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Exactitud en el laboratorio
La exactitud puede definirse como el grado de sujecién a la verdad. El cientifi-
co debe, por consiguiente, ser exacto tanto en las mediciones como en la inter-
pretacién y presentacién de los resultados de sus experimentos. En este
primer capitulo se estudiardn estos temas, ya que el trabajo de laboratorio
tendré valor para el estudiante y para quienes lean sus trabajos s6lo si se
cumplen esos criterios. Sin embargo, antes de referirnos a estos puntos debe-
mos considerar las unidades y cantidades empleadas usualmente en los expe-
rimentos bioquimicos.
UNIDADES Y CANTIDADES
Las unidades usadas en este libro son unidades SI (Systéme Internacional
d’Unités) basadas en el sistema métrico decimal. Estas unidades fueron apro-
badas en 1960 por la Conferencia General de Pesos y Medidas y han sido
adoptadas por laboratorios cientificos en todo el mundo. Constituyen un
sistema coherente, ya que si dos cantidades expresadas en dichas unidadesse
multiplican o dividen, se obtiene una cantidad numéricamente distinta pero
con las mismas unidades. En esta forma se reduce el numero de miltiplos y
submiiltiplos de unidades actualmente en uso.
Unidades basicas
Las unidades fundamentales, sobre las cuales se basan todas las demés son
siete y aparecen en la tabla 1.1.2 Bloquimica practica
Tabla 1.1 Unidades basicas SI
Cantidad fisica Nombre Simbolo
longitud metro m
masa kilogramo kg
tiempo segundo 8
cantidad de sustancia mol mol
temperatura termodinémica Kelvin K
corriente eléctrica amperio A
intensidad luminosa candela cd
Unidades derivadas
Ademis de las anteriormente citadas, existe también un ntimero de unidades
SI obtenidas mediante la adecuada combinacién de las unidades basicas. Por
conveniencia se dan nombres especiales a estas unidades derivadas. Ejemplos
de aquellas encontradas con ms frecuencia en el trabajo cientifico aparecen
en la tabla 1.2.
Prefijos
Algunas veces las unidades son muy grandes 0 muy pequefias en cuyo caso,
para evitar escribir muchos ceros, se coloca un prefijo antes del simbolo de la
unidad. Los miltiplos 0 fracciones de unidad recomendados cambian por
factores de 1000 cada vez (tabla 1.3). Por ejemplo, 0.000015 mol se escribe como
15 umol y 13 400 m se expresan como 13.4 km.
Tabla 1.2 Nombres especiales y simbolos de algunas unidades SI derivadas
Definicién en términos
de unidades
Nombre de
Cantidad fisica la unidad Simbolo _Basica Derivada
frecuencia hertz Hz ca =
fuerza newton N kgms dm
energia joule a kg m? 5 Nm
presion pascal Pa kg m7! 5? Nm?
potencia watt w kg m?s~3 Jst
carga eléctrica coulomb c As =
potencial eléctrico volt Vv kgm? sa) WAT?
resistencia eléctrica ohm Q igmite ae VAd
capacitancia eléctrica _farad F A? s4 kg"! m=? AsV!
temperatura ambiente grado celsius °C °C-K—273.15 —
Ninguna de estas unidades tiene plural; asi pues, 5 voltios se escribe 5 V y no 5 Vsy 2
metros se escribe 2 m y no 2 ms,Exactitud en el taboratorio 3
Tabla 1.3. Prefijos comunes para unidades SI usualmente encontrados
en trabajos bioquimicos
Miltiplos Fracciones
Factor Prefijo_ Simbolo Factor Prefijo. —-Simbolo
108 mega M mili m
10° kilo k micro Bu
nano n
pico P
La combinacién de un prefijo y un simbolo se considera como un nuevo
simbolo; asi, mm? quiere decir (10-? m)? y no10~? m*. Por lo tanto no debe
haber espacio o punto entre el simboloy sus prefijos, y para mayor claridad se
debe usar un punto entre los dos simbolos colocados encima de la linea cuando
se quiere indicar multiplicacién. Por ejemplo:
ms = milisegundo (107? s),
mientras que
m - = metro x segundo (m x s)
Otras unidades usadas ademas de las SI
En bioquimica existen otras unidades que por su conveniencia y uso generali-
zado es probable que se continten empleando por mucho tiempo junto con las
unidades SI.
Litro (1). La unidad de volumen del sistema SI es el metro ciabico (m}), pero
esta unidad es relativamente grande y en trabajos bioquimicos se acepta
actualmente el litro como unidad de volumen.
El litro es exactamente igual a un decimetro ctibico (1 decimetro=10-'m=
1 dm) asi que:
1000 litros = 1 metro cabico = 1 m3
1 litro (I) = 1dm = 107 m>
1 mililitro (ml) = 1 ems 10-6 m?
1 microlitro (ul) = 1 mm 10° m?.
Los términos mililitro y microlitro serén eventualmente reemplazados pero
probablemente sélo después de que este texto haya perdido vigencia.
Gramo (g). El gramo se seguiré usando como una unidad elemental y
asociada con prefijos (ug, mg) hasta cuando se adopte una nueva unidad
basica de masa, la cual hoy se conoce como kilogramo.4 Bloquimica préctica
Tiempo. La unidad basica SI de tiempo es el segundo, pero las unidades de
tiempo comtinmente en uso (minuto, hora, afio) pueden emplearse cuando
se crea necesario.
Molaridad, moles y concentracion
Segiin mi experiencia, los estudiantes encuentran dificultad en los calculos de
moles y molaridades y en la conversion de molaridades a milimoles o micro-
moles para un volumen dado. Por lo tanto, se sugiere que el estudiante com-
prenda esta seccin antes de intentar cualquier experimento que requiera
célculos.
Mole (mol). La unidad basica SI de cantidad es el mol, que expresa la cantidad
de una sustancia contenida en un recipiente o tubo de ensayo, independien-
te de su volumen. El mol se define como el peso molecular de un compuesto
expresado en gramos.
1 mol = peso molecular en gramos = 6 x 10% moléculas (ntimero de
Avogadro).
El término mol se aplica no sélo a las moléculas, sino también a otras
particulas de composicién definida, tales como dtomos, iones o radicales
libres:
1 mol de glucosa (peso molecular 180) = 180 g
1 mol de albamina (peso molecular 68 000) = 68 000 g 6 68 kg.
Molaridad (mol/l). La concentracién de una sustancia es la cantidad de la
misma en la presente unidad de volumen de solucién. En trabajos bioqui-
micos la unidad de cantidad es el mol y la unidad de volumen el litro. Por
lo tanto, una solucién molar se define como 1 mol de un compuesto dado por
litro.
1 mol/l = peso molecular en gramos por litro de solucién.
Las molaridades se han representado usando la letra M (0.15 M NaCl) pero
segiin las recomendaciones del SI este simbolo debe ser reemplazado por
mol/I (NaCI 0.15 mol/l).
Concentracién en términos de masa. En ocasiones se hacen mediciones de
sustancias que no tienen una composicién definida, tales como concentra-
cién de proteina o dcido nucleico presente en un extracto. En estos casos la
concentracién se expresa en términos de peso por unidad de volumen y noen
moles. Lo mismo sucede cuando el peso molecular del compuesto biolégica-
mente activo que queremos medir no esta definido como en los casos de la
vitamina B12 y de las inmunoglobulinas del suero. Comose anotaba arriba, la
unidad de volumen es el litro; por lo tanto, la concentracién deberé expresar-
se comio g/l, mg/l, ug/l, etc. y no en base a 100 ml. El término por ciento(%) se
usa comtinmente pero es ambiguo y su uso debe descontinuarse a menos queExactitud enellaboratorio 5
se defina claramente. Por ejemplo, una solucién de Acido acético al 2% podria
significar:
2g de Acido acético por 100 g de agua (peso/peso)
2g de Acido acético por 100 ml de agua (peso/volumen)
2 ml de dcido acético por 100 ml de agua (volumen/volumen)
Conversién de molaridad a moles por mililitro. En muchas reacciones
bioquimicas se necesita conocer el naimero de moles de una sustancia pre-
sente en una muestra y esto puede hacerse facilmente a partir de la mola-
ridad de la solucién y el volumen de la misma. Primero se calcula el namero
de moles presente en 1 ml y luego se multiplica por el volumen total de la
solucién. Es conveniente memorizar y usar con facilidad las relaciones que se
describen a continuacién, las cuales se obtienen disminuyendo tanto la canti-
dad como el volumen por un factor de 103.
Solucién 1 molar = 1 mol/1
1 mmol/ml
1 pmol/p1
y una solucién milimolar = 1 mmol/l
= 1 wmol/ml
Verifique si ha entendido suficientemente estas ideas desarrollando los
siguientes ejercicios; las respuestas se dan en el apéndice.
1, gCuantos gramos de glucosa se necesitan para preparar 100 ml de una
solucién molar? (Glucosa, peso mol. = 180.)
2,