UNIVERSIDAD CIENTFICA DEL SUR

FACULTAD DE MEDICINA HUMANA

LABORATORIO DE BIOLOGA

CURSO: BIOLOGA CELULAR

PROFESOR: JESUS ROJAS JAIMES

INFORME DE PRCTICAS
PRCTICA N 6
TITULO: OBTENCION Y ANALISIS DE ESTRUCTURAS
CELULARES
INTEGRANTES:
Luna Venturo, Christian
Len Jara, David
Lescano Santos, Martn
Huamn Changanaqu, Guillermo
HORARIO de PRCTICAS
DIA: Jueves
HORA: 7:10 am 9:00 am
FECHA de REALIZACION de la PRCTICA: 4 de mayo de 2017
FECHA de ENTREGA del INFORME: 11 de mayo de 2017

LIMA PERU
INTRODUCCIN

Como sabemos por definicin, las clulas eucariotas presentan un

compartimento que encierra al material gentico llamado ncleo, este
a su vez se separa del citoplasma por una envoltura nuclear o
carioteca. Esto deja separado al material gentico en un
compartimento separado del resto de los contenidos de la clula y
del citoplasma, donde se realizan todas sus actividades metablicas.
El citoplasma, adems, presenta varios organelos que realizan
diversas actividades especficas y muy importantes para la clula, por
ejemplo las mitocondrias, cloroplastos, retculo endoplasmico,
aparato de Golgi, lisosomas, peroxisomas y varias estructuras como
los ribosomas y el citoesqueleto.
Para poder estudiar los componentes y funcionalidad de estos
diversos organelos que se encuentra en la clula de una manera muy
especfica, es necesaria la existencia de ciertas tcnicas que nos
ayuden a separarlas de la clula con el menor dao posible, de forma
que no afecte su actividad ni su estructura. Existen diversas
metodologas para observar los componentes celulares sin que
ocurra una alteracin significativa de la misma que pueda perjudicar
la investigacin.
Una de las tcnicas ms significativas para obtener dichas fracciones
celulares es el fraccionamiento celular, el cual es conjunto de
procedimientos que tienen como objetivo principal obtener fracciones
enriquecidas de los organelos o componentes que deseemos enfocar
nuestro estudio. Dependiendo del tipo de estudio que se desee
efectuar, a travs de esta tcnica tambin podemos separar
componentes moleculares.
En todo proceso de fraccionamiento celular se tiene que seguir 3
pasos concretos:
Disgregacin o rotura celular (Homogenizacin)
Filtracin
Centrifugacin
Homogenizacin
Es el paso en el cual el tejido se homogeniza, es decir, se rompen las
clulas con el menor dao posible; normalmente la clula se
encuentra en un solucin isotnica para detener el dao osmtico,
luego se agrega un tampn o buffer para regular el pH y a una
temperatura muy baja para evitar daos enzimticos. Finalmente los
organelos se encuentran en un estado isotnico, frio y tamponado;
luego el resultado es una pasta fina de lquido, el cual contiene
clulas intactas y componentes celulares.

Filtracin
Este paso puede ser a veces no necesario dependiendo del tipo de
clulas. Por ejemplo en el filtrado de un tejido animal si es necesario
el filtrado, de manera que es probable que se liberen restos de tejido
conectivo y estos deben ser eliminados. La filtracin se puede llevar
a cabo ya sea mediante el vertido a travs de un tejido poroso ( el
cual es el procedimiento que se ha usado para realizar este informe)
o a travs de un filtrado de succin empleando el correspondiente
filtro de cermica con un poro adecuado.

Centrifugacin
La centrifugacin es un proceso en el cual se separan solidos de
lquidos de diferente densidad por medio de una fuerza giratoria. La
fuerza centrfuga es provista por una maquina centrifugadora, la cual
brinda a la mezcla un movimiento de rotacin que origina una fuerza
que produce la sedimentacin de los slidos de la partcula de mayor
densidad. Cabe destacar que entre mayor densidad tenga lo que
queremos centrifugar, menor sern las vueltas que necesitaremos
para que esto sedimente.
La centrifugacin puede ser de diferentes tipos, pero los ms
importantes dentro de un laboratorio de biologa celular y molecular
es la centrifugacin en gradiente de densidad y la centrifugacin
diferencial.
La centrifugacin en gradiente de densidad es la mayormente se
utiliza; se sita el lquido fino dentro de un tubo de centrifugacin y
se les da las vueltas correspondientes para que el compuesto que
deseemos enfocar nuestro estudio, sedimente. La centrifugacin
diferencial es aquella que separa los componentes celulares a travs
de centrifugaciones repetitivas, cada vez con mayor velocidad. En
estas circunstancias los componentes celulares se separan en
funcin de su densidad y tamao y se va formando un sedimento en
el fondo.

BIBLIOGRAFA

1. Gerald Karp. Biologa celular y molecular 5ta edicin.

Mexico: Mc Graw Hill: 2009

2. Ville, Claude Biologa. Fraccionamiento celular 1998

3. THERMO, conceptos bsicos de centrifugacin.

Disponible en
http://www.coleparmer.com/TechLibraryArticle/910