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Ncleo interf

Ncleo sico
interfsico Prof. Ivn Rebolledo

Introduccin histrica Generalidades estructurales

En 1876, Balbiani observ estruc- Con el uso de colorantes bsicos


turas cilndricas en el ncleo, previo se encontr que en los ncleos
a su divisin. En 1871, Miescher interfsicos, la cromatina puede
design como nucleina al compuesto encontrarse en estado condensada
fosforado encontrado en el (heterocromatina) o en forma
espermatozoide de salmn. En dispersa (eucromatina). La hetero-
1879, Flemming acu el trmino de cromatina tiende a adherirse al lado
cromatina para nombrar a la interno de la envoltura nuclear.
sustancia que se colorea intensa-
mente con colorantes bsicos. En La envoltura nuclear es una
1888, Waldeyer us el nombre de cisterna perinuclear conformada por
cromosoma para sealar las dos membranas, una externa y otra
estructuras cilndricas observadas interna, entre las cuales se
aos atrs. encuentra el espacio perinuclear y
que se encuentra atravesada por los
Recordemos que la envoltura llamados complejos de poro nuclear.
nuclear es la estructura citolgica
que marca la clasificacin de clulas El espacio interior del ncleo
procariticas y eucariticas. Los suele llamarse nucleoplasma, el
trminos procarionte (pro, antes de y cual puede contener uno o varios
karyon, ncleo) para la vida cuerpos denominados nuclolos que
pronuclear y eucarionte (eu, poseen una alta concentracin de
verdadero y karion, ncleo) para los molculas de ARNr, protenas y
organismos nucleados fueron subunidades de los ribosomas. El
sugeridos por Hans Ris en los aos nucleoplasma muestra tambin
60, siendo aceptados hasta ahora. grnulos densos ricos en nucleo-
protenas que contienen precursores
de los ARN.
El trmino interfsico proviene de
un lapso de tiempo en que la clula El ncleo parece tener una
no est en divisin. Creo que el estructura interna que organiza los
esquema de abajo aclare esto. materiales internos y localiza
algunas funciones en sitios precisos,
de aqu que se est hablando de la
Mitosis Interfase Mitosis matriz nuclear, como una especia
de esqueleto estructural del ncleo.

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Envoltura nuclear(*) Las membranas llegan a fusionarse


a nivel de los complejos de poro, la
La envoltura nuclear separa el nica va que pueden utilizar las
contenido del ncleo del citoplasma, pequeas molculas polares y
acta como barrera que impide que macromolculas para entrar o salir
molculas no autorizadas puedan del ncleo.
entrar o salir y as mantiene un
compartimiento bioqumico muy Subyacente a la membrana interna
regulado e independiente. de la envoltura nuclear se encuentra
la lmina nuclear: una trama fibrosa
La envoltura nuclear est que le da soporte a la envoltura
conformada por dos membranas nuclear. Esta lmina est
nucleares, una lamina nuclear conformada por protenas fibrosas
subyacente y complejos de poro llamadas lmina (60-80 kd), de las
nuclear. Las membranas son una cuales existen 4 variedades (A, B1,
externa y otra interna. La membrana B2 y C) y que corresponden al tipo V
externa se contina con el RE de tal de los filamentos intermedios.
forma que el espacio perinuclear se Adems de proporcionar soporte a la
comunica con el lumen del RE. envoltura nuclear se piensa que
Adems, esta membrana externa es sirve como punto de unin a las
molecular y funcionalmente similar a diferentes asas del ADN. Por ltimo,
la membrana del RER; an ms, estas protenas logran unirse a
existen ribosomas asociados a la protenas de la membrana interna de
superficie externa de la membrana la envoltura nuclear.
externa.
(*) no debe hablarse de membrana nuclear para
referirse a la envoltura nuclear, pues sta la conforman
dos membranas.

C
A
D E
Micrografa electrnica que muestra un sector de la envoltura nuclear. A, citosol; B,
nucleoplasma; C, complejo de poro; D, ribosomas; E, membranas nucleares.

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Complejo de poro Se ha establecido la presencia de


una pequeas hendiduras ( 10 nm
El complejo de poro es el nico ) entre los complejos octogonales
canal por el cual pueden atravesar que podran representar pasos a
las molculas polares, los iones y las travs de los cuales podran cruzar
macromolculas (protenas, ARN, pequeas molculas no inicas
subunidades del ribosoma). Es una (lisozima, 14 kd; ovoalbmina, 44
estructura muy compleja con un kd).
de 120 nm y un peso molecular
estimado en 125 millones de daltons En ovocitos, espermatocitos y
Al ME se visualiza una estructura clulas embrionarias se han
octogonal alrededor de un gran encontrado en el citosol las llamadas
canal central. El uso de otras laminillas anulares, que son unas
tcnicas han sugerido un modelo formaciones membranosas apiladas
muy particular, que se muestra aqu. con abundantes complejos de poro.
Se postula que podran representar
una forma de almacenamiento de
citoplasma Membrana
externa
complejo de poro preformados.

Importacin selectiva

Es evidente de las diferentes


funciones que suceden dentro del
ncleo, la presencia de muchas
protenas las cuales son todas
sintetizadas en el citoplasma.

nucleoplasma
Membrana
interna
Como Ud. ya sabe, las protenas
sintetizadas en el citosol disponen
de una secuencia seal que permite
Puede verse la presencia de dos dirigirlas hacia el RER, en caso
anillos de 8 unidades cada uno: uno contrario se quedarn en el citosol.
citoslico y otro nuclear. Adems Como una extensin de este
hay protenas filamentosas que se principio, le resumir unos
extienden desde estos anillos hacia resultados experimentales de Alan
cada compartimiento. Por ltimo, se Smith(*) sobre la identificacin de la
ve el tapn central, cuya naturaleza secuencia seal nuclear.
est en estudio.
(*) Cell 39:499-509 (1984)

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Utiliz como modelo una protena La importacin de la protena a


llamada antgeno T del virus SV40, travs del complejo de poro puede
de 94 kd y necesaria para que el ser operacionalmente dividida en
virus pueda replicarse dentro del dos etapas. En la primera etapa la
ncleo de las clulas infectadas. secuencia de localizacin nuclear es
reconocida por un receptor citoslico
Cuando se obtuvo una mutacin y el complejo se une al complejo de
de esta protena en la lisina ubicada poro. Este receptor se denomina
en la posicin nmero 128, la importina y posee dos cadenas
protena permaneca en el citosol y polipeptdicas: alfa, que se une a la
no ingresaba al ncleo. Para probar secuencia y beta, media la unin del
la hiptesis de una secuencia de complejo con el complejo de poro.
sealizacin nuclear, otros investiga-
dores fraccionaron la protena en 3
sectores: 1-126; 127-133 y 134
hasta el C terminal. Encontraron que
el primer y tercer sector poda entrar
al ncleo, no as el segundo. Secuencia sealizacin nuclear

Pareca que este sector era la seal


para que la protena entrara al Importina
ncleo.

Ahora viene lo grandioso: tomaron


este sector intermedio (127-133) y lo
aadieron a protenas que
normalmente permanecen en el
citosol. Qu cree Ud. que sucedi? Membrana
nuclear
Pues s seor, esas protenas (- externa
galactosidasa; piruvato kinasa)
puderon entrar al ncleo.

Conclusin: esta secuencia de 7


aminocidos representa la
secuencia seal nuclear para las
protenas que deben ingresar al
ncleo. Posteriores estudios Membrana
determinaron que esta secuencia la nuclear
integran PKKKRKV (averigue a interna

cules aminocidos corresponden).

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La segunda etapa corresponde a Como se aprecia en la tabla, las


la translocacin de la protena a histonas y el ADN se encuentran en
travs del complejo de poro. Esta una relacin aproximada de 1:1.
etapa requiere de energa Esto sugiere una relacin molecular.
proporcionada por hidrlisis del ATP. Las histonas son protenas
El complejo protena-receptor se une pequeas con alto contenido de
a las protenas del anillo proteico arginina y lisina. Existen 5 varie-
externo, cambia su configuracin y dades de histonas denominadas: H1,
desprende la subunidad beta. Con H2A, H2B, H3 y H4. Estas protenas
ayuda energtica el resto penetra. son bsicas y pueden unirse
fuertemente al ADN que es cido
Una protena necesaria para la (por su contenido en PO4). Las
translocacin es la llamada Ran que histonas ricas en arginina son la H3 y
maneja ciclos de GTP-GDP. Se H4; las ligeramente ricas en lisina
considera que intervenga en la son las H2A y H2B; y la rica en lisina
disociacin de la otra subunidad. es la H1.

Cromatina 2 molculas de c/u


H2A, H2B, H3 y H4
El ADN es la principal compo-
nente gentico de la clula, que se
halla en el ncleo de las clulas
eucariticas, formando un complejo
con protenas denominado
cromatina. La siguiente tabla
resume la composicin porcentual
de los componentes de la cromatina
en ncleos de hepatocitos.

Hay ms de mil protenas no


COMPONENTE % histnicas diferentes, comprometi-
das en una serie de actividades
ADN 31
nucleares, principalmente la
ARN 5 replicacin y la transcripcin. Como
ejemplos recordamos: ADN
Histonas 32 polimerasas, ARN polimerasas,
helicasa, primasa, topoisomerasa,
Protenas no-histonas 28
etc. etc.

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La unidad estructural bsica de la Esta secuencia de nucleosomas


cromatina es el nucleosoma conforma una fibra de 10 nm ,
(mostrado en la figura anterior) llamada fibra delgada. Esta forma
descrito por Roger Kornberg (1974). de empaque del ADN acorta su
Propuso que cada nucleosoma longitud en unas seis veces. Luego,
estaba formado por un sector de esta fibra delgada se pliega
ADN de 146 pares de bases que conformando una fibra gruesa de
daban casi dos vueltas (1.75) 30 nm , en la cual se ubican unos
alrededor de un centro de 8 histonas 6 nucleosomas por vuelta de hlice.
Las histonas que integran dicho Las fibras gruesas se observan en
centro son dos de cada una de las los cromosomas metafsicos y en
siguientes histonas : H2A, H2B, H3 y parte del ncleo interfsico.
H4. La histona H1 se ubica en el sitio
en que el ADN entra y sale del
nucleosoma. Entre los nucleosomas Eucromatina y
hay trozos de ADN de 60 pares de heterocromatina
bases. Al ME esta configuracin
puede verse como si fuera un collar Cuando las clulas no estn en
de cuentas. divisin, gran parte de la cromatina
est descondensada y distribuida en
todo el ncleo, suele llamarse
eucromatina. Durante este perodo
del ciclo celular, los genes son
transcritos y ADN puede replicarse.
Gran parte de la eucromatina se
encuentra en forma de fibras
gruesas de 30 nm, las cuales suelen
organizarse en grandes asas.

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Asa gruesa
de ADN Nuclolo

La subestructura ms prominente
dentro del ncleo es el nuclolo, el
cual es el sitio de transcripcin y
procesamiento del ARNr y del
Protena
ensamble de las subunidades del
andamio
ribosoma. Las clulas que realizan
intensa sntesis de protenas
muestran un notable nuclolo. El
La cromatina interfsico posee un nuclolo es la fabrica de las
10 % de heterocromatina: un subunidades del ribosoma, las
estado muy condensado similar a la cuales abandonan el ncleo a travs
cromatina de las clulas que estn del complejo de poro para ir a unirse
en mitosis. La heterocromatina es al ARNm e iniciar la sntesis de
transcripcionalmente inactiva y protenas.
contiene muchas secuencias
repetidas, tales como las que se Morfolgicamente, el nuclolo
encuentran en los centrmeros y comprende tres regiones concn-
telmeros (averige qu son estas tricas: centro fibrilar laxo, medio
estructuras). Cuando las clulas fibrilar denso y externo granular. Se
entran en mitosis, su cromatina llega consideran que estas regiones
a condensarse a un nivel mximo representan los sitios de estados
para conformar los cromosomas, progresivos de la transcripcin,
visibles al MO. procesamiento y ensamble de las
subunidades de los ribosomas. As,
los genes para los ARNr estn
localizados y se transcriben en la
regin central y media. El
procesamiento y ensamble de las
subunidades de los ribosomas, es
decir, la unin de los ARNr con las
protenas, se inicia en la regin
media y contina en la regin
externa, desde donde las
subunidades estn listas para ser
exportadas hacia el citosol a travs
de los complejo de poro.

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Matriz nuclear Aplicacin mdica

La matriz nuclear es el esqueleto Existe una enfermedad llamada


estructural del ncleo. Varios lupus eritematoso sistmico, del tipo
cientficos llegaron a este concepto de las enfermedades autoinmunes,
luego de aplicar ADNasas para que produce erupciones en la piel,
digerir gran parte del ADN y buffer artritis y alteraciones renales. Es
muy salinos para extraer gran parte ms frecuente en mujeres que en
de las histonas y otras protenas. varones, con edades promedio entre
Como comprender, despus de 20 y 60 aos.
extraer todo el contenido del ncleo,
debiera variar la forma e integridad Una enfermedad autoinmune
del ncleo. Pues no ocurri as, sino sucede cuando el organismo
que qued una trama residual que produce anticuerpos contra sus
mantuvo la forma y tamao original propios constituyentes celulares
del ncleo. Esto nos lleva a que la normales. En el caso del Lupus, se
matriz nuclear es comparable al producen anticuerpos contra
citoesqueleto que mantiene la forma componentes del ncleo: el ADN,
celular. Adems, se ha confirmado histonas, protenas cromosmicas y
su importancia en movimientos ribonucleoprotenas pequeas
direccionales de ciertos productos, nucleares (RNPsn).
tales como los ARNm, las
subunidades ribosomales, etc. El diagnstico histolgico se hace
precisamente detectando los
Como es un punto de activa anticuerpos antinucleares con
investigacin, se empieza a sustancias fluorescentes.
considerar que estos filamentos de
la matriz estaran constituidos por Debido a que se producen
microfilamentos de actina. Se muchos autoanticuerpos se
sugiere que la orientacin de estos considera que la falla puede
microfilamentos sera desde el encontrarse a nivel de los linfocitos
centro del ncleo hasta sitios ms B, que al transformarse en clulas
perifricos. Serviran como gua de plasmticas son las que producen
los ARN desde su lugar de los anticuerpos.
transcripcin y procesamiento hasta
los complejo de poro.

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