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Bloque II : Cinética Enzimática y 

Crecimiento Microbiano
TEMA 3: CINÉTICA MICROBIANA
METABOLISMO

• Son todos los procesos químicos que tienen lugar dentro de una célula

La célula incorpora 
nutrientes que se convierten 
en constituyentes celulares.

Va a necesitar también 
energía que la célula obtiene 
a partir de la degradación de 
sustancias con la  Conocer el metabolismo del 
consiguiente producción de  microorganismo de interés 
desechos. es básico para “dirigir” el 
proceso biotecnológico hacia 
el producto deseado.
METABOLISMO

• Clasificación de los microorganismos por fuente de


energía y de carbono.

Clasificación Fuente de energía Fuente de carbono

Autótrofos 

Fotoautótrofos Luz CO2

Quimioautótrofos Redox inorgánica CO2

Heterótrofos 

Quimioheterótrofos Redox orgánica Carbono orgánico

Fotoheterótrofos Luz Carbono orgánico


METABOLISMO

• Tipos de metabolismos microbianos

Ambiente  Aceptor de electrones Proceso 

Aerobio  oxígeno Aerobio 

Nitrato  Desnitrificación 
Anaerobio 
Sulfato Sulfatoreducción

Dióxido de carbono Metanogénesis
METABOLISMO
Las bacterias son microorganismos unicelulares, con movilidad propia gran diversidad en su forma: 
Bacterias  esferas, barras, hélices,...

Protistas multicelulares, no fotosintéticos y heterótrofos. Pueden crecer en condiciones de baja humedad 
Hongos 
y tolerar bajos pH.

Levaduras Hongos que no pueden formar micelio

Microorganismos con propiedades intermedias entre las bacterias y los hongos, importantes en la 
Actinomicetos 
descomposición de la materia orgánica en suelos.

Eucariotas móviles generalmente un orden de magnitud mayores a las bacterias. La mayoría heterótrofos 
Protozoos
aerobios (consumen bacterias y materia orgánica)

Rotíferos Heterótrofos aerobios que actúan como purificadores de efluentes

Eucariotas unicelulares o pluricelulares fotosintéticos autótrofos. Función oxigenadora en procesos de 
Algas 
lagunaje
METABOLISMO
CRECIMIENTO MICROBIANO

• Estequiometría del crecimiento microbiano

El crecimiento microbiano se puede expresar en forma de reacción química:

Sustratos  ‐‐‐‐ biomasa + productos

Por ejemplo para el crecimiento aerobio de S. cerevisiae:
biomasa
C6H12O6 + aO2 + bNH3 ‐‐‐‐ cCHxOyNz + dCO2 + eH2O

o Permite la aplicación de balances de materia y la determinación de los 
coeficientes estequiométricos.
o Para el cálculo de estos valores, se plantea la reacción en función de los 
componentes que actúan como nutrientes limitantes (sustrato cuyo consumo 
controla la velocidad de producción de biomasa).

En este sentido es importante la relación C/N en torno a 20.
• Para relaciones C/N superiores el nitrógeno será el nutriente limitante
• Para relaciones inferiores será el carbóno. Otros importantes: S, P, K, Mg y Na.
CRECIMIENTO MICROBIANO

• Estequiometría del crecimiento microbiano

En el transcurso de una fermentación se produce una gran variedad de 
productos.

o Si el producto principal se produce como consecuencia del 
metabolismo primario se obtiene:

metabolito
aCHmOn + bO2 + cNH3 ‐‐‐‐ dCHxOyNz + eCO2 + fH2O + gCHyOw
CRECIMIENTO MICROBIANO

• Rendimientos
A partir de datos experimentales de la cantidad de sustrato consumido y de la 
biomasa obtenida puede observarse que existe una relación entre ambos.

Se define el rendimiento biomasa‐sustrato como el cociente entre el incremento de 
masa celular obtenida y el consumo de sustrato (normalmente fuente carbono).

X concentración de biomasa
S concentración de sustrato

Puede haber usos del sustrato que no están asociados a la producción de biomasa 
(por ejemplo un quimiheterótrofo, que va a utilizar el sustrato como fuente de 
energía y de carbono).

o Aspectos nutricionales
o Condiciones de operación 
• Temperatura
• Oxigeno
• pH
• Presión Osmótica
CRECIMIENTO MICROBIANO

• Rendimientos

De forma similar a la que se define el rendimiento Biomasa/Sustrato pueden 
definirse rendimiento para otras parejas de parámetros del proceso.

Simbolo Definción
Yx/s g biomasa seca por g de sustrato consumido
Yx/o g de biomasa seca por g oxígeno consumido
Yp/s g o mol de producto por g o mol de sustrato consumido
Yc/s mol de CO2 producido por mol de sustrato consumido
CRECIMIENTO MICROBIANO

• Rendimientos

Los valores de estos rendimientos dependen de la especie microbiana y del 
sustrato consumido.
CRECIMIENTO MICROBIANO

• INTRODUCCIÓN
El proceso de crecimiento celular a partir de unos determinados sustratos 
que conlleva la formación de productos y energía puede llegar a ser muy 
complejo.

En la tabla se recogen los aspectos más importantes a considerar cuando se 
plantea el estudio cinético del crecimiento celular.
CRECIMIENTO MICROBIANO

• INTRODUCCIÓN
El estudio cinético de los procesos fermentativos no es fácil.

La situación se complica por la heterogeneidad en la actividad catalítica de 
las células y por los medios de cultivo.

La heterogeneidad relativa al material celular es evidente aunque se opte 
por usar cepas puras, ya que se dividen continuamente dando lugar a células 
nuevas.

Es habitual que en el cultivo haya células con distinta edad y evolución en el 
ciclo de crecimiento que pueden tener un comportamiento distinto según 
sea su entorno más inmediato.

Normalmente en los sistemas de fermentación se promociona la 
uniformidad de propiedades (concentración de sustrato, pH, temperatura…) 
pero un sistema de reacción perfecto no existe.

Un modelo cinético que contemple todos los aspectos citados sería muy 
difícil de formular, siendo poco práctico por la información requerida.
CRECIMIENTO MICROBIANO

• INTRODUCCIÓN

Por tanto a la hora de formular un modelo se puede considerar:

Modelo estructurado: considera que el sistema está constituido por 
múltiples factores que interviene en la actividad de la célula.

Modelo no estructurado: globalizaría esos factores en uno solo

Modelo segregado: considera las características individuales de las 
células.

Modelo no segregado: describe la células como un promedio.

La tendencia más simplista (modelo no estructurado y no segregado) es 
considerar que el proceso fermentativo depende de un componente 
individual que controla la velocidad, sustrato limitante, y que todas las 
células son iguales en promedio.
CRECIMIENTO MICROBIANO

• MÉTODOS DETERMINACIÓN CONCENTRACION CELULAR

Se puede definir la concentración celular en un cultivo como el número de 
células por unidad de volumen.

Lo más habitual es expresarlo como concentración en masa de células por 
unidad de volumen (Kg/L).

Dos tipos de métodos.

Métodos directos
Método indirectos

Se basan en la Estequiometría y termodinámica del crecimiento celular. 

La concentración celular se mide indirectamente a través de medir evolución 
en la concentración de nutrientes, productos, calor desprendido,…
CRECIMIENTO MICROBIANO
• MÉTODOS DETERMINACIÓN CONCENTRACION CELULAR
Recuento en microscopio. Métodos directos

Se puede determinar el número de células por unidad de 
volumen observando al microscopio una muestra 
representativa del cultivo, en las denominadas cámaras de 
recuento (UFC).

Están soportados sobre portaobjetos con una pequeña 
depresión en la superficie, presentando una retícula graduada 
grabada en el fondo.

Esta retícula permite focalizar con el microscopio parcelas 
concretas para facilitar el recuento.

Ventaja: necesita un mínimo de equipos y los resultados son 
inmediatos.
Inconveniente: puede no ser fácil discriminar entre células 
muertas y viables y pierde precisión para bajas 
concentraciones de células o si tienen capacidad de 
movimiento.
CRECIMIENTO MICROBIANO
• MÉTODOS DETERMINACIÓN CONCENTRACION CELULAR
Medida del peso seco de células. Métodos directos

Una alícuota de cultivo se centrifuga, y el pellet obtenido, una 
vez lavado se seca en estufa y se pesa.

Ventaja: es muy sencillo y relativamente rápido.

Inconveniente: para obtener una medida fiable es necesario 
asegurar que con el lavado del pellet se eliminan todos los 
materiales que no son células.
CRECIMIENTO MICROBIANO
• MÉTODOS DETERMINACIÓN CONCENTRACION CELULAR

Medida de la turbidez. Métodos directos

La concentración de células es proporcional a la cantidad de 
luz que es capaz de absorber.

Se utiliza el espectrofotómetro, normalmente con medidas 
entre 600‐700 nm.

Es un método rápido de manipulación sencilla.

El inconveniente es que solo es aplicable a cultivos 
relativamente concentrados y cuyo medio sea transparente o 
al menos “poco” coloreado.
CRECIMIENTO MICROBIANO
• CINÉTICA DE CULTIVO MICROBIANO

DEFINICIÓN DE VELOCIDAD ESPECÍFICA DE CRECIMIENTO.
Productos extracelulares
yields

sustrato biomasa

El crecimiento microbiano es un ejemplo de reacción autocatalítica. La velocidad de 
crecimiento está relacionada con la concentración de células.

Velocidad específica neta de crecimiento (h‐1)
X: concentración másica de células (g/L)
T: tiempo (h)

La velocidad especifica neta es la diferencia entre la velocidad de crecimiento y la de 
desaparición de biomasa por muerte celular.


CRECIMIENTO MICROBIANO
• CINÉTICA DE CULTIVO DISCONTINUO

Los microorganismos se suelen cultivar en medio líquido en un sistema discontinuo 
(batch).

Sistemas cerrados de volumen fijo en el cual los sustratos se adicionan al inicio del 
cultivo y se consumen durante el proceso, facilitando el crecimiento microbiano.

Se puede representar el crecimiento del microorganismo frente al tiempo de 
incubación, obteniendo una curva  que frecuentemente tiene cuatro fases:
CRECIMIENTO MICROBIANO
• CINÉTICA DE CULTIVO DISCONTINUO (Batch)
CRECIMIENTO MICROBIANO
• CINÉTICA DE CULTIVO DISCONTINUO (Batch)

ETAPAS:

LATENCIA: adaptación del inóculo al medio. Depende de la edad y de los nutrientes.

CRECIMIENTO EXPONENCIAL: rápida multiplicación de células. Crecimiento 
balanceado (composición de células constante).

ESTACIONARIO: velocidad de crecimiento nula. Las células son activas y pueden 
producir metabolitos secundarios.

MUERTE CELULAR: baja el número de células.
CRECIMIENTO MICROBIANO
• CINÉTICA DE CULTIVO DISCONTINUO (Batch)
CRECIMIENTO MICROBIANO
• CINÉTICA DE CULTIVO DISCONTINUO (Batch)
CRECIMIENTO MICROBIANO
• CINÉTICA DE CRECIMIENTO: MODELOS CINÉTICOS
CRECIMIENTO MICROBIANO
• CINÉTICA DE CRECIMIENTO: MODELOS CINÉTICOS
CRECIMIENTO MICROBIANO
• CINÉTICA DE CRECIMIENTO: MODELOS CINÉTICOS
CRECIMIENTO MICROBIANO
• CINÉTICA DE CRECIMIENTO: MODELO DE MONOD
CRECIMIENTO MICROBIANO
• CINÉTICA DE CRECIMIENTO: MODELO DE MONOD

No tiene en cuenta los 
problemas de transferencia
CRECIMIENTO MICROBIANO
• CINÉTICA DE CRECIMIENTO: MODELO DE MONOD

Si se invierten los términos de la ecuación de Monod y se multiplica por X, se 
obtiene una ecuación :

De donde se puede obtener:



CRECIMIENTO MICROBIANO
• CINÉTICA DE CRECIMIENTO: MODELO DE MONOD

La ecuación de Monod es muy simple y no siempre permite obtener una buena 
representación de los datos de crecimiento del microorganismo. A modo de 
ejemplo:
CRECIMIENTO MICROBIANO
• CINÉTICA DE CRECIMIENTO: MODELO DE MONOD

Además en muchos casos debe tenerse en cuenta que el crecimiento puede 
venir afectado por inhibición por sustrato, producto…

A modo ilustrativo se muestran algunas de las ecuaciones utilizadas en estos 
casos:
CRECIMIENTO MICROBIANO
• CINÉTICA DE CRECIMIENTO: MODELO DE MONOD

o La ecuación de Monod generalizada, propuesta por Han y Levenspiel intenta 


cubrir la mayor parte de las situaciones, en particular la inhibición por el 
sustrato y producto.

o Donde Ci es la concentración de inhibidor, Ci* es la concentración crítica del 
inhibidor que para totalmente el proceso y n y m son constantes, relacionadas 
con el poder tóxico del inhibidor. Sustituyendo Ci por S,P o X podremos tener la 
inhibión por sustrato, producto o por las propias células.

Cuando Ci<<Ci* la ecuación se reduce a la de MONOD.
CRECIMIENTO MICROBIANO
• CINÉTICA DE CRECIMIENTO: MODELO DE MONOD

La ecuación de Monod generalizada, también se puede reorganizar y representar 
segun Lineweaver‐Burk obteniendo la ecuación:
CRECIMIENTO MICROBIANO
• CINÉTICA DE CRECIMIENTO: MODELO DE MONOD