MANUAL DE PRÁCTICAS

CURSO DE PROPAGACION DE PLANTAS PARA LA FORMACION DE INGENIEROS AGRÓNOMOS

Elaboró EDWIN ANTONIO GUTIÉRREZ RODRIGUEZ. Ingeniero Agrónomo – Universidad de los Llanos T.P 25.526 M.A.D.R Docente Propagación de Plantas

Universidad de los Llanos Facultad de ciencias agropecuarias y recursos naturales Escuela de Ingeniería en Ciencias Agrícolas Programa de Ingeniería Agronómica 2010

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Propagación asexual.  Bibliografía 3 4 5 9 11 13 16 19  Practica 1. Cultivo in vitro de meristemos. pruebas de viabilidad y métodos para 2 .  Practica 3. Preparación de sustratos.  Practica 5.  Practica 4. Métodos de trazado. Selección de semillas.TABLA DE CONTENIDO  Introducción  Criterios para la presentación de informes romper dormancia.  Practica 2.

generan diversidad de situaciones que requieren la actuación crítica. que en su interacción. El proceso de formación del profesional. sociales. 3 . búsqueda e investigación en los estudiantes. económicos. y de esta manera promover la capacidad de indagación. este manual recopila una serie de prácticas que incitaran a los estudiantes a la construcción de conocimiento desde la observación y análisis de resultados en cada una de los ejercicios. En este sentido. técnicos. analítica y propositiva para el planteamiento de alternativas de solución.Introducción El contexto de actuación del Ingeniero Agrónomo. de modo tal que el componente teórico está acompañado de una serie de prácticas y visitas de observación que buscan la aplicación y confrontación de las temáticas. está caracterizado por la pluralidad de componentes políticos. está caracterizado por la contextualización de acuerdo al curso desarrollado.

etc.)  Bibliografía Nota. una consulta exhaustiva de bibliografía que permita desarrollar un adecuado análisis. es necesario en cada caso. Debe presentarse evidencia física de los procedimientos realizados 4 . para ello. es:  Titulo. La estructura mínima del informe que deben presentar en un plazo máximo de 8 días a partir de la culminación de la práctica. debe evidenciar el desarrollo de las actividades planteadas y ser consecuente con los resultados. El informe debe responder al análisis crítico y comparativo de los resultados obtenidos en cada una de las prácticas.Criterios para la presentación de informes El informe presentado. cuadros.  Análisis de resultados (Tablas.  Objetivos  Revisión de literatura  Metodología desarrollada  Resultados obtenidos.

Germinación a. SELECCIÓN DE SEMILLAS. garantizar las características genotípicas deseables en cuanto a altura de la planta. a. resistencia a enfermedades. Porcentaje de germinación b.LABORATORIO NO 1. PRUEBAS DE VIABILIDAD Y MÉTODOS PARA ROMPER DORMANCIA. 5 . comprenda y aplique. El desarrollo de esta práctica. entre otros. pretende que el estudiante analice. Vigor germinativo e. INTRODUCCIÓN La selección de la semilla sexual es un proceso que se realiza bajo criterios técnicos y que hace parte de las primeras medidas dentro de un programa de manejo integrado de cultivos. Factores que afectan la dormancia b. Dormancia. entre otros. calidad de frutos. y en segundo lugar dar las condiciones adecuadas para la germinación y normal crecimiento de las plantas. Prueba de viabilidad c. Latencia 2. Métodos para romper dormancia. Poder germinativo d. que busca en primer lugar. colores. los siguientes conceptos básicos: 1.

guanábana o de frutos como guayaba. después del lavado se dejan secar sobre papel absorbente estéril bajo sombra.Materiales  100 semillas de tres especies vegetales diferentes (100 de c/u)  Lija de agua fina  Acido sulfúrico (250 ml para todo el curso). (Prueba de viabilidad) 1. sumérjala en 100 ml de Agua destilada.2 De las semillas que se precipitaron. deseche inmediatamente el acido y lave tres veces las semillas con agua destilada. posteriormente la semilla se limpia en un tamiz por lavados sucesivos. Determine el porcentaje de semillas que no flotaron. el primero sumérjalo por 15 segundos es Acido sulfúrico 90%. la semilla está lista para usar.5% Procedimiento En primer lugar. Agítela en forma circular por 1 minuto y deje decantar. cítricos. los residuos de pulpa pueden eliminarse con una leve fricción manual sobre ellas. una vez que secan. 1.  Cinco frascos o cajas de petri.1 Seleccione una especie. En el proceso de propagación sexual. séquelas y haga cuatro grupos de 20 cada uno. 1. (Escarificación química) 6 . Luego de lo anterior. previamente cada grupo debe seleccionar los frutos que van a servir como fuente de semillas a emplear. las semillas se retiran de los frutos maduros (en el caso de semilla con arilo carnoso como maracuyá.  Solución de tetrazolio 0. se recomienda una previa fermentación en el contenido del fruto para mejor desprendimiento).

3 Tome el segundo grupo y frote contra la lija (u otro medio áspero según el tipo de semilla) varias veces hasta que observe que la testa ha cambiado su apariencia natural. haga por separado cámaras húmedas en cajas de petri.4 Caliente 50 ml de agua destilada a 40°. Porcentaje de perdida 2. (Escarificación física) 1. dejándolas protegidas de la luz durante el procedimiento. 1. b. 1. Evalué y compare en cada una de ellas: a.6 Tome los cinco grupos de semillas.5 Prepare 100 ml de una solución (Una para todo el curso) de Acido giberelico (200 ppm).1. el primer grupo córtelo en dos secciones. Días a emergencia de radícula c. y aplique con atomizador sobre las semillas. Porcentaje de germinación. Tome otra Prueba de tetrazolio en Semilla de Maíz especie. previamente embebidas desde el día anterior (24 h) y divídalas en dos grupos.5 % 7 las semillas de . Tipo de germinación d. evitando destruir el tejido embrionario y sumérjalo en una solución de tetrazolio 0. posteriormente sumerja el otro grupo durante un minuto y deseche el agua.

Por qué algunas semillas demoran más en el proceso de imbibición y germinación? 8 . mientras que los muertos no). Tome semillas de otra especie. y evaluar todos los parámetros referentes a la práctica. Ocho días después de la práctica debe presentarse informe técnico escrito a mano de los resultados obtenidos. La observación de los resultados se hará durante ocho días. Con el segundo grupo. y a partir de ella determine el porcentaje de germinación.bajo completa oscuridad hasta que observe que el tejido se tiñe color violeta (Durante ese tiempo los tejidos vivos se tiñen. Realice un análisis comparativo a partir de los resultados obtenidos. el informe debe presentar resultados y análisis de los mismos con base en comparación de revisión de literatura realizada sobre la temática. durante los cuales se debe tomar tiempos de germinación. sumérjala en hipoclorito de sodio 2% por cinco minutos. posteriormente póngalas en cámara húmeda. lave los excedentes y observe bajo el estereoscopio. Cuestionario Desde el punto de vista bioquímico. Tome la otra mitad. Compare las dos condiciones de germinación. deseche el hipoclorito y lávelas. realice una cámara húmeda. siembre la mitad en bandejas o bolsas (según las características de la semilla) utilizando suelo normal sin desinfectar. explique por qué se da la reacción de tinción en la prueba química de viabilidad. 3.

natural. de síntesis o residual. mineral u orgánico. bajo método sexual o asexual es importante para el adecuado desarrollo de los objetivos a alcanzar. por tanto. bien si se trata de propagación sexual a raíz desnuda o en envases. que. 100% suelo 9 . o si se van a emplear explantes para propagación asexual. desempeñando. en forma pura o en mezcla. Cítricos. PREPARACIÓN DE SUSTRATOS Introducción Un sustrato es todo material sólido distinto del suelo. La preparación de sustratos adecuados para la multiplicación de plantas. otros) Metodología 1. colocado en un contenedor. Papaya.PRACTICA 2. Así mismo. El sustrato puede intervenir o no en el complejo proceso de la nutrición mineral de la planta.: Arroz. una adecuada preparación de sustratos hace parte de un método legal para el manejo de enfermedades e insectos plaga Materiales      60 vasos pequeños Suelo Arena Gallinaza 30 semillas de una misma especie (para siembra en los vasos: Ej. permite el anclaje del sistema radicular de la planta. un papel de soporte para la planta. Maracuyá. Prepare los siguientes sustratos: a.

Registre y analice cada uno de los resultados. riegue adecuadamente. y que características químicas. 4. c. Suelo – Arena 2:1 c. siembre una semilla. Suelo – Gallinaza 2:1 e. llene 10 vasos pequeños perforados en la base para evitar encharcamiento. Geminación Frecuencia de riego Vigor Sanidad Otros 5. teniendo cuidado de separar los tratamientos.b. y determine la cantidad de agua almacenada en cada sustrato (Agua aprovechable por la planta). posteriormente seque en la mufla (Laboratorio de suelos). y deje drenar por 24 horas. b. d. Suelo – Arena 1:1 d. e. 3. En cinco recipientes de cada sustrato. Suelo –Arena – Gallinaza 2:1:1 f. físicas y organolépticas debe presentar un buen compost para la preparación de sustratos? 10 . Con cada uno de los sustratos. Preguntas  Que fitopatologías están asociadas al sustrato como fuente de transmisión?. 100% Arena 2. y evalúe: a.  Que es. Pese un recipiente de cada sustrato.  Cuál es la principal función de los sustratos?  A que se le denomina un sustrato hidropónico?  Por que se dice que existen algunos sustratos o suelos supresivos?  Para que es utilizado el poliestireno expandido en algunos sustratos?. Registre el valor de cada uno de los sustratos.

PRACTICA 3 MÉTODOS DE TRAZADO EN CAMPO Objetivo  Aplicar los conceptos y criterios necesarios para el diseño. será asignado un caso.  Determinar la densidad de siembra y población de plantas del cultivo asignado. se denomina método de trazado. trazado y establecimiento de un cultivo. de acuerdo con las características particulares de cada sistema productivo. se encuentran: Cuadrado. Introducción La forma como se planifica y establece un cultivo en el terreno. voleo. en grupos de cuatro personas. donde previa revisión de literatura. el grupo deberá plantear el 11 . Materiales  Flexo metro  Estacas (50)  Cuerda  Barreno Metodología Con base en los conocimientos adquiridos y los criterios para el establecimiento de cultivos. Entre los métodos más empleados. curvas de nivel. triangulo o tres bolillo.

Cultivo de piña como cultivo transitorio en cultivo de cítricos de un año. Cultivo de Cacao en asocio con plátano Caso 4. Cuestionario  Qué criterios deben tenerse en cuenta al momento de definir un sistema de trazado en campo  Porque es importante conocer el nivel freático y la pendiente del terreno para determinar el sistema de trazado? 12 . argumente su respuesta. Triangulo ó tres bolillo Caso 1. Cultivo de Mango Tommy Cuadrado Rectángulo Caso 2. en dado caso de considerar que no es viable la siembra.procedimiento a seguir. Cultivo de plátano Hartón bajo penumbra del 45 – 50% Caso 3. las posibles dificultades y arreglos que fueran necesarios para el establecimiento del cultivo.

a cada uno de los grupos aplique uno de los siguientes tratamientos: 13 . Metodología Estacas: En bolsa pequeña o vasos pequeños con drenaje. diámetro y el mismo grado de lignificación) de una misma especie en cuatro grupos diferentes (15 cada uno). siembre 60 estacas con características similares (las estacas deben tener la misma longitud. Materiales  Navaja para injertacion  Hipoclorito de sodio  Plástico negro  200 ml de citoquinas 500 ppm (Para todo el grupo)  200 ml de Auxina 500 ppm (Para todo el grupo)  Hormonagro  Trichoderma sp.PRACTICA 4 PROPAGACIÓN ASEXUAL Objetivo Analizar los factores fisiológicos y morfológicos que inciden sobre los métodos de propagación asexual. Desarrollar habilidades básicas en los diferentes métodos de propagación asexual por estructuras especializadas.

y sembrar en posición vertical. preferiblemente limo de rio: a. Euphorbia cotinifolia. Gliricidia sepium). preferiblemente en horas de la tarde (después de las 4:00 pm).  Aplicación de ANA (Hormonagro 1) en la zona proximal y sembrar con inclinación de 45°. hasta que se observe abundante formación de raíz. utilizando un mismo sustrato previamente esterilizado. Escisión de medio anillo de la corteza.  Siembra de las estacas con la polaridad invertida.  Realice los siguientes tratamientos. Acodos  Seleccione una especie (Liquidámbar styraciflua. 14 . Azadirachta indica. Guadua angustifolia. y tape con suficiente sustrato húmedo. aplique con atomizador una solución de ANA en el sitio de corte.  Siembra de las estacas en posición vertical sin aplicación de ANA. cada uno por cinco repeticiones. Aplicación de ANA (Hormonagro 1) en la zona proximal.

y tape con suficiente sustrato húmedo. tienen respuesta más rápida para la rizogénesis?  Que hormonas están implicadas en la rizogénesis? 15 . Realice seguimiento y anote los cambios observados Cuestionario  Como afecta la polaridad. Realice el mismo procedimiento indicado en el literal a y b. d.  Por qué algunas especies. el enraizamiento de explantes?. c. pero en cambio. hasta que se observe abundante formación de raíz. Es necesario revisarlos periódicamente para mantener las condiciones de sanidad y humedad adecuadas.b. aplique con atomizador una solución de ANA en el sitio de corte. aplique la solución de ANA en el follaje. Escisión completa de un anillo en la corteza.

dentro de las técnicas de cultivo de tejidos. como el grado de especialización de una célula. considerado el pionero del cultivo de células. la totipotencia. se define como la capacidad que tiene cualquier célula. generalmente hacen de la zona meristematica un tejido libre de patógenos. es empleada principalmente como una herramienta para la producción de plantas libres de enfermedades. Objetivos Identificar el proceso general para la extracción y siembra in vitro de meristemos con fines de micro propagación Reconocer los equipos e instalaciones para procesos básicos de cultivo de tejidos. pues las características de rápida división celular y ausencia de tejidos conductor diferenciado. CULTIVO in vitro DE MERISTEMOS Introducción Las técnicas de cultivo de tejidos. Materiales  8 semillas de especies diferentes (4 de cada especie) sin embeber. de formar un organismo idéntico al que proviene. como herramienta de la biotecnología vegetal. de acuerdo a la función dentro del organismo. Haberlant 1902. y la diferenciación celular. que según G. El cultivo de meristemos. se basan en dos principios fundamentales.PRACTICA 5.  8 semillas de especies de las anteriores especies embebidas por 24 Horas (Las semillas deben ser desinfestadas con una solución de hipoclorito al 5% por 5 minutos y embebidas en agua destilada estéril) 16 .

Mangos de bisturí.  Tome dos semillas de cada especie.  Lave dos veces las semillas con ADE y séquelas antes de la siembra. Germinación in vitro  Tome las semillas de las especies seleccionadas sin embeber. realice el proceso de desinsfestacion de la siguiente manera:  Sumerja las semillas en una solución de Hipoclorito de sodio 5% más dos gotas de Tween por 10 min. otros)  100 ml de Hipoclorito 5%  50 ml de Hipoclorito 0. previamente adecuada para el trabajo aséptico.5% por tres minutos.  Realice el mismo procedimiento para las semillas embebidas  Márquelas adecuadamente e incube a 27° C y 12 horas luz. posteriormente sumerja la semilla desnuda en alcohol 70% por 10 segundos e inmediatamente llévelas a la solución de NaOCl 0.  Elimine la testa de todas las semillas.5%  Dos frascos de Agua destilada estéril  50 ml de Alcohol 70%  Dos cajas de petri con toalla absorbente (Estériles ) Metodología 1. 10 Explantes apicales de cinco especies diferentes (2 de cada especie)  Medios de cultivo MS  Instrumentos para trabajo en cámara (Pinzas. evitando dañar el tejido embrionario.  Tome las otras dos semillas con cotiledón y siémbrelas. 17 . extraiga el meristemo y siembre en medio de cultivo (En frascos distintos cada especie).  Llévelas en la solución a la cabina de flujo laminar.

hasta que tenga un explante de 1 cm aproximadamente. estipulas y demás hasta obtener un explante de aproximadamente tres (3) centímetros. .Elimine hojas. ¿Qué ventajas presenta el desarrollo embrionario.Sumerja los explantes en una solución de alcohol por 10 segundos. ¿cuales considera que pueden ser las aplicaciones de la siembra de embriones y meristemos en condiciones in vitro? 18 . ¿Qué diferencias presentó el tejido meristematico de las diferentes especies?.Tenga en cuenta el protocolo de trabajo en cabina de flujo. el efecto de la imbibición de las semillas sobre el desarrollo embrionario en condiciones in vitro?. Desde un enfoque agronómico. en una solución de NaOCl 5% más dos gotas de Tween 20. Extracción y siembra de meristemos .Identifique previamente la filotaxia de las especies a introducir. en caso de presentarse crecimiento de microorganismos. OBSERVACIONES: . cuando se retiran los cotiledones?.Siembre en el medio de cultivo.Introdúzcalos a la cabina de flujo. retire cuidadosamente el tejido externo.Tape y marque adecuadamente.Introduzca el explante en la solución de NaOCl por 3 minutos.En ambos procedimientos. Cuestionario 1. identifíquelos a nivel de género. 4. . .2. 2. Analice ésta situación. . . . Analice desde el punto de vista fisiológico.Con la ayuda del estereoscopio. 3. . .Lave dos veces en agua destilada estéril .

Asexula Plant propagation: Special techniques considerations for sucessful high altitude revegetation.html  BEWLEY. and Sam A. Jalalabad.  http://www.  STANISLAV V.  Scianna. Unyversity of Guelph. Joseph D. Plaza. Mark E.cl/cesaf/n14/4. PROPAGACIÓN DE PLANTAS..uchile. 2007 Agronomía 19 . Reid.cesaf. 96-103. Fisiologia de semillas recalcitrantes de arboles tropicales. Derek. Majerus.Bibliografía  OSORIO M. vol 9. 1998  Vegetative propagation techniques. 2007. Gruber. Magnitskiy y GUIDO A. Winslow. Editorial Guadalupe. Afganistan. Diego L. Seed germination and dormancy. Susan R. Colombiana 25(1). pag 1055 – 1066. J. Lori M. The plant cell. November 18.

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