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PRACTICA Nº 2 PREPARACION DE MEDIOS DE CULTIVO - SIEMBRA Y AISLAMIENTO

I. Resultados
 En la práctica realizamos la preparación de 2 medios de cultivo: Agar nutritivo y Caldo Nutritivo.

 Agar Nutritivo: Medio de cultivo utilizado para propósitos generales como el aislamiento y recuento de
microorganismos poco exigentes en lo que se refiere a requerimientos nutritivos. Se aconseja como
medio de cultivo general para la mayor parte de microorganismos y como base para la preparación de
otros medios enriquecidos. Se emplea en muchos procedimientos para el análisis de alimentos, aguas y
otros materiales de importancia sanitaria. Tiene un color ámbar claro a medio ligeramente opalescente.
Anexos Fig1.

 Caldo Nutritivo: Medio de cultivo utilizado para propósitos generales, para el desarrollo de
microorganismos con escasos requerimientos nutricionales. Su uso está descripto en muchos
procedimientos para el análisis de alimentos, aguas y otros materiales de importancia sanitaria. Medio
de cultivo deshidratado color beige claro, homogéneo y libre de deslizamiento. Anexos Fig2.

 Después de tener estos medios listo se procedió con la siembra de un microorganismo de agua estancada
sobre un agar nutritivo donde dimos uso de la técnica de siembra por estrías o sea pasando el inoculo en
zigzag sobre la superficie del medio inclinado cuya finalidad será conseguir que un germen quede aislado de
otro en la superficie del medio, donde se producirá hasta el punto de formar colonias. Anexos Fig3.
II. Discusión
 El medio de cultivo constituye el aporte de nutrientes indispensables para el crecimiento de los
microorganismos. La composición precisa dependerá de la especie que se quiera cultivar, porque las
necesidades nutricionales varían considerablemente. Hay microorganismos muy poco exigentes que
crecen bien en medios de laboratorio normales y microorganismos muy exigentes que necesitan
determinadas sustancias para crecer. (Schlegel, 1997)

 La siembra en cajas Petri nos permite cultivar microorganismos gracias a que contiene los nutrientes
necesarios para su desarrollo. El crecimiento de los microorganismos se manifiesta de formas diferentes
dependiendo de la técnica utilizada para su siembra y del tipo de medio en el que se realizó dicha
siembra, de esta forma es posible obtener características morfológicas distintas cuando se realizan
siembras de una misma muestra en diferentes medios de cultivo o viceversa. (Parker, 2004)
III. Conclusión
 En este experimento se pudo realizar la siembra de dilución, en la cual dio como resultado la formación
de colonias sobre las placas de agar nutritivo. Las colonias se formaron durante un tiempo de incubación
de 24 a 48 horas.
Después de un largo periodo de tiempo se pudo observar las diferentes características de las
diferentes bacterias como su forma y tamaño.

 El desarrollo de colonias formadas a partir de los métodos realizados por estrías y por extensión en
placa difieren en forma, borde, elevación, superficie y estructura interna, lo cual es notablemente
influenciado por las concentraciones de carga microbiana del medio en el cual dichas colonias se
desarrollaron así como por el mismo medio de cultivo

Referencias bibliográficas.

 Parker, J. (2004). Biología de los microorganismos. 10th ed. México: Pearson, pp.102 - 131.
 Schlegel, H. (1997). Microbiología General. 7th ed. Barcelona: Omega, pp.193 - 231.

IV. Anexos

Fig1 - Calentando el agar nutritivo Fig2 - Calentando el caldo nutritivo

Fig3 - Siembra y aislamiento de agua estancada

Cuestionario

a) ¿Considera usted necesario tomar alguna precaución en caso de tener que adicionar sangre al medio?
Por supuesto, no solo la exposición o contacto con sangre humana sino también la animal nos puede
poner en peligro ante la exposición de algún microorganismo patógeno que nos cause algún daño o
enfermedad, por esto la utilización de guantes quirúrgicos es básica, también lavarse las manos con
agua y jabón después de la exposición o en caso de una salpicación y si cae a los ojos enjuagar bien con
agua, una solución salina u otra solución estéril.

b) ¿Es posible aislar gérmenes en estado de pureza en medios líquidos a partir de muestras con flora
variada?
Aunque si es posible es muy difícil obtener un cultivo puro. Se debe ser muy minucioso en la
composición de caldos nutritivos por que el mal uso de estos nos lleva a errores en la manipulación de
microorganismos.

c) ¿Qué importancia tiene el Aspecto de una colonia?


Pues nos ayuda a conocer el tipo de cultivo bacteriano, es decir nos permite identificar y diferencias de
otros microorganismos, una de las características morfológicas indispensables para su aislamiento.

d) ¿Qué importancia tiene la capacidad de un germen de desarrollo o no en un medio simple?

e) ¿Qué le indicaría la presencia de un bacilo y un coco en la coloración de una sustancia hecha a partir de
una colonia?
Bueno puede presentarse o deberse a un intermediario llamado cocobacilos que pertenece o dio origen
a la familia Bacillaceae, son Gram+ de gran tamaño y esporulados, con pocas exigencias nutricionales y
móviles. Incluye bacterias aerobias y anaerobias facultativas. Distribuidos ampliamente en la naturaleza
y suelen ser contaminantes de laboratorios. Sus crecimientos se observan en ausencia de Agar-Mac
Conkey.