3.

1 Metodologa

3.4.1 Determinacin de Grasa

Mtodo 963.15 AOAC (1995)
Mtodo de Extraccin por Soxhlet.
3.4.2 Determinacin de Acidez del polvo soluble
Mtodo IOCCC 37 (1990).
3.4.3 Determinacin del Contenido de Humedad
Mtodo 44.19 (AOAC 2000)
3.4.4 Protena Total
Mtodo Micro Kjeldahl 960.52AOAC (1990)

Anexo 1. Determinacin de la Cantidad de Grasa

Mtodo 963.15 AOAC (1995) Mtodo de Extraccin por Soxhlet
La extraccin consiste en el lavado sucesivo de una mezcla solida con un determinado
solvente lavando de la mezcla los componentes ms solubles, se puede extraer con
hexano, ter, cloroformo, etanol o acetato de etilo.
- Pesar 5 a 20 gramos de muestra molida con 3 repeticiones.
- Colocar la muestra en un cartucho de un papel filtro formando un
pequeo paquete sujetado con pabilo
- Pesar el paquete envuelto con pabilo.
- Introducir en el solvente de ter de petrleo o hexano en cantidad de 120
ml sobre la cmara Soxhlet
- Calentar el baln a cierta distancia alejado de la hornilla para empezar la
evaporacin del solvente condense y empieza el lavado de la muestra.
(Tironeada).
- El tiempo de proceso es de 2.5 a 3 horas hasta que el solvente que rodea
el cartucho tenga color cristalina y transparente.
- Pesar el cartucho sin pabilo.

(
% = = ( )
100

Anexo 2. Determinacin de Acidez

Procedimiento
- Se pesan de 9 a 10 g de muestra y se colocan en un matraz Erlenmeyer,
se llevan a 100 ml con agua y se agitan vigorosamente.
 - Posteriormente se titula con solucin de Hidroxilo de Sodio, usando
como indicador 2 ml de fenolftalena; la solucin se agrega hasta que el
punto de viraje a rosa tenue persista por 15 segundos.
- Para que la coloracin del cacao no influya se puede utilizar el mtodo
potencio mtrico.
Anexo 3. Determinacin de Humedad (AOAC 2000 - Mtodo 44.19)

Equipos:

Platos de humedad de aluminio, dimetro de aproximadamente 55 mm, no ms de 40

mm de profundidad, y provistos de tapa deslizable. Horno con secador de aire.

Procedimiento

- Llevar la muestra y pasar por el tamiz con aberturas circulares de 1 mm

(1/25 pulg.) de dimetro y mezclar bien.
- Si la muestra no se puede moler, reducir a la condicin tan bien como sea
posible.
- Pesar la muestra (2 g 1 mg) en cada plato, con tapas removidas, colocar
los platos con tapas en el horno y secar las muestras por 2 horas a 135C.
(Secado periodo comienza cuando la temperatura del horno es en
realidad 135C) trasladar la muestra con el plato al desecador, enfriar.
Pesar y calcular la prdida de peso como la humedad segn la Ecuacin

% = 100

% = 100 %

100 =%

Anexo 4. Protena Total - Mtodo Kjeldahl

Procedimiento
- Efectuar un ensayo en blanco usando una sustancia orgnica sin
nitrgeno (sacarosa) que sea capaz de provocar la reduccin de los
derivados ntricos y nitrosos eventualmente presentes en los reactivos.
- Pesar al 0.1 mg. alrededor de 1 g de muestra homogeneizada (m) en un
matraz de digestin Kjeldahl.
- Agregar 3 perlas de vidrio, 10 g de sulfato de potasio o sulfato de sodio,
0.5 g de sulfato cprico y 20 mL de cido sulfrico concentrado.
 - Conectar el matraz a la trampa de absorcin que contiene 250 mL de
hidrxido de sodio al 15 %.
- Enfriar y agregar 200 mL de agua.
- Conectar el matraz al aparato de destilacin, agregar lentamente 100 mL
de NaOH al 30 % por el embudo, y cerrar la llave.
- Destilar no menos de 150 mL en un matraz que lleve sumergido el
extremo del refrigerante o tubo colector en:
a) 50 mL de una solucin de cido sulfrico 0.1 N, 4 a 5 gotas de rojo de
metilo y 50 mL de agua destilada. Asegurar un exceso de H2SO4 para
que se pueda realizar la retrotitulacin. Titular el exceso de cido con
NaOH 0.1 N hasta color amarillo o
b) 50 mL de cido brico al 3 %. Titular con cido clorhdrico 0.1 N hasta
pH 4.6 mediante un medidor de pH calibrado con soluciones tampn
pH 4 y pH 7, o en presencia del indicador de Tashiro hasta pH 4.6
Cada cierto tiempo es necesario verificar la hermeticidad del equipo
de destilacin usando 10 mL de una solucin de sulfato de amonio 0.1
N (6.6077 g/L), 100 mL de agua destilada y 1 a 2 gotas de hidrxido
de sodio al 30 % para liberar el amonaco, as como tambin verificar
la recuperacin destruyendo la materia orgnica de 0.25 g de L(-)-
Tirosina.
14 100
% =
1000

14 100
% =
1000
Dnde: V: 50 ml H2SO4 0.1 N gasto NaOH 0.1 N o gasto de HCl 0.1 N

m = masa de la muestra, en gramos.