Está en la página 1de 3

Establecimiento de organogénesis directa a

partir de hoja de Viola odorata


Andrea Aluisa1, Stefania Llumiquinga1, Bryan Mangui1, Andrea Morillo1, Santiago Salazar1
Departamento de 1Ciencias de la Vida y de la Agricultura, Ingeniería en Biotecnología, Universidad de las
Fuerzas Armadas – ESPE, Sangolquí, Ecuador
acaluisa@espe.edu.ec, msllumiquinga@espe.edu.ec, bamangui@espe.edu.ec,
aemorillo@espe.edu.ec, sasalazar7@espe.edu.ec

RESUMEN

Palabras clave:

ABSTRACT

Key words:

INTRODUCCIÓN plantas. Así mismo menciona que la


organogénesis directa es la regeneración de las
El género Viola L. originario de África y Europa, plantas, excluyendo la fase de inducción del callo,
está ampliamente distribuido en el Nuevo y Viejo que si está presente en la indirecta. Domínguez
Mundo, principalmente en regiones templadas, y (2008), indica que la regeneración in vitro se ha
son comúnmente conocidas como "Violetas" alcanzado a través de la obtención de brotes a
(Sanso, Xifreda, & Colasante, 2005). Una de las partir de meristemos auxilares localizados en el
especies pertenecientes a este género es Viola segmento basal de las plantas, o bien a través de
adorata, una hierba perenne con tallos aéreos no organogénesis o embriogénesis somática indirecta,
ramificados, cortos y largos estolones. Además de es decir, a partir de tejido calloso generado
hojas orbiculares a anchamente ovadas, con una también in vitro.
lámina foliar de 3-4,5 cm de longitud por 3,2-5 cm
de ancho (Arango, 2004). Esta planta posee El cultivo in vitro de plantas medicinales
flavonoides, aceite esencial, mucilagos, saponinas conforman una fuente inmediata de material
y alcaloides que le confieren propiedades vegetal uniforme y libre de contaminación
curativas por ende sus raíces, flores y hojas son microbiana y química para la caracterización
medicinalmente utilizadas (Botero, 2011). bioquímica e identificación de compuestos
activos. Por tanto, su micropropagación vegetal ha
Dentro de las técnicas de cultivo in vitro utilizadas sido exitosamente utilizada en la conservación de
se alude a la organogénesis directa e indirecta, la diferentes especies medicinales y en la extracción
embriogénesis somática directa indirecta y la de metabolitos secundarios para el desarrollo de
proliferación de yemas axilares. Especialmente en medicamentos (Cardoso, Naranjo, Atehortúa, &
la vía de la organogénesis, varios tipos de Blair, 2011).
explantes han sido utilizados para la regeneración
directa de plantas (García, Collado, Bermúdez, Dada la importancia medicinal que tiene el cultivo
Veitía, Torres, & Romero, 2008). Según Li et al. de Viola odorata, el objetivo del presente trabajo
(2015), nódulos cotiledonarios, hipocótilos, hojas, fue evaluar la capacidad de regeneración de brotes
tallos con segmentos nodales han sido reportados del tejido diferenciado de la hoja violeta vía
como explantes efectivos para muchas especies de organogénesis directa.

1
MATERIALES Y MÉTODOS RESULTADOS

Preparación de la sala de siembra Una vez transcurridos los 21 días se evaluó el


La sala de siembre fue desinfectada con limpiador comportamiento del material vegetal. En la
de pisos Kalipto. Las cámaras de flujo fueron tabla 1 se tiene que los explantes expuestos a
desinfectadas con solución de alcohol al 90%. una concentración de 0.7% de NaClO por 10
Una vez fueron ingresados los materiales de minutos presentan contaminación en ambos
trabajo a las cámaras de flujo, estos fueron frascos lo que se corrobora en la figura 1, en
expuestos a luz UV durante 20min. Luego el flujo
donde no se observa cambio de coloración del
de aire de las cámaras de fue activado por 15 min.
medio.
Desinfección de las muestras
Tabla 1. Resultados de crecimiento de brotes a
Hojas jóvenes y completas de una planta de partir de hojas de violeta (Viola adorata) a
violeta (Viola odorata), fueron cortadas [NaClO] de 0.7% por 10 minutos.
incluyendo el peciolo. Las hojas fueron lavadas
Nombre: Violeta Fecha de Fecha de
con agua corriente retirando tierra e impurezas.
siembra: 16 evaluaci
Luego las hojas fueron sumergidas en solución de de junio ón: 07 de
detergente 1% durante 15 min, en agitación. Julio
Seguido por dos lavados con agua destilada y un
lavado con agua estéril. A continuación, las hojas N° Expla Contamin Parte aérea Otras
fueron sumergidas en solución con cloro 0,7% Fras nte ación caracterí
co (Hongo o N° Longi sticas
más 3 gotas con Tween 20 durante 10 min, en brot tud
bacteria) típicas
agitación. Por último, las hojas fueron ingresadas es (mm) (oxidació
a la cámara de flujo laminar donde fueron lavados n,
tres veces con agua estéril. muerte,
cambio
Siembra de los explantes de color)
Los materiales fueron desinfectados con alcohol 1 Envés No 0 - Se
90% y flameados. Los explantes se obtuvieron observó
cortando cuadrados de 1 cm de lado de tejido sano 2 Haz Hongo 0 - oxidación
de hojas de violeta, incluyendo a la nervadura en los
3 Envés No 0 -
principal. Cuatro explantes fueron sembrados en explante
4 Haz No 0 - s
cada frasco con medio de cultivo usando 20 uM
después
BAP y 0.54 uM ANA como fitoreguladores. En del día
5 Envés No 0 -
cinco frascos se sembró los explantes con el haz 15
sobre el medio de cultivo y en otros cinco frascos 6 Haz Bacteria 0 -
los explantes fueron sembrados con el envés sobre
7 Envés No 0 -
el medio de cultivo. Los frascos fueron cerrados
con láminas de plástico y ligas. Los explantes se 8 Haz Hongo 0 -
incubaron con luz y se evaluó la contaminación y
organogénesis semanalmente. 9 Envés No 0 -

10 Haz No 0 -

2
CONCLUSIONES

BIBLIOGRAFÍA

Arango, S. (2004). Guía de plantas Medicinales


de uso común en Salento, Colombia .
U.S.A: Murray Print Shop, Inc.

Botero, H. (2011). Plantas medicinales .


Medellín: CORANTIOQUIA.

Cardoso, O., Naranjo, E., Atehortúa, L., & Blair,


S. (2011). Organogénesis directa in vitro
a partir de hojas de la planta
Antiplasmodial Solanum nudum Dunal.
Revista Colombiana de Biotecnología,
186-192.

Domínguez, M. (2008). El cultivo in vitro como


herramienta para el aprovechamiento,
mejoramiento y conservación de especies
del género Agave. Investigación y
Figura 1. Explantes de hojas de violeta (Viola Ciencia de la Universidad Autónoma de
adorata) tratados a [NaClO] de 0.7%. Aguas Calientes, 53-62.
Fotos tomada por: Andrea Morillo García, L., Collado, R., Bermúdez, I., Veitía, N.,
Torres, D., & Romero, C. (2008).
Regeneración de plantas vía
organogénesis directa en Phaseolus
vulgaris L. Biotecnología vegetal , 109-
114.

Sanso, M., Xifreda, C., & Colasante, M. (2005).


Especies de Viola (Violaceae)
adventicias en Argentina. Darwiniana ,
43 (1-4): 192-200. .

DISCUSIÓN