METODOLOGA

Formulas

M: mol/L mol: w/ P.M

M x L: mol w: mol x P.M

OPERACIONES

mol:(0.05 mol/ L) (0.15 L)= 7.5* 10 a la -3mol

w: (7.5* 10 a la -3mol) (342.29g/mol)= 2.56g
mol:(0.1 mol/ L) (0.15 L): 0.015mol
w: (0.015mol) (342.29g/mol)= 5.13g
mol:( 0.20mol/ L) (0.15 L): 0.03mol
w: (0.03mol) (342.29g/mol)= 10.26g
mol:( 0.25mol/ L) (0.15 L): 0.0375mol
w: (0.0375) (342.29g/mol)= 12.83g
mol:( 0.3mol/ L) (0.15 L): 0.045mol
w: (0.045mol) (342.29g/mol)= 15.4g
mol:( 0.4mol/ L) (0.15 L): 0.06mol
w: (0.06mol) (342.29g/mol)= 20.53g
mol:( 0.5mol/ L) (0.15 L): 0.075mol
w: (0.075mol) (342.29g/mol)=25.67g
mol:( 0.6mol/ L) (0.15 L): 0.09mol
w: (0.09mol) (342.29g/mol)= 30.8g
mol:( 0.7mol/ L) (0.15 L): 0.105mol
w: (0.105mol) (342.29g/mol)= 35.94g
 Tubo 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10

Solucin de 0 0.05 0.10 0.20 0.25 0.30 0.4 0.5 0.6 0.7
sacarosa (Agua
(concentracin destilada)
Molal)
Mol/kg 2.56g 5.13g 10.26g 12.83g 15.4g 20.53g 25.67g 30.8g 35.94g
Se prepar las siguientes soluciones, para obtener el amortiguador de succinato CaCl2 pH 5 se pes CaCl2 1.416 g en 600 ml de
cido succnico en el cual se ajust a un pH 5 con NaOH 0.1M.Patrn de maltosa (500/ml) se obtuvo al disolver 0.05 g de maltosa en
100 ml de agua destilada. En la solucin de almidn (20 mg/ml), se disolvi 800 mg de almidn soluble en ml de agua destilada en
donde posteriormente se agreg a 15 ml de agua hirviendo por un minuto. Finalmente se adiciono 20 ml de amortiguador de
succinato-CaCl2. Para obtener el reactivo l se prepararon dos soluciones, solucin A y B. para la solucin A, en 50 ml de agua
destilada se mezclaron 2.5 gr de carbonato de sodio anhidro, 2.5 g de tartrato doble de sodio y potasio, 2 gr de bicarbonato de sodio,
20 gr de sulfato de sodio anhidro posteriormente se agit y se afor a 100 ml. Para la solucin B se hizo una mezcla de 40 ml de
agua destilada, 6 gr de sulfato de cobre y una gota de cido sulfrico, y se agit en la parrilla hasta que se disolvi. Finalmente se
tom 1 ml de la solucin B y se mezcl con 25 ml de solucin A para formar el reactivo l.
En la preparacin del reactivo II se pes 5 g de molibdato de amonio en el cual se disolvi en 100 ml de agua destilada que contena
ya previamente 4.2 ml de cido sulfrico concentrado. Por separado se pes 0.6 g de arsenato de sodio heptahidratado y se le agreg
en 5 ml de agua destilada, de igual manera se disolvi, y se agreg a la solucin anterior con agitacin constante, despus se afor
a 100 ml y se coloc en un bao de agua a 55C durante 30 minutos.
Posteriormente en seis tubos de ensayo se agreg las diferentes concentraciones de cada solucin ya preparadas como se muestra
en la tabla 1.
En la siembra y tratamiento de los granos se seleccion 30 granos de maz en el cual:
Se sembraron 10 granos en una hoja de toalla absorbente humedecida.
Se imbibicin de la misma manera otros 10 granos, transcurrido 1 da, se hizo una incisin en la testa y a este grupo de granos
se les aplic el tratamiento con giberelinas durante 2 das.
Se puso 10 granos a remojar en agua.

En la preparacin del extracto enzimtico, se seleccion dos granos de cada tiempo de imbibicin en el cual a cada uno de los granos
quitamos la plntula y escutelo, solo dejando el endodermo almidonoso y despus pesamos los dos granos de cada tiempo de
imbibicin. Posteriormente se prepar un extracto enzimtico para cada tiempo de imbibicin en el cual se macer el endospermo
de los dos granos en un mortero previamente fro con 5 ml de la solucin amortiguadora de succinato, despus se vaci en un tubo y
se lav el mortero con otros 5 ml donde se le agreg en el mismo tubo, luego se coloc en un tubo de centrfuga para pesarlo con el
fin de equilibrarlo con los dems tubos de centrfuga. Se centrifug 20 min a 3000 rpm, al concluir se separ el sobrenadante y se
desech la pastilla. Ya a partir de los sobrenadantes se prepar las diluciones usando el buffer de succinato.

Posteriormente se realiz la reaccin enzimtica y la determinacin de azcares reductores totales por la hidrlisis enzimtica del
almidn en los extractos de embriones de maz.