Laboratorio de Microbiologa E.A.P.

Gentica y Biotecnologa

Prctica N17:

Virologa: Sistemas de Propagacin Viral. Efecto Citoptico

1. Descripcin del Proceso Experimental

En esta prctica se debi inocular el virus de Influenza a un huevo embrionario de gallina de

entre 7-11 das sin rajaduras, el saco de aire a un extremo del huevo y con el embrin sin estar
pegado a las paredes del huevo. Esta inoculacin debi realizarse a 34C, la temperatura ptima
para el desarrollo del virus en una atmsfera hmeda. No obstante, al no obtenerse embriones
viables para esta prctica todo lo que se mencionar ser meramente terico y bibliogrfico. En
la actualidad sigue utilizndose huevos de gallina como modelo para el estudio de virus, como
en el trabajo de Kandeil donde se determina la importancia de enzimas proteolticas para la
replicacin vrica (Kandeil, y otros, 2014).

2. Descripcin del Efecto Citoptico

Si bien puede darse crecimiento viral sin evidencia citoptica, otros tienden a matar las clulas
hospedadoras generando monocapas infectadas con evidente dao celular, esto ltimo
denominado efecto citoptico (CPE). Para su adecuada distincin debe agregarse colorantes en
diferentes tejidos embrionarios, como es la fucsina en la membrana corioalantoidea y el azul de
metileno en la cavidad amnitica. Tras la incubacin viral es posible distinguir cuerpos de
inclusin, sincitios y otros detalles de la monocapa de gran relevancia para un diagnstico
adecuado sobre el virus citopatognico en cuestin. Para el caso de la infeccin por el virus de
la influenza H1N1 se identific efecto citoptico a nivel alveolar evidenciado como necrosis,
hiperplasia epitelial o metaplasia escamosa (Mauad, Hajjar, Callegari, & Saldiva, 2010).

3. Resultados Hipotticos

Debi observarse efecto citoptico de tipo sincitio, lo que se traducira en un desorden de la

monocapa con una respectiva aglomeracin de clulas al punto de la fusin y as formacin de
una clula morfolgicamente diferentes al resto, grande y multinucleada; todo ello teido con
fucsina. (Imagen 1.)

Imagen 1.
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4. Cuestionario

Diferencie entre lnea celular primaria y secundaria.

La lnea celular primaria es aquel cultivo desde un tejido celular que con tiempo de vida
limitado in vivo, pero con reproduccin de las clulas in vitro, en el cultivo. Por otro lado la
lnea celular secundaria o continua es aquel cultivo desde un tejido celular inmortal (tumores,
por ejemplo).

5. Aplicaciones

Como a partir de la inoculacin de un huevo embrionado de gallina se puede incubar virus y

luego recuperarlos a concentraciones ms elevadas que permitan mayor versatilidad en el uso de
las muestras, aplicaciones usuales con respecto a esta tcnica son:

El estudio de virus acerca de la evolucin caracterstica de los virus. (Neumann, Noda,

& Kawaoka, 2009)

El desarrollo de vacunas atenuadoras del efecto viral. (Chen, y otros, 2009)

Las bibliografas anexadas muestran estas aplicaciones para el virus de la influenza A/H1N1el
cual lleg a ser una pandemia el 2009 y absorbi la atencin de muchos investigadores
alrededor del mundo.