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ASPECTOS BSICOS DE LOS FERMENTADORES.

Un fermentador o biorreactor es un recipiente o sistema que mantiene un ambiente


biolgicamente activo en el que se lleva a cabo un proceso qumico que involucra
organismos o sustancias bioqumicamente activas derivadas de dichos organismos. Este
proceso puede ser aerbico o anaerobio. Estos fermentadores son comnmente cilndricos,
variando en tamao desde algunos mililitros hasta metros cbicos y son usualmente
fabricados en acero inoxidable.

El mismo provee todos los servicios que son necesarios para el cultivo, tales como
mezclado, termostatizacin, suministro de oxgeno, entradas para adicin de nutrientes,
control del pH, etc. Existen varios modos de operar del fermentador, esto es en forma
continua, discontinua o semicontinua. (James R. Mihelcic, 2012)

Existen ciertos aspectos a considerar al momento de disear un fermentador.

1. El tanque debe disearse para que funcione aspticamente durante numerosos das,
as como para las operaciones de ms larga duracin.
2. Se debe proporcionar un sistema adecuado de aireacin y agitacin para cubrir las
necesidades metablicas de los microorganismos.
3. El consumo de energa debe ser tan bajo como sea posible.
4. Debe tener un sistema para el control del pH.
5. El fermentador debe tener un sistema para la toma de muestras.
6. Debe existir un sistema para el control de la temperatura.
7. Las prdidas por evaporacin no deben ser excesivas.
8. El diseo del tanque debe ser tal que las operaciones laborales durante el
funcionamiento, recoleccin, limpieza y mantenimiento sean mnimas.
9. El tanque debe ser verstil para la aplicacin de diversas modalidades de procesos.
10. Las superficies internas del tanque deben ser lisas, utilizando, donde sea posible,
soldaduras.
11. La geometra del fermentador debe ser similar a otros tanques ms pequeos o
mayores de la planta o a los de la planta piloto para poder reproducir procesos a
diferentes escalas.
12. Deben emplearse los materiales ms baratos que proporcionen resultados
satisfactorios.
13. Debe existir un servicio adecuado de repuestos para el fermentador.

El mantenimiento de un ambiente asptico y unas condiciones aerbicas son,


probablemente, los dos puntos de mayor relevancia que hay que considerar. Los
fermentadores ms ampliamente utilizados a nivel industrial estn provistos de
mecanismos de agitacin, dispersin y aireacin as como de sistemas para el
control de la temperatura, pH y formacin de espuma.
FERMENTADOR DISCONTINUO

El ms tradicional y ms usado es el fermentador discontinuo. Se emplea usualmente en la


industria farmacutica, alimentaria y biotecnolgica.

Este proceso consiste en aadir una concentracin inicial de la solucin esterilizada de


nutrientes y se inocula con el microorganismo, sin que esta sea alterada por nutrientes
adicionales, manteniendo constante al volumen y a lo largo de toda la fermentacin lo
nico que se aade es oxgeno (en forma de aire), un agente antiespumante y cidos o bases
para controlar el pH, el operador tambin se encargar de controlar las condiciones
ambientales del medio como temperatura, presin, velocidad de agitacin,etc.

El proceso finaliza cuando todo el substrato ha sido consumido por los microorganismos y
transformado en el producto de inters. (Loera, 2003)

Este tipo de fermentador es simple y se utiliza extensamente en laboratorio como a escala


industrial, una de las principales ventajas en comparacin con el fermentador continuo es
que gracias a su corto tiempo de operacin, se puede asegura de forma fcil las condiciones
aspticas durante todo el proceso de reaccin.

Las principales desventajas son: la prdida de rendimiento debido a los periodos de


arranque y parada, la falta de homogeneidad del producto obtenido en cargas consecutivas
y la dificultad de implementacin de esquemas de integracin energtica. Estos tipos de
reactores operan con una baja concentracin celular, sobretodo en el instante inicial donde
los microorganismos permanecen en fase latente. Adems el proceso global es ms lento
que en el fermentador continuo ya que al no haber retirada de producto ni aporte de
nutrientes, en los instantes finales del proceso las condiciones del medio son hostiles, alta
concentracin del producto y baja concentracin de nutrientes. Al darse fenmenos de
inhibicin la fermentacin tarde en completarse.

El reactor se mezclar de forma completa siendo as la concentracin de cada componente


en un determinado tiempo es constante con la posicin dentro del reactor. Al finalizar el
proceso, cuando se ha llegado a una conversin fijada, la concentracin a la salida de cada
componente ser la misma en el interior del reactor. (Garca A. , 2007)

1. Proceso de produccin de cido lctico

El proceso de produccin de cido lctico puede ser obtenido por va qumica o


biotecnolgica. Por tanto en la produccin qumica el proceso ms comn se basa en
dar lugar a la reaccin de cido cianhdrico para producir lactonitrilo, el cual puede ser
hidrolizado a cido lctico. Mientras que en la produccin biotecnolgica se basa en la
fermentacin de sustratos ricos en carbohidratos por bacterias u hongos para obtener
energa y donde el producto de desecho es el cido lctico (Serna & Rodrguez , 2005).

El cido lctico, por lo general, se produce a partir de fermentacin discontinua (batch),


pero existen numerosos procesos en el cual usan una fermentacin continua (fed-batch)
y fermentaciones repetidas batch semicontinuas. Sin embargo, al comparar los modos
de fermentacin discontinuo (batch) y continuo (fed-batch), el primero resulta en
mayores concentraciones de cido lctico y mejores rendimientos en la mayora de
estudios (Surez , 2007). La fermentacin discontinua en los procesos comerciales se
interrumpe al final de la fase logartmica (metabolitos primarios) o antes de que
comience la fase de muerte (metabolitos secundarios) (Garca , Arrzola , & Durango ,
2010).

La produccin biotecnolgica depende de varios factores entre los que cabe recalcar, el
tipo del microorganismo utilizado, la inmovilizacin, pH, temperatura, fuente de
carbono, fuente de nitrgeno, el modo de fermentacin y la formacin de subproductos
(Serna & Rodrguez , 2005).

1.1 Parmetros de relevancia en la produccin de cido lctico

1.1.1 pH.- El pH de la fermentacin puede fijarse al comienzo e ir disminuyendo en


el proceso de produccin del cido, o a su vez puede ser controlado por
titulacin, extraccin, absorcin o electrodilisis del cido lctico. El pH ptimo
para la produccin de cido lctico vara entre 5.0 y 7.0 (Arias , Henao, &
Castrillon , 2008).
1.1.2 Fuente de carbono.- Diferentes fuentes de sustratos han sido usados para la
produccin fermentativa de cido lctico con LAB, entre ellas cabe destacar a la
glucosa que proyecta mayores concentraciones de cido lctico y rendimientos.
Mientras que la xilosa, galactosa, arabinosa, lactosa, fructosa y celulosa
hidrolizada han sido menos efectivos (Del Pozo , Daz, Fernndez , San Jos,
Tellado, & Vila, 2010).
1.1.3 Fuente de Nitrgeno.- Se puede ir incluyendo diferentes fuentes de nutrientes
en forma de extracto de levadura, peptona o jarabe de maz, demostrando tener
un efecto positivo en la produccin de cido lctico al adicionar
concentraciones ms altas (Arias , Henao, & Castrillon , 2008). Las
concentraciones de la fuente de nitrgeno en el medio de cultivo se pueden
encontrar entre 10 y 25 gr/L (Surez , 2007).
1.1.4 Temperatura.- La temperatura puede variar segn el microorganismo, en
algunos casos la temperatura que obtiene mayor productividad es menor que la
temperatura que obtiene mayor rendimiento y concentracin de cido lctico.
Mientras que en otros la misma temperatura obtuvo los mismos resultados en
todas las categoras (Del Pozo , Daz, Fernndez , San Jos, Tellado, & Vila,
2010).
1.1.5 Densidad Celular.- La produccin fermentativa de cido lctico con LAB da
lugar a un incremento en la masa celular, lo cual constituye un subproducto
indeseado. Las ms altas densidades celulares han sido logradas con
recirculacin, sin embargo con fermentaciones sin recirculacin se han
alcanzado densidades celulares menores (Surez , 2007) (Garca , Arrzola , &
Durango , 2010).
1.1.6 Inmovilizacin y recirculacin de clulas.- Las clulas de LAB pueden ser
inmovilizadas en soportes slidos en diferentes modos para aumentar la
densidad celular. Sin embargo, no ha resultado sido exitoso en trminos de
aumento del rendimiento del cido lctico y productividad. Mientras que la
recirculacin de clulas ha dado mayores concentraciones de cido lctico y
rendimientos iguales o mayores (Surez , 2007).
1.1.7 Fermentaciones fed-batch (Discontinuo).- Una fermentacin discontinua es
un "sistema cerrado", el cual consiste en realizar una alimentacin inicial con
todos los nutrientes necesarios para el microorganismo durante el proceso
fermentativo, para que este se reproduzca en forma exponencial hasta el
momento en que se agote el sustrato, posteriormente la fermentacin llega a fase
estacionaria (Surez , 2007).

1.2 Proceso de Fermentacin Fed-Batch (Discontinuo) de cido Lctico

La sntesis de cido lctico se produce siguiendo un proceso en discontinuo que consta


de tres etapas diferenciadas (Del Pozo , Daz, Fernndez , San Jos, Tellado, & Vila,
2010).

Produccin de lactonitrilo
Produccin de cido lctico
Cristalizacin y purificacin de cido lctico

1.2.1 Produccin de lactonitrilo

La primera reaccin se produce a travs del cido cianhdrico con acetaldehdo en un


medio bsico, a modo de catalizador, para producir lactonitrilo (Del Pozo , Daz,
Fernndez , San Jos, Tellado, & Vila, 2010).
El proceso de produccin de lactonitrilo, se realiza mediante la adicin escalonada de
reactivos y se produce mediante los perodos siguientes:

Adicin de acetaldehdo al reactor (Del Pozo , Daz, Fernndez , San Jos, Tellado,
& Vila, 2010).
Reducir de la temperatura a 10C mediante el sistema de refrigeracin del propio
reactor y adicin de hidrxido sdico, que acta como catalizador (Del Pozo , Daz,
Fernndez , San Jos, Tellado, & Vila, 2010).
Adicin dosificada del volumen de cido cianhdrico, para asegurar que el sistema
de refrigeracin es capaz de eliminar el calor generado por la reaccin (Del Pozo ,
Daz, Fernndez , San Jos, Tellado, & Vila, 2010).
Presin atmosfrica durante dos horas e Introduccin de cido sulfrico al 50% para
acidificar el medio (Del Pozo , Daz, Fernndez , San Jos, Tellado, & Vila, 2010).
Eliminacin del cido cianhdrico y del acetaldehdo no reaccionado mediante la
introduccin del calor y aportacin de vaco, hecho que causa la evaporacin de
estos dos compuestos (Del Pozo , Daz, Fernndez , San Jos, Tellado, & Vila,
2010).
La mezcla destilada, utilizando el propio reactor como caldern, se aspira mediante
una bomba de vaco, que fuerza el paso del gas por el condensador. En este punto,
se separa idealmente el acetaldehdo obtenindolo en fase lquida el cual se puede
almacenar en un tanque, que posteriormente puede ser usado como solucin de
limpieza de tanques. El cido cianhdrico a bajas presiones, circula a travs del
condensador y llega hasta el Depurador de gases mediante el impulso/absorcin
producido por la bomba de vaco. En el Depurador de gases el cido gas es
neutralizado con una solucin de hipoclorito sdico en medio bsico,
neutralizndolo y emitiendo dixido de carbono y nitrgeno (Del Pozo , Daz,
Fernndez , San Jos, Tellado, & Vila, 2010).
El lactonitrilo obtenido, mezclado con partes de sulfrico y agua se almacena para
realizar la siguiente etapa del proceso que es la produccin de cido lctico (Del
Pozo , Daz, Fernndez , San Jos, Tellado, & Vila, 2010).

1.2.2 Produccin de cido lctico

La segunda reaccin del proceso se basa en la hidrolisis del lactonitrilo en medio cido,
produciendo cido lctico y sal amnica (Del Pozo , Daz, Fernndez , San Jos,
Tellado, & Vila, 2010).

Esta etapa se realiza siguiendo los pasos:


Introduccin del lactonitrilo (Del Pozo , Daz, Fernndez , San Jos, Tellado, &
Vila, 2010).
Introduccin del cido sulfrico que se encuentra al 98% de pureza (Del Pozo ,
Daz, Fernndez , San Jos, Tellado, & Vila, 2010).
Introduccin del agua procede del descalcificador (Del Pozo , Daz, Fernndez , San
Jos, Tellado, & Vila, 2010).
La reaccin se produce a 100C (Del Pozo , Daz, Fernndez , San Jos, Tellado, &
Vila, 2010).

1.1.1 Purificacin

La etapa de purificacin se realiza siguiendo los siguientes pasos:

Cristalizacin del sulfato de amonio, una vez terminada la reaccin de sntesis del
cido lctico, bajando la temperatura del reactor descalcificador (Del Pozo , Daz,
Fernndez , San Jos, Tellado, & Vila, 2010).
Descarga del reactor una vez producida la cristalizacin descalcificador (Del Pozo ,
Daz, Fernndez , San Jos, Tellado, & Vila, 2010).
Separacin de los cristales de sulfato de amonio de la solucin mediante
centrifugacin. La sal amnica se recupera y se almacena en contenedores altamente
sellados para su posterior comercializacin descalcificador (Del Pozo , Daz,
Fernndez , San Jos, Tellado, & Vila, 2010).
La solucin resultante contiene cido lctico con un grado de pureza del 60%, por lo
que es necesaria una etapa purificacin del compuesto que se detalla a continuacin
(Del Pozo , Daz, Fernndez , San Jos, Tellado, & Vila, 2010).
Introduccin de la mezcla libre de sales a amonio a un reactor de flujo pistn donde
se mezcla con metanol y circula a travs de un lecho de catalizador (Sanz &
Gmehling, 2009). El cido lctico reacciona con el metanol formando lactato de
metilo y agua descalcificador (Del Pozo , Daz, Fernndez , San Jos, Tellado, &
Vila, 2010).

El lactato de metilo tiene un punto de ebullicin menor al cido lctico, permitiendo


as la evaporacin de este descalcificador (Del Pozo , Daz, Fernndez , San Jos,
Tellado, & Vila, 2010).
Evaporacin del lactato de metilo, mediante una columna de destilacin
descalcificador (Del Pozo , Daz, Fernndez , San Jos, Tellado, & Vila, 2010).
Introduccin del destilado y agua, como reactivo, en un nuevo reactor de flujo
pistn con lecho de catalizador (Sanz & Gmehling, 2009). El lactato de metilo
reacciona con el agua y formndose nuevamente cido lctico y metanol
descalcificador (Del Pozo , Daz, Fernndez , San Jos, Tellado, & Vila, 2010).
Finalmente se procede a la destilacin de la mezcla anterior mediante una columna
de destilacin separando el metanol del cido. El cido lctico que se obtiene tiene
una alta pureza descalcificador (Del Pozo , Daz, Fernndez , San Jos, Tellado, &
Vila, 2010).

Bibliografa

Arias , M., Henao, L., & Castrillon , Y. (2008). PRODUCCIN DE CIDO


LCTICO POR FERMENTACIN. Scielo , 147.

Del Pozo , M., Daz, F., Fernndez , S., San Jos, A., Tellado, A., & Vila, A.
(2010). Planta de Produccin de cido Lctico. Cerdanyola del Valls .

Garca , C., Arrzola , G., & Durango , A. (2010). PRODUCCIN DE CIDO


LCTICO POR VA BIOTECNOLGICA. Temas agrarios - Dialnet , 10.

Sanz, M., & Gmehling, J. (2009). Autocatalyzed and Ion-Exchange-Resin-


Catalyzed Esterification Kinetics of Lactic Acid with Methanol. Burgos, Espaa.

Serna , L., & Rodrguez , A. (2005). Produccin Biotecnolgica de cido Lctico .


Ciencia y Tcnologia Alimentaria - Redalyc , 55.

Surez , D. (2007). EVALUACIN Y SIMULACIN DE LA PRODUCCIN DE


CIDO LCTICO CON Lactobacillus casei ATCC 7469. Colombia - Medellin.

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