de cada uno de los
contenidos de los tres tubos a una longitud de onda optima de 510 nm.
Después de las lecturas obtenidas en cada caso se aplicara una de las siguientes
fórmulas para poder determinar la glicemia.
Si. VSt = VMP y VF St = VFMP
𝑀𝑃 = [𝑆𝑡] /𝐴𝑏𝑆𝑡 ∗ 𝐴𝑏𝑀𝑃 ∗ 𝐹𝑑
Si: VSt ≠ VMP y VF St = VFMP
𝑀𝑃 = 𝑚𝑔𝑆𝑡/𝐴𝑏𝑆𝑡 ∗ 𝐴𝑏𝑀𝑃 ∗ 100/𝑉𝑅
En las formulas se utilizaran las absorbancias corregidas, es decir, a las absorbancias
obtenidas se le restara la absorbancia del blanco.
Se elige la primera fórmula ya que el volumen de la muestra y el del estándar son iguales.
Datos:
[st] = 5 mg % 𝐴𝑏𝑆𝑡 =0.642
𝐹𝑑 = 20 𝐴𝑏𝑀𝑃 =0.424
𝐴𝑏B= 0.221
Absorbancias corregidas: Abx - AbB
𝐴𝑏𝑆𝑡 =0.421
𝐴𝑏𝑀𝑃 =0.208
𝑀𝑃 = [𝑆𝑡] /𝐴𝑏𝑆𝑡 ∗ 𝐴𝑏𝑀𝑃 ∗ 𝐹𝑑
MP = 5/421 * 208*20
MP = 49.406