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PROCEDIMENTO OPERACIONAL PADRÃO

CEACLIN – Centro de Análises Clínicas de Porto Velho

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ACIDO FOLICO 05 01 00

Elaborado por: Diego Cavalcante Cargo: Biomédico

Data da elaboração: 01/09/2016 Assinatura:

Aprovado por: Paulo Sérgio Bonfim Cargo: Responsável Técnico

Data da liberação: 02/09/2016 Assinatura:

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1) PRINCÍPIO DO MÉTODO:
O ensaio ARCHITECT Folate é um ensaio de dois passos para a determinação quantitativa do folato no
soro, plasma e glóbulos vermelhos (RBC) humanos utilizando a tecnologia do imunoensaio de
microparticulas por quimioluminescencia (CMIA) com protocolos de ensaio flexíveis, designados
Chemiflex. Dois passos de pré tratamento medeiam a liberação do folato mda proteína de ligação
endógena. No pré tratamento 1, a amostra e o reagente de pré tratamento 2 são aspirados e dispensados
em uma célula de reação. No pré tratamento 2, uma alíquota da mistura da amostra com o reagente de
pré tratamento 2 é aspirada e dispensada em uma segunda célula de reação. O reagente de pré tratamento
1 é adicionado em seguida. Uma alíquota da amostra pré tratada é transferida para uma terceira RV,
seguida pela adição de microparticulas paramagnéticas revestidas de proteínas de ligação aos folatos e
do diluente espcifico do ensaio. O folato presente na amostra liga-se as microparticulas revestidas de
FBP. Após a lavagem, o conjugado de acido pteroico marcado com acridinio é adicionado, ligando-se
aos locais não ocupados nas microparticulas revestidas de FBP. As soluções pré ativadora e ativadora
são adicionadas a mistura de reação; a reação quimioluminescente resultante é medida em unidades de
luz relativas (RLUs). Existe uma relação inversa entre a quantidade de folato na amostra e as RLUs
detectadas pelo sistema ótico do ARCHITECT.

2) PRINCIPAIS APLICAÇÕES CLÍNICAS:

O ácido fólico atua na maturação das hemácias e participa do processo de síntese das purinas e
pirimidinas, componentes dos ácidos nucléicos. A deficiência do ácido fólico e quase sempre
consequência de ingestão insuficiente e esta presente em cerca de 1/3 (um terço) de todas as mulheres
grávidas, na maioria dos alcoólatras crônicos, nas pessoas que cumprem dietas pobres em frutas e
vegetais e nas pessoas com distúrbios absortivos do intestino delgado. Pode estar falsamente elevado em
casos de hemólise. Sua concentração pode estar reduzida com o uso de contraceptivo oral. Flutuações
significantes ocorrem com a dieta e pode resultar num folato sérico normal em um paciente deficiente.
Deficiência grave de ferro pode mascarar a deficiência do folato.

3) MATERIAL OU AMOSTRA:

a) Amostra: Soro humano; Plasma humano (Heparina de lítio);

b) Acondicionamento: Frasco do laboratório devidamente identificado;
c) Coleta: Conforme Manual de Coleta do Laboratório;
d) Volume mínimo: 500 L;
e) Volume recomendado: 1000 L;
f) Armazenamento e estabilidade da amostra: Remova o soro ou plasma do coágulo, gel separador o
mais rápido possível após a completa formação do coágulo. Caso o ensaio não seja realizado
imediatamente, as amostras de soro poderão ser armazenadas de 2 a 8 °C. Caso o ensaio seja adiado por
mais de 7 dias, as amostras devem ser congeladas a - 10 °C ou temperatura inferior por até 30 dias.

4) PADRÕES, CONTROLES, REAGENTES E INSUMOS:

a) Calibrador: FOLATE ARCHITECT (Abbott);
b) Soros Controles: Lyphochek Immunoassay Plus Control Levels 1 and 2 (BIO-RAD)

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c) Kit: FOLATE ARCHITECT SYSTEM (Abbott).

5) EQUIPAMENTOS:
a) O Laboratório CEACLIN utiliza o equipamento ARCHITECT ABBOTT I1000 como equipamento
principal e ARCHITECT ABBOTT I2000 como equipamento de apoio, com as manutenções preventivas
devidamente atualizadas;

6) PROCEDIMENTO DE EXECUÇÃO:
a) Inspeção Inicial da amostra: Verificar se a mesma encontra-se identificada.
b) Identificação das amostras: Etiqueta padrão, com nome completo do paciente, requisição, código
de barras, exames a serem realizados e o tipo da amostra;
c) Processo de análise: Após a coleta as amostras passam ao setor de triagem, onde o soro é
centrifugado conforme POP do setor de triagem e destinado ao setor para a realização dos analitos.
As amostras são dispostas em racks; próprias do equipamento, posteriormente são inseridas no
equipamento;
d) Técnica utilizada: Vide programação do equipamento ARCHITECT ABBOTT I1000;
e) Registro dos resultados: Com o sistema de Interface o responsável pelo setor faz a primeira análise
dos resultados e faz sua liberação para o X-Clinic;
f) Interferentes: A interferência em potencial no ensaio ARCHITECT Folate da bilirrubina (conjugada
e não-conjugada), triglicerídeos e proteína foi demonstrada em um estudo com base em oritentações do
documento EP7-A2 do CLSI. A hemoglobina não foi testada devido ao alto teor de folatos nos glóbulos
vermelhos. Os dados desse estudo estão resumidos na tabela abaixo:

Referência Teste
Média/Mediana Média/Mediana
ng/mL ng/mL Dif.ª %Dif.ᵇ
Interferente n n ng/mL

Bilirrubina 40 2,1 40 2,0 - 0,1 - 4,0

(não-conjugada)
≤ 20 mg/dL 40 7,9 40 7,6 - 0,3 - 3,8

Bilirrubina 40 1,8 40 1,7 - 0,1 - 5,6

(conjugada) 4
≤ 20 mg/dL 40 7,5 40 7,0 - 0,5 - 6,7
Proteína 40 2,6 40 2,9 0,3 11,5
≤ 12 g/dL 40 8,8 40 9,1 0,3 2,8
Triglicerídeos 40 2,1 40 2,2 0,1 4,8
≤ 3000 mg/dL 40 7,9 39 8,0 0,1 1,8

ª Diferença = média (ou mediana) do ensaio – média (ou mediana) da referência.

ᵇ % Diferença = diferença/média (ou mediana) da referência x 100.
g) Precauções de segurança: Como as amostras utilizadas são potencialmente infectantes, deve-se
manuseá-las seguindo as normas estabelecidas para Biossegurança.

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7) CÁLCULOS DOS RESULTADOS:

Conforme programação do aparelho ARCHITECT ABBOTT I2000.

8) CONTROLE DA QUALIDADE:

a) Controle Interno: Através do uso sistemático de soros controles em 2 níveis: Lyphochek

Immunoassay Plus Control Level 1 (BIO-RAD) cujos analitos se encontram em uma faixa dentro do
valor de referência considerado patológico baixo e Lyphochek Immunoassay Plus Control Level 2
(BIO-RAD) cujo valor de referência é considerado normal, para que com isso seja possível cobrir a
faixa dinâmica dos métodos utilizados.
Plotagem dos valores obtidos nos ensaios em gráficos de Levey-Jennings para controle estatístico de
erros e tomada de ações corretivas, seguindo as regras de Westgard para validação ou não das
corridas analíticas, utilizando-se para esta finalidade o software Qualichart (Biosoft Informática).

b) Controle Externo: O controle externo é realizado através do programa de ensaio de proficiência

PNCQ.

9) VALORES DE REFERENCIA:

O setor de hormônios, imunologia e marcadores sorológicos deverão estabelecer os valores de

referência para população atendida:

VALORES RESULTADOS

Soro/Plasma 3,1 – 20,5 ng/mL

10) INTERPRETAÇÃO:
A deficiência do folato pode ser causada por baixo consumo alimentar, ma absorção devido a
doenças gastrointestinais, utilização inadequada devido a deficiências de enzima ou terapia antagonista ao
folato, drogas como álcool e contraceptivos orais e demanda excessiva de folato durante a gravidez. Uma
vez que as deficiências tanto de vitamina B12 quanto de folato podem levar a anemia megaloblástica, o
tratamento apropriado requer um diagnostico diferencial da deficiência, portanto, tato os valores de
Vitamina B12 como os de folato são necessários. Baixos níveis de folato no soro refletem a primeira fase
do equilíbrio negativo de folato e precedem o esgotamento tecidual.

11) VALORES CRÍTICOS:

a) Mínimo: Não Aplicável

b) Máximo: Não Aplicável

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12) LINEARIDADE E LIMITES DE DETECÇÃO DA REAÇÃO:

Limite de detecção: 0,0 ng/mL

Limite de linearidade: 20,0 ng/mL

13) REFERENCIAS:

Bula do kit que se encontra no Arquivo de Bulas;

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