1-9-2017 Dictamen cientfico sobre

la inocuidad de los
productos lcteos
tratados trmicamente
fermentados con
Bacteroides Xylanisolvens
DSM 23964 como nuevo
alimento
ARTCULO TRADUCIDO

NOMBRE:

UNIV. CLAUDIA ANDREA ALFARO ALFARO

MATERIA:

PROCESOS INDUSTRIALES II (IND-3335)

ORURO - BOLIVIA
 OPININ CIENTFICA
Dictamen cientfico sobre la inocuidad de los productos lcteos tratados trmicamente
fermentados con Bacteroides xylanisolvens DSM 23964 como nuevo alimento
Panel de la EFSA sobre productos dietticos, nutricin y alergias (NDA)
Autoridad Europea de Seguridad Alimentaria (EFSA), Parma, Italia

ABSTRACTO
A raz de una solicitud de la Comisin Europea, se pidi al Grupo de expertos de la EFSA que
llevara a cabo la evaluacin adicional de productos lcteos pasteurizados fermentados con
Bacteroides xylanisolvens DSM 23964 como nuevo alimento (NF) en el contexto del Reglamento
(CE) 97. Para el proceso de fermentacin con B. xylanisolvens DSM 23964 se usa leche
pasteurizada o tratada con ultra alta temperatura. Despus de la fermentacin, el producto se
somete a tratamiento trmico durante una hora a 75 C para asegurar la ausencia de B.
xylanisolvens viable DSM 23964. El Grupo Especial considera suficiente la informacin
proporcionada sobre la identidad y la caracterizacin de B. xylanisolvens DSM 23964. El proceso
de produccin abarca las tcnicas estndar utilizadas por la industria lechera, est
suficientemente descrito por el solicitante y no planteado. El Grupo considera que la informacin
proporcionada sobre el proceso de produccin y sobre el contenido de vitaminas B2 y B12 y
furosina en los productos lcteos fermentados sometidos a tratamiento trmico no suscita
preocupacin por los efectos nutricionales desventajosos. El Grupo considera que los datos
microbiolgicos proporcionados no plantean problemas de seguridad. El Panel tambin observa
que se proporcion un estudio piloto y un ECA durante seis semanas con 140 voluntarios que
recibieron dosis diarias de un producto de leche fermentada tratada con calor secado por
pulverizacin que contena tomas de hasta 1 1012 clulas bacterianas inactivadas de B.
xylanisolvens DSM 23964. No se observaron efectos clnicos relacionados con el tratamiento en
los dos estudios. Aunque no se ha proporcionado informacin para concluir sobre el riesgo de
reacciones alrgicas causadas por la NF, el Grupo considera que es improbable que su potencial
alergnico sea diferente al de otros productos lcteos fermentados. El Grupo Especial concluye
que los productos lcteos tratados con calor de la NF fermentados con B. xylanisolvens DSM
23964 son seguros para los usos propuestos y para los niveles de uso propuestos.
Autoridad Europea de Seguridad Alimentaria, 2015
PALABRAS CLAVE
Bacteroides xylanisolvens, fermentacin, lcteos, nuevos alimentos

1
RESUMEN
A raz de una solicitud de la Comisin Europea, se pidi al Grupo de expertos en productos
dietticos, nutricin y alergias de la EFSA que llevara a cabo la evaluacin adicional de los
productos lcteos pasterizados fermentados con Bacteroides xylanisolvens DSM 23964 como
nuevo alimento En el contexto del Reglamento (CE) n 258/97, teniendo en cuenta las
observaciones y objeciones de carcter cientfico planteadas por los Estados miembros.
Los productos NF que pertenecen a esta solicitud son productos lcteos bajos en grasa y
descremada que se han fabricado usando B. xylanisolvens DSM 23964 como un cultivo iniciador,
han sido tratados trmicamente despus de la fermentacin y no contienen bacterias viables de B.
xylanisolvens. Para la especificacin del NF, el solicitante propone la "ausencia de B.
xylanisolvens viables" utilizando un mtodo modificado para la deteccin y enumeracin de
Enterobacteriaceae (DIN EN ISO 21528-2) adems de los anlisis microbiolgicos generales
aplicables a la leche fermentada.
Ni B. xylanisolvens DSM 23964 ni ninguna otra cepa Bacteroides tiene antecedentes de uso en la
produccin y consumo de alimentos.
Bacteroides spp. Son bacterias comensales de la microbiota intestinal humana y se ha descrito que
la especie B. xylanisolvens es una de las bacterias ms abundantes de Bacteroides spp. En el
intestino humano. B. xylanisolvens DSM 23964 ha sido aislado de las heces de un adulto humano
sano. En 2010, se reconoci como una cepa independiente. El anlisis de secuencias de un
fragmento de 480 pb del gen de ARN ribosmico 16S y anlisis de hibridacin ADN-ADN, as
como anlisis de ADN polimrfico amplificado aleatoriamente, se utilizaron para identificar esta
bacteria a nivel de especie y cepa, respectivamente. La identificacin bioqumica y la
caracterizacin de B. xylanisolvens DSM 23964 incluyeron 12 enzimas y 6 metabolitos. El Grupo
considera que la informacin proporcionada sobre la identidad y las caractersticas genotpicas
y fenotpicas de B. xylanisolvens DSM 23964 es suficiente.
Para la fermentacin con B. xylanisolvens DSM 23964 se usa leche pasteurizada o tratada con
ultra alta temperatura (UHT). Despus de la fermentacin, el producto se trata trmicamente
durante una hora a 75 C para asegurar la ausencia de B. xylanisolvens viable DSM 23964 El
Grupo observa que el proceso de produccin abarca las tcnicas normalizadas utilizadas por la
industria lechera y considera que el solicitante lo describe suficientemente y no plantea problemas
de seguridad. De acuerdo con los anlisis proporcionados por el solicitante, el tratamiento trmico
no tiene efectos adversos significativos sobre el contenido de vitaminas B2 y B12 y lisina. Sobre la
base de la informacin proporcionada sobre el proceso de produccin y composicin, el Grupo
considera que el consumo de la NF no es desventajoso en trminos nutricionales.
El solicitante proporcion estudios que evaluaron la presencia de resistencia a antibiticos y
plsmidos, genes potenciales de virulencia, enzimas extracelulares y factores patognicos, y la
adhesin de B. xylanisolvens DSM 23964 a clulas Caco-2. El gen cepA que confiere resistencia
a los antibiticos -lactama se identific en el ADN genmico de esta cepa y no se detectaron
plsmidos. El Grupo observa que la resistencia a los antibiticos -lactama est muy extendida
entre Bacteroides spp. Y que no se ha descrito que el gen cepA est asociado con elementos mviles

2
(por ejemplo, transposn conjugado) que median la transferencia de genes. El Grupo considera
que la localizacin cromosmica de cepA, la ausencia de plsmidos detectables y la inactivacin
por calor hacen improbable que se produzca transferencia horizontal de genes de esta bacteria.
Un ensayo de formacin de absceso con B. xylanisolvens DSM 23964 fue negativo. El Grupo
considera que los datos facilitados no plantean.
Segn la estimacin de la ingesta realizada por el solicitante, el nmero estimado de clulas
inactivadas (tratadas trmicamente) de B. xylanisolvens ingeridas con productos lcteos
fermentados fue similar para los diferentes grupos de edad. En un peso corporal de kilogramo
(peso corporal) por da, se estim que la ingesta era mayor en nios de dos a cinco aos, con
valores medios y 90 percentiles de 2 1010 clulas / kg pc por da y 3.8 1010 clulas / Kg pc
por da, respectivamente. Estas estimaciones se basan en la hiptesis conservadora de que B.
xylanisolvens DSM 23964 se utiliza para todos los productos lcteos fermentados consumidos.
El Panel tambin toma nota de los resultados de un estudio piloto y un ensayo controlado aleatorio
(ECA) en el que 140 voluntarios adultos recibieron dosis diarias de un producto de leche
fermentada tratada trmicamente y secado por pulverizacin que proporciona hasta 1 1012
clulas inactivadas de B. xylanisolvens DSM 23964, que est por encima de la ingestin del
percentil 90 de un escenario de ingesta conservadora. No se observaron efectos adversos
hematolgicos, inmunolgicos, gastrointestinales u otros efectos adversos clnicos relacionados
con el tratamiento en estos dos estudios en seres humanos.
Aunque no se ha proporcionado informacin alguna que permita extraer conclusiones sobre el
riesgo de reacciones alrgicas causadas por la NF, el Grupo considera que es poco probable que
el potencial alergnico de la NF sea diferente al de otros productos lcteos.
El Grupo Especial concluye que la NF, productos lcteos tratados trmicamente fermentados con
B. xylanisolvens DSM 23964, es segura para los usos propuestos y para los niveles de uso
propuestos.

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TABLA DE CONTENIDO

ABSTRACTO ..................................................................................................................................................1
RESUMEN .....................................................................................................................................................2
TABLA DE CONTENIDO .................................................................................................................................4
ANTECEDENTES DE LA COMISIN EUROPEA ................................................................................................5
TRMINOS DE REFERENCIA APLICADOS POR LA COMISIN EUROPEA.........................................................6
EVALUACIN ................................................................................................................................................6
1. Especificacin del nuevo alimento ...................................................................................................6
2. Proceso de produccin aplicado al nuevo alimento ........................................................................8
3. Historia del organismo utilizado como fuente ....................................................................................9
4. Ingesta / extensin prevista del uso del nuevo alimento ...................................................................9
5. Informacin nutricional sobre el nuevo alimento .............................................................................11
6. Informacin microbiolgica sobre el nuevo alimento .......................................................................13
7. Informacin toxicolgica sobre el nuevo alimento ...........................................................................14
7.1. Genotoxicidad .............................................................................................................................14
7.2. Toxicidad subcrnica ...................................................................................................................15
7.3. Prueba de formacin de abscesos ...............................................................................................15
7.4. Datos humanos ............................................................................................................................15
8. Alergenicidad .....................................................................................................................................16
DISCUSIN .................................................................................................................................................16
CONCLUSIONES ..........................................................................................................................................17
DOCUMENTACIN SUMINISTRADA A EFSA ................................................................................................18
REFERENCIAS ..............................................................................................................................................18
Apndice A. Ingesta diaria estimada de slidos no grasos de leche procedentes de productos lcteos
fermentados por la poblacin estadounidense, NHANES 2003-2008 ........................................................21
ABREVIATURAS...........................................................................................................................................23

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ANTECEDENTES DE LA COMISIN EUROPEA

El 18 de diciembre de 2012, la empresa Avitop GmbH present una solicitud de comercializacin

de productos lcteos pasteurizados fermentados con Bacteroides (B.) xylanisolvens de
conformidad con el artculo 4 del Reglamento (CE) n 258/97 sobre nuevos alimentos.
El 21 de junio de 2013, la autoridad competente irlandesa (FSAI) remiti a la Comisin su informe
de evaluacin inicial, que lleg a la conclusin de que los productos lcteos pasteurizados
fermentados con B. xylanisolvens cumplan los criterios de aceptacin de un nuevo alimento
definido en el artculo 3) 1 del Reglamento (CE) n 258/97.
El 4 de septiembre de 2013, la Comisin remiti el informe de evaluacin inicial a los dems
Estados miembros. Varios Estados miembros presentaron observaciones o plantearon objeciones.

Por consiguiente, la Comisin dispone ahora de una decisin con arreglo al artculo 7, apartado
1, del Reglamento (CE) no 258/97.

Las preocupaciones de carcter cientfico planteadas por los Estados miembros pueden resumirse
de la siguiente manera:

Falta una especificacin clara del producto, y el organismo de produccin no se analiza

completamente genticamente. Bacteroides xylanisolvens se presenta como un comensal
en el intestino humano, pero la informacin sobre este organismo en la literatura cientfica
parece ser todava escasa.
No hay publicaciones sobre el origen de la cepa B. xylanisolvens DSM 23964 en contraste
con la cepa DSM 18836 (Chassard y col., 2008). La informacin sobre la cepa DSM 23964
no es tan detallada como para la otra. La cepa B. xylanisolvens DSM 23964 fue descubierta
recientemente y por lo tanto se conoce poca informacin y est estrechamente relacionada
con Bacteroides ovatus que es potencialmente patognico en infecciones intraabdominales.
Sera deseable recibir datos significativos sobre la comparabilidad de los productos en
cuestin con los productos tradicionales.
Si no es probable que la pasteurizacin de los productos lcteos inactive las enzimas
hidrolticas, la fermentacin colnica aumentada puede aumentar el valor energtico de la
dieta consumida, lo que puede no ser beneficioso para ciertos grupos de consumidores.
Falta informacin sobre las actividades remanentes de las enzimas hidrolticas en los
productos alimenticios pasteurizados finales que contienen B. xylanisolvens. Estas
actividades pueden mejorar la hidrlisis de otros componentes alimenticios, en particular
los que contienen fibra diettica en la dieta de los consumidores. La fermentacin del colon
puede ser aumentada a un nivel que puede causar flatulencia y malestar intestinal en
sujetos sensibles.
Debido a su maquillaje enzimtico, se sospecha que las especies de Bacteroides son
capaces de convertir los precarcingenos en carcingenos.
Debern proporcionarse datos de la UE sobre la ingesta prevista de la NF, incluidos los
nios.
No se presenta informacin sobre grupos vulnerables especficos dentro de la poblacin.
No se ha abordado la posible alergenicidad de B. xylanisolvens inactivado por calor.

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TRMINOS DE REFERENCIA APLICADOS POR LA COMISIN EUROPEA
De conformidad con el artculo 29, apartado 1, letra a), del Reglamento (CE) n 178/2002, la
Comisin Europea pide a la Autoridad Europea de Seguridad Alimentaria que emita un dictamen
cientfico mediante la evaluacin adicional de los productos lcteos pasteurizados fermentados
con B. xylanisolvens Como alimento nuevo en el contexto del Reglamento (CE) N 258/97.

EVALUACIN

De conformidad con la Recomendacin 97/618 / CE de la Comisin, los productos lcteos

pasteurizados fermentados con B. xylanisolvens se asignaron a la clase 2.2 (nuevos alimentos
complejos de origen no transgnico que no tienen antecedentes de uso alimentario en la
Comunidad) por la autoridad competente de Irlanda En su informe de evaluacin inicial. La
evaluacin de la inocuidad de este nuevo alimento (NF) se basa en los datos facilitados en la
solicitud original, en la evaluacin inicial realizada por la autoridad competente de Irlanda
(FSAI), las preocupaciones y objeciones de los dems Estados miembros , Y las respuestas del
solicitante. Los datos deben cumplir con la informacin requerida para los nuevos alimentos de la
clase 2.2, es decir, los esquemas estructurados I, II, III, IX, XI, XII y XIII de la Recomendacin
97/618 / CE de la Comisin. En el texto, estos esquemas estructurados estn cubiertos en nueve
secciones. Esta evaluacin se refiere nicamente al riesgo que puede estar asociado con el
consumo y no es una evaluacin de la eficacia de los productos lcteos pasteurizados fermentados
con Bacteroides xylanisolvens con respecto a cualquier beneficio alegado. La Directiva 92/46 /
CEE del Consejo, de 16 de junio de 1992, establece en el anexo C que la leche pasteurizada debe
haberse obtenido mediante un tratamiento que implique una temperatura elevada durante un
perodo breve de tiempo (al menos 71,7 C durante 15 segundos o cualquier combinacin
equivalente) O un proceso de pasteurizacin utilizando diferentes combinaciones de tiempo y
temperatura para obtener un efecto equivalente. En el presente dictamen, el Grupo Especial
utiliza por lo tanto un tratamiento trmico para describir el proceso de tratamiento a 75 C
durante una hora, en lugar de pasteurizacin , Propuesta por el solicitante.
1. Especificacin del nuevo alimento
Los nuevos productos alimenticios pertenecientes a esta aplicacin son productos lcteos bajos en
grasa y descremada que se han fabricado usando B. xylanisolvens DSM 23964 como un cultivo
inicial, han sido tratados trmicamente despus de la fermentacin y no contienen bacterias
viables de B. xylanisolvens.
Tanto la demandante como la FSAI observaron que los productos lcteos fermentados no estn
estandarizados en la composicin de la UE, pero tomaron nota de la norma del Codex para leches
fermentadas, incluidas las leches fermentadas tratadas trmicamente, las leches fermentadas
concentradas y los productos compuestos de leche fermentada para consumo directo o
transformacin ulterior (Norma del Codex 243-2003, FAO, 2011). Esta norma especifica cultivos
iniciadores particulares para productos lcteos fermentados, pero tambin permite el uso de
"otros microorganismos adecuados e inocuos".

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Para la especificacin del NF, el solicitante propone la "ausencia de B. xylanisolvens viables"
utilizando un mtodo modificado para la deteccin y enumeracin de Enterobacteriaceae (DIN
EN ISO 21528-2) adems de los anlisis microbiolgicos generales aplicables a la leche
fermentada Productos. Con respecto al anlisis DIN EN ISO 21528-2 modificado, el solicitante
indic que se utilizaron placas de agar usando agar Wilkins-Chalgren anaerobe CM0619 (Oxoid)
con incubacin durante 48 horas a 37 C, diluciones apropiadas de B. xylanisolvens en
anaerobios Wilkins-Chalgren Caldo CM0643 (Oxoid) se incluyeron como controles positivos, y
que todos los pasos se llevaron a cabo en condiciones anaerobias.
Identidad y caracterizacin de B. xylanisolvens DSM 23964
La cepa de B. xylanisolvens fue depositada por el solicitante en el Centro Alemn de Recursos
para Material Biolgico (DSMZ) y se le ha asignado la referencia DSM 23964 (DSMZ, 2010). La
demandante observa que, antes de asignar un nmero de referencia por la DSMZ, B. xylanisolvens
DSM 23964 se denomin B. xylanisolvens CTC1. Esta designacin ms antigua se utiliz en los
primeros informes de estudio. El solicitante present una copia firmada de la DSMZ que confirm
la aceptacin y viabilidad de B. xylanisolvens CTC1 (DSM 23964) (DSMZ, 2010).
Segn el solicitante, B. xylanisolvens DSM 23964 se ha aislado de las heces de un sujeto humano
adulto sano. Bacteroides spp. Representan aproximadamente una cuarta parte de todos los
microorganismos anaerbicos que habitan el colon humano (Salyers, 1984). Bacteroides
xylanisolvens es una especie estrictamente anaerbica, Gram-negativa. Los organismos son
vstagos no mviles que no forman esporas, que, a diferencia de los miembros de otras Bacteroides
spp., No pueden degradar el almidn (Chassard et al., 2008). Bacteroides xylanisolvens crece
ptimamente a 38 C y un valor de pH de aproximadamente 6,8 bajo estrictamente condiciones
anaerbicas. Puede utilizar una variedad de azcares, incluyendo la lactosa, y metaboliza el xilano
en acetato, propionato y succinato. Bacteroides xylanisolvens DSM23964 se clasific en base a
sus propiedades fenotpicas y bioqumicas y secuenciando el gen del ARN ribosmico 16S (rRNA)
y mediante anlisis de hibridacin ADN-ADN (Ulsemer et al., 2012a). Estos autores construyeron
un rbol filogentico que cubre la cepa de Bacteroides que es el objeto de esta solicitud (DSM
23964), B. xylanisolvens DSM 18836 y otras 20 cepas de Bacteroides caracterizadas de otras
colecciones de cultivo tales como la American Type Culture Collection (ATCC), DSMZ o la
Coleccin Japonesa de Microorganismos (JCM). En este anlisis, una secuencia de 480 pb del
ARNr 16S de B. xylanisolvens DSM 23964 y B. xylanisolvens DSM 18836 mostr una similitud del
100%. La similitud con otras especies relacionadas fue significativamente menor: 97,5%, 94,2%
y 92,2% de similitud con B. ovatus ATCC 8483, B thetaiotaomicron ATCC 29148 y B. finegoldii
DSM 17565, respectivamente. La hibridacin ADN-ADN realizada por el Servicio de
Identificacin DSMZ revel una similitud del 98,65% con B. xylanisolvens DSM 18836 y
similitudes de aproximadamente 25-30% con otras especies Bacteroides investigadas (incluyendo
B. ovatus ATCC8483).
Un anlisis aleatorio de ADN polimrfico amplificado (RAPD) de B. xylanisolvens DSM 23964 y
B. xylanisolvens DSM 18836 revel perfiles diferentes, indicando que B. xylanisolvens DSM 23964
es una cepa distinta de B. xylanisolvens DSM 18836 (Culebras et al., 2012).

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La identificacin bioqumica de B. xylanisolvens DSM 23964 se realiz con kits de prueba
bioqumica rpida ID 32A y API 20A (bioMrieux, Marcy l'Etoile, Francia) que cubren la
actividad de 12 enzimas (N-acetil--glucosaminidasa, cido glutmico descarboxilasa, -
fucosidasa, produccin de indol, arginina arilamidasa, fenilalanina arilamidasa, leucina
arilamidasa, tirosina arilamidasa, glicina arilamidasa, histidina arilamidasa, glutamil glutmico
arilamidasa, serina arilamidasa) y seis metabolitos (D-manitol, salicina, glicerol, D-melezitosa,
D - sorbitol, D - trehalosa). Bacteroides xylanisolvens DSM 23964 y B. xylanisolvens DSM 18836
mostraron un perfil idntico y ambos fueron diferentes de otros Bacteroides spp.
La solicitante proporcion una comparacin de algunos parmetros de composicin de la leche
desnatada fermentada con B. xylanisolvens y de productos lcteos comerciales fermentados con
cultivos de Lactobacillus reuteri, L. rhamnosus o yogur, respectivamente (vase Tabla 2). El Grupo
observa que no se proporcion informacin sobre el contenido de lactosa.
El Grupo considera suficiente la informacin proporcionada sobre la identidad y las
caractersticas genotpicas y fenotpicas de B. xylanisolvens DSM 23964.
2. Proceso de produccin aplicado al nuevo alimento
El solicitante proporcion detalles sobre la produccin del cultivo iniciador DSM 23964 de B.
xylanisolvens. Se pueden aadir azcares tales como glucosa y otros azcares fermentables, tales
como materiales vegetales que contienen xilano, para ayudar al crecimiento bacteriano durante
la fermentacin. Al final del proceso de fermentacin, el cultivo de biomasa se recupera, se lava y
se concentra aproximadamente 50 veces por ultracentrifugacin. Los grnulos de B. xylanisolvens
DSM 23964 obtenidos pueden usarse directamente como un cultivo inicial para la fermentacin
de la leche o pueden congelarse y liofilizarse y almacenarse para uso posterior. La identidad del
cultivo iniciador se confirm mediante anlisis moleculares (reaccin en cadena de la polimerasa
especfica (PCR) y RAPD-PCR). Los procedimientos de control de calidad de rutina aplicados por
la industria lechera se siguen en las diferentes etapas de este proceso.
En la produccin de productos lcteos fermentados con el cultivo inicial de B. xylanisolvens DSM
23964, la leche baja en grasa (<1,8% de grasa) o la leche desnatada (<0,3% de grasa) es
pasteurizada o tratada con ultracaliente inmediatamente antes de iniciar el proceso de
fermentacin. Despus de la inoculacin con el cultivo de arranque, la fermentacin se lleva a
cabo a 38,5C bajo desgasificacin constante con dixido de carbono y sin agitacin durante 14
a 16 horas. El producto lcteo se homogeneiza al final del proceso de fermentacin y luego se
trata trmicamente a 75 C durante una hora para inactivar el cultivo de arranque. Para fines de
control de calidad, se toman muestras antes y despus del segundo tratamiento trmico. El
producto de leche fermentado puede entonces ser empaquetado como un producto de leche
fermentado lquido tradicional o secado por pulverizacin para su uso como leche en polvo
fermentada. Se realizan pruebas de control de calidad, incluidas pruebas microbiolgicas de
acuerdo con la Farmacopea Europea, durante todo el proceso para asegurar la ausencia de
microorganismos contaminantes y para comprobar la ausencia de B. xylanisolvens viable en el
producto final.
La solicitante tambin proporcion un informe de estudio sobre el efecto del tratamiento trmico
despus de la fermentacin de la leche con B. xylanisolvens DSM 23964 a 75 C durante varias
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veces (15, 30, 60, 120, 180 segundos) o 65 C para 30 minutos (Toutounian, 2008). La leche
tratada trmicamente antes de la inoculacin de B. xylanisolvens DSM 23964 se us como control
negativo. La leche tratada con calor y fermentada antes del segundo tratamiento trmico pero
despus de la fermentacin se us como control positivo. No se observ ninguna colonia
microbiana en ninguna de las muestras tratadas trmicamente despus de la fermentacin en
condiciones de cultivo (agar Wilkins-Chalgren, condiciones anaerbicas).
En respuesta a una pregunta planteada por un Estado miembro, la demandante respondi que las
normas (buenas prcticas de fabricacin, buenas prcticas de fabricacin) y las medidas de
control de calidad (anlisis de riesgos y puntos crticos de control, HACCP) que se aplican en la
produccin de la NF son de hasta fecha y que el cumplimiento de la produccin de la NF con las
normas aplicables para la produccin de alimentos estar dentro del mbito de las mismas normas
y dentro de la competencia de las mismas autoridades que la produccin de los alimentos
tradicionales correspondientes.
El Grupo observa que el proceso de produccin abarca las tcnicas normalizadas utilizadas por
la industria lechera y considera que el solicitante lo describe suficientemente y no plantea
problemas de seguridad.
3. Historia del organismo utilizado como fuente
Bacteroides spp. representan aproximadamente una cuarta parte de todos los microorganismos
anaerbicos que habitan el colon humano (Salyers, 1984). Bacteroides spp. son en su mayor parte
comensales no patgenos, aunque se ha informado que ciertas cepas de la especie B. fragilis son
potencialmente patgenas y toxignicas (Brook, 1989; Snchez et al., 2012).
Bacteroides xylanisolvens es un comensal regular de la microbiota intestinal humana (Marschal
et al., 2011; Ponnusamy et al., 2011; Zitomersky et al., 2011). Kulagina et al. (2012) informaron
que B. xylanisolvens, junto con B. vulgatus y B. uniformis, fueron las especies ms frecuentes y
abundantes de Bacteroides en las heces de 36 sujetos sanos de 1 a 33 aos de edad, en los que los
conteos bacterianos de estas especies estaban en la orden de 8,3 - 9,9 lg de unidades formadoras
de colonias (CFU) / g de heces.
Ni B. xylanisolvens DSM 23964 ni ninguna otra cepa Bacteroides tiene antecedentes de uso en la
produccin y consumo de alimentos.
4. Ingesta / extensin prevista del uso del nuevo alimento
El solicitante tiene la intencin de comercializar el NF en forma lquida y semilquida en productos
lcteos fermentados bajos en grasa y desnatada, es decir, leches fermentadas, suero de leche,
yogures y bebidas de yogur, y como polvo secado por pulverizacin para usarse como polvos de
yogur, p. en rellenos y recubrimientos de cereales, barras de cereales, frutas y nueces. Los
productos finales de leche fermentada tratados trmicamente tambin pueden complementarse con
otros ingredientes tales como azcares, sabores, preparaciones de frutas y fibra.
La ingesta de slidos lcteos no grasos se estim utilizando datos de consumo de los Estados
Unidos. El demandante declar que no dispona de datos europeos equivalentes. La demandante
consider un escenario conservador en el que se supona que la NF sustitua a todos los yogures,

9
sueros de mantequilla y leches acidfilas. Basado en los datos de ingesta de alimentos de la
Encuesta Nacional de Salud y Nutricin (NHANES) y en la Base de Datos de Ingresos de Productos
Alimenticios asociados, los consumos diarios de slidos no grasos de yogures, sueros de leche y
leches acidfilas para todos los participantes de la encuesta (> 2 aos de edad) se estimaron como
1,6 g por da aumentando a 6,3 g por da para el percentil 90 (Apndice A). Considerando slo
los consumidores, las cifras correspondientes fueron de 5,5 g por da y 15,3 g por da,
respectivamente.
Se estimaron los valores ms altos de media y 90 percentil para las tomas diarias para los nios
que consuman entre 2 y 5 aos (6,4 g al da y 14,9 g al da, respectivamente) y para los hombres
de 20 aos o ms (5,4 g por da y 17,4 g por da, respectivamente). Por kilogramo de peso corporal
por da, se inform la mayor ingesta diaria de todos los slidos lcteos fermentados no grasos
combinados en nios de 2 a 5 aos (0,38 g / kg de peso corporal al da, 90% de percentil 0,96 g /
kg de peso corporal da). Cuando se consideraron slo los consumidores de yogur, se estim la
ingestin ms alta de percentil medio y 90 por kilogramo de peso corporal por da para nios de
2 a 5 aos (0,57 y 1,1 g / kg de peso corporal por da).
En una segunda etapa, el solicitante estim el nivel de ingesta del cultivo iniciador inactivado por
calor (B. xylanisolvens DSM 23964) a travs del consumo de yogures, que representa la mayor
ingesta potencial de la NF. La ingestin estimada de clulas no viables de B. xylanisolvens en
productos lcteos fermentados expresada como UFC fue similar para los diferentes grupos de
edad. El peso por kilogramo de peso corporal por da fue mayor para los nios de dos a cinco
aos de edad (promedio de 2 1010 UFC / kg de peso corporal al da, percentil 90, 3.8 1010
UFC / kg de peso corporal por da) ser considerado como un escenario conservador (Tabla 1). La
ingesta del percentil 90 de 964 mg de slidos lcteos no grasos de todos los productos lcteos
fermentados, combinados por kilogramo de peso corporal por nios de 2 a 5 aos, correspondera
a una ingesta de 3,4 1010 UFC de B. xylanisolvens no viable por kilogramo de peso corporal
por da para este grupo de poblacin.
Tabla 1: Ingesta estimada de slidos lcteos sin grasa y B. xylanisolvens inactivado por calor
DSM 23964 para la media y el percentil 90 del consumo de yogur por grupo de edad
Grupo de edad, gnero Slidos lcteos sin grasa B. xylanisolvens DSM
23964
gr por da mg/kg por da Celulas por da Clulas/kg por da
Media 90th Media 90th Media 90th Media 90th
25 aos 9.5 16.5 570 1084 3.4 5.9 2.0 3.8
1011 1011 1010 1010
610 9.6 20.5 357 793 3.4 7.3 1.3 2.9
aos 1011 1011 1010 1010
1119 12.7 25.0 (a) 225 475 4.5 8.9 0.8 1.7
11 11 10
aos M (a) 10 10 10 1010
1119 11.0 23.1 190 403 3.9 8.1 0.68 1.4
11 11 10
aos F 10 10 10 1010
> 20 12.1 23.1 147 282 4.3 8.2 0.52 1.0
11 11 10
aos M 10 10 10 1010
10
 > 20 11.7 22.5 171 339 4.2 8.1 0.61 1.2
aos F 1011 1011 1010 1010
Todos 11.4 22.5 225 464 4.1 7.9 0.80 1.6
1011 1011 1010 1010

a) Se calcula sobre la base del supuesto de que 100 ml de producto lcteo fermentado, fermentado
o no graso tratado con calor, contiene 14 g de slidos lcteos sin grasa y 0,5 1012 UFC de B.
xylanisolvens DSM 23964 no viable.
5. Informacin nutricional sobre el nuevo alimento
Los datos de composicin proporcionados por el solicitante incluyen informacin sobre
macronutrientes (Tabla 2).
Tabla 2: Composicin de leche desnatada secada por pulverizacin cultivada con B. xylanisolvens
DSM 23964 y productos lcteos fermentados comerciales

Composicin (g Leche Leche Leche Yogur bajo en

/ 100 g) desnatada con fermentada L. fermentada L. grasa (b)
B. xylanisolvens reuteri (a) rhamnosus (a)
Carbohidratos 48.8 37.3 41.0 35.7
Glucosa 3.6 0.4 < 0.10 n.a.
Fructosa < 0.10 < 0.10 < 0.10 n.a.
Sacarosa 1.5 0.15 0.15 n.a.
Maltosa < 0.10 < 0.10 < 0.10 n.a.
Proteina (c) 30.9 32.5 32.1 42.6
Grasas (d) 0.4 13.9 14.0 0.98
Saturado 0.21 9.78 9.86 n.a.
MUFAs 0.12 3.27 3.28 n.a.
PUFAs 0.014 0.36 0.36 n.a.
Grasas trans 0.012 0.36 0.37 n.a.
Ash 8.17 6.78 6.73 8.8
Total acido (e) 4.84 5.62 2.51 11.9
Nitrogeno de 0.025 0.012 0.013 n.a.
Purina
agua 6.86 3.91 3.67
(a): Producto preparado por Avitop (proceso similar al de la leche desnatada fermentada con B.
xylanisolvens, excepto para el cultivo iniciador aplicado y la adicin de glucosa).
(b): Souci et al., 1994-valores calculados sobre la materia seca.
(c): anlisis de Kjeldahl (N 6,25); Norma Codex 243-2003:> 2,7%.
(d): anlisis de Weibull-Stoldt; Norma Codex 243-2003: <10%.
(e): Titulacin-calculada como cido ctrico; Norma Codex 243-2003:> 0,3%.
n.a., no disponible; MUFA, cido graso monoinsaturado; PUFA, cido graso poliinsaturado.

11
Con el fin de abordar los efectos del proceso de tratamiento trmico largo (75 C durante 60
minutos) sobre las vitaminas para las que los productos lcteos fermentados podran ser una fuente
relevante y sobre el alcance de las reacciones de Maillard que podran afectar el contenido de
lisina, para proporcionar anlisis de contenido, en al menos tres lotes, de vitaminas B2 y B12 y
lisina, as como furosina, como marcador de los productos Amadori formados a partir de
reacciones tempranas de Maillard antes y despus de este tratamiento trmico. Los resultados de
estos anlisis se proporcionan en la Tabla 3. De acuerdo con estos resultados, no hay efecto de
esta etapa de tratamiento trmico sobre el contenido de vitamina B2 y vitamina B12. La medicin
de la "lisina libre" no se considera un parmetro apropiado para tratar la posible prdida de lisina
por reaccin de Maillard, pero, teniendo en cuenta los resultados de la furosina, el Grupo
considera que el tratamiento trmico de una hora no tiene un efecto significativo sobre el contenido
de lisina.
Tabla 3: Efecto del tratamiento trmico (75 C durante 60 minutos) sobre el contenido de ciertos
nutrientes sensibles al calor y furosina en leche UHT baja en grasa antes y despus de la
fermentacin con B. xylanisolvens DSM 23964
UHT control Batch No UHT control Batch No UHT control Batch No
1 2 3 1 2 3 1 2 3
0 min 5 min 60 min
Vita 1.8 1.6 1.7 1.7 1.9 2.1 2.1 1.9 1.7 1.8 1.7 1.7
min
B2
(mg/
l)
Vita 1.4 1.5 1.4 1.3 1.3 1.4 1.3 1.3 1.3 1.3 1.1 1.2
min
B12
(g/l
)
Free 3.5 25.7 25.5 24.8 2.7 23.1 24.2 23.5 3.1 21.6 18.9 18.8
lysin
e
(mg/
l)
Fur 26.6 26.6 26.1 24.8 27.1 25.6 25.9 26.0 29.0 26.9 27.0 27.5
osin
e
(mg/
kg)

En respuesta a la pregunta planteada por la EFSA sobre el contenido de lactosa de la NF, la

solicitante indic que el contenido de lactosa no se ha analizado, pero que podra estimarse por
la diferencia entre las cifras dadas para los carbohidratos totales y los azcares especficamente
determinados (glucosa , fructosa, sacarosa y maltosa). La solicitante estim que el 43,7% de los

12
slidos totales de leche fermentada seran lactosa, lo que estara dentro del rango de productos
lcteos secos bajos en grasa disponibles en el mercado.
Sobre la base de la informacin proporcionada sobre el proceso de produccin y composicin, el
Grupo considera que el consumo de la NF no es desventajoso desde el punto de vista nutricional.
6. Informacin microbiolgica sobre el nuevo alimento
El solicitante y el FSAI observaron que el uso de Bacteroides en la produccin de alimentos no se
notific en la UE antes de mayo de 1997 y que B. xylanisolvens no fue evaluado bajo el esquema
de Seguridad Presunta Presunta (QPS) en el momento en que este nuevo alimento fue evaluado
por Estados miembros. Sin embargo, una evaluacin QPS se activa cuando EFSA recibe una
solicitud para una nueva cepa bacteriana o un producto que intencionalmente contiene nuevas
bacterias. As, en 2014, el Panel de Peligros Biolgicos de la EFSA ha evaluado B. xylanisolvens
bajo el esquema QPS (EFSA BIOHAZ Panel, 2014). La evaluacin de QPS por el Panel de
Peligros Biolgicos es independiente de la evaluacin de los expedientes de solicitudes, que siguen
siendo responsabilidad del Panel de la EFSA al que se asigna la evaluacin del riesgo. Por lo
tanto, la evaluacin QPS no considera datos especficos del expediente, como el proceso de
produccin (por ejemplo, etapas de pasteurizacin o inactivacin) o datos no publicados
contenidos en los expedientes de solicitud. Adems, el Panel de Peligros Biolgicos de la EFSA
seal que, aunque no se han observado problemas de seguridad (ya que slo se ha identificado
un gen de resistencia a -lactamasa (cepA) en el ADN genmico, que es poco probable que sea
transferible) B. xylanisolvens no son suficientes para la inclusin de esta especie en la lista QPS.
Adems de la informacin proporcionada en la seccin 1 sobre la identificacin y caracterizacin
fenotpica y genotpica de B. xylanisolvens DSM 23964, la informacin proporcionada por el
solicitante tambin contena un examen de la presencia de resistencia a antibiticos y plsmidos,
genes potenciales de virulencia, enzimas extracelulares y factores patognicos y determinacin de
la adhesin de B. xylanisolvens DSM 23964 a clulas Caco-2 (Ulsemer et al., 2012a).
De acuerdo con los resultados de las investigaciones de Ulsemer et al. (2012a), B. xylanisolvens
DSM 23964 es resistente a los antibiticos -lactama debido a la presencia de actividad -
lactamasa codificada por el gen cepA. Este gen (que codifica una cefalosporinasa de clase 2e) no
ha sido previamente asociado con elementos mviles (por ejemplo, transposn conjugado) que
facilitan la transferencia gnica y se identific en el ADN genmico de esta cepa. Esta resistencia
a los antibiticos -lactama est muy extendida entre las especies del gnero Bacteroides (Wexler,
2007; Eitel, 2013). Un ensayo que determina los plsmidos con un lmite de deteccin de
aproximadamente 150 kb y usando cepas de Escherichia coli que contenan plsmidos de bajo
nmero de copias como controles positivos fue negativo, lo que sugiere la localizacin
cromosmica del gen de -lactamasa. Bacteroides xylanisolvens DSM 23964 fue sensible a los
antibiticos metronidazol, meropenem y clindamicina.
El Grupo considera que, debido a la localizacin cromosmica del gen cepA, no se espera que se
produzca la transferencia de genes, la ausencia de plsmidos detectables (con un lmite de
deteccin de 150 kb) y la inactivacin por calor.

13
Los anlisis de B. xylanisolvens DSM 23964 para ocho genes potenciales de virulencia,
identificados para B. fragilis, B. caccae y B. ovatus, proporcionaron resultados negativos
(Ulsemer et al., 2012a). Las cepas establecidas y aislados clnicos de estas tres especies se
utilizaron como controles positivos para los factores de virulencia potencial y la produccin de
enzimas extracelulares.
Las actividades exoenzimticas ms relevantes se analizaron mediante PCR (para el gen de la
neuraminidasa) o con ensayos enzimticos. Bacteroides xylanisolvens DSM 23964 no mostr
actividad de DNasa, condroitinasa, hialuronidasa o neuraminidasa y slo actividades muy dbiles
de -hemoltica y colagenasa (Ulsemer et al., 2012a).
Bacteroides xylanisolvens DSM 23964 difiere de tres cepas de B. ovatus, DSM 1896 y dos aislados
clnicos (MN23 y MN7) en varias de las caractersticas investigadas: las cepas de B. ovatus fueron
positivas para el gen cefoxitina (cfxA), que se inform que era horizontal (adems de cepA) y se
utilizaron como controles positivos para la actividad de neuraminidasa, hemolisina y colagenasa.
Bacteroides xylanisolvens DSM 23964 fue negativo en un ensayo de adhesin con clulas Caco-2
en comparacin con L. acidophilus DSM 9126 y B. fragilis DSM 1396, que se usaron como
controles positivos.
El Instituto Federal Alemn de Seguridad y Salud Ocupacional (BAuA) asign a B. xylanisolvens
al grupo de riesgo 1 (RG1), que contiene los microorganismos que en su composicin viable se
puede manejar sin riesgo para la salud de los seres humanos (y otros vertebrados), de acuerdo
con los conocimientos actuales (BAuA, 2011). Por lo tanto, se considera que B. xylanisolvens DSM
23964 pertenece a aquellos agentes biolgicos que es poco probable que causen enfermedades
humanas, tal como se definen en la Directiva 2000/54 / CE sobre la proteccin de los trabajadores
contra los riesgos relacionados con la exposicin a agentes biolgicos en el trabajo (Deutsche
Gesetzliche Unfallversicherung, 2010).
El Grupo considera que los datos facilitados son suficientes y no plantean problemas de seguridad
con respecto a los riesgos microbiolgicos de la NF.
7. Informacin toxicolgica sobre el nuevo alimento
La evaluacin toxicolgica abarc la genotoxicidad y toxicidad subcrnica de B. xylanisolvens
inactivado por calor y no inactivado por calor DSM 23964 examinado por estudios que siguieron
las directrices apropiadas de la OCDE y las BPL. Adems, se realiz un ensayo de formacin de
abscesos en ratones para investigar la patogenicidad potencial del DSM 23964 de B.
xylanisolvens.
7.1. Genotoxicidad
El solicitante present los informes del estudio sobre una prueba in vitro de mutaciones
genticas (prueba de Ames) y sobre una prueba de aberracin cromosmica in vitro utilizando
liofilizado que contena B. xylanisolvens DSM 23964 purificado vivo y inactivado por calor de
conformidad con las Directrices 471 y 473 de la OCDE con resultados negativos (Leuschner
2010a, b, Ulsemer et al., 2012b). Sin embargo, el Grupo considera que no existe ninguna

14
justificacin para las pruebas de genotoxicidad de microorganismos vivos o inactivados por
calor, como B. xylanisolvens DSM 23964.
7.2. Toxicidad subcrnica
La toxicidad de B. xylanisolvens DSM 23964 se examin en un estudio de toxicidad oral de 90
das siguiendo la directriz 408 de la OCDE (Leuschner, 2010c, Ulsemer et al., 2012b). Se
estudiaron cinco grupos de dosis (10 machos y 10 hembras animales por grupo): cada ratn
recibi dosis diarias de gavage de 1 109 viables, 1 1010 viables, 1 1011 viables o 1
1011 clulas inactivadas por calor de B. xylanisolvens DSM 23964 o el vehculo (control). No se
observ mortalidad durante el curso del estudio. No se encontraron diferencias en el
comportamiento, apariencia clnica externa, heces y observaciones funcionales entre los
animales tratados con B. xylanisolvens DSM 23964 viable o inactivado. Tampoco se observaron
diferencias en el peso corporal ni en el consumo de agua o alimentos. No se encontraron efectos
relacionados con el tratamiento en los anlisis hematolgicos y clnicos bioqumicos,
oftalmolgicos, macroscpicos post mortem, peso de los rganos o histologa. En cuanto a las
pruebas de genotoxicidad, el Grupo considera que no existe ninguna justificacin para las
pruebas de toxicidad de microorganismos vivos o inactivados por calor, como B. xylanisolvens
DSM 23964.
7.3. Prueba de formacin de abscesos
Bacteroides xylanisolvens DSM 23964 tambin se estudi en un modelo de formacin de absceso
intraperitoneal en ratones (Toutounian, 2010, indito, Ulsemer et al., 2012a). Se utilizaron 26
ratones macho Webster para este experimento. Los ratones se dividieron en siete grupos, de los
cuales tres grupos recibieron una inyeccin intraperitoneal de 200 l de B. xylanisolvens viable
DSM 23964 en tres dosis diferentes que variaban de 5 106 a 1 109 CFU por ratn. Tres
grupos recibieron las mismas cantidades de B. fragilis RMA 6791 como control positivo y un
grupo recibi sobrenadante esterilizado de heces de rata suspendidas en solucin salina
tamponada con fosfato (control negativo). B. fragilis RMA 6791 indujo la formacin de abscesos
en los tres grupos de dosis, confirmado por PCR especfica de especie, mientras que ningn
ratn que reciba B. xylanisolvens DSM 23964 desarroll un absceso.
7.4. Datos humanos
La inocuidad del producto de leche fermentada de B. xylanisolvens se abord en un estudio
piloto y un ensayo controlado aleatorio (ECA).
En un estudio piloto no controlado de tres semanas, dos grupos de 10 voluntarios masculinos y 10
voluntarios femeninos consumieron porciones diarias de 100 ml de leche baja en grasa tratada
trmicamente cultivada con B. xylanisolvens (5 1011 u 8 1011 inactivada clulas / porcin) y
aromatizadas con pulpa de cereza. El producto fue bien tolerado y no se observaron efectos
significativos en los parmetros (anlisis hematolgicos, inmunoglobulinas, citoquinas,
fagocitosis, clulas NK) monitorizados (Ulsemer et al., 2012c).
En un ECA subsiguiente durante seis semanas, 140 voluntarios adultos se dividieron en cuatro
grupos, que recibieron una vez al da (1) leche en polvo como placebo o leche tratada con calor
secada por aspersin fermentada por B. xylanisolvens DSM 23964; (2) 1 x 1010 CFU B.

15
xylanisolvens DSM 23964; (3) 2,5 \ times 1011 CFU B. xylanisolvens DSM 23964; o (4) 1 1012
CFU B. xylanisolvens DSM 23964 que haban sido inactivados. No se presentaron problemas
gastrointestinales. No se observaron efectos en los parmetros clnicos, hematolgicos e
inmunolgicos analizados (Ulsemer et al., 2012c). En el artculo no se proporcion informacin
sobre el origen de la leche utilizada para la fermentacin, pero la solicitante inform a la EFSA
que se trataba de leche de vaca.
Adems de los estudios en humanos, el solicitante tambin realiz una extensa bsqueda
bibliogrfica e investigaciones del Centro para el Control y Prevencin de Enfermedades y las
bases de datos de la Food and Drug Administration, incluyendo Medwatch, que no revelaron
ningn informe de intoxicacin alimentaria o enfermedad humana asociada con B. xylanisolvens.
8. Alergenicidad
El solicitante no proporcion datos sobre la alergenicidad del nuevo alimento.
El Grupo observa que los efectos del tratamiento trmico de la leche sobre su alergenicidad han
sido considerados por la EFSA (EFSA NDA Panel, 2014).
Aunque no se ha proporcionado informacin para permitir sacar conclusiones sobre el riesgo de
reacciones alrgicas causadas por la NF, el Grupo considera que es improbable que el potencial
alergnico de la NF sea diferente al de otros productos lcteos fermentados.
DISCUSIN
Los productos NF pertenecientes a esta solicitud son productos lcteos tratados con calor, bajos
en grasa y desnatada, incluyendo productos secados por pulverizacin, fermentados con B.
xylanisolvens DSM 23964. El solicitante observ que la NF debe cumplir con la Norma Codex
para leche fermentada y fermentada productos lcteos y con criterios microbiolgicos en la
reglamentacin de la UE para los productos lcteos fermentados. Adems, el solicitante propuso
la ausencia de B. xylanisolvens viable DSM 23964 para servir como la especificacin de esta NF.
Bacteroides xylanisolvens es una bacteria comensal de la microbiota intestinal humana y se ha
descrito como una de las especies de Bacteroides ms abundantes en el intestino humano.
Bacteroides xylanisolvens DSM 23964 se ha aislado de las heces de un adulto humano sano. Se
caracteriz a nivel de cepa y se diferenci de la cepa de tipo B. xylanisolvens DSM 18836. El
anlisis de secuencia de un fragmento de 480 pb del gen rRNA 16S y la hibridacin ADN-ADN,
as como el anlisis RAPD, se utilizaron para identificar esta bacteria a nivel de especie y de cepa,
respectivamente. La identificacin bioqumica y caracterizacin de B. xylanisolvens DSM 23964
incluy la deteccin de 12 actividades enzimticas y 6 metabolitos. El Grupo Especial considera
suficiente la informacin proporcionada sobre la identidad de B. xylanisolvens DSM 23964.
Para el proceso de fermentacin con B. xylanisolvens DSM 23964 se usa leche pasteurizada o
UHT descremada o baja en grasa. Despus de la fermentacin, el producto es tratado
trmicamente durante una hora a 75 C para asegurar la ausencia de B. xylanisolvens viable
DSM 23964. El Panel observa que el proceso de produccin abarca las tcnicas normalizadas
utilizadas por la industria lechera y considera que el solicitante lo describe suficientemente y no
plantea problemas de seguridad. El Grupo Especial tambin considera que la informacin

16
proporcionada sobre el proceso de produccin y su efecto sobre el contenido de vitaminas B2 y
B12 y furosina de los productos lcteos fermentados tratados trmicamente no suscitan
preocupacin por los efectos nutricionales desventajosos.
El solicitante proporcion estudios evaluando las resistencias a los antibiticos y la presencia de
genes y plsmidos relacionados, genes potenciales de virulencia, enzimas extracelulares y factores
patognicos y la adhesin de B. xylanisolvens DSM 23964 a clulas Caco-2. El gen cepA que
confiere resistencia a los antibiticos -lactama se identific en el ADN genmico de esta cepa.
El Grupo observa que esta resistencia a los antibiticos -lactama est muy extendida entre las
especies del gnero Bacteroides y que el gen cepA no ha sido previamente asociado con elementos
mviles (por ejemplo, el transposn conjugado) que facilitan la transferencia gnica. El Grupo
considera que la localizacin cromosmica de cepA, la ausencia de plsmidos detectables (lmite
de deteccin de 150 kb) y la inactivacin por calor hacen improbable que se produzca
transferencia horizontal de genes a partir del cultivo iniciador. Bacteroides xylanisolvens DSM
23964 no mostr caractersticas patgenas potenciales y actividades enzimticas adversas tales
como actividad de DNasa, condroitinasa, hialuronidasa o neuraminidasa y slo actividad -
hemoltica y colagenasa muy dbil. Un ensayo de formacin de abscesos con clulas viables de B.
xylanisolvens DSM 23964 fue negativo. El Grupo considera que la informacin microbiolgica no
plantea problemas de seguridad.
Segn la estimacin de la ingesta realizada por el solicitante, la ingestin de clulas inactivadas
(no viables) de B. xylanisolvens, expresadas como CFU, ingeridas con productos lcteos
fermentados fue similar para los diferentes grupos de edad. En un kilogramo de peso corporal por
da, se estim que la ingesta era mayor en nios de dos a cinco aos, con un valor medio y un
percentil 90 de 2 1010 UFC / kg de peso corporal por da y 3.8 1010 UFC / kg de peso corporal
por da, respectivamente. Estas estimaciones se basan en la hiptesis conservadora de que B.
xylanisolvens DSM 23964 se utiliza para todos los productos lcteos fermentados consumidos.
El Panel tambin observa un estudio piloto y un ECA en el que 140 voluntarios adultos recibieron
dosis diarias de un producto de leche fermentada tratada trmicamente secado por pulverizacin
que proporciona hasta 1 1012 UFC inactivada de B. xylanisolvens DSM 23964, que est por
encima del percentil 90 ingesta de un escenario conservativo de ingesta. No se observaron efectos
adversos hematolgicos, inmunolgicos, gastrointestinales u otros efectos clnicos adversos
relacionados con el tratamiento en estos dos estudios en seres humanos.
Aunque no se ha proporcionado informacin para permitir sacar conclusiones sobre el riesgo de
reacciones alrgicas causadas por la NF, el Grupo considera que es improbable que el potencial
alergnico de la NF sea diferente al de otros productos lcteos fermentados.
CONCLUSIONES
El Grupo Especial concluye que los nuevos productos alimenticios tratados con calor fermentado
con Bacteroides xylanisolvens DSM 23964 son seguros para los usos propuestos y para los niveles
de uso propuestos.

17
DOCUMENTACIN SUMINISTRADA A EFSA
Dossier sobre productos lcteos pasteurizados fermentados con Bacteroides
xylanisolvens DSM 23964 presentado por Bioresco en nombre de Avitop GmbH, recibido
el 10 de abril de 2014. Se proporcion informacin adicional el 10 de octubre y el 28 de
noviembre de 2014.
Carta de la Comisin Europea a la Autoridad Europea de Seguridad Alimentaria con
solicitud de dictamen sobre la seguridad de los productos lcteos pasteurizados
fermentados con Bacteroides xylanisolvens como nuevo alimento. rbitro. Ares (2014)
1132458-10 / 04/2014.
Informe de evaluacin inicial realizado por la autoridad competente de Irlanda
Evaluacin de la seguridad de los productos lcteos pasteurizados fermentados con
Bacteroides xylanisolvens DSM 23964.
Observaciones y objeciones de los Estados miembros.
Respuesta del solicitante al informe de evaluacin inicial y comentarios y objeciones de
los Estados miembros.
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18
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20
Apndice A. Ingesta diaria estimada de slidos no grasos de leche procedentes de productos lcteos fermentados por la poblacin
estadounidense, NHANES 2003-2008
Categora y subpoblacin Tamao de muestra no Nmero sin ponderar de % Usuarios Ingesta estimada de
de leche fermentada ponderado usuarios slidos lcteos sin grasa
(g per day) (mg/kg bw per day)
Per capita Per user Per capita Per user
Mean 90th Mean 90th Mean 90th Mean 90th
Yogurt
US 2+ 22 602 2 727 13 1.5 5.7 11.4 22.5 30 87 225 464
aos
Nios 2 2 149 467 25 2.4 9.6 9.5 16.5 144 529 570 1084
5 aos
Nios 6 2 202 311 15 1.4 4.7 9.6 20.5 52 159 357 793
10 aos
Hombres 2 667 155 8 1.0 0 12.7 25.0 (a) 17 0 225 475 (a)
1119
aos
Mujeres1 2 719 257 10 1.1 0.7 11.0 23.1 19 13 190 403
119
aos
Hombres 6 113 521 9 1.1 0 12.1 23.1 14 0 147 282
20+ aos
Mujeres2 6 752 1 016 16 1.9 8.1 11.7 22.5 27 116 171 339
0+ aos
Leche de Buttermilk y acidophilus
US 2+ 22 602 4 144 20 0.1 0.3 0.7 1.0 1.9 3.9 9.8 15.4
aos
Nios 2 2 149 308 17 0.1 0.1 0.3 0.7 2.9 6.2 17.0 35.7
5 aos
Nios 6 2 202 425 20 0.1 0.2 0.3 0.7 2.2 6.6 11.4 27.8
10 aos

21
Hombres 2 667 427 16 0.1 0.2 0.5 1.1 1.2 3.1 7.2 17.0
1119
aos
Mujeres 2 719 552 22 0.1 0.3 0.4 0.8 1.4 4.5 6.2 14.6
1119
aos
Hombres 6 113 1 007 17 0.2 0.3 1.1 1.4 2.3 3.0 13.7 14.8
20+ aos
Mujeres 6 752 1 425 23 0.1 0.3 0.5 0.9 1.6 4.1 7.1 12.7
20+ aos
Todos los productos lcteos fermentados combinados
US 2+ 22 602 6 359 30 1.6 6.3 5.4 15.3 31 94 104 288
aos
Nios 2 2 149 699 38 2.4 9.7 6.4 14.9 146 531 383 964
5 aos
Nios 6 2 202 675 32 1.5 4.7 4.6 13.8 54 161 171 500
10 aos
Hombres 2 667 549 22 1.1 0.7 4.8 15.0 19 11 84 247
1119
aos
Mujeres 2 719 758 30 1.2 1.4 4.0 13.8 21 26 69 233
1119
aos
Hombres 6 113 1 454 25 1.3 1.4 5.4 17.4 16 16 65 207
20+ aos
Mujeres 6 752 2 224 35 2.0 8.7 5.7 15.5 29 119 82 243
20+ aos

22
ABREVIATURAS
ATCC: Coleccin de cultura tipo americana

Bw: peso corporal

DSMZ Centro Alemn de Recursos para el Material Biolgico

FAO Organizacin de las Naciones Unidas para la Agricultura y la Alimentacin

GMP Buenas Prcticas de Fabricacin GMP

HACCP Anlisis de riesgos HACCP y punto crtico de control

JCM Japan Collection of Microorganisms

kb kilobase
NF novel food
PCR polymerase chain reaction
RAPD random amplified polymorphic DNA

23