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Cómo Procesos
Qué microbio: Producción, biomasa, rendimiento, recuperación de
costos, estabilidad a gran escala, fácil de manipulación
genética.
CONSIDERACIONES:
El aislamiento de los microorganismos desde la naturaleza es el primer pasa del
microbiólogo en la selección para productos naturales tales como metabolitos
secundarios y enzimas.
En el aislamiento implica técnicas de enrriquecimiento, aislamiento
monocelulares por uso del método capilar, modificaciones de procedimientos de
ensayo de selección para adecuar el desarrollo y metabolismo de varios generos
diferentes, personal calificado.
En el aislamiento se de acuerdo a ciertos productos a desear se debe considerar
las características del producto deseado y el desarrollo del proceso; y los datos
ecológicos. Esto ayuda a responder la pregunta ¿Qué aislo y de dónde?.
La elección de los microorganismos puede estar influenciado por la existencia de
capacidades para la producción, biomasa, rendimiento del producto,
recuperación de costos, estabilidad de los microorganismos en fermentadores de
gran escala, y fácil de manipulación genética.
El muestreo sistemático en diferentes nichos dentro de un ecosistema específico
permite que pueda ser aislado una diversidad más grande de tipos microbianos.
El medio de selección, diluyente, condiciones de incubación, y manejo de
muestra, determina determina el número y tipos de microorganismos aislados
desde plantas, suelos y aguas.
Constituyen reglas generales de aplicación ecológica para el aislamiento los
siguientes:
AISLAMIENTO DE ACTINOMICETOS:
Lodos y suelos primero son secados a temperatura de cuarto por 3 a10 días y
pulverizados. Este polvo con un estampador de 16 mm de diámetro es
impregnado y sacudido. El estampador entonces es presionado suavemente
sobre la superficie del agar de aislamiento para actinomicetos en 13 veces
continua ( 10 en el perímetro y dos en el centro) para conseguir un efecto de
dilución. Finalmente las placas se incuban sin invertir entre 4 a 15ºC para
Psicrófilos, entre 22 a 35 ºC para mesófilos, y entre 55ºC a más para termófilos.
Subcultivo y purificacion:
Tiene en cuenta que una vez que las colonias desarrollan, ellos tentativamente
pueden ser identificadas por diferencias en la morfología tales como forma de
colonia, color de esporas aéreas, y pigmentos difusibles y reversos
Las colonias son cogidas con el aza a agar de mantenimiento apropiado o a
plaqueados de réplica para selección.
AISLAMIENTO DE ALGAS:
Se tiene en cuenta los parametros ecologicos que a menudo varían: tales como
temperatura , salinidad, pH proporción superficie/volumen y fuentes de
nitrógeno.
Existen medios sintéticos y naturales según el tipo de muestra y propósito.
Los medios básicos pueden ser ajustados según la necesidad, ejemplo: en el
medio se puede omitir fuente de nitrógeno (NaNO3, KNO3, etc.)para aislar
algas fijadoras de nitrógeno.
Permite que después de diluir la muestra hasta 10 4 cel / ml. esta pueda ser
usada para ser sembrada.
La siembra puede hacerse por placa vertida, extensión en placa, estriamiento,
en caldo.
La incubación se hace en presencia de luz cíclica ( 12 horas) a una temperatura
adecuada.
Subcultivo y purificación:
AISLAMIENTO DE BACTERIAS
Subcultivo y purificación:
Las colonias elegidas son transferidas ya sea a placas master para la selección o
para agares de mantenimiento inclinados que tienen una pequeña cantidad (50
ml/ L) de extractos naturales incorporados.
AISLAMIENTO DE HONGOS:
Puede ser en medios de agar papa dextrosa, agar malta levadura, y medio
selectivo de basidiomiceto.
La muestra debe ser de especimenes frescos puede ser tomada desde el tejido
del esporocarpo o de las basidiosporas.
Cómo Procesos
Qué microbio: Producción, biomasa, rendimiento, recuperación de
costos, estabilidad a gran escala, fácil de manipulación
genética.
SUBCULTIVO Y PURIFICACION:
1. transplante de colonias a agares de mantenimiento y de réplica para selección.
AISLAMIENTO DE ALGAS
SUBCULTIVO Y PURIFICACION:
1. Transferencia
2. Micromanipulación (uso de micromanipulador): para trasladar colonias solas
desde medio líquido.