SEPARACIN DE PROTENAS POR CROMATOGRAFA DE EXCLUSIN MOLECULAR

MATERIAL 1-Tampn fosfato 25 mM y ClK 100 mM pH 7. 2-Columna de cromatografa de 30

cm de altura y 1cm de dimetro 3-20 ml de Sephacryl S-200 equilibrados en tampn fosfato 4-
Patrones de alto y bajo peso molecular. A cada grupo se le suministran 3 marcadores de peso
molecular, azul de dextrano y una alcuota de riboflavina 100 mM

METODO -Empaquetar el gel dentro de la columna: con la columna cerrada aadir 5 ml de

tampn fosfato, a continuacin comenzar a aadir los 20 ml de gel debidamente hidratado en
el mismo tampn, lentamente y evitando hacer burbujas de aire dentro de la columna. En este
momento; colocar un recipiente debajo de la columna para recoger el lquido que va a fluir,
abrir la columna para ealizar el proceso de empaquetado. -Lavar bien la columna (aprox. 40
ml). -Marcar 50 tubos -Elucin de la columna: El proceso descrito a continuacin se debe
realizar para cada uno de los marcadores de peso molecular y colorantes por separado, ms
otra vez para la muestra problema. 1-Aplicacin de la muestra. Dejar que la columna gotee
hasta que se elimine todo el tampn de la parte superior del gel. A continuacin aplicar 20 l
de la muestra. 2-Dejar gotear hasta que toda la muestra entre en el gel 3-Colocar el tubo n 1
debajo de la columna y aadir a la columna una alcuota de 400 l de la solucin tampn.
Recoger en el tubo el eludo hasta que se elimine de la parte superior todo el volumen
aplicado. 4-Repetir el paso 3 con cada uno de los tubos numerados

CROMATOGRAFA EN PRUEBA DE EMBARAZO

Procedimiento
Colocar una gota de la muestra de orina en la prueba de embarazo.
Esperar y observar los resultados.

Resultado
Se marcaron dos rayas en la prueba de embarazo. Lo que da a entender como
positivo, debido que la prueba detect HGC en la orina. La primera raya en la
prueba, que contiene Anti HGC, comprueba que se detecto dicha hormona. La
segunda raya demuestra que el reactivo es vlido.