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Terra Latinoamericana

E-ISSN: 2395-8030
terra@correo.chapingo.mx
Sociedad Mexicana de la Ciencia del Suelo,
A.C.
Mxico

Paredes-Mendoza, Marianela; Espinosa-Victoria, David


CIDOS ORGNICOS PRODUCIDOS POR RIZOBACTERIAS QUE SOLUBILIZAN FOSFATO: UNA
REVISIN CRTICA
Terra Latinoamericana, vol. 28, nm. 1, enero-marzo, 2010, pp. 61-70
Sociedad Mexicana de la Ciencia del Suelo, A.C.
Chapingo, Mxico

Disponible en: http://www.redalyc.org/articulo.oa?id=57316076007

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CIDOS ORGNICOS PRODUCIDOS POR RIZOBACTERIAS
QUE SOLUBILIZAN FOSFATO: UNA REVISIN CRTICA
Organic Acids Produced by Phosphate Solubilizing Rhizobacteria: A Critical Review

Marianela Paredes-Mendoza1 y David Espinosa-Victoria1

RESUMEN en la solubilizacin de fosfato mineral y sus implicaciones


en el estatus nutricional del suelo.
La produccin de cidos orgnicos de bajo peso
molecular por las r izobacterias es uno de los Palabras clave: rizsfera, P soluble, bacterias
mecanismos ms ampliamente conocidos de solubilizadoras, cido 2-cetoglucnico, cidos
solubilizacin del fosfato del suelo, que hace al fsforo alifticos.
(P) disponible para la nutricin de las plantas. Dentro
del perodo de 1908-2008 se report la capacidad SUMMARY
solubilizadora de fosfatos por los cidos: oxlico, ctrico,
butrico, malnico, lctico, succnico, mlico, glucnico, The production of low molecular weight organic acids
actico, glicnico, fumrico, adpico, indolactico y by the rhizobacteria is one of the most widely known
2-cetoglucnico. Los gneros bacterianos con capacidad mechanisms of soil phosphate solubilization, a process
de producir cidos orgnicos que solubilizan fosfato se that makes phosphorus available for plant nutrition. The
tienen: Pseudomonas, Rhizobium, Burkholderia, phosphate solubilizing capacity of organic acids, such
Achromobacter, Agrobacterium, Aereobacter, as oxalic, citric, butyric, malonic, lactic, succinic, malic,
Flavobacterium, Yarowia, Streptosporangium y gluconic, acetic, gliconic, fumaric, adipic, indoleacetic,
Erwinia. Los cidos glucnico y 2-cetoglucnico son and 2-ketogluconic acids, was reported during the period
los agentes ms frecuentemente reportados como 1908-2008. Some bacterial genera that exhibit solubilizing
solubilizadores de fosfato. La capacidad de los cidos phosphate activity through organic acid production are
orgnicos para aumentar la disponibilidad de P, no slo Pseudomonas, Rhizobium, Burkholderia,
se debe a la acidificacin en la rizsfera de la planta, Achromobacter, Agrobacterium, Aereobacter,
sino tambin a su capacidad de formar complejos Flavobacterium, Yarowia, Streptosporangium, and
estables con el Al y Fe. Los cidos orgnicos incrementan Erwinia. Gluconic and 2-ketogluconic acids are the acids
la disponibilidad de micronutrientes, como Fe, Zn y Mn, most frequently reported as phosphate solubilizing
en el suelo al disminuir el pH en la rizsfera, o por la agents. The capacity of the organic acids to increase P
quelacin de estos micronutrientes. De igual manera, availability not only results from the acidification of the
los cidos orgnicos participan en el suelo en fenmenos plant rhizosphere, but also from their capacity to form
como la quimiotaxis microbiana y la detoxificacin de stable complexes with some metals, such as Al and Fe.
metales. Sin embargo, su papel en la mayora de estos Organic acids also increase the availability of other soil
procesos sigue siendo desconocida, debido a la falta de micronutrients such as Mn, Al, and Zn when pH
datos experimentales que expliquen las reacciones de decreases in the rhizosphere or by chelation of
los cidos orgnicos en el suelo. El objetivo de esta micronutrients. At the same time, organic acids
revisin es analizar el papel que juegan los cidos participate in other soil phenomena, such as microbial
orgnicos producidos por las rizobacterias chemotaxis and metal detoxification. The objective of
this paper is to analyze the role of the organic acids
1
produced by rhizobacteria in the solubilization of mineral
Colegio de Postgraduados, Campus Montecillo. 56230 Montecillo,
estado de Mxico.
phosphate and its implications in the soil nutritional status.

Autor responsable (marianela@colpos.mx)


Index words: soluble P, solubilizing bacteria,
Recibido: agosto de 2006. Aceptado: julio de 2009. rhizosphere, low molecular weight acids,
Publicado como ensayo en
2-ketogluconic acid, aliphatic acids.
Terra Latinoamericana 28: 61-70.

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INTRODUCCIN en la rizsfera. La concentracin de los cidos orgnicos


en la solucin del suelo normalmente es baja, variando
El fsforo (P) es un elemento esencial para los de 1 a 50 M (Baziramakenga et al., 1995; Strobel,
organismos, tanto en ecosistemas terrestres como 2001). La produccin de cidos orgnicos por las BSP
acuticos; no obstante, algunos procesos del ciclo del ha sido poco estudiada, por lo que se requiere generar
fsforo son desconocidos (Lindsay, 1979; Illmer y ms conocimiento sobre este tema.
Schinner, 1992; Stephen y Jisha, 2009). Despus del
nitrgeno (N), el P es el segundo nutriente inorgnico BACTERIAS SOLUBILIZADORAS DE
necesario para todas las formas de vida. Se trata de un FOSFATO MINERAL
componente esencial de molculas como RNA, DNA y
ATP, as como de los fosfolpidos (Coyne, 2000). El P Durante los ltimos 10 aos, el conocimiento sobre
disponible es absorbido por la planta en forma de H2PO4- los microorganismos solubilizadores de fosfato (MSP)
en suelos cidos, y como HPO42- en suelos alcalinos. El ha aumentado significativamente. Entre los MSP se
P disponible en el suelo es fcilmente convertido en encuentran las bacterias promotoras del crecimiento
complejos insolubles, como fosfatos de Fe, Al o Mn en vegetal o PGPR (del ingls plant growth promotion
suelos cidos y fosfatos de Ca o Mg en suelos alcalinos rhizobacteria). Estas bacterias son de vida libre en el
(Torriani-Gorini, 1994). Debido a lo anterior, el P es uno suelo y son capaces de adaptarse, colonizar y persistir
de los elementos que con mayor frecuencia resulta en la rizsfera de la planta y favorecer su crecimiento o
limitante en los suelos. Los microorganismos estn desarrollo (Bashan, 1998). Las rizobacterias pueden ser
involucrados en procesos que afectan la transformacin benficas o antagnicas para la planta (Lemanceau,
del P del suelo y son componentes integrales del ciclo 1992). Las BSP pertenecen al grupo de las PGPRs y
del P. Los microorganismos participan en la solubilizacin son capaces de solubilizar fosfato inorgnico de
del fosfato inorgnico y en la mineralizacin del fosfato diferentes compuestos, como son el fosfato biclcico,
orgnico, as como en su inmovilizacin (Richardson, fosfato triclcico y rocas fosfricas. Con el trmino rocas
1994). En particular, las bacterias solubilizadoras de fosfricas se conoce a los minerales que contienen P
fosfato (BSP) solubilizan tanto fosfato orgnico, como como es el caso de las apatitas, incluyendo fluorapatita,
inorgnico (Banik y Dey, 1982; Goldstein et al., 2003). cloroapatita e hidroxiapatita. Hay grandes depsitos en
El fosfato orgnico es mineralizado por la enzima Rusia, Estados Unidos, frica del Norte y China; tambin
fosfatasa excretada por algunos microorganismos, existen importantes reservas en Brasil, Per y Mxico
produciendo la liberacin de ste (Gerretsen, 1948; (Sperber 1958a; Hoffland, 1992). Existen 13 gneros
Kucey et al., 1989). Las bacterias Bacillus megaterium, de bacterias con la capacidad de solubilizar fosfato:
Bacillus mesentericus y Pseudomonas putida Pseudomonas, Bacillus, Rhizobium, Burkholderia,
mineralizan las formas orgnicas de P (ortofosfato) Achromobacter, Agrobacterium, Micrococcus,
(Tarafdar y Claassen, 1988; Das et al., 2003). En Aerobacter, Flavobacterium, Mesorhizobium,
general, se acepta que el mecanismo ms comn de Azotobacter, Azospirillum y Erwinia (Sperber, 1958b;
solubilizacin del fosfato mineral es la accin de cidos Goldstein, 1986; Rodrguez y Fraga, 1999). Se ha
orgnicos sintetizados por las BSP (Goldstein, 1995; Wan reportado al cido glucnico como el agente ms
y Wong, 2004). frecuente de solubilizacin de fosfato, el cual es
Los cidos orgnicos son constituyentes normales producido por Pseudomonas sp. (Illmer y Shinner, 1992),
de la mayora de los suelos agrcolas. Su papel dentro Erwinia herbicola (Liu et al., 1992), Pseudomonas
del suelo no ha sido an bien definido, pero existen cepacia (Goldstein et al., 1993) y Burkholderia
numerosas evidencias que indican sus efectos cepacia (Rodrguez y Fraga 1999; Lin, et al., 2006; Song
fisiolgicos en el crecimiento de las plantas (Illmer y et al., 2008). Otro metabolito solubilizador de fosfato es
Shinner, 1995; Scheffer y Schachtschabel, 1998; Igual el cido 2-cetoglucnico, sintetizado por Rhizobium
et al., 2001). Algunos cidos orgnicos incrementan la leguminosarum (Halder et al., 1990), Rhizobium
disponibilidad de formas insolubles de diferentes meliloti (Halder et al., 1990), Bacillus firmus (Banik y
nutrimentos de las plantas, en especial el P (Goldstein, Dey, 1982) y otras bacterias del suelo an no
1995). Estos cidos orgnicos de bajo peso molecular identificadas (Richardson, 2001). Algunas cepas de
son producidos por microorganismos que se encuentran Bacillus liqueniformis y Bacillus amyloliquefaciens
PAREDES Y ESPINOSA. CIDOS ORGNICOS PRODUCIDOS POR RIZOBACTERIAS QUE SOLUBILIZAN FOSFATO 63

producen mezclas de cidos lctico, isovalrico, bacterias solubilizan el fosfato inorgnico por medio de
isobutrico y actico. Otras BSP que producen cidos la produccin de CO2, cidos orgnicos, excrecin de
orgnicos son: Rahnella aquatilis (Kim et al., 1997), protones y asimilacin de NH4+ (Ohtake et al., 1996).
Pseudomonas lutea sp. nov. (Peix et al., 2004) y El mecanismo ms importante de solubilizacin de
Pantoea agglomerans (Lin et al., 2006). El P fosfatos de calcio es la acidificacin por medio de la
solubilizado es fcilmente absorbido por las races de biosntesis y secrecin de cidos orgnicos.
las plantas y utilizado para su crecimiento y desarrollo.
El uso de los MSP no es nuevo. Sackett et al. (1908) CIDOS ORGNICOS QUE SOLUBILIZAN
reportaron, por primera vez, aspectos relacionados con FOSFATO
este tpico. Hasta el momento, se conocen varios cidos
orgnicos producidos por las BSP: oxlico (Kim et al., Los cidos orgnicos que solubilizan fosfato son
1997), ctrico (Cunningham y Kuiack, 1992; Drouillon de bajo peso molecular y poseen uno o ms grupos
y Merckx, 2003), malnico (Hwangbo et al., 2003), carboxilo. Dependiendo de las propiedades de
lctico (Jones et al., 2003), succnico (Banik y Dey, disociacin y el nmero de grupos carboxilo, los cidos
1983; Kucey, 1989), mlico (Stevenson, 1967), orgnicos tienen carga negativa, por lo que pueden
glucnico (Goldstein y Liu, 1987), oxalactico (Singh formar complejos con cationes metlicos en solucin y
y Amberger, 1998a), actico (Loganathan y Nair, 2004), el desplazamiento de aniones de la solucin del suelo
frmico (Ahonen-Jonnarth et al., 2000), isovalrico (Stevenson, 1967; Sagoe et al., 1998). Los cidos
(Vazquez et al., 2000), fumrico (Ohtake et al., 1996), orgnicos de bajo peso molecular provienen del
gliclico (Sperber, 1958b), adpico (Hwangbo et al., metabolismo de compuestos de alto peso molecular,
2003), indolactico (Bric et al., 1991), 2-cetoglucnico como carbohidratos, pptidos y lpidos (Baziramakenga
(Moghimi y Tate, 1978), butrico e isobutrico et al., 1995). stos juegan un papel determinante en el
(Rodrguez y Fraga, 1999). Las BSP estn ciclo biolgico de nutrientes, en la agricultura y los
histricamente asociadas a la produccin de cidos ecosistemas forestales. Los cidos orgnicos o
orgnicos de bajo peso molecular (Goldstein, 1986). Liu carboxlicos son sustancias polares y son capaces de
et al. (1992) identificaron las bases genticas y formar puentes de hidrgeno entre s y con el agua. La
metablicas para una solubilizacin eficiente de fosfato mayora de los cidos orgnicos producidos por las BSP
de calcio. Liu et al. (1992) proponen que la son alifticos, es decir, son cidos no aromticos
solubilizacin es el resultado de la acidificacin del (Figura 1).
espacio periplsmico, debida a la oxidacin directa de El entendimiento de la qumica y biologa de la
la glucosa (oxidacin no fosfoltica) o de otra aldosa rizsfera es esencial para la determinacin de
por accin de la quinoprotena glucosa deshidrogenasa la movilidad y disponibilidad de los metales en la
(PQQGDH). La glucosa se convierte en cido glucnico interfase raz-suelo. La produccin de cidos orgnicos
y despus de dos oxidaciones sucesivas, en el espacio por las BSP tiene accin directa en la acidificacin,
periplsmico, se convierte en cido 2-cetoglucnico quelacin, precipitacin y las reacciones de xido-
2,5-dicetoglucnico (Anderson et al., 1985). reduccin en la rizsfera (Kucey et al., 1989). Son
En la actualidad, las investigaciones sobre las BSP importantes los cidos orgnicos en la agricultura, por
estn dirigidas a conocer las bases bioqumicas y que forman complejos con metales, solubilizan metales
genticas de la actividad de estas bacterias. Los eventos y participan en su transporte (Fuentes-Ramrez et al.,
o hechos importantes que han ocurrido durante el estudio 1999; Jones et al., 2003). cidos como el oxlico,
de los cidos orgnicos producidos por las BSP se ctrico, lctico, tartrico y 2-cetoglucnico tienen
enlistan en el Cuadro 1. propiedades quelantes y solubilizadoras sobre los metales
Las BSP solubilizan compuestos como el fosfato (Babu-Khan et al., 1995). La accin de los cidos
triclcico, el fosfato diclcico, la hidroxipatita y la roca orgnicos en la solubilizacin de minerales puede
fosfrica. Hay numerosas especies de bacterias atribuirse a que disminuyen el pH y, ms an, a la
solubilizadoras de fosfatos en el suelo y en la rizsfera formacin de complejos estables con Ca2+, Mg2+, Fe3+ y
(Gupta et al., 1994) que incluyen aerobias y anaerobios Al3+. Reacciones similares ocurren al prevenir la fijacin
(Richardson, 2001). Las bacterias que solubilizan de fosfatos aadidos al suelo como fertilizantes.
fosfatos se encuentran normalmente en la rizsfera. Las Se ha demostrado que los cidos orgnicos reducen la
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Cuadro 1. Eventos importantes en el estudio de los cidos orgnicos producidos por bacterias solubilizadoras de fosfato (BSP) de la
rizsfera.

Evento Significado Referencia


Aislamientos bacterianos que presentaban solubilizacin de roca Primer reporte de las BSP publicado en una revista Sacket et al. (1908)
fosfrica visible (36 de 50). cientfica.

Caracterizacin de cidos orgnicos producidos por BSP aisladas del Primera demostracin de que la solubilizacin de fosfato por Sperber (1958b)
suelo. bacterias se deba a la produccin extracelular de cidos
orgnicos.

El cido 2-cetoglucnico, como un agente importante en la Primera evidencia de que la ruta de oxidacin directa Duff y Webley (1963)
solubilizacin del fosfato mineral del suelo. produca el cido 2-cetoglucnico. Se aportan las primeras
bases sobre el entendimiento de las rutas metablicas de las
BSP.

Las BSP en el rizplano del trigo presentan oxidacin de glucosa ms Se enfatiza la importancia de las rutas de oxidacin directa Katznelson y Bose (1959)
activa que las bacterias del suelo. en las BSP.

El cido 2-cetoglucnico exhibe mayor capacidad solubilizadora que Nuevamente, se remarca la importancia de las rutas de Moghimi y Tate (1978)
otros compuestos relacionados con la rizsfera. oxidacin directa en las BSP.

Modificacin gentica de una cepa de E. coli capaz de disolver Primera BSP transgnica, modificada mediante la tcnica Goldstein y Liu (1987)
hidroxiapatita debido a la clonacin y expresin del gen MSP de del DNA recombinante.
Erwinia herbicola .
La secuenciacin del gen MSP de Erwinia herbicola sugiere que la Primera demostracin de que la ruta de oxidacin directa es Liu et al. (1992)
enzima codificada est involucrada en la sntesis de la enzima la que proporciona la capacidad solubilizadora de las
quinona pirroloquinolina sintetasa (PQQ). bacterias Gram negativas.

La acidificacin artificial del medio de cultivo con HCl, no produce Demostracin de que los cidos orgnicos producidos por Illmer y Schimer (1992)
una considerable solubilazacin de fosfato, en contraste con la bacterias tienen mayor capacidad solubilizadora de fosfatos
actividad de dos aislamientos microbianos. que el HCl.

La produccin de cidos orgnicos es el mecanismo ms importante Nuevas aportaciones para entender los mecanismos de Illmer et al . (1995)
de solubilizacin de fosfato, pero necesita de otros como la excrecin solubilizacin del fosfato.
de protones acompaada de la asimilacin de NH4+.

Primer congreso sobre microorganismos solubilizadores de fosfato. Intercambio de experiencias entre cientficos. Velzquez y Rodrguez-
Barrueco (2007)
Las clulas de Yarowia lipolytica encapsuladas producen ms cido Aplicacin en la tecnologa de inculos para mayor Vassileva et al . (2000)
ctrico que las no encapsuladas. produccin de cido orgnico.

Aislamientos de bacterias endfitas y epfitas que producen cido Aislamiento de microorganismos que solubilizan fosfato y Conn y Franco (2004)
indolactico. fijan nitrgeno
Los protones del cido glucnico son los que producen la Entendimiento del mecanismo de accin del cido Lin et al. (2006)
solubilizacin de fosfato triclcico por Burkholderia cepacia CC- glucnico en la solubilizacin de fosfato.
Al74.

Aislamiento de Xanthomonas campestris, una bacteria Uso de una bacteria en la industria alimenticia y como Sharan et al. (2008)
solubilizadora de fosfato tolerante a suelos salinos y alcalinos debido biofertilizante.
a que produce xantano y cidos orgnicos.

Los posibles mecanismos de solubilizacin de fosfasto por Entendimiento de los mecanismos de solubilizacin de Park et al. (2009)
Pseudomonas fluorescens RAF15 son: la excrecin de protones por fosfato por bacterias promotoras del crecimiento vegetal.
asimilacin de NH4+ y la produccin de cidos orgnicos.

precipitacin de fosfato por el hierro y el aluminio (Stevenson, En estudios con cidos alifticos, los cidos
1967; Moghimi y Tate, 1978; Illmer et al., 1995). tricarboxlicos (cido ctrico) forman quelatos ms
estables que los cidos dibsicos (mlico y tartrico),
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O O H3C CH2
H3C CH2
HC H3C C C O CH2
OH OH HO HO C
O
cido metanoico cido etanoico cido propanoico cido butanoico
(cido frmico) (cido actico) (cido propinico) (cido butrico)

Figura 1. cidos orgnicos alifticos producidos por bacterias solubilizadoras de fosfato.

pero menos estables son an los quelatos conocidos como del citrato se intercambian por el P ligado a la superficie
-hidroxi monobsicos. Algunos cidos dibsicos de los cristales de Al(OH)3 o Fe(OH)3 reducindolos y
alifticos derivados de alcoholes forman complejos ms liberando al P (Andrews, 1990; Halder et al., 1990). El
fuertes y los compuestos -hidroxi son ms efectivos segundo mecanismo depende de la concentracin de los
que los derivados -hidroxi para la quelacin del calcio. cidos orgnicos producidos por las BSP, el cual involucra
Struthers y Sieling (1959) observaron que la la formacin de complejos con iones de metales
efectividad de los cidos orgnicos para prevenir provenientes de la roca fosfrica (Singh y Amberger,
la precipitacin de fosfatos por el hierro y el aluminio 1998b). Sin embargo, la enorme cantidad de rutas
se incrementa progresivamente con el nmero de grupos metablicas generadoras de cidos por las bacterias, han
hidroxilo, debido a la formacin de complejos ms hecho imposible el desarrollo de un conocimiento
estables con el Fe y Al, y por lo tanto ms efectivos. unificado sobre la microbiologa de la solubilizacin del
Los derivados hidroxi se consideran ms efectivos en fosfato. Lo anterior no ha ocurrido en el estudio de
el ataque al fosfato frrico que sus similares no fijacin de N2, donde todas las rutas deben converger a
substituidos (Figura 2). El cido que produce la mayora alguna variacin del sistema de la nitrogenasa (Beever
de bacterias es el cido lctico. Los hidroxicidos se y Burns, 1980; Ohtake et al., 1996). Illmer y Schinner
consideran mejores para disolver la apatita que los (1995) sugieren que los cidos orgnicos producidos por
cidos voltiles, debido a que forman quelatos con el las BSP no son determinantes para la solubilizacin y el
calcio (Gyaneshwar et al., 1998). nico factor determinante para la solubilizacin de P es
la concentracin de H+ originados que se producen de
Mecanismo de Accin la respiracin o asimilacin de NH4+.
El gran nmero de rizobacterias Gram negativas
La solubilizacin del fosfato por los cidos orgnicos aisladas que solubilizan fosfato usan la glucosa como
depende del pH y la mineraloga del suelo. Existen dos fuente de carbono (Goldstein et al., 2003). Al usar este
mecanismos para que esto ocurra. El primero es un criterio, entonces las bacterias que posean la ruta de la
intercambio del cido, por ejemplo, los H+ provenientes oxidacin directa de la glucosa tienen la habilidad

O
C O O O
HO O HO O O C C
CH 2 C CH 2 O Al
O O
OH H3 C OH O O
C C
O O

cido etanoloico cido Propanol-2-oico Trioxalato de aluminio


(cido gliclico) (cido lctico) (Quelato de oxalato de aluminio)

Figura 2. Hidroxicidos producidos por bacterias solubilizadores de fosfato.


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de disolver los fosfatos. Estas bacterias se han designado las bacterias. Para muchas especies bacterianas, la ruta
como fenotipo MSP+. Las bacterias de MSP+ pueden de oxidacin directa es el mecanismo primario para la
disolver los fosfatos muy insolubles, como la roca utilizacin de aldosas. La primera oxidacin se cataliza
fosfrica (fluoroapatita), debido al pH sumamente bajo por la quinoprotena glucosa deshidrogenasa, as llamada
de los productos de oxidacin de la glucosa: los cidos porque pertenece al grupo de enzimas bacterianas que
glucnico y 2-cetoglucnico (pH de ~3.4 y ~2.6, utilizan el cofactor quinnico PQQ (2,7,9-tricarboxil-1H-
respectivamente). Adems, desde que estos cidos se pirrolo[2,3-f]quinolina-4,5-diona). La PQQGDH
producen en el espacio periplsmico, los protones son transfiere dos electrones directamente de las aldosas a
eficazmente liberados en el medio extracelular de la la ubiquinona en la membrana plasmtica, ocurren dos
rizsfera. Las especies de MSP+ superiores no slo oxidaciones que generan protones y que estn mediadas
tienen los genes de la oxidacin directa, sino que por el cofactor PQQ. La oxidacin directa de glucosa al
tambin expresan la ruta metablica a un nivel alto para cido glucnico genera un protn transmembranal que
que haya una correlacin directa entre la produccin de puede usarse para la bioenergtica y funciones de
cidos y la disolucin de fosfatos. Tambin es de inters transporte de la membrana, mientras el protn del cido
notar que bajas concentraciones de P pueden inducir la glucnico est disponible para la solubilizacin de
ruta de oxidacin directa en algunas especies. Babu- fosfatos. Las bacterias que producen cido 2-
Kan et al. (1995) sugiere que existe una relacin entre cetoglucnico, normalmente llevan a cabo la segunda
las BSP Gram negativas muy eficaces y la expresin de oxidacin del cido glucnico per iplsmico a
la ruta de la oxidacin directa de glucosa. 2-cetoglucnico (Liu et al., 1992).
La oxidacin directa es una de las cuatro rutas La fisiologa de solubilizacin de fosfato no se ha
metablicas para la utilizacin de glucosa por estudiado completamente. Algunos trabajos indican

Cuadro 2. cidos orgnicos y sus rutas biosintticas en bacterias solubilizadoras de fosfato (BSP).

cido Frmula Ruta biosinttica Bacteria que lo produce Referencia

Actico CH3CO2H Oxidacin incompleta de Acetobacter aceti, Gluconobacter Singh y Amberger


azcares (fermentacin oxydans y Pseudomonas fluorencens (1998a)
actica)

Lctico CH3CHOH2CO2H (Gliclisis) Fermentacin Bacillus liqueniformis y Bacillus Bano y Musarrat


lctica primaria amyloliquefaciens (2003)

Oxlico HO2 CCO2H cidos tricarboxlicos Pseudomonas fluorescens Singh y Amberger


(1998a)

Ctrico HO2 CCH2COHCO2 HCHO2CO2H cidos tricarboxlicos Erwinia herbicola y Yarowia Goldstein (1995);
lipolytica Vassileva et al. (2000)

Butrico CH3(CH2)2 CO2 H Oxidacin anaerobia del Bacillus liqueniformis y Bacillus Wan y Wong (2004)
piruvato amyloliquefaciens

Succnico HO2 CCH3CH2CO2H Ciclo del glioxilato y cidos Pseudomonas putida y Pseudomonas Liu et al. (1992)
tricarboxlicos fluorescens

Mlico HO2 CCHOHCH2 CO2 H cidos tricarboxlicos Bacillus megaterium Singh y Amberger
(1998b)

Glucnico HO2 C(CHOH)4CH2OH Oxidacin directa de la Erwinia herbicola, Pseudomonas Goldstein y Liu (1987)
glucosa cepacia y Burkholderia cepacia

Fumrico HO2 CCOCH2 CO2 H cidos tricarboxlicos Pseudomonas aeruginosa Harrison et al. (1972)

2-Cetoglucnico HO2 CO(CHOH)4CH2OH Oxidacin directa de la Rhizobium leguminosarum , Anderson et al. (1985)
glucosa Rhizobium meliloti y Bacillus
firmus
PAREDES Y ESPINOSA. CIDOS ORGNICOS PRODUCIDOS POR RIZOBACTERIAS QUE SOLUBILIZAN FOSFATO 67

que ciertos elementos minerales juegan un papel en este est involucrado en la biosntesis del cofactor quinona
proceso. Es necesaria una concentracin de K crtica de pirrolo-quinolina presente en un gran nmero de
(concentracin mnima necesaria) para la solubilizacin deshidrogenasas bacterianas que oxidan alcoholes,
ptima, mientras que la concentracin de Mg y Na aldehdos y azcares. Este gen se expresa en E. coli,
parecen ser importantes en algunos hongos (Beever y la cual es capaz de sintetizar la enzima glucosa
Burns, 1980), pero no en Pseudomonas (Illmer y deshidrogenada (GDH), pero no al cofactor PQQ,
Shinner, 1992). Los micr oorganismos pueden esencial para la formacin de la haloenzima. Con la
relacionarse entre s, dando lugar, en muchos casos, a insercin del gen HB101 (pMCG8) en E. coli sta
interacciones sinrgicas que favorecen la nutricin de produce cido glucnico mediante la haloenzima
la planta e incrementan su produccin. Un ejemplo de PQQGDH. La acumulacin de cido glucnico favorece
este sinergismo lo constituye la interaccin entre las la disolucin de minerales, como la hidroxiapatita.
micorrizas y los microorganismos solubilizadores de Posteriormente, Rodrguez et al. (2001) realizaron
fosfato (Toro et al., 1997). Los fosfatos de calcio son trabajos similares. Por otro lado, se han obtenido mutantes
disueltos por la acidificacin, por consiguiente, de Pseudomonas fatiga, Pseudomonas fluorescens
cualquier bacteria que acidifica muestra algn nivel de y Pseudomonas corrugata tolerantes al fro, sin perder
actividad de MSP (Cuadro 2). En la mayora de los su capacidad solubilizadora (Wasaki et al., 2003;
suelos, las reacciones de substitucin del protn se Katiyar y Goel, 2003; Trivedi y Sat, 2008), con la finalidad
manejan para la produccin microbiana de cidos de que el inculo bacteriano sea funcional bajo
orgnicos: temperaturas extremas. Tambin, se han empleando
bacterias inmovilizadas, ya que se ha reportado que estos
[Ca2+]m[PO43 -] n + [HA] = [H+][PO4 3 -] + [Ca2+][A -] (1) sistemas producen una mayor cantidad de cidos
orgnicos y, por lo tanto, una solubilizacin de fosfato
No hay ninguna estequiometra en la Ecuacin 1, ms eficiente (Vassileva et al., 2000; Rekha et al., 2007).
debido a la complejidad qumica del fosfato de calcio y
a que los cidos orgnicos que intervienen en el suelo CONCLUSIONES
difieren en su nmero de protones disociables (Goldstein
et al., 1993). La aplicacin de roca fosfrica al suelo, - En aos recientes se ha optado por la bsqueda de
como fuente de P, requiere de un ambiente apropiado fertilizantes de alta calidad, cuya produccin y uso sean
que facilite el proceso de disolucin de la misma. ste ecolgicamente amigables con el ambiente. En este
se ha descrito para la fluoropatita (Andrew, 1990), de sentido, la bioconversin y consecuente disponibilidad
acuerdo con la ecuacin:
del fosfato de las rocas fosfricas se han convertido en
rea de investigacin promisoria.
Ca10 (PO4)6F2 + 12H+ 10Ca + 6H2PO 4- + 2F- (2)
- El principio bsico de la transformacin biotecnolgica
Se han adjudicado a los cidos orgnicos muchas de los fosfatos naturales reside en la produccin
funciones en el suelo, incluso la adquisicin de bacteriana de cidos orgnicos, principalmente ctrico,
nutrientes por la raz, la solubilizacin mineral, oxlico, glucnico y 2-cetoglucnico que los disuelven,
quimiotaxis microbiana y la detoxificacin de metales dejndolos disponibles para la absorcin por las plantas.
(Jones et al., 2003). Sin embargo, su papel en la mayora - No obstante, se requiere de investigaciones adicionales
de estos procesos sigue siendo desconocido, debido a la con la finalidad de entender de forma ms clara los
falta de evidencias experimentales que expliquen las mecanismos de solubilizacin del fosfato mineral,
reacciones de los cidos orgnicos en el suelo (Singh y los factores que intervienen en este proceso y la funcin
Amberger, 1998b; Jones et al., 2003). de estos cidos en el ciclo del fsforo en el suelo.
- Este conocimiento dar las pautas para optimizar el
AVANCES uso de las bacterias solubilizadoras de fosfatos (BSPs),
as como de los cidos orgnicos que stas sintetizan,
Goldstein y Liu (1987) identificaron y clonaron el con lo que se contribuir a la cultura del uso de
gen HB101 (pMCG8) de Erwinia herbicola, el cual fertilizantes de origen natural.
68 TERRA LATINOAMERICANA VOLUMEN 28 NMERO 1, 2010

LITERATURA CITADA Gerretsen, F. C. 1948. The influence of microorganisms on the


phosphate intake by the plant. Plant Soil 1: 51-81.
Goldstein, A. H. 1986. Bacterial solubilization of mineral
Ahonen-Jonnarth, U., P. A. W. van Hees, U. S. Lundstrm, and R.
phosphates: historical perspective and future prospects.
D. Finlay. 2000. Production of organic acids by mycorrhizal
Am. J. Altern. Agric. 1: 51-57.
and non-mycorrhizal Pinus sylvestris L. seedlings exposed to
Goldstein, A. H. 1995. Recent progress in understanding the
elevated concentrations of aluminium and heavy metals. New
molecular genetics and biochemistry of calcium phosphate
Phytol. 146: 557-567.
solubilization by gram negative bacteria. Biol. Agric. Hortic.
Anderson, S., C. B. Marks, R. Lazarus, J. Miller, K. Stafford,
12: 185-193.
S. Seymour, D. Light, W. Rastetter, and D. Estell. 1985.
Goldstein, A. H. and S. T. Liu. 1987. Molecular cloning and regulation
Production of 2-keto-L-gluconate, an intermediate in
of a mineral phosphate solubilizing gene from Erwinia herbicola.
L-ascorbate synthesis, by a genetically modified Erwinia
Biotechnology 5: 72-74.
herbicola. Science 230: 144-149.
Goldstein, A. H., R. D. Rogers, and G. Mead. 1993. Separating
Andrews, G. F. 1990. Large-scale bioprocessing of solids.
phosphate from via bioprocessing. Biotechnology 11:
Biotechnol. Prog. 6: 225-230.
1250-1254.
Babu-Khan, S., T. C. Yeo, W. L. Martin, M. R. Duron, R. D. Rogers,
Goldstein, A., T. Lester, and J. Brown. 2003. Research on the
and A.H. Goldstein. 1995. Cloning of a mineral phosphate
metabolic engineering of the direct oxidation pathway for
solubilizing gene from Pseudomonas cepacia. Appl. Environ.
extraction of phosphate from ore has generated preliminary
Microbiol. 61: 972-978.
evidence for PQQ biosynthesis in Escherichia coli as well as a
Banik, S. and B. K. Dey. 1982. Available phosphate content of an
possible role for the highly conserved region of quinoprotein
alluvial soil as influenced by inoculation of some isolated
dehydrogenases. Biochim. Biophys. Acta Proteins and
phosphate-solubilizing microorganisms. Plant Soil 69: 353-364.
Proteomics 1647: 266-271.
Banik, S. and B. K. Dey. 1983. Alluvial soil microorganisms capable
Gupta, A. R., A. Singal, R. Sankar, M. Chander, and R. S. Kumar. 1994.
of utilising insoluble aluminium phosphate as a sole source of
A modified plate assay for screening phosphate solubilizing
phosphorus. Z. Allg. Mikrobiol. 138: 437-442.
microorganisms. J. Gen. Appl. Microbiol. 40: 255-260.
Bano, N. and J. Musarrat. 2003. Isolation and characterization of
Gyaneshwar, P., G. N. Kumar, and L. J. Parekh. 1998. Effect of buffering
phorate degrading soil bacteria of environmental and agronomic
on the phosphate-solubilizing ability of microorganisms. World J.
significance. Lett. Appl. Microbiol. 36: 349-353.
Microbiol. Biotechnol. 14: 669-673.
Bashan, Y. 1998. Inoculants of plant growth-promoting bacteria for
Halder, A. K., A. K. Mishra, P. Bhattacharya, and P. K. Chakrabartty.
use in agriculture. Biotechnol. Adv. 16: 729-770.
1990. Solubilization of rock phosphate by Rhizobium and
Baziramakenga, R., R. R. Simard, and G. D. Leroux. 1995.
Bradyrhizobium. J. Gen. Appl. Microbiol. 36: 81-92.
Determination of organic acids in soil extracts by ion
Harrison, M. J., R. E. Pacha, and R. Y. Morita. 1972. Solubilization of
chromatography. Soil Biol. Biochem. 27: 349-356.
inorganic phosphates by bacteria isolated from upper Klamath
Beever, R. E. and D. J. Burns. 1980. Phosphorus uptake, storage
Lake sediment. Limnol. Oceanogr. 17: 50-57.
and utilization by fungi. Adv. Bot. Res. 8: 127-219.
Hoffland, E. 1992. Quantitative evaluation of the role of organic acid
Bric, J. M., R. M. Bostock, and S. E. Silverstone. 1991. Rapid in situ
exudation in the mobilization of rock phosphate by rape. Plant
essay for indolacetic production by bacteria immobilized on
Soil 140: 279-289.
nitrocellulose membrane. Appl. Environ. Microbiol. 57: 535-538.
Hwangbo, H., R. D. Park, Y. W. Kim, Y. S. Rim, K. H. Park, T. H. Kim,
Conn, V. M. and C. M. Franco. 2004. Analysis of the endophytic
J. S. Suh, and K. Y. Kim. 2003. 2-Ketogluconic acid production
actinobacterial population in the roots of wheat (Triticum
and phosphate solubilization by Enterobacter intermedium. Curr.
aestivum L.) by terminal restriction fragment length
Microbiol. 47: 87-92.
polymorphism and sequencing of 16S rRNA clones. Appl.
Igual, J. M., A. Valverde, E. Cervantes, and E. Velazquez. 2001.
Environ. Microbiol. 70: 1787-1794.
Phosphate-solubilizing bacteria as inoculants for agriculture: use
Coyne, M. 2000. Microbiologa del suelo: un enfoque exploratorio.
of updated molecular techniques in their study. Agronomie 21:
Paraninfo D. L. Madrid, Espaa.
561-568.
Cunningham, J. E. and C. Kuiack. 1992. Production of citric and
Illmer, P. and F. Schinner. 1992. Solubilization of inorganic phosphates
oxalic acids and solubilization of calcium phosphate by
by microorganisms isolated from forest soil. Soil Biol. Biochem.
Penicillium bilajii. Appl. Environ. Microbiol. 58: 1451-1458.
24: 389-395.
Das, K., V. Katiyar, and R. Goel. 2003. P solubilization potential
Illmer, P. and F. Schinner. 1995. Solubilization of inorganic calcium
of plant growth promoting Pseudomonas mutants at low
phosphates solubilization mechanisms. Soil Biol. Biochem. 27:
temperature. Microbiol. Res. 158: 359-362.
257-263.
Drouillon, M. and R. Merckx. 2003. The role of citric acid as a
Illmer, P., A. Barbato, and F. Schinner. 1995. Solubilization of hardly-
phosphorus mobilization mechanism in highly P-fixing soils.
soluble AlPO4 with P-solubilizing microorganisms. Soil Biol.
Gayana Bot. 60: 55-62.
Biochem. 27: 265-270.
Duff, R. B., D. M. Webley, and R. O. Scott. 1963. Solubilization of
Jones, D. L., P. G. Dennis, A. G. Owen, and P. A. W. van Hess. 2003.
minerals and related materials by 2-ketogluconic acid-producing
Organic acid behavior in soils-misconceptions and knowledge gaps.
bacteria. Soil Sci. 95: 105-114.
Plant Soil 248: 31-41.
Fuentes-Ramrez, L. E., J. Caballero-Mellado, J. Seplveda y
Katiyar, V. and R. Goel. 2003. Solubilization of inorganic phosphate
E. Martnez-Romero. 1999. Colonization of sugarcane by
and plant growth promotion by cold tolerant mutants of
Acetobacter diazotrophicus is inhibited by high N-fertilization.
Pseudomonas fluorescens. Microbiol. Res. 158: 163-168.
FEMS Microbiol. Ecol. 29: 117-128.
PAREDES Y ESPINOSA. CIDOS ORGNICOS PRODUCIDOS POR RIZOBACTERIAS QUE SOLUBILIZAN FOSFATO 69

Katznelson, H. and B. Bose. 1959. Metabolic activity and Rodrguez, H., T. Gonzalez, and G. Selman. 2001. Expression of a
phosphate-dissolving capability of bacterial isolates from wheat mineral phosphate solubilizing gene from Erwinia herbicola in
roots, rhizosphere, and non-rhizosphere soil. Can. J. Microbiol. two rhizobacterial strains. J. Biotechnol. 84: 155-161.
5: 79-85. Sackett, W. G., A. J. Patter, and C. W. Brown. 1908. The solvent
Kim, K. Y., D. Jordan, and H. B. Krishnan. 1997. Rahnella aquatilis, action of soil bacteria upon the insoluble phosphates of raw
a bacterium isolated from soybean rhizosphere, can solubilize bone meal and natural raw rock phosphates. Zbl. Bacteriol 28:
hydroxyapatite. FEMS Microbiol. Lett. 153: 273-277. 228.
Kucey, R. M. N, H. H. Janzen, and M. E. Leggett. 1989. Microbially Sagoe, C. I., T. Ando, K. Kouno, and T. Nagaoka. 1998. Effects of
mediated increases in plant-available phosphorus. Adv. Agron. organic-acid treatment of phosphate rocks on the phosphorus
42: 199-228. availability to Italian ryegrass. Soil Sci. Plant Nutr. 43:
Lemanceau, P. 1992. Effets benefiques de rhizobacteries sur les 1067-1072.
plantes: exemple des Pseudomonas spp. fluorescent. Scheffer, F. und P. Schachtschabel. 1998. Lehrbuch der Bodenkunde.
Agronomie 12: 413-437. Enke. Stuttgart, Germany.
Lin, T. F., H. I. Huang, F. T. Shen, C. C. Young. 2006. The protons Sharan, A., Shikha, Darmwal N. S. and Gaur S. 2008. Xanthomonas
of gluconic acid are the major factor responsible for the campestris, a novel stress tolerant, phosphate-solubilizing
dissolution of tricalcium phosphate by Burkholderia cepacia bacterial strain from salinealkali soils. World J. Microbiol.
CC Al74. Bioresour. Technol. 97: 957-960. Biotechnol. 24: 753-759.
Lindsay, W. L. 1979. Chemical equilibrial in soil. John Wiley. New Singh, C. P. and A. Amberger. 1998a. Organic acids and phosphorus
York, NY, USA. solubilization in straw composted with rock phosphate.
Liu, T. S., L. Y. Lee, C. Y. Tai, C. H. Hung, Y. S. Chang, J. H. Bioresour. Technol. 63: 13-16.
Wolfram, R. Rogers, and A. H. Goldstein.1992. Cloning of an Singh, C. P. and A. Amberger. 1998b. Solubilization of rock
Erwinia herbicola gene necessary for gluconic acid production phosphate by humic and fulvic acids extracted from straw
and enhanced mineral phosphate solubilization in Escherichia compost. Agrochimica 41: 221-228.
coli HB101: nucleotide sequence and probable involvement in Song, O. R., S. J. Lee, Y. S. Lee,S. C. Lee, K. K. Kim, and Y. L. Choi.
biosynthesis of the coenzyme pyrroloquinoline quinone. 2008. Solubilization of insoluble inorganic phosphate by
J. Bacteriol. 174: 5814-5819. Burkholderia cepacia DA23 isolated from cultivated soil. Braz.
Loganathan, P. and S. Nair. 2004. Swaminathania salitolerans gen. J. Microbiol. 39: 151-156.
nov., sp. nov., a salt-tolerant, nitrogen-fixing and phosphate- Sperber, J. I. 1958a. Solution of apatite by soil microorganisms
solubilizing bacterium from wild rice (Porteresia coarctata producing organic acids. Austr. J. Agric. Res. 9: 782-787.
Tateoka). Int. J. Syst. Evol. Microbiol. 54: 1185-1190. Sperber, J. I. 1958b. The incidence of apatite-solubilizing organisms
Moghimi, A. and E. Tate. 1978. Does 2-ketogluconic chelate calcium in the rhizosphere and soil. Austr. J. Agric. Res. 9: 778-781.
in the pH range 2.4 to 6.4? Soil Biol. Biochem. 10: 289-292. Stephen, J. and M. S. Jisha. 2009. Buffering reduces phosphate
Ohtake, H., H. Wu, K. Imazu, Y. Anbe, J. Kato, and A. Kuroda. solubilizing ability of selected strains of bacteria. World J.
1996. Bacterial phosphonate degradation, phosphite oxidation Agric. Sci. 5: 135-137.
and polyphosphate accumulation. Resour. Conserv. Recy. 18: Stevenson, F. J. 1967. Organic acids in soil. pp. 119-146. In: A. D.
125-134. Mclaren and G. H. Peterson. (eds). Soil biochemistry. Marcel
Park, K. H., C. Y. Lee, and H. J. Son. 2009. Mechanism of insoluble Dekker. New York, NY, USA.
phosphate solubilization by Pseudomonas fluorescens RAF15 Strobel, B. W. 2001. Influence of vegetation on low-molecular-weight
isolated from ginseng rhizosphere and its plant growth- carboxylic acids in soil solution: A review. Geoderma
promoting activities. Lett. Appl. Microbiol. 49: 222-228. 99: 169-198.
Peix, A., R. Rivas, I. Santa-Regina, P. F. Mateos, E. Martnez- Struthers, P. H. and D. H. Sieling. 1959. Effects of organic anions
Molina, C. Rodrguez-Barrueco, and E. Velzquez. 2004. on phosphate precipitation by iron and aluminum as influenced
Pseudomonas lutea sp. nov., a novel phosphate-solubilizing by pH. Soil Sci. 69: 205-213.
bacterium isolated from the rhizosphere of grasses. Int. J. Syst. Tarafdar, J. C. and N. Claassen. 1988. Organic phosphorus
Evol. Microbiol. 54: 847-850. compounds as a phosphorus source for higher plants through
Rekha, P. D., W. A. Lai, A.B. Arun, and C. C. Young. 2007. Effect of the activity of phosphatases produced by plant roots and
free and encapsulated Pseudomonas putida CC-FR2-4 and microorganisms. Biol. Fertil. Soils 5: 308-312.
Bacillus subtilis CC-pg104 on plant growth under gnotobiotic Toro, M., R. Azcon, and J. M. Barea. 1997. Improvement of
conditions. Bioresour. Technol. 98: 447-451. arbuscular mycorrhiza development by inoculation of soil with
Richardson, A. E. 1994. Soil microorganisms and phosphorus phosphate-solubilizing rhizobacteria to improve rock
availability. pp. 5062. In: C. E. Pankhurst, B. M. Doube, phosphate bioavailability (32P) and nutrient cycling. Appl.
W. S. R. Grupta, and P. R. Grace (eds). Soil biota: management Environ. Microbiol. 63: 4408-4412.
in sustainable farming systems. Commonwealth Scientific Torriani-Gorini, A. 1994. Regulation of phosphate metabolism and
Institute Research Organization. Melbourne, Australia. transport. pp. 1-4. In: A. Torriani-Gorini, E. Yagil, and S. Silver
Richardson, A. E. 2001. Prospects for using soil microorganisms to (eds). Phosphate in microorganisms: Cellular and Molecular
improve the acquisition of phosphorus by plants. Austr. J. Biology. ASM Press. Washington, DC, USA.
Plant Physiol. 28: 897-906. Trivedi, P. and T. Sat. 2008. Pseudomonas corrugata (NRRL B-
Rodrguez, H. and R. Fraga. 1999. Phosphate solubilizing bacteria 30409) mutants increased phosphate solubilization, organic
and their role in plant growth promotion. Biotechnol. Adv. 17: acid production, and plant growth at lower temperatures. Curr.
319-339. Microbiol. 56: 140-144.
70 TERRA LATINOAMERICANA VOLUMEN 28 NMERO 1, 2010

Vassileva, M., R. Azcon, J. Barea, and N. Vassilev. 2000. Rock Velzquez, E. and C. Rodrguez-Barrueco. 2007. First International
phosphate solubilization by free and encapsulated cells of Meeting on Microbial Phosphate Solubilization. Plant Soil 287:
Yarowia lipolytica. Process Biochem. 35: 693-697. 1-84.
Vazquez, P., G. Holguin, M. E. Puente, A. Lopez-Cortes, and Wan, J. H. C. and M. H. Wong. 2004. Effects of earthworm activity
Y. Bashan. 2000. Phosphate-solubilizing microorganisms and P-solubilizing bacteria on P availability in soil. J. Plant Nutr.
associated with the rhizosphere of mangroves in a semiarid Soil Sci. 167: 209-213.
Wasaki, J., T. Yamamura, T. Shinano, and M. Osaki. 2003. Secreted
coastal lagoon. Biol. Fertil. Soils 30: 460-468.
acid phosphatase is expressed in cluster roots of lupin in response
to phosphorus deficiency. Plant Soil 248: 129-136.