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PRÁCTICA # 5B

“SIEMBRA Y ESTUDIO DE HONGOS”

OBJETIVOS:

 Manejar las técnicas básicas para el cultivo e identificación de hongos.


 Aplicar las técnicas de tinción adecuadas para el estudio microscópico de hongos.
 Aplicar adecuadamente los términos microbiológicos para hacer la descripción colonial y microscópica
de este tipo de microorganismos.
 Reconocer y describir las características morfológicas y estructurales de hongos.

INTRODUCCIÓN:

Los hongos son células eucarióticas (con núcleo y demás orgánelos membranosos: aparato de Golgi,
mitocondrias, retículo endoplasmático, etc.), carecen de clorofila (son aclorofílicos, no realizan la fotosíntesis, por
lo que son heterótrofos y necesitan un aporte de carbono y nitrógeno fijado orgánicamente), tienen una pared
celular rígida bien definida de quitina; normalmente son inmóviles, no presentan tallos, ni raíces, ni hojas, ni vasos
conductores como presentan las plantas. Pueden ser unicelulares o multicelulares y microscópicas o
macroscópicas. Se reproducen asexual o sexualmente. Al carecer de clorofila, deben nutrirse a expensas de
materia orgánica.

En la industria farmacéutica cada vez tienen más importancia, ya que a partir de los hongos se fabrican
antibióticos, drogas, tonificantes, etc. Son responsables de la desintegración de la materia orgánica, y en
simbiosis con determinados árboles producen un mayor crecimiento de estos. También son causantes de
determinadas enfermedades en las plantas, (con deterioro de cosechas), en animales y humanos. Por
consiguiente, los hongos están íntimamente relacionados con el ser humano, resultando benefactores y
perjudiciales para la vida.

Los hongos se nutren de materia vegetal viva o muerta. Según sea el substrato en el que se encuentren se
dividen en: Micorrízicos, Parásitos y Saprófitos.

o Hongos Micorricicos: Define una relación simbiótica entre las hifas de ciertos hongos y las raíces de las
plantas.
o Hongos Saprófitos: Viven sobre materia orgánica en descomposición, es decir sobre materia muerta, (restos
orgánicos de la de plantas y animales que contiene el suelo, partes muertas de la madera de un árbol o
excrementos de animales.)
o Hongos Parásitos: Se alojan sobre algún ser vivo que los hospede, viviendo a expensas de éste sin ofrecerle
ningún beneficio a cambio.

Los hongos tienen habitats muy diversos , algunos son acuáticos viviendo principalmente en agua dulce , pero
también se conocen unos cuantos marinos ; la mayoría son terrestres y habitan en el suelo , sobre materia
orgánica muerta (saprofitos ) desempeñando una actividad crucial en la mineralización del carbono orgánico ,
otros muchos son parásitos de vegetales , ocasionando la mayoría de las enfermedades significativas
económicamente de plantas cultivadas , algunos son parasito de animales incluyendo el hombre.

Al cuerpo de lo hongos se les denomina talo y este puede ser unicelular , de forma amiboideo u ovoide , ejemplo
, las levaduras , o bien pueden ser pluricelulares con aspecto filamentoso , esponjoso o carnoso , a los filamentos
se les conoce como mohos como ejemplo de los carnosos se tiene a las setas y champiñones.

Algunos hongos presentan dimorfismo, es decir bajo ciertas circunstancias ambientales se desarrollan como
levaduras, en tanto que cuando se cambia la temperatura o la concentración o tipo de algún nutriente, se
desarrollan en forma filamentosa.

En las levaduras el talo unicelular desempeña las funciones vegetativas reproductivas, estas se reproducen
asexualmente por bipartición o por gemación y en la reproducción sexual dos células levaduriformes se unen y
como resultado forman ascosporas en algunas levaduras la gema o brote formado queda adherido a la célula
madre, los brotes sucesivos dan lugar a la formación de un talo de transición ( ni-pluricelular ) denominado
pseudomicelio.

La mayoría de los hongos tienen aspecto filamentoso , a los filamentosos individuales se les denomina fías y al
conjunto de hifas micelio , este por su posición puede ser profundo y aéreo , el primero se encuentra sumergido

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en el sustrato desempeñando las funciones de absorción y sostén , también se le conoce como micelio
vegetativo . el micelio aéreo emerge del sustrato donde se desarrolla , siendo este el que da lugar alas hifas o
cuerpos fructíferos formadoras de esporas por lo que también se le conoce como micelio reproductivo en cada
especie de hongo las hifas vegetativas , crecen , se ramifican y entretejen en forma mas o menos constante , lo
que determina la formación de colonias con características típicas de la especie , por otra parte algunos hongos
rizoides , haustorios , estolones y apresorios , en algunos otros hongos la hifas se agrupan y retuercen formando
fibras gruesas ( funículos y rizomorfos ) o un micelio compacto y apretado ( plectenquima ) las hifas
reproductivas pueden permanecer diferenciadas ( esporiangoforos , conidioforos ) , al igual que las hifas
vegetativas las reproductivas se pueden agrupar en una estructura especializada llamada cuerpo fructífero : en
estos , la agrupación de hifas puede quedar directamente expuesta al medio ( coremio ) o protegida dentro de un
receptáculo o contenedor ( picnidos , esporodoquios ) o formar parte de un cuerpo altamente diferenciado
( ascocarpos y basidiocarpos ).

Cuando se compara a los hongos con las bacterias , en general estos tienen requerimientos nutricionales muy
simples, pero su desarrollo es mas lento , por lo que requieren mayor tiempo de incubación para su cultivo , la
diversidad mas notable la presentan en sus propiedades morfológicas y en sus ciclos sexuales siendo estas
características los criterios que se emplean en la identificación y clasificación de este grupo las características
estructurales incluyen : tipo de talo , morfología microscópica del micelio tanto aéreo como profundo . tipo de
hifas diferenciación y disposición o agrupación de las mismas tipo de hifas reproductivas asexuales , estructura y
modo de formación del cuerpo fructífero sexual , tipo de espora ( forma , tamaño , aspecto externo , agrupación ,
tabicacion , color , movilidad , tipo y numero de flagelos ); compocision de la pared celular , además , evaluar
otras características fisiológicas y reacciones metabólicas especialmente sobre azucares , de este modo , el
estudio de los hongos implica el examen microscópico , la observación del aspecto macroscopico de sus colonias
y la determinación de sus propiedades fisiológicas , especialmente su actividad frente a sus diferentes azucares .

Examen microscopio , por lo regular , los hongos se examinan en preparaciones húmedas , para tomar una
muestra del micelio partir de un cultivo puro o de un tejido enfermo , se utilizan asas rígidas y ligeramente planas ,
se pueden emplear un trozo de cinta adhesiva transparente ligeramente adherida al asa o un buen par de pinzas ,
esta preparación debe hacerse con mucho cuidado para evitar que las esporas y otras estructuras se destruyan ,
lo que se evita tomando un trozo de agar con el desarrollo del hongo , la muestra se coloca en un portaobjetos ,
se calienta ligeramente para difundir el agar , se coloca una gota de azul de lactofenol y se tapa con un
cubreobjetos , examinándose con los objetivos de 10x y 40x , la observación de hongos también se facilita
agregando solución de hidróxido de potasio del 10 al 20 % , esta tiene la propiedad de aclararlos haciéndose mas
transparentes , quizás la preparaciones mas adecuadas resultan cuando ala potasa o a una solución salina se le
agrega una pequeña cantidad de eosina diluida , el examen microscópico de las levaduras se facilita agregando
yodo a la preparación húmeda , con lo que los gránulos de almidón se tiñen de azul.

En el aislamiento y cultivo de la mayoría de los hongos (patógenos o saprofitos) se aprovechan ciertas


características especiales de los hongos, tales como, su tolerancia al ph acido, su preferencia por medios de
cultivo con gran cantidad de azúcar fermentable, su resistencia a la penicilina y estreptomicina permite usar estos
antibióticos, los que al ser agregados a los medios de cultivo, reducen el numero de bacterias contaminantes.

En la preparación de medios de cultivos, los micologos, utilizan frecuencias mezclas de vegetales (agar-papa,
agar-harina de maíz, etc...) y otras substancias naturales

Para estudiar a los hongos se dispone de dos tipos especiales de cultivos, el cultivo de portaobjetos o
microcultivo y el cultivo en cajas de petri

Los microcultivos se pueden observar directamente día a día, lo que permite hacer el seguimiento del desarrollo
del hongo en estudio.

Los cultivos en placa se obtienen sembrando por picadura, el centro de las cajas que contienen diferentes
medios, a simple vista .el aspecto de las colonias es a veces tan característico, que permite identificar enseguida
el tipo de hongo.

INVESTIGACIÓN:

HONGO CARÁCTERÍSTICAS IMPORTANCIA


Rhizopus Hongo filamentoso que presenta Son los causantes del moho negro del
esporangióforos sin ramificar (de hasta 2 mm x pan. Las esporas de estos hongos no son
20 μm), de color pardo oscuro que nacen de un abundantes en el aire libre, aunque su
nudo de rizoides bien desarrollados. Están frecuencia aumenta en lugares donde hay
caracterizados por un micelio aseptado, humedad y se acumula vegetación muerta.
cenocítico, con septos en la base de las La exposición a concentraciones elevadas

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estructuras reproductoras o septos de esporangiosporas de Rhizopus se ha
secundarios. El nombre del grupo proviene de descrito como causa de alveolitis alérgica
la presencia en parte de su ciclo de una extrínseca (pulmón de serrador) en
zigospora característica. Pero en todo el grupo serrerías suecas. Se ha observado una
también es muy importante la reproducción pequeña proporción de pacientes con
asexual, incluso algunos sistemas clasificación reactividad cutánea a Rhizopus stolonifer.
de partes del grupo, están basados en esto. Puede ser un patógeno oportunista en
Colonias de crecimiento rápido (cubren personas inmunosuprimidas y se han
prácticamente toda la superficie de la placa en descrito casos de micosis rinocerebrales
tres días a 25 °C) de aspecto consistente, con en diabéticos.
denso micelio aéreo, algodonosas, al principio
blancas, después gris oscuras (micelio rojizo,
grisáceo o marrón). Se reconoce fácilmente por
sus espolones hialinos o parduzcos, sus
rizoides numerosos y pardos y sus esporangios
negros y lustrosos (brillantes).
Alternaria El género Alternaria contine especies Causa la punta negra. Es necesaria una
cosmopolitas que se encuentran en un amplio identificación precisa de las especies
rango de materiales y productos. Como porque cada nombre entraña un conjunto
saprobias pueden deteriorar alimentos y de características ( preferencias para el
forrajes, produciendo compuestos crecimiento, patogenicidad, producción de
biológicamente activos tal como micotoxinas. metabolitos secundarios) que permiten
Como patógenas reducen el rendimiento de las predecir el comportamiento del hongo. En
cosechas o afectan a los vegetales Czapek- Levadura A. alternata y A.
almacenados infectoria producen colonias de tamaño
Las características del crecimiento constituyen similar (56 - 63 mm de diámetro en 1
uno de los criterios para la clasificación. El semana a 27°C), chatas y ligeramente
micelio aéreo es gris verdoso con reverso algodonosas.
negro parduzco. Muchas cepas de A. infectoria
forman escasos conidios, tienen un micelio
algodonoso y el reverso de la colonia es
obscuro en el centro rodeado de un anillo
anaranjado pálido
Phialophora En el agar de la dextrosa de Sabouraud, las El solo-celled phialoconidia se produce en
colonias son de crecimiento lento, inicialmente (el más joven en la base) la sucesión y el
en forma de cúpula, más adelante llegando a agregado basipetal de cabezas fangosas
ser planas, ante-como y olivaceous a negro en en los ápices del phialide.
color. Microscópico, las culturas demuestran a
tipo típico de Phialophora ontogeny conidial con
los phialides bien formados, frasco-formados o
elípticos que tienen extensamente señalar por
medio de luces distintivo, collarettes
pigmentados. Los conidios son elipsoidales, a
veces llegando a ser truncados en la base,
hyaline, sobre todo 3.0-5.0 x 1.5-3.0 um, pero a
veces el llegar a ser más grandes cuando son
viejos.
Geotrichum Características microscópicas: Se observan Geotrichum es una levadura encontrada
Candidium Arthroconidia y los hyphae verdaderos gruesos. mundial en suelo, agua, aire, y las aguas
Blastoconidia, los conidiophores y los residuales, así como en las plantas, los
pseudohyphae están ausentes. Arthroconidia cereales, y los productos lácteos. También
(µm 6-12x3-6) es unicelular, en cadenas, se encuentra en flora humana normal y se
hyaline, y resultado de la fragmentación de aísla del esputo y de las heces. Las
undifferentiated los hyphae por la fisión a través tensiones de Geotrichum producen
de tabiques dobles. Son cualquier rápidamente el crecimiento, blanco, seco,
rectangulares en forma o redondeados en los polvoriento a las colonias algodonosas,
extremos que se asemejan a la forma del barril. asemejándose al “cristal de tierra.” Cuando
La formación consecutiva del arthroconidia y la está disturbada en la superficie, la colonia
ausencia de las células vacías que hacen se convierte levadura-como o fangoso. La
fragmentos para lanzar el arthroconidia temperatura óptima del crecimiento es
(“células del disjunctor”) son típicas. 25°C. La mayoría filtra no crece en todos
ni no crece débil en 37°C.

Penicillium el órgano especial de reproducción asexuada Penicillium notatum es el hongo del que se

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notatum formado por conidiosporos tiene el aspecto de obtuvo el antibiótico penicilina, descubierto
un pequeño pincel. Se caracteriza este género por primera vez por el médico francés
Ernest Duchesnepor en 1896, olvidado y
porque los esterigmas se implantan
redescubierto por Alexander Fleming en
directamente sobre el conidióforo o sobre 1928. La cepa de Penicillium notatum
órganos alargados en forma de U o V llamados aislada por A. Fleming producía 2 mg de
métulas. penicilina por cada litro de cultivo,
En el género Penicillium el ¨pincelito¨ o sea el posteriormente se encontró que otros
órgano encargado de producir los Penicillium eran mejores productores de
penicilina y se eligió a Penicillium
conidiosporos, está formado por una célula pie
chrysogenum como cepa superproductora
o célula basal poco diferenciada de la cual nace de este antibiótico. Finalmente, la
el conidióforo y sobre él se implantan células selección de sucesivos mutantes
llamadas ramas; de las ramas nacen células superproductores y la mejora en las
llamadas ¨métulas¨en forma de U o V que técnicas de fermentación realizadas por la
sostienen una fila de esterigmas de los cuales industria biotecnológica han hecho que
se forman los conidiosporos. actualmente se obtengan 20 g/L de
También pertenece a la serie ¨asimétrica- penicilina.
velutina¨, se diferencia del P. chrysogenum por Esta especie tiene importancia histórica,
tener conidioporos globosos y de color azul ya que a partir de ella se obtuvo penicilina
verdoso. El reverso de la colonia es de color por primera vez usando el proceso de
amarillento, y exuda abundantes gotitas de cultivo en superficie, en cambio en la
líquido dorado en la superficie del medio. actualidad, se emplean razas de P.
chysogenum para producir penicilina por
cultivo sumergido.

Mucor El Mucor es un hongo filamentoso encontrado Así como ser ubicuo en naturaleza y un
en suelo, plantas, frutas que se decaen y contaminante común del laboratorio,
vehículos. Mucor spp. puede causar infecciones en
El género Mucor contiene varias especies. Los hombre, ranas, anfibios, ganados, y
mas comunes son amphibiorum del Mucor, cerdos. La mayor parte de el Mucor spp.
circinelloides del Mucor, indicus de mucor no poder crecer en 37°C y las tensiones
hiemalis, del Mucor, racemosus del Mucor, y aisladas de infecciones humanas son
ramosissimus del Mucor. generalmente una del poco Mucor
Las colonias del Mucor crecen rápidamente en thermotolerant spp. El indicus del Mucor es
25-30°C y cubren rápidamente la superficie del una especie aromática y puede crecer en
agar. Su aspecto mullido con una altura de las temperaturas tan altas como
vario centímetro se asemeja al caramelo de racemosus del Mucor 40°C. y el
algodón. Del frente, el color es blanco ramosissimus del Mucor, por otra parte,
inicialmente y se convierte en marrón grisáceo crece mal o no crece en todos en 37°C.
a tiempo. Del revés, es blanco.
Ustilago caracteriza por la inducción inicial de clorosis Huitlacoche o cuitlacoche: El Ustilago
maydis y/o pigmentación de antocianinas, y la maydis ataca potencialmente todas las
formación de agallas características en los porciones de la planta, pero ocurre con
granos de elote, espiga, hojas de la planta, más frecuencia en las mazorcas. Las
tallos y raíces de anclaje. U. maydis plantas atacadas desarrollan
generalmente sobrevive como teliospora en malformaciones en la forma de agallas
plantas infectadas, en el suelo o en el abultadas, en un principio de color gris
estiércol si ha sido ingerido. pálido, pero que se oscurecen al aproximar
La forma patogénica del hongo Ustilago maydis la maduración, y que contienen en su
es un filamento dicariótico (hifa), el cual interior esporas reproductivas en un tejido
consiste de una célula cilíndrica alargada esponjoso de color negro. La difusión de
separada por septas, en esta etapa del dichas esporas es a través del viento o por
desarrollo, el hongo es capaz de colonizar el contacto. Este hongo es considerado como
tejido e inducir tumores. La infección del una plaga por muchos agricultores a lo
huésped por U. maydis es una parte obligada largo del mundo, debido a que ataca las
del ciclo de vida y conlleva varios pasos: la mazorcas y plantas de maíz e impide su
formación de tubos de conjugación por las desarrollo y maduración, además de que
células haploides de diferente loci, la fusión de toda planta parasitada es contagiosa para
células para formar el dicarión, y finalmente el el resto del cultivo.
crecimiento (hifal) de filamentos del dicarión. El
filamento dicariótico invade la planta a través
de aberturas naturales, tales como estomas u

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órganos florales o por penetración directa. En la
naturaleza, el proceso de apareamiento ocurre
en la superficie de las hojas. Los tubos de
conjugación
forman hifas dicarióticas ramificadas, las cuales
proliferan inter e intracelularmente
iniciando la formación del tumor en diferentes
partes de la planta
Claviceps Hongo parásito del gineceo de diversas Es un hongo parásito del género
purpurea gramíneas, cuyo ovario transforma en una Claviceps, que consta de más de
estructura de resistencia llamada esclerocio, cincuenta especies pueden afectar a una
que consiste en una masa compacta de hifas gran variedad de cereales y hierbas,
fúngicas (plecténquima), en forma de aunque su anfitrión más común es el
cuernecillo algo curvado de 2-30 mm de centeno
longitud, de color negro purpúreo en el exterior
y blanco en el interior. Los conidios producidos
durante los primeros estadios de desarrollo por
su fase anamórfica (= la que produce esporas
asexuales y sirve para la propagación
vegetativa), llamada Sphacelia, son
dispersados por los insectos, que así propagan
la infección a otros ovarios y a otras plantas.
Una vez maduros (lo que coincide con la
maduración del fruto en el huésped), los
esclerocios caen al suelo en donde
permanecen hasta la primavera siguiente. En
primavera, se desarrollan a partir de ellos los
estromas, formados también por hifas fúngicas
conglutinadas en una masa compacta
(plecténquimas), que constan de un pedúnculo
pardo-rojizo (1-30 mm de longitud) y una
cabezuela globular o algo aplanada (1,5-3 mm),
ocre o algo amarillenta, en cuyo interior se
forman los ascomas. Éstos son peritecios que
producen en su interior ascos delgados y
alargados, en cada uno de los cuales se forman
8 ascosporas (meiosporas) unicelulares y
filiformes (100-120 x 1 µm). Una vez liberadas,
las ascosporas pueden infectar una nueva
planta.
Histoplasma El Histoplasma capsulatum es una levadura La fase saprofítica se encuentra en suelos
capsulatum que en el estado saprofito crece en forma de con alto contenido en heces de ave o de
micelios. Histoplasma capsulatum es el murciélago.
anamorfo de Ajellomyces capsulatus, Familia
Onygenaceae, Orden Onygenales, División
Ascomycota. Presenta tres variedades: H. c.
var. capsulatum, ureasa+; H. c. var.
farciminosum, de crecimiento muy lento y H. c.
var duboisii, que es ureasa-.
La forma infectante es una microconidia oval
lisa o finamente equinulada, de 1-6 μm, que se
forma sobre las hifas o sobre cortos
pedúnculos. Se puede cultivar a 25-30 ºC en
SDA, dando colonias algodonosas,
blanquecinas a morenas, que una vez maduras
forman también macroconidias esféricas de 8-
14 μm pigmentadas, de pared gruesa y aspecto
de “mina submarina”.
En Agar BHI-Cisteína-Sangre a 37 ºC crece
levaduriforme en colonias redondas, mucoides
y color crema, con pequeñas blastosporas
ovales a esféricas de 2-5 m, con gemación de
base estrecha. La forma blastosporada aparece
también en los tejidos infectados, a menudo en

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grandes números en el citoplasma de
histiocitos y macrófagos.
El trasporte aéreo de microconidias y de
fragmentos miceliares del suelo contaminado
da lugar a la deposición alveolar vía la
inhalación. La susceptibilidad a la difusión
dentro del huésped se aumenta con las
defensas celulares deterioradas del anfitrión.
La conversión miceliar a la forma patógena de
la levadura ocurre de forma intracelular. Las
teorías propuestas sugieren que las levaduras
pueden producir las proteínas que inhiben la
actividad de proteasas lisosomales.
Agaricus El champiñón de París o champiñón común El champiñón de París tiene un sabor
bisporus (Agaricus bisporus) es una especie de hongos neutro y delicado, con un aroma
del género Agaricus, cultivado extensamente ligeramente nogado en los ejemplares más
para su uso en gastronomía. Es la más maduros. Es popular en gastronomía pese
frecuentemente empleada de las especies a su escaso rendimiento calórico,
comestibles de hongos, prestándose a conteniendo alrededor de 20 calorías cada
numerosas formas de consumo. 100 gramos. Es relativamente rico en fibra
alimentaria, así como en vitamina B6,
vitamina C, vitamina D, potasio y niacina
Aspergillus El género Aspergillus por poseer conidiosporos Son los principales causantes de las
niger que nacen en cadenas y que se originan en micotoxicosis. Hongo que produce un
células especializadas llamadas esterigmas o moho negro en vegetales -muy común en
fiálides, los conidioforos poseen célula basal o la lechuga, el tomate o la acelga-, una de
célula pie bien diferenciadas; el órgano de las especies más corrientes del género
reproducción asexuada se asemeja a un hisopo Aspergillus. El Aspergillus es un género de
o aspersorio de donde deriva la palabra alrededor de 200 hongos. Se pueden
Aspergillus. En el género Aspergilllus, los dividir en dos formas morfológicas básicas,
esterigmas pueden presentarse en una o en levaduras e hifas. Aspergillus niger se
dos filas, los esterigmas primarios y cultiva para varios productos químicos:
secundarios respectivamente; cuando hay dos ácido cítrico (E330), ácido glucónico
filas, los esterigmas primarios sirven de sostén (E574) enzimas: glucoamilasa,
a los secundarios y a partir de éstos se originan galactosidasa, etc
los conidiosporos; en cambio si hay una sola
fila de esterigmas de ella se originan los
conidiosporos. Cada esterigma no es más que
una célula con un núcleo que se divide en dos;
el núcleo que queda hacia la parte externa se
rodea de protoplasma y membrana
transformándose en conidiosporo. el núcleo
que queda en la parte basal del esterigma
vuelve a dividirse para formar otro esporo y así
sucesivamente mientras el medio sea
favorable; por lo tanto las conidias más viejas y
maduras de la cadena son las más externas o
sea las más alejadas del esterigma que les dio
origen.
Al germinar un conidiosporo de Aspergillus en
un medio favorable produce un micelio
vegetativo del cual nacen los conidióforo que
terminan en una vesícula aspergilar; de ella se
originan una o varias filas de esterigmas y a
partir de éstos se forman los conidiosporos
(esporos asexuados externos) y que al caer de
nuevo al medio reinician el ciclo asexuado.

Amanita Su sabor, al igual que su olor, no es Es un hongo micorrizógeno muy común,


muscaria especialmente intenso. también denominado "matamoscas". El
Presenta un elevado grado de toxicidad en nombre muscaria se refiere a sus
todas sus partes y, si bien no resulta propiedades insecticidas, ya que paraliza
necesariamente mortal, puede provocar graves temporalmente a los insectos,
alteraciones neurológicas y gastrointestinales generalmente moscas, que entran en

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contacto con la seta.
Sacharomyces Es un hongo unicelular, un tipo de levadura. Utilizado industrialmente en la fabricación
cereviceae Una levadura haploide es capaz de cambiar de de pan, cerveza y vino.
sexo. De tal forma que si una única célula de
tipo a o α está en un medio sin la presencia del
sexo contrario. Se divide por gemación y puede
tener una reproducción asexual cuando se
encuentra en su forma haploide, y de manera
sexual cuando a partir de un cigoto se forma un
asca que contiene cuatro ascosporas
haploides.
Candida hongo asexual diploide (una forma de agente causal de infecciones orales y
albicans levadura). vaginales en seres humanos. Infecciones
Hongos están siempre presentes en la piel y en fungicidas (fungemias) han emergido como
el tracto digestivo de la mayoría de las las causas importantes de la morbosidad y
personas, pero se encuentran controlados por de la mortalidad adentro de pacientes
otros microorganismos no patógenos. Cuando inmunodepresivos (trasplante de la
se produce un desequilibrio, el aumento médula e.g., del SIDA, de la quimioterapia
desmedido de la población de hongos produce del cáncer, del órgano o). Además, las
esta u otras micosis. Es el más frecuente. Se infecciones hospital-relacionadas en los
puede transmitir por ropas, objetos y también pacientes considerados no previamente a
por contacto sexual. afecta normalmente las riesgo se han convertido en una causa de
zonas húmedas y cálidas de la piel y las la preocupación importante de la salud.
mucosas, como las axilas, la boca, el glande y Los albicans de la C. están entre la flora
la vagina de la tripa, los muchos organismos que
viven en la boca humana y el aparato
gastrointestinal. Bajo circunstancias
normales, los albicans de la C. viven en el
80% de la población humana sin efectos
dañosos, aunque el crecimiento excesivo
da lugar a candidiasis. El Candidiasis se
observa a menudo adentro de individuos
inmunodepresivos tales como pacientes
VIH-positivos. El Candidiasis también
puede ocurrir en la sangre y en la zona
genital.
Pleurotas Esporada: Blanca cremosa. Esta especie se desarrolla casi siempre en
ostreatus Esporas: De blancas a cremosas, cilíndricas de troncos o tocones de frondosas en fase de
8-11 x 3-4/µm., hialinas y lisas. descomposición, aunque a veces puede
Basidios: Tetraspóricos, claviformes y largos. comportarse como parásita. Donde más
Otras características: Carece de cistidios en las frecuentemente la hemos encontrado ha
láminas. La cutícula presenta fíbulas. sido en hayedos, pero tambien es capaz
de colonizar otras especies
dermatophyton Los dermatofitos son hongos filamentosos que Hongos que afectan a la piel.
afectan a la epidermis y anejos cutáneos. La
principal característica de ellos es que invaden
las capas superficiales queratinizadas de la
piel, pelos y uñas. Algunos atacan la queratina,
allá donde esté en la Naturaleza; otros son
altamente especializados y, por tanto,
restringen su patogenicidad a ciertos
huéspedes y tejidos. Producen manifestaciones
clínicas muy variables, desde síntomas leves,
hasta lesiones supuradas e inflamatorias
intensas, que reciben el nombre genérico de
dermatofitosis o tiñas.

MATERIAL

*cajas de petri, conteniendo: una capa delgada de algodón o un disco de papel filtro, una varilla de vidrio en forma
de v o de triangulo quede quedar ajustada a los bordes de la caja y dos portaobjetos (esterilizar el conjunto en
horno)
1 frasco con agua 1 caja de petri con agar- asa micologica
glicerinada sabouraud

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bisturí estéril pinzas cubreobjetos limpios
1 frasco con alcohol del 96 metanol eritrosina
azul de algodón 3 cajas de koplin bálsamo de camada
xilol , alcohol , acetona microscopio
Diversos hongos mohos

METODO

1.- En zona aséptica, con el bisturí estéril corte el agar-sabouraud en cuadros de aproximadamente 1cm3
2.- Colocar en el centro de uno de los portaobjetos contenidos en la caja de petri un cuadrito de agar- sabouraud
(o un cuadrito en cada uno de los extremos de 1 porta)
3.-Con el asa micologica (o con el asa bacteriológica recta) , inocular cada uno de los lados del cuadrito ( o de los
cuadritos )
4.-Con ayuda de unas pinzas flameadas, coloque sobre esta preparación el segundo portaobjetos estéril
5.-Para mantener la humedad, agregar aproximadamente 10 ml de agua glicerinada, teniendo cuidado de saturar
el algodón de papel, evitando la inundación para que el liquido no toque el cultivo
6.- Incube durante 7 días
7.- En condiciones de asepsia, saque los portaobjetos de la caja
8.- Observar el desarrollo del hongo que se presenta alrededor de los cuadros de agar
9.-Separe cuidadosamente los portaobjetos
10.-Retirar el agar, tratando de no dañar el desarrollo del hongo el que debe quedar adherido el portaobjetos
11.- Colocar los cuadros de agar sobre la caja y llevarlos a esterilizar
12.- Fijar las preparaciones, agregando 5 a 6 gotas de metanol, eliminar inmediatamente el exceso y dejar secar
el aire
13.-Cubra la preparación con un pedazo de papel filtro y saturarlo con eritrosina
14.- Calentar la preparación, durante 10 minutos teniendo cuidado de no dejar secar la preparación, debiendo
adicionar colorante cada ves que sea necesario
15.- Decolore con etanol durante 10 segundos
16.- Colocar la preparación en una caja de koplin que contiene acetona una mezcla de xilol-acetona y dejar actuar
10 minutos
17.- Transferir la preparación a una segunda caja de koplin, la que contiene una mezcla de xilol-acetona y dejar
actuar 10 minutos
18.- Repetir el procedimiento empleando xilol y dejar actuar 10 minutos
19.- Dejar secar a temperatura amiente
20.- Coloque una gota de bálsamo de Canadá en el centro de cada una de las preparaciones y tapar con
cubreobjetos
21.- Dejar secar a temperatura ambiente durante 24 horas y rotular, esta preparación puede mantenerse
indefinidamente
22.- Observar con los objetivos de 10x y 40x, consultar la guía de observación y hacer esquemas y la descripción
correspondiente.

OBTENCION DE COLONIAS Y OBSERVACION MICROSCOPICA

MATERIAL

1.- cajas de petri con agar-sabouraud, medio felpa y agar papa dextrosa
2.- solución glicerinada
3.- mechero
4.- asa micologica
5.- gradilla
6.- 9 tubos de 16 x 150 con 5ml de agua estéril
7.- lápiz graso o marcador
8.- cultivos de hongos
9.- microscopio
10.- portaobjetos y cubreobjetos
11.- lactofenol azul y de algodón

METODO

1.- En condiciones de asepsia tomar una muestra de cultivo de saccharomyces y suspenderla en un tubo que
contiene agua estéril y agitar
2.- Con la suspensión de levaduras obtenida sombrar por estría una de las cajas que contiene sabouraud y una
caja que contiene el medio de felpa y papa dextrosa
3.- Repetir el procedimiento con los mohos

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4.- Repita con los otros hongos filamentosos
5.- Con el asa en ángulo recto, tomar una muestra de la suspensión de esporas e inocular por picadura el centro
de las placas que contiene sabouraud y czapek
6.- Invierta las cajas e incubar a 28c durante 5 a 7 días
7.- Observar las características de las colonias de los diferentes hongos desarrollados, consultar la guía de
observación y describir los resultados
8.- A partir de los cultivos de levaduras, preparar frotes fijos y teñirlos con azul de metileno
9.- En un portaobjetos, coloque una gota de lactofenol azul de algodón
10.- Colocar el ultimo tercio de asa micologica en un pedacito de diurex de 1.5 cm. de largo, enrollándolo
ligeramente
11.- En condiciones de asepsia destapar la caja que contiene el cultivo de una fracción de la colonia
12.- Depositar la muestra en el portaobjetos con el colorante, extender el diurex y colocar encima de un
cubreobjetos
13.- Observe al microscopio con los objetivos 40x y 10 x
14.- Repita el procedimiento de tinción húmeda con los otros hongos y hacer las observaciones correspondientes

Guía de observación:

o En cada hongo observe las características culturales de los diferentes medios de cultivo.
o En las cajas con medio para cultivo compare las características coloniales de hongos levaduriformes y
filamentosos.
o Elabore una tabla de registro de resultados. Esta debe incluir la información que permita la comparación
de las características de todos los hongos en estudio.
o Observar al microscopio cada uno de los hongos en estudio.
o Hacer esquemas.
o Comparar los resultados de las observaciones microscópicas observadas efectuadas en las
preparaciones en fresco y en los microcultivos e indicar en donde se logró una mejor observación.

RESULTADOS:

TABLA 1

HONGO CARACTERÍSTICAS DE LOS HONGOS SIN CULTIVAR (CARACTERÍSTICAS


(de donde proviene) MACROSCÓPICAS)
Xoconostle Negro, de aspecto aterciopelado
Tortilla Blanco, verde, amarillo y rojo; aterciopelado y algodonoso compacto
Queso Verde aterciopelado
Pan Verde aterciopelado
Moho de cultivo a) Blanco con orillas moradas, algodonoso compacto y algodonoso laxo. B) verde con
contaminado centro negro aterciopelado
Moho de cultivo a) gris algodonoso laxo. B) verde-amarillo aterciopelado.
contaminado
Moho de cultivo Café claro amarillento, algodonoso laxo.
contaminado

Observaciones al microscopio:

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OBSERVACIONES AL MICROSCOPIO DE UN HONGO MACROSCÓPICO: CHAMPIÑON (Agaricus bisporus)

TABLA 2: COLONIAS GIGANTES:

MOHO U HONGO CARACTERÍSTICAS MACROSCÓPICAS


1) Moho de cultivo Algodonoso laxo; micelio superficial: blanco con esporangios negros.; micelio
contaminado profundo: homogéneo.
2) Xoconostle Por zonas:
a) algodonoso laxo blanco sectorial
b) aterciopelado verde con centro verde más oscuro por zonas.
c) naranja claro homogéneo aterciopelado; modificación del medio con turbiedad
d) verde aterciopelado con orillas naranjas; modif. Medio con turbiedad.
e) aterciopelado verde casi negro; turbiedad en el medio.
3) Queso Verde azulado aterciopelado, homogéneo. Medio turbio.
4) Pan a) algodonoso laxo por zonas con medio amarillo turbio.
b) aterciopelado verde con centro más claro (algodonoso compacto) homogéneo,
medio amarillo turbio.
5) Moho contaminado Algodonoso laxo (blanco con esporangios negros en las puntas), homogéneo,
medio turbio amarillento.
6) Moho contaminado Lanoso blanco, homogéneo, medio turbio.
7) Moho contaminado Por zonas aterciopelado verde, sectorial, medio amarillo turbio.
8) Moho contaminado Lanoso cremoso, homogéneo, turbio
9) Moho contaminado Lanoso cremoso, sectorial, turbio
10) Moho contaminado Algodonoso compacto, sectorial, blanco y verde; muy turbio.
11) Moho contaminado Aterciopelado, verde, homogéneo, medio amarillo crema muy oscuro, y muy turbio.
12) Moho contaminado a) aterciopelado verde, sectorial con orillas blancas; medio cremoso turbio.
b) verde muy oscuro, algodonosos compacto por zonas, medio negro.

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TABLA 3: PREPARACIONES PERMANENTES DE MICROCULTIVOS:

DESARROLLO DE LOS HONGOS En microcultivos (CARACTERÍSTICAS MACROSCÓPICAS)


Algodonoso laxo con puntas negras; blanco lanoso.
Algodonoso laxo, amarillo al centro, blanco con puntos negros en las puntas.
Algodonoso laxo aterciopelado, verde.
Aterciopelado verde
Lanoso blanco; algodonoso compacto negro.
Aterciopelado verde; algodonoso compacto amarillento.
Amarillento algodonoso laxo.

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DISCUSIÓN DE RESULTADOS:

 Primero se prepararon los medios correspondientes para sembrar los hongos ya fuera en cajas petri o para
microcultivos para después de que estos ya estuvieran listos se procediera a sembrar.
 Se observaron las características de los mohos que habían contaminado tanto a cultivos como a frutas, pan,
queso, etc. Estas se describen en la primera tabla donde se observan las características visuales que
permiten saber que se encuentran contaminados. Así mismo, se realizaron preparaciones en fresco para
observar sus características microscópicas, que no se lograron observar muy claramente debido a que los
mohos que se intentaban observar se juntaban con restos de la comida y se difundían entre si sin permitir
observar claramente las características de los mohos como se muestra en los dibujos.
 Se realizó la siguiente sesión y se cultivaron los hongos para después observar sus características tanto
macroscópicas como microscópicas, que se pueden apreciar en la segunda tabla donde se describen las
características macroscópicas de las colonias formadas de mohos y después se muestran los dibujos de las
observaciones microscópicas; en estas ya se logra apreciar más claramente algunas de las estructuras de
los mohos y se lograron reconocer algunas de las partes de los mohos e incluso a algunas especies.
 En la última tabla se muestra el desarrollo de los hongos que se presenta en los microcultivos una vez listos
y se puede observar como cambian sus características a comparación de las primeras observaciones debido
a que aquí ya se desarrollaron sin la presencia de restos de comida. Se elaboraron preparaciones y se
observó al microscopio donde se lograron apreciar claramente las estructuras de los diversos hongos
cultivados, sus características y formas.

CONCLUSIONES:

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Por medio de esta práctica se lograron apreciar distintos tipos de mohos y hongo, se manejaron las técnicas de
cultivo e identificación de hongos para su posterior estudio y de esta forma reconocer las características
estructurales y morfológicas de los hongos y mohos; así mismo se puede concluir que los microcultivos son la
mejor técnica de siembra si se desea observar las estructuras de los hongos de una forma más clara y precisa ya
que esta técnica nos permitió tener una mayor claridad de las formas que poseen los hongos y mohos. Por lo
tanto es muy importante conocer todas estas técnicas si se desea realizar un estudio adecuado de este tipo de
microorganismos.

REFERENCIAS

o http://www.micologia.net/micologia/hongos.htm
o http://www.smb.org.mx/Memorias_Bioener2005/Orales/P45.pdf
o http://www.unsa.edu.ar/matbib/hongos/07htextoalternaria.pdf
o http://es.wikipedia.org/wiki/Penicillium_notatum
o http://www.vc.ehu.es/plfarm/01.clpur.htm
o http://es.wikipedia.org/wiki/Histoplasma_capsulatum
o http://es.wikipedia.org/wiki/Amanita_muscaria
o http://www.amanitacesarea.com/pleurotus-ostreatus.html

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