INSTITUTO POLITCNICO NACIONAL

ESCUELA NACIONAL DE
CIENCIAS BIOLGICAS
UNIDAD STO. TOMS

PRCTICA N12

DETERMINACIN DE LA TOXICIDAD DE MUESTRAS DE AGUA POR UN MTODO

BACTERIOLGICO

UNIDAD DE APRENDIZAJE: ECOLOGA MICROBIANA

PROFESORA:
IRMA GABRIELA MARTINEZ GOMEZ

ALUMNOS:
BERNAL MORALES HECTOR ENRIQUE
NAVA MONROY MAXIMA MONSERRAT
SEGURA LPEZ MICHELLE
SOTO MONTES ELIZABETH

FECHA DE ENTREGA
21/NOVIEMBRE/2017

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RESULTADOS.

Formula: %I= (A-B)-(A-C)/(A-B)

Estacin % Inhibicin Interpretacin

1 -4.76
2 -21.97
3 33.84
5 68.75
6 -26.66
7 105.55

120
105.55
100

80
68.75

60
%INHIBICIN

40 33.84

20

0
-4.76
-20
-21.97
-26.66
-40
Estacin 1 Estacin 2 Estacin 3 Estacin 5 Estacin 6 Estacin 7

Fig.1 Grafica de los % de Inhibicin de las diferentes estacines

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OBJETIVOS:

Determinar la toxicidad de un cuerpo de agua midiendo el efecto el efecto sobre la actividad

deshidrogenasa de una cepa tipo

RESULTADOS

DISCUSIONES:

Bacillus cereus es productora de toxinas que pueden causar dos tipos de enfermedades: una
caracterizada por diarrea y la otra, denominada toxina emtica, por causar nuseas y vmitos. Es por ello
que es de gran inters diagnstico, Bacillus cereus es anaerobia facultativa y utiliza el la enzima
deshidrogenasa para reducir el NAD a NADH y llevar a cabo su actividad respiratoria, por otro lado,
cuando existe presencia de Cloruro de Trifenil Tetrazolio (TTC) este acta como inhibidor competitivo del
NAD, reduciendo as hasta TPF, dando un color rojo, que indica la estimulacin respiratoria del TTC a
TPF gracias a la Deshidrogenasa
En el medio de TTC la maltosa y la lactosa son utilizados por los enterococos con produccin de acido,
mientras que los dems son suprimidos por la azida de sodio, por lo cual el TTC es selectivo, ya que los
enterococos tienen la habilidad de reducir el tetrazolio a formazano, los derivados del tetrazolio son
sustancias incoloras que al reaccionar con azucares se trasforman en compuestos poco solubles de color
rojo (formazanos)

En estaciones con un porcentaje de inhicion negativo podemos decir que el TTC no inhibi completamente
la reduccion de NAD a NADH, por el contrario, en las estaciones que se obtuvo un porciento de inhibicion,
positivo podemos decir que existi un grado de competicencia entre el NAD y el TTC por reducirse hasta
sus compuestos NADH y TPF respectivamente
Con respecto a los valores de toxicidad proporcionados en clase por la profesora Irma (figura 1) podemos
decir que los valores negativos tienen un efecto toxico ligeramente inhibitorio o incluso estimulante,
mientras que los valores positivos pueden ser desde no toxicos (0-5%) hasta ligeramente toxico (5-50%)
o toxico (50-100%) para la respiracin de Baccillus cereus

CONCLUSIONES

El Cloruro de Trifenil Tetrazolio (TTC) utiliza la enzima deshidrogenasa para reducirse a APF
Bacillus cereus utiliza el NAD para su actividad respiratoria a travs de su reduccin de NAD
a NADH, a travs de la enzima deshidrogenasa.

CUESTIONARIO:

1- En las normas mexicanas, qu organismos se utilizan para determinar toxicidad?

La presente Norma Mexicana establece el mtodo para el anlisis biolgico de calidad del agua mediante
pruebas de toxicidad aguda utilizando al organismo dulcecucola Daphnia magna Straus 1820 (Crustacea-
Cladocera).

CAMPO DE APLICACIN: Este mtodo es aplicable para la evaluacin de toxicidad aguda en cuerpos de agua
dulce, as como aguas residuales industriales, efluentes agrcolas, municipales y sustancias puras, combinadas
o lixiviados.

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REFERENCIAS:

NMX-AA-003 Aguas residuales - Muestreo.

NMX-AA-007 Aguas - Determinacin de la temperatura.
NMX-AA-008 Aguas - Determinacin del pH.
NMX-AA-014 Cuerpos receptores - Muestreo.
NMX-AA-072 Anlisis de agua - Deteminacin de la dureza -Mtodo del E.D.T.A.(Acido etilen
diamino tetraactico).
NMX-AA-093 Proteccin del ambiente - Contaminacin del agua - Determinacin de la
conductividad elctrica.
Daphnia magna Es un microcrustceo del orden Cladocera de 1 mm a 1,5 mm
de longitud los neonatos, y de 4 mm a 6 mm los adultos (ambos, visibles a
simple vista). Es un representante importante de las comunidades
dulceacucolas con gran sensibilidad a una amplia gama de compuestos
txicos, siendo sta una de las caractersticas principales para que sea usado
internacionalmente en pruebas de toxicidad. Asimismo, su ciclo de vida corto y
fcil cultivo en laboratorio, permite realizar pruebas rpidas y econmicas (ver
figura 2).

2- Qu indica un porcentaje de inhibicin negativo?

Bacillus cereus utiliz el TTC como una estimulacin (Toxicidad

estimulatoria)

FIGURA 2 .- Hembra adulta Daphnia magna Straus

BIBLIOGRAFAS:

https://espanol.foodsafety.gov/intoxicaci%C3%B3n/causas/bacteriasvirus/bcereus/xki/%C3%
ADndice.html (consultado 19/11/17)
http://legismex.mty.itesm.mx/normas/aa/aa087.pdf (consultado 19/11/17)

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