TEXTO ILUSTRADO ODE
Biologia Molecular
e Ingenieria Genética
(CTL Kee M Meu aK TOC UCKKI CHET)
José Luque
Angel Herraez
eo. TEXTO ILUSTRADO DE
Biologia Molecular
e Ingenieria Genética
Conceptos, Técnicas y Aplicaciones
en Ciencias de la Salud
José Luque Cabrera
Catedrético de Universidad
Angel Herréez Sanchez
Profesor Titular de Universidad
Departamento de Bioquimica y Biologfa Molecular
Universidad de Alcala
Alcala de Henares. Madrid
ELSEVIER
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‘Madrid - Barcelona - Amsterdam - Boston - Filadelfia
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ISBN: 84-8174-505-7
Depésito legal: M-47839-2002
Impreso en Espatia por: Grifieas Marte, S.A. Prdlogo
En la Presentacién de este libro, que tengo ol honor de prologar, los autores afirman que pretenden ceunir os con-
‘ceptos actuales de la Biologia Molecular y las modernas metodologias de la Ingenierfa Genética con vistas a su aplicacién
a fa Patologia Molecular, humana’y animal, en sus diversos aspectos: etiologia, fisiopatologia, diagnéstico, pronéstico,
terapéutica y prevencién de las enfermedades, y promocién de la salud. Y pretenden hacerlo desde una perspectiva
pluridisciplinar e integradora dirigida, fundamentalmente, a los estudiantes que cursan las licenciaturas de Farmaci
Medicina, Odontologia y Veterinaria, y las orientaciones biosanitarias de Biologia, Bloquimica y Quimica. Se trata, sin du-
{da, de una empresa tan oportuna y ambiciosa, como comploja y dificil. Pero, a la vista del resultado alcanzado, puede
afiimarse quo el éxito ha sido total.
La elaboracion de un texto de las caractersticas mencionadas es oportuna y necesaria. En los titimos decenios, la
Biologia ha experimentado un proceso de progresiva ‘molecularizacién’” que ha conducido a un nuevo paradigma biolé-
gico que trata de entender lo que se ha denominado ‘la logique du vivant” (F. Jacob, 1970) o “the molecular logic ot
the living state” (A. L. Lehninger, "Biochemisty’, 1970): las bases moleculares subyacentes a los procesos biolégicos. El
reciente desciframiento del genoma de dlversos organismos, y muy especialmente del genoma humano, constituye una
etapa fundamental que ha de hallar su continuidad en el no menos importante estudio de los proteomas. Siguiendo los
pasos de la Biologia, la Medicina y la Veterinaria estan experimentando un proceso de “molecularizacién™ creciente que
hha hecho emerger la que se ha llamado Patologia Molecular. Hoy en dia, el nivel molecular no es s6l0 un nivel de i
vestigacién biomédica, sino también un nivel de actuacién diagnéstica, prondstica y terapéutica. Por ello, es imprescin-
dible preparar adecuadamente a los futuros profesionales de la salud, ya que sélo si disponemos de protesionales
‘competentes podremos hacer frente con éxito a los rotas dol futuro, El ejercclo profesional de los aos venideros exigira
‘competencia para abordar a nivel molecular los problemas de la salud, Por ello, har falta profesionales que posean los
Conceptos y los elementos de lenguaje molecular necesarios para comprender las bases moleculares de la salud y la en-
‘ermedad. Profesionales capaces de adquirr constantemente la informacién bioquimica necesaria para mantener su com-
petencia, y capaces de aplicar dicha informacién a la solucién de los problemas que les concierman; profesionales con
‘capacidad de autoaprendizaje para poder susttur los conceptos caducos por los nuevos, haciendo uso de todas las posi-
blidades que las modemas tecnologias de la informacién pondrén a su alcance. Para la formacién basica de tales pro-
fesionales tienen gran valor los textos que resumen los nuevos elementos concepiuales de las diversas areas de la Biolo-
gfa junto a las correspondientes téonicas y metodologias; ya que permiten que el estudiante adquiera una base sdlida
® partir de la cual podra ampliar los conocimientos acuciendo, luego, a las monografias especializadas, a las revisiones
©, incluso, a los articulos originales. Por todo allo, y por abarcar un campo hasta ahora insuficientemente cubierto, con-
sideramos que la obra de José Luque y Angel Herréez responde a una necesidad urgente e importante.
‘Ahora bien, como hemos indicado, la empresa no era nada facil. Y no lo era por su cardcter de obra basica, dirigi-
dda a estudiantes de varias licenciaturas y, por tanto, con formacién versa, y por su pretension de seguir un tratamiento
pya
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fetomeratas (oniucdn)
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TRADUCCION
[FRANSCRIPCION] ribonuclestidos (NTPs) ———=—__p [pp
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Zaina encima: epation
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[un RSA componente da ribo 2 INTRODUCCION Y ASPECTOS GENERALES EN EUCARIOTAS.
Francis Crick intradujo el término “Dogma central de la genética molecular” para describir, incluso antes de
Cconocerse su importancia real en los seres vivos, el flujo de la informacién genética y la ullizacién celular de dicha
informacion. En conereto, la transmision de la Informacién contenida en la secuencia del DNA a las oéiulas y organismos
descendientes mediante la replicacién, y su expresién en biomoléculas funcionales mediante los procesos de
transcripcion y traduccién. Comprende, pues, el Conjunto de relaciones generales existentes entre el DNA, el RNA y las
proteinas,
Debe resaltarse que la representacién abreviada DNA > RNA — Proteina no indica la transformacién de una
molécula en otra, tal como se indica normalmente en las rutas metabélicas, sino que cada elemento en la secuencia
‘porta la informacién necesaria para la sintesis del siguiente. En este sentido, es importante el concepto de plantilla 0
‘molde molecular: aunque cada paso esta calalizado por una enzima, los sustratos (nuclestides, aminodcidos) no son
‘seleccionados por ella, sino que vienen especificados por la intervencién del molde, en conereto por su secuencia de
nuclestides.
El progreso en el conocimiento de los procesos de transmisién de la informacién genética obligé a la ampliacién
de este esquema basico original para acomodar otros procesos que también ocurren, al menos en algunos organismos
particulares, como es el caso de algunos virus:
Siaess do una moléoula de
FRNA como duplicado de un
RNA eromosémco, Catalizade
[por RNA replcasas Seda en
‘algunos virus, como el del
‘mastica del abaco,
licack replicacion de! RNA
ve ae replicacién plicac
transmision de Ta { ) _tonsaioaon | (>)
informacién genética
(dogma central de la DNA RNA —Haduscion_ Proteina
i ~__
Senet moleesley ) transcripcion inversa
Formacin de DNA span dt
RNA cromotiico, Calzada
oa wanes inves.
Por dh en los earevins
4.2 EL DNA COMO MATERIAL GENETICO: PASADO, PRESENTE Y FUTURO
El conacimiento de la estructura de las Acidos nucleicos se inicia en el siglo XIX con el aislamiento en el nicleo
celular de una nucleina formada por una parte dcida (hoy, DNA) y una parte basica (proteina), asi como con el estudio
parcial de las propiedades de la nucleina y de su relacién con la herencia celular. Sin embargo, la estructura stlo se
conocié a mediados del siglo XX, al mostrarse que el DNA era el componente cromosémico depositatio de la
informacion genética. Cabe destacar en este sentido, como antecedentes clave, los experimentos de Oswald T. Avery,
olin MacLeod y Maclyn McCarty, en 1944, y de Alfred D. Hershey y Martha Chase, en 1952, que constituyen un hito en
el conocimiento del material genético a escala molecular.
‘Tras estas aportaciones iniciales, el verdadero inicio de la Biologia Molecular moderna lo constituyé la propuesta
de estructura en doble hélice para el DNA, formulada, en 1953, por James D. Watson y Francis Crick. A partir de este
‘momento, casi todo el esfuerzo realizado se centra en el estudio del DNA genémico, desde el punto de vista estructural
¥ funcional, en procariotas y eucariotas, con una atencién especial a mamiferos en general y humanos en particular. Los
‘avances logrados, tanto tedricos como técnicos y aplicados, han sido enormes. A ello ha contribuido la aparicién de la
Ingenieria genética, como principal area derivada de la biologia molecular. Queda pendiente para un futuro préximo la
conclusion del Proyecto Genoma Humano (gendmica funcional), el andlisis de las funciones de cada gen (genémica
funcional) y la diseccién de la estructura y funcién de las prote!nas (proteémica). Como expresién de estos nuevos
‘conocimientos, ha surgido una gran variedad de campos de actividad en las Ciencias de la Salud (Medicina, Farmacia y
Veterinaria), tales como anticuerpos monoctonales, métodos inmunoquimicas, biochips para el diagndstico, clonacién
‘molecular y clonacién animal, farmacogenes, ingenieria de proteinas, proteinas recombinantes de interés diagnostico y
terapéutico, sondas de hibridacién, terapia celular y terapia génica, transferencia de genes, vectores, virus, etc. Nuestto
‘objetivo no es descriir los aspectos concretos de estos campos, sino sélo poner de manifiesto las bases molecuiares
‘que les sirven de soporte, como punto de partida para un estudio detenido de cada campo en su correspondiente area
) .
01 4 10 100 1000
Peso ota del DNA (pg)
Por otro lado, no existe correlacién alguna entre el tamario det genoma de distintas especies y el nimero de
‘cromosomas que fo componen. Por ejemplo, mientras que el genoma humano diploide (6,6 10" pb) esté repartido en
46 cromosomas (23 pares, n=23), las células de ratén, con un genoma menor (3 10° pb), poseen menor numero de
‘cromosomas (40); pot el contrario, en las células de cebolla un genoma 2 veces mayor que el humano (1,5 10" pb)
‘est contenido en solo 16 cromosomas. De forma similar, la mosca de la fruta, con un genoma (1,7 - 10° pb) mucho
mayor que el de la levadura (1,6 - 10" pb), posee un niimero muy inferior de cromosomas (8 frente a 32).
«4
304
‘evi nematodes
ae e
(© Dicyostatum
‘Numero de cromosomas (2n)
w4 °
Dreeophila
0 108 10 10°
‘Tamario del genoma (pb)
Esta ausencia de correlacién entre cantidad de material genético y complejidad del organismo sugiere que el
tamafio de los genomas de organismos superiores es muy superior al necesario y, por tanto, que una gran parte es 10
ccodificante, es decir, no esta organizado en genes, nunca traduce su informacién a un producto génico (RNA 0
proteina). Esta hipétesis ha sido confirmada al estudiar con detalle el genoma. Par ejemplo, se ha encontrado que los
‘genes tienen una longitud media de alrededor de 1.000 pb. Asumiendo esta cia, el genoma humano haploide podria
‘contener, en teoria, unos 3,3 millones de genos (pues cada aminodcido esta codificado por 3 nucleétides) y, sin
OO —————————————————————————— 8 INTRODUCCION Y ASPECTOS GENERALES EN EUCARIOTAS.
embargo, se estima hoy en dia que sblo contiene unos 100.000, de modo que la proporcion codiicante s6lo alcanza
alrededor det 3% de! DNA total.
‘Aungue la funcién de los genes esté bien establecida para una pequefia fraccién del total presente en el genoma
humano, la Inexistencia de una correlacién entre cantidad total de DNA en el genoma y grado de complajidad del
‘organismo superior puso de manifiesto la necesidad de estudiar con mayor precision la organizacién estructural, a nivel
‘molecular, tanto del genoma (tema 10) como de los genes (tema 19). Los hechos més caracteristicas en relacion con la
‘complejidad del genoma nuclear son la presencia de grandes reglones que no codifican producto génico lguno (DNA
‘no codificanta) y la existencia de secuencias de DNA que se repiten un numero mas 0 menos elevado de veces (DNA
repetitive). Como se estudiara con detenimiento posteriommente, hay que unir a ello la existencia de una enorme
diversidad de secuencias (polimorfismo, tema 26) en distintas regiones del DNA, tanto sencilas como repetitivas,
codificantes 0 no,
1.3.3 Magnitud y caracteristicas del genoma mitocondrial
El genoma de organulos (mitocondrias en animales, mitocondrias y cloroplastos en plantas) es, posiblemente, un
vestigo del cromosoma de bacterias arcalcas que accedieron al ctoplasma de eucariotas primitivos, para dar lugar tras
la evolucion a dichos organulos. Se cree que la mitoconcria (organulo que aporta el 90% de la energia que necesian las
células) surgié al acumularse el oxigeno en la atmésfera terrestre. Posiblemente, la mitocondria y el ndicleo de la célula
eucerota se crearon a la vez, al Incorporarse por endoctosis células procarotas aerdbicas al interior do la cdlula
‘eucaritica anaerdbica y fusionarse ambas. Con el tiempo, la mayoria de los genes procaridticos. (genes
protomitecondrales) se integraron en el genom nuclear, con lo que el eucariota primtivo anaerébico ya podia vir en
una atmésfera aerdbica, rica en oxigeno; sdlo una pequefia fraccién de! genoma procaridtico primigenio permanecio en
la mitocondra
Las células animales poseen un niimero muy variable de mitocondrias, dependiendo del tejido. Cada mitocondria
posee varias copias de un Unico cromosoma, situadss en la matriz mitocondrial y ancladas a la membrana interna. En
‘consecuencie, el nlmero de copias de DNA mitocondrial (mDNA) en una céluia oscla entre 200 y 100.000. El
‘eromosoma mitocondrial es bicatenari y circular, como el de procariolas, aunque de tamafo muy inferior: 16.569 pb en
hhumanos, con una longitud de 5 yim y una masa molecular de 10 MDa; esto supone unas 3.000 veces menos que la
tongitud del cromosoma nuclear més pequefio. Teniendo en cuenta el nimero de copias totale (2 del genoma nuclear y
‘mittiples, y muy variables, del mitocondrial), se puede calcular que el DNA mitocondrial total supone, dependiendo del
telido, entre un 0,05 y un 20% del DNA toial de la celula, Finalmente, el cromosoma de cloroplastos es igualmenta
Dicatenaro y circular, pro de mayor tamafo que el mitocondal.
‘diferencia del DNA nuclear, do gran compojitad, con rogiones codicantes y no codicantes, el {DNA os en su
‘asi tolaidad codiicante y no repeitv, En concreto, el cromosoma ritocondrial humano contiene un total de 37 genes:
2 para rRNA, 22 para tRNA y 13 para proteinas que forman parte de los complejos enziméticos respiratorios I, II, IV y V.
Estas suponen solo el 5% de las proteinas mitoconériales, mientras que el resto estan codificades por DNA nuclear.
me Tema 2
Componentes fundamentales
de los acidos nucleicos
24 Componente acido: Fosfatos..
241.1 Monofosfates...
242 Difosfatos...
24.3 Taifosfatos. .
2.14 Tipos de enlaces fostaio.
22
23
Bases nitrogenadas mas frecuentes: 2 tipos.. 2
232 _Otras bases de interés biolégico y ciinico. 1B
23.3 Propiedades fisicoqulmicas de las bases purinicas y Pirie. 4
23.3.1 Existencia de dipoles. 14
2.33.2 Hidrofobicidad 14
233.3. Disposicion coplanar de los enlaces de cada anillo. (EN y CH 6). 14
2.33.4 Tautomeria o isomeria dinémica 14
2.3.35 Caracter basico... 16
233.6 Absorcién de la luz en el ultravioleta 7
Los acidos nucieicos (DNA y RNA) estan constituides por la unién de numerosos nucleotides, de 4 tips. Como
introduccién a su estudio, se consideran algunos aspectos de interés para cad uno de los componentes estructurales
de dichas unidades, los nucleétidos:
Fosfato(s)
Nucledtido: +. Aziicar
Nucleésido
Base nitrogenada ms
2.1 COMPONENTE ACIDO: FOSFATOS
2.1.1 Monofosfatos
El osfato inorganico (P), mezcla de las especies quimicas resultantes de la disociacién de la moléoula de acido
fosfoico, aparece como anién a pH acido, como dianion a pH fisiolégico y como trianién a pH alcalino. En la célula, el
fosfato se encuentra en forma libre (P,) 0 formando parte de numerosos compuestos organicos (R-P), por ejemplo, ios
udedtides. 40 COMPONENTES FUNDAMENTALES DE LOS ACIDOS NUCLEICOS
“Tres eaulibrios de dsoincii en nein dt pH
Acido fostérico: Gaon 2 oth or? wothon BE" oho
ortofsfirice)! §— Ho—F—on "== oho == noSt—o" == “oro
HPO, bu 1H & &
—————osfato inorgénico (P;) ———
alcohol R-O! (> mezcla de las 3 formas iénicas del 4c. fosférico,
on diferente proprcion segin el pH)
Dos equlibvis de disociacién en fancién del pt:
or R-o8P-07s= R081
a bu
— fosfato orginico (R-P)—~
(Compuesto orgénico fosftado)
2.1.2 Difosfatos
El difosfato © pirofosfato (PP)) se presenta a pH fsiolégico como trianién (una de las 4 formas iénicas del écido
plrofostérico). Es estable en disolucion a pH neutro 0 alcalino; sin embargo, dentro de la célula es inestable por accion
de las pirofosfatasas, formande 2 P;. Aparece combinado fundamentalmente en nucledsides-difosfato (por ejemplo,
ADP),
oto
Castro equlibvios de dsoiacin en fms dl pl:
(+ merc de as 4 formas ibnicas dt. pirofostric,
‘en diferente proporién seine pl)
oo °
erie OO
oud on
2) ~pirfosfato orginico (R-PP)—
‘(Compuesto orgnieo pirofosfatado)
2.41.3 Trifosfatos
El trifosfato (PPP,) se presenta a pH fisiolégico como tetraanién. No aparece en forma libre, sino formando parte,
‘esencialmente, de nucledsidos-trifesfato (por ejemplo, ATP).
acide trifostorieo
oa
Hto-f
ou
——trifostato orginico (R-PPP) ——
Tealees COMPONENTE NEUTRO: AZUCARES "1
2.1.4 Tipos de enlaces fosfato
Pueden distinguirse cinco tipes de enlaces fosfato que van a formar parte de los nuclestides. Obsérvese le
estructura y nombre de todos ellos, asi como la diferencia entre enlace éster y anhidtido en los nuclestides aifosfatados:
ytifostatados.
SOLO CON ENLACES ESTER, (ON ENLACES TER Y ANHIORIDO; —
q ° fonoéten, fstunhidido
7 R-o-lLo-n 4
R-O-F0-fo
fosfoéster fosfodiéster: Caan:
(osforonosster, un éster dable con Tafa
fosfato, monofosfaio): ‘dos moléculas (irofostao, difesfeanbidrido)
Sepa tetelansi ad ‘ferences fosfotser, oanhitrido — ffanbirido
°
° ° NIA.
~ 9 g bP OF 0
oo
& é ake
(citosfoanidr
os fosfomonoéseres en sites diferentes de una (itosfoanhirido)
misma molécula
2.2 COMPONENTE NEUTRO: AZUCARES
El aziicar (inicialmente llamado ose) siempre es una pentosa (5 tomos de carbone), bien la D-ibosa 0 la
D-desoxiribosa. La ribosa (nombre derivado de osa del Rockefeller Institute of Biochemistry, 1908) interviene en
rudleésidos y nucledtidos bajo su forma mas estable, f-D-ribofuranosa,
1 @
i No=¢
ton = or] HOF o ONG —HOFTL_o oH
x ix I 4 f
wabon Me ncbon 9 o> KE F (
wy L H A 4 H
hong He
‘non cuz0n fon nar cn on
forma tincal, ‘forma cictica, (Proyeccién de HAWORTH) B-D-2-desoxirribofuranosa
cncaemosieiden “Song f-b-ibofuranosa (@-desoiribosa)
(ryecn de FISHER) om SA) RIBOSA)
Semel
oa [ cchertstemettn,
ws yy OH HOCH: 6, "
La formula representada como ejemplo puede extenderse a otras muchas moléculas de interés bioquimico:
D-glucosa, D-galactosa, 3-desoxi-D-vibosa, etc. 12 COMPONENTES FUNDAMENTALES DE LOS ACIDOS NUCLEICOS
2.3 COMPONENTE BASICO: BASES NITROGENADAS
‘Son moléculas heterocialicas, con més de un tomo de nitrégeno, formadas por un anillo Unico (pirimidina) o por
dos anilos condensados (purina). Obsérvense en los ejemplos de bases que intervienen en los dcidos nucleicos ta
‘numeracién de los étonos del helerocicio y la posicién de los susituyentes externos.
2.3.1 Bases nitrogenadas mas frecuentes: 2 tipos
Férmulas y nomenclatura de BASES PIRIMIDINICAS
Ni r
Hy
Z
m
mM 3
4 Wy (oy
H H
Ne icles citosina timina
LJ a (Coxo-Laminopiinidig) —@24-dixo-Smeipirimiing)
Sy7_ Pieinidina (G-metiracilo)
Sistema de numeracion vl
(QUB) de os tomes dl
anil piriniina. N
(Ait pin: =
entdo hora)
Formulas y nomenclatura de BASES PURINICAS (0 PURICAS)
we) \
es y
Pisimiina imiderol
ry ‘ nicleo
oy purina
q
adenine guanine
(6-aminoprina) €@-amio-6onoparina
Sistema de numeracién (UB) de los
‘toms dl nil purin
aston eto enor:
oil dz ss tre)
amy | -0 |,
mode de i 6
A resumen,
i posiion de los e a z
sustituyentes presenter aya
enada una dels 5 7 x
bases nitrogenadas es
T aa [5 COMPONENTE BASICO: BASES NITROGENADAS. 413
2.3.2 Otras bases de interés biolégico y clinico
Existen otras bases purinicas y pirimidinicas, en general poco frecuentes, que surgen por modificacién de las
bases principales A, G, C y U 0 de alguno de sus anélogos (hipoxantina, H). Son de origen natural o sintético,
Interienen en procesos como ta metiiacién del DNA en la célula y muestran distintas propiedades (antibisticas,
antivircas, antitumorales, ete).
oatural, DNA bacteriano) (siti, etotdxiea)
G6 soo obo
&y,
xanioa Aida rico cst
) (2,6-dioxopurina) —_(2,6,8-trioxopurina) (,3,7-trimetilxantina)
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‘H,C-O 3CH,OH Hycen-cH,on
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Cc) j ri
oe] omy oy
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ctusing | Smetciosin —_—_Shidoxinetlctosina
(cane, DNA vercbraon) (rata DNA bata)
° ° 9 °
ws |e ny ON
Au) a) a A J AS
OW} OW ow oy °
u ¥ " t y
asia | ‘iownclo aiisrounctoS-beomounilo_s-tvracilo
(ratral, RNA) (natural) into) (smn
> anitumoral) 14 COMPONENTES FUNDAMENTALES DE LOS ACIDOS NUCLEICOS
2.3.3. Propiedades fisicoquimicas de las bases purinicas y pirimidinicas
2.3.3.1 Existencia de dipolos
‘Todas las bases poseen atomos electronegativos de © (excepto adenina), en posicién exociclica o extranuclear, y
de N, tanto exocicticos como en el anillo, nucleares. Como consecuencia, son abundantes los enlaces polares, lo que
les permite interaccionar entre si mediante puentes de hidrdgeno, que poseen una importancia capital en la estructura
secundaria de los dcidos nucleicas, en especial del DNA.
2.33.2 Hidrofobicidad
La naturaleza aromatica de fos anillos hace que las bases tengan un marcado cardcter apolar, sean hidrofébicas y
poco solubles en agua al pH celular, cercano a la neutralidad. A pH acido 0 alcalino adquieren carga y se hacen més
solubles en agua, Como ya se estudiard, las interacciones hidrofébicas de apilamiento, que tienen lugar enire bases
7 NH
Destposde | R a me ce
tautomerias | EEC ce c
encrales ; forma amina
& forma ceto forma enol forma imina primaria
Son muchos los compuestos organtioos que existen como mezclas de 2 0 més de estas formas tautomérica
interconvertbies y en equllbrio. Entre los compuestos heterociclicos son de especial importancia las tautomerias en la
‘bases purinicas y pirimidinicas, on las cuales la migracién del H tiene lugar desde un tomo de N nuclear hacia otro
‘tomo extranuclear, y viceversa:
Tautomeria Tautomeria
lactame-lactima imina-amina primaria
+ Dostiposae [ if NH ie
tautomerias | « eA 5 py
enlasbases | HY iN N “Ny is
nitrogenadas 1 tactama factima ; forma amina
(efomacer, | | («fom cnet, ocuos ising ipimana’
Sat mciary Nowa) (Nt nucle vet)
neste caso, ef grupo ceto forma pate de wh
‘onlace aids cfeies, 0 aciama. Al migrar cl
‘tomo de H desde el N nuclear a O
grupo cot, se conviore en el tautbmero
cima Psa tautomers afecta 9G, nica
purina oxo-sustituds, ya 1383 pirimidinas,
CUyT,
grupo exocicico es wna mina,
aque al tecbir el duomo de H desde
'N nuclear se converte en wn
‘grupo amina primaria, Esta
fautomeriaafecta ala nica
pirimidina smino-sustiuida, Cy @
as2 purinas, Ay G. COMPONENTE BASICO: BASES NITROGENADAS. 15
En consecuencia, las tautomerias de las beses ntragenadas son las siguientes:
Wh at
La tautomeria de A es iy Oe
imina-amina primaria. na 1 \ A SN 1 \
“Los tqutémers imine nomban ie u
Fovienlounastericosobciaiemade SN ~N Noe
base
amina imina
—
Ty U muestran tautomeria oop
doble lactams-lactima
~~
lactima doble
— On
~— vy
og Js, J
= Sy
lactima doble
Gy C muestran tautomerias
imina-amina primatia y
lactama-lactima,
Los taut6meros imina se nombran
pponiendo un asterisco sobre Ia Tactama y
letra de la beso, rina
lactima e
imina
Desde el punto de vista quimico, en las bases libres las formas tautoméricas lactima (enol) @ imina son menos
estables, y por ello son unas 10,000 veces menos abundantes que sus correspondientes tautomeros lactama (cet0) y
‘mina, con lo que el equilbrio se encuentra desplazado hacia la lzqulerda. 16 COMPONENTES FUNDAMENTALES DE LOS ACIDOS NUCLEICOS
2.3.3.5 Caracter basico
‘Todas las bases nilrogenadas son bases débiles, pues sus atomos de N, tanto nucleares como extranucleares, se
pueden protonar, con valores de pk, comprendidos entre 9 y 10. Como elemplo representatvo, obsérvese la ionizacion
de la adenine:
uo a ron cic
gy os = oH ocx oO as, ors
(vatido samba =>
para G, C, T, U)
‘Sin embargo, este cardcler basico, propio de los anillos purina y pirimidina, se ve disminuido por la presencia de
algunos sustituyentes. En conereto, el grupo -OH de los enoles (y lactimas) es ligeramente acide y puede disociarse:
Ht
eee ow
AN Cas
‘Como consecuencia, las bases nitrogenadas que poseen grupos lactama (ceto) pueden actuar como acidos, @
través de sus tautémeros lactima (enol), con lo cual se ve reducido el cardcter basico propio de los anilos, en mayor
medida cuanto mayor sea el nimero de grupos -OH. Véanse los ejemplos siguientes:
a) Aes la Unica base que no tiene grupo ceto/enol y, por tanto, no muestra ningén cardcter acido y es la mas basica de
todas.
b) En Gy G, el nico grupo OH aporta un caracter acido muy débil, por lo que siguen comportandose como bases:
NH NH Nt
(vido también <) tewongre ry“) design O
© a
maa Ye)“ ‘
(forma lectama) (forma lactima) (forma lactima
ionizada)
©) En Ty U, la presencia de dos grupos OH compensa en mayor grado el cardcter basico:
9
| . cH
eee , y I ‘autogeria oe isociacjén aH + a
A
(forma (forma (forma lactima
lactama doble) lactima doble) doble ionizada)
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