DESNATURALIZACION DE ENZIMAS

Cuarez Arotoma, Adolfo y Reyes Mestas Josu Manuel, Diaz Paxi Angie, Cuba Ynca
Katherine

Departamento de Bioqumica- laboratorio de bioqumica

Facultad de Ciencias Naturales y Formales Universidad Nacional de San Agustn de
Arequipa. Per. e-mail: lagio@usp.br

RESUMEN

La catalasa en una enzima que la podemos encontrar en muchos organismos vivos, y cataliza
la reaccin de descomposicin del perxido de hidrgeno en agua y oxgeno.

El perxido de hidrgeno es uno de los productos del metabolismo celular en diversos

organismos, pero dada su potencial toxicidad, es transformado enseguida por la enzima
catalasa, al desnaturalizar esta enzima con diferentes medios como metales pesados solvetes,
cambios bruscos de pH y temperatura, la enzima no reaccionara al agregar estos tipos de
agentes desnaturalizantes todas las enzimas son protenas. Por lo tanto, todas las enzimas
sufren desnaturalizacin frente al calor. Esto quiere decir que cuando la temperatura es muy
elevada, la enzima pierde su estructura terciaria, por lo tanto su sitio activo tambin se
desnaturaliza, y ya no puede cumplir su funcin. Este hecho se puede demostrar repitiendo el
experimento anterior, pero habiendo hervido previamente los trocitos de hgado. Cuando
aadimos el agua oxgenada, no se observa el burbujeo.

DENATURALIZATION ENZYME ABSTRACT

Catalase in an enzyme that can be found in many living organisms, and catalyzes the
decomposition reaction of hydrogen peroxide to water and oxygen.

Hydrogen peroxide is one of the products of cell metabolism in various organisms, but due to their
potential toxicity, it is immediately transformed by the enzyme catalase, to denature the enzyme
with different media such as heavy metals solvetes, sudden changes in pH and temperature,
enzyme does not react to add these types of denaturants all enzymes are proteins. Therefore, all
enzymes suffer from heat denaturation. This means that when the temperature is very high, the
enzyme loses its tertiary structure, therefore its active site also denatures, and can no longer fulfill
its function. This fact can be demonstrated by repeating the above experiment, but having
previously boiled liver morsels. When we add the oxygenated water, bubbling is observed.
INTRODUCCION

Las enzimas son molculas de naturaleza proteica que catalizan reacciones qumicas, siempre
que sean termodinmicamente posibles: una enzima hace que una reaccin qumica que es
energticamente posible (ver Energa libre de Gibbs), pero que transcurre a
una velocidad muy baja, sea cinticamente favorable, es decir, transcurra a mayor velocidad
que sin la presencia de la enzima.2 3 En estas reacciones, las enzimas actan sobre
unas molculas denominadas sustratos, las cuales se convierten en molculas diferentes
denominadas productos. Casi todos los procesos en las clulas necesitan enzimas para que
ocurran a unas tasas significativas. A las reacciones mediadas por enzimas se las
denomina reacciones enzimticas.
Debido a que las enzimas son extremadamente selectivas con sus sustratos y su velocidad
crece solo con algunas reacciones, el conjunto (set) de enzimas presentes en
una clula determina el tipo de metabolismo que tiene esa clula. A su vez, esta presencia
depende de la regulacin de la expresin gnica correspondiente a la enzima.
Como todos los catalizadores, las enzimas funcionan disminuyendo la energa de
activacin (G) de una reaccin, de forma que la presencia de la enzima acelera
sustancialmente la tasa de reaccin. Las enzimas no alteran el balance energtico de las
reacciones en que intervienen, ni modifican, por lo tanto, el equilibrio de la reaccin, pero
consiguen acelerar el proceso incluso en escalas de millones de veces. Una reaccin que se
produce bajo el control de una enzima, o de un catalizador en general, alcanza el equilibrio
mucho ms deprisa que la correspondiente reaccin no catalizada.
Al igual que ocurre con otros catalizadores, las enzimas no son consumidas en las reacciones
que catalizan, ni alteran su equilibrio qumico. Sin embargo, las enzimas difieren de otros
catalizadores por ser ms especficas. La gran diversidad de enzimas existentes catalizan
alrededor de 4000 reacciones bioqumicas distintas.4 No todos los catalizadores bioqumicos
son protenas, pues algunas molculas de ARN son capaces de catalizar reacciones (como la
subunidad 16S de los ribosomas en la que reside la actividad peptidil
transferasa).5 6 Tambin cabe nombrar unas molculas sintticas denominadas enzimas
artificiales capaces de catalizar reacciones qumicas como las enzimas clsicas.7
La actividad de las enzimas puede ser afectada por otras molculas. Los inhibidores
enzimticos son molculas que disminuyen o impiden la actividad de las enzimas, mientras
que los activadores son molculas que incrementan dicha actividad. Asimismo, gran cantidad
de enzimas requieren de cofactores para su actividad. Muchas drogas o frmacos son
molculas inhibidoras. Igualmente, la actividad es afectada por la temperatura, el pH,
la concentracin de la propia enzima y del sustrato, y otros factores fsico-qumicos.
Muchas enzimas son usadas comercialmente, por ejemplo, en la sntesis de antibiticos o de
productos domsticos de limpieza. Adems, son ampliamente utilizadas en diversos procesos
industriales, como son la fabricacin de alimentos, destincin de vaqueros o produccin
de biocombustibles
PARTE EXPERIMENTAL

EFECTO DEL pH SOBRE LA ACTIVIDAD

ENZIMTICA

Los enzimas poseen grupos qumicos ionizables

(carboxilos -COOH; amino -NH2; tiol -SH; imidazol,
etc.) en las cadenas laterales de sus aminocidos.
Segn el pH del medio, estos grupos pueden tener
carga elctrica positiva, negativa o neutra. Como la conformacin de las protenas depende, en
parte, de sus cargas elctricas, habr un pH en el cual la conformacin ser la ms adecuada
para la actividad cataltica Este es el llamado pH ptimo.

La mayora de los enzimas son muy sensibles a los

cambios de pH. Desviaciones de pocas dcimas por
encima o por debajo del pH ptimo pueden afectar
drsticamente su actividad. As, la pepsina gstrica
tiene un pH ptimo de 2, la ureasa lo tiene a pH 7 y la
arginasa lo tiene a pH 10 (Figura de la izquierda). Como
ligeros cambios del pH pueden provocar la
desnaturalizacin de la protena, los seres vivos han
desarrollado sistemas ms o menos complejos para
mantener estable el pH intracelular: Losamortiguadores fisiolgicos.
EFECTO DE LA TEMPERATURA SOBRE LA ACTIVIDAD ENZIMTICA

En general, los aumentos de temperatura

aceleran las reacciones qumicas: por cada
10C de incremento, la velocidad de
reaccin se duplica. Las reacciones
catalizadas por enzimas siguen esta ley
general. Sin embargo, al ser protenas, a
partir de cierta temperatura, se empiezan
a desnaturalizar por el calor. La
temperatura a la cual la actividad
cataltica es mxima se
llama temperatura ptima). Por encima de esta temperatura, el aumento de velocidad de la
reaccin debido a la temperatura es contrarrestado por la prdida de actividad cataltica
debida a la desnaturalizacin trmica, y la actividad enzimtica decrece rpidamente hasta
anularse.

EFECTO DE LOS METALES PESADOS LA ACTIVIDAD ENZIMTICA

Los metales pesados pueden daar la enzima desnaturalizndola y esto hace que este no pueda
reaccionar con el perxido de hidrogeno, en nuestro experimento usaremos una salde cobre
(sulfato de cobr) diluido como agente desnaturalizante, si notamos laguna reaccin esta es
muy pequea por que la mayor parte de la exima esta desnaturalizada.
CONCLUSIONES

Las enzimas se pueden desnaturalizar por diferentes medios como pudimos comprobar el pH,
la temperatura, sal de cobre, solvente (etanol) y acido clorhdrico.

Las enzimas alcanzan una temperatura ptima de velocidad de reaccin que est entre los 30
C y 40 C

BIBLIOGRAFA

Bioqumica 5 Edicin (2003) L. Stryer, J. M. Berg y J.L. Tymoczko. Ed. Revert

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