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CARACTERIZACION, PREPARACION DEL MEDIO DE CULTIVO,

DETERMINACIN DE LA CINETICA DE CRECIMIENTO Y AISLAMIENTO DE UN


HONGO CON APLICACIONES A LA INGENIERA QUIMICA

CHARACTERIZATION, PREPARATION OF THE CULTIVATION MEDIUM,


DETERMINATION OF THE KINETICS OF GROWTH AND ISOLATION OF A
HONGO WITH APPLICATIONS TO THE CHEMICAL ENGINEERING

Cristian Arley Morillo Pantoja y Jess Ernesto Garca Senz

Facultad de Ingeniera Qumica. Universidad de Antioquia de Medelln. Colombia

Laboratorio de biologa para ingenieros

RESUMEN

Este trabajo fue desarrollado con el objetivo de identificar la aplicacin en la ingeniera qumica
del aislamiento del hongo, la caracterizacin (macro y micro), preparacin del medio de cultivo
y determinacin cintica (crecimiento) y capacidad metablica del hongo. Con este trabajo se
pretendi encaminar al estudio de las diversas especies de microorganismos (en nuestro caso
hongos) presentes en diversos hbitats y que son de bastante importancia en la industria qumica
debido a los innumerables usos que tienen. Durante la realizacin del trabajo se determin los
cambios evidenciados en crecimiento y porcentaje de biomasa del hongo. Al final logramos
concluir lo importante que resulta ser este (hongo) hoy en da debido a las diversas aplicaciones
que tiene.

Palabras clave: aislamiento, medio de cultivo, capacidad metablica, cintica, aplicaciones,


hongo, ingeniera qumica, biomasa, crecimiento.

ABSTRACT

his work was developed with the aim of identifying the application in the chemical engineering
of the fungus isolation, the characterization (macro and micro), preparation of the culture medium
and kinetic determination (growth) and metabolic capacity of the fungus. This work was intended
to study the various species of microorganisms (in our case fungi) present in various habitats and
that are quite important in the chemical industry due to the many uses they have. During the
realization of the work the changes evidenced in growth and percentage of biomass of the fungus
were determined. In the end we managed to conclude how important it is to be this (mushroom)
today due to the various applications it has.

Keywords: isolation, culture medium, metabolic capacity, kinetics, applications, fungus, chemical
engineering, biomass, growth.
Determinacin de la cintica de crecimiento del hongo

1. INTRODUCCION

Con este trabajo se pretende determinar queramos determinar, durante esta


cualidades especficas como prctica se aisl el hongo en un medio de
aplicaciones industriales del hongo, cultivo conocido como KIMURA, lo
tales como tratamientos de desarrollamos en estado slido con
biodescontaminacin a partir de los presencia de agar todo con la finalidad
hongos basidiomicetos ligninolticos de lograr el crecimiento radial del hongo
que producen un conjunto de enzimas y determinar su capacidad metablica a
extracelulares para metabolizar la medida que transcurre el tiempo de
lignina que les confieren, asimismo, la haberse sembrado.
capacidad de degradar un amplio
abanico de contaminantes, lo relevante 2. MATERIALES Y METODOS
de esto es el inters con que son
acogidos en el entorno, por ello la 2.1 Materiales
importancia de su uso, aunque durante el La muestra del hongo fue extrada del parque
laboratorio no se experiment con este
norte de la corteza de los rboles, se tomaron
tipo de hongo, cabe mencionar la varias muestras de diversos lugares.
utilidad sobre todo por la actualidad en
la que se encuentran varias ciudades con La glucosa, extracto de levadura, peptona
el tema de contaminacin, en Colombia universal, fosfato di cido de potasio, agar y
el ms claro ejemplo es Medelln cuyo sulfato de di amonio los encontramos como
ndice de contaminacin esta 2,5% .Ante reactivos disponibles en el laboratorio, de
estos hechos surgen estas alternativas igual manera se necesit de una balanza
biologas que tienen un trasfondo digital para medir las cantidades del medio a
importante por la utilizacin de especies preparar, utilizamos un agitador magntico,
que tenan varios usos pero tres cajas Petri, pH metro y plancha de
desconocamos. calentamiento; todos estos tambin los
encontramos en el laboratorio.
Otro de los factores sobre los cuales se
llev a cabo el desarrollo de este trabajo Se prepar 75 ml de medio, debido a que en
consiste en el caracterizacin macro y la gua estaban las cantidades
micro de los microorganismos, todo con correspondientes a un litro, se utiliz un
la finalidad de aplicar el conocimiento a factor de conversin para calcular la
procedimientos reales, esto se llev a cantidad deseada.
cabo con la tincin de Gram y
observacin directa al microscopio, pues 2.2 Siembra y condiciones de
debido a las subclases que presenta cada crecimiento
especie es necesario clasificarlas de
Se llev a una plancha de calentamiento con
acuerdo a su estructura morfolgica, de
el objetivo de que las partculas slidas se
ah la utilizacin progresiva de cada
disolvieran completamente en el medio
especie junto con sus propiedades que la
lquido(agua destilada), el control del pH
caracterizan.
para este caso no era necesario, luego se
Sin embargo los cultivos de hongos de dej enfriar el medio, se tap el beaker con
igual forma que las otras especies se papel kraft y se llev al autoclave a una
caracterizan por crecer en un medio temperatura de 121 grados Celsius y 12 psi
especifico que le permite desarrollar y de presin, a esa temperatura y presin
evidenciar las caractersticas que estamos garantizando la muerte completa de
Cristian Arley Morillo Pantoja y Jesus Ernesto Garcia Saenz

microrganismos que podan contaminar el de la zona decolorada y se defini el


medio sobre el cual se realiz la siembra. promedio como el valor del dimetro. Este
procedimiento se sigui hasta la completa
En la siembra no utilizamos los mtodos que colonizacin o decoloracin de la caja.
se aparecan en la prctica, en nuestro caso
la siembra se efectu tomando un fragmento El incremento de masa celular se determin
de muestra y sembrndolo en la parte central a partir de la concentracin del radio medido
de la caja Petri con el medio KIMURA; por densidad ptica. A partir de estos datos
fueron tres las siembras realizadas, estas se de construyeron las curvas de crecimiento
llevaron a un cuarto refrigerante. celular en funcin de tiempo, que se
presentan en la Figura 1.
3. ANALISIS DE RESULTADOS
Se observa un mayor crecimiento del hongo
Muestra Muestra Muestra en la caja Petri de la muestra 1, y en segundo
1 2 3
lugar la muestra 3. Igualmente se not un
Da 1 1 1,1 1,03
crecimiento vertical en los hongos de dichas
Da 2 1,16 1,2 1,36
cajas.
Da 3 1,26 1,6 1,83
Da 4 3,4 2,66 2,9 El hongo crece hasta el noveno da
Da 5 4,43 3,2 3,6 aproximadamente, y a partir de este, se
Da 6 5,96 4,26 4,8 puede decir, que entra en la fase estacionaria,
Da 7 6,53 5 5,2 ya que no se pudo apreciar un incremento en
Da 8 7,3 5,63 5,56
la concentracin de cidos nucleicos, lo que
indicara que el hongo dej de crecer.

Tabla : Promedio das Se puede decir, en general, que a mayor


crecimiento del hongo, existe una mayor
generacin de metabolito, respecto de su
Cinetica de Crecimiento blanco correspondiente.
8
Se utiliz un colorante industrial: Orange
6
II, el cual es ampliamente utilizado en la
4
industria del jean y teido de algodn. Hacen
2 parte del grupo de colorantes cidos,
0 reactivos y dispersos, y por su estructura
Dia 1 Dia 2Dia 3Dia 4 Dia 5Dia 6Dia 7Dia 8 qumica son azoicos y ftalocianina.
Muestra 1 Muestra 2
En las siguientes imagines se puede observar
Muestra 3
el crecimiento del primero da al da 8. De
igual forma no hubo degradacin del hongo
Figura 1. Cintica de crecimiento con respecto a su color, no absorbi color
como se observa en la figura 6.
Crecimiento y decoloracin en los cultivos
en cajas de Petri: Los cultivos en caja se
tomaron peridicamente y se midi
empleando una regla graduada, el dimetro
de los halos formados de micelio y/o
decoloracin. En caso de que los halos
formados no fueran totalmente circulares, se
tomaron tres medidas del micelio formado o

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Determinacin de la cintica de crecimiento del hongo

Figura 2. Hongo con colorante, muestra da Figura 5. Crecimiento hongo da 8 muestra 1


1.

Figura 6. Crecimiento hongo colorante da 8


(Muestra 3)

CONCLUSIONES Y
RECOMENDACIONES

1. En el medio de color amarillo de se


Figura 3. Crecimiento vertical del hongo en
evidencia que hubo una contaminacin,
colorante.
durante el sembrado, debido a esto hubo
esparcimiento en varias regiones de la
caja Petri.
2. En las cajas de Petri con medio
traslucido, nada ms en una se dio un
excelente crecimiento radial, mientras
que en la otra se observ que tambin
hubo contaminacin a la hora de
sembrar.
3. Se observ que el hongo sobre el cual se
desarroll el trabajo tiene una contextura
algodonosa en las tres cajas Petri.
4. Se recomienda ser ms cuidadoso en el
momento de la siembra, pues de ello
Figura 4. Hongo muestra 2 dependen los resultados cuantitativos
como cualitativos que se buscan.
5. Se recomienda estudiar los factores que
pueden influir de manera directa como
indirecta en el crecimiento paulatino del
hongo.
6. El mayor crecimiento radial lo presento
la caja Petri que no estaba contaminada,
de lo cual podemos concluir que de
cierto modo el crecimiento est ligado al
cuidado que se tenga de no contaminar
el medio de cultivo.
7. se logr observar que por da el
crecimiento del hongo variaba en cerca
de un milmetro.
Cristian Arley Morillo Pantoja y Jesus Ernesto Garcia Saenz

parmetros de crecimiento de cepas del


gnero Pleurotus. Characterization of
REFERENCIAS growth parameters of Pleurotus strains.
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