Está en la página 1de 10

SECRETARIA DE COMERCIO

FOMENTO INDUSTRIAL

NORMA MEXICANA

NMX-Y-246-1983

PRODUCTOS PARA USO AGROPECUARIO-FERTILIZANTES-


BIURET METODO INDIRECTO DE ESPECTROFOTOMETRIA
DE ABSORCION ATOMICA-METODO DE PRUEBA

PRODUCTS FOR AGRICULTURAL USE-FERTILIZERS-BIURET


INDIRECT- ATOMIC ABSORTION SPECTROPHOTOMETRIC METHOD
METHOD OF TEST

DIRECCION GENERAL DE NORMAS


NMX-Y-246-1983

PREFACIO

En la elaboracin de esta norma, participaron los siguientes Organismos:

- UNION DE PRODUCTORES DE ALGODON.

- CENTRO NACIONAL DE INVESTIGACION, CERTIFICACION Y


CAPACITACION.

- SECRETARIA DE AGRICULTURA Y RECURSOS HIDRAULICOS.


DIRECCION GENERAL DE EXTENSION AGRICOLA. DEPARTAMENTO
DE SUELOS Y LABORATORIOS.

- SERVICIOS AGRICOLAS BANRURAL.

- FERTILIZANTES MEXICANOS, S.A.

- CONFEDERACION NACIONAL CAMPESINA.


NMX-Y-246-1983

PRODUCTOS PARA USO AGROPECUARIO-FERTILIZANTES-BIURET


METODO INDIRECTO DE ESPECTROFOTOMETRIA DE ABSORCION
ATOMICA-METODO DE PRUEBA

PRODUCTS FOR AGRICULTURAL USE-FERTILIZERS-BIURET


INDIRECT- ATOMIC ABSORTION SPECTROPHOTOMETRIC METHOD
METHOD OF TEST

1 OBJETIVO Y CAMPO DE APLICACION

Esta Norma Mexicana establece un mtodo indirecto por espectrofotometra de


absorcin atmica para la determinacin de biuret en fertilizantes mezclados.

2 REFERENCIAS

Esta norma se complementa con la vigente de la siguiente Norma Mexicana:

NOM-Y-035 Mtodo de muestreo para fertilizantes - Lquidos en polvos y en


grnulos.

3 PRINCIPIO

El mtodo se basa en la formacin y separacin del complejo cobre-biuret, en medio


alcalino-alcohlico, y determinacin del cobre por medio de espectrofotometra de
absorcin atmica.

4 REACCIONES

La reaccin que se lleva a cabo en la complejacin es:


NMX-Y-246-1983

5 REACTIVOS Y MATERIALES

Los reactivos que a continuacin se mencionan, deben ser grado analtico, a menos que
se indique otra cosa. Cuando se hable de agua, debe entenderse agua destilada o
desmineralizada.

5.1 Biuret recristalizado (NH2CONHCONH2)

Pesar 10 g de biuret, transferir a un vaso de precipitados de 2000 cm3, agregar 1000 cm3
de alcohol etlico (5.2) disolver y calentar a ebullicin controlada en la placa de
calentamiento (6.3), hasta reducir el volumen a 250 cm3. Retirar de la placa de
calentamiento y enfriar a una temperatura de 278 K (5C) filtrar con ayuda del vaco por
medio de un crisol de vidrio de fondo poroso, lavar con tres porciones de 20 cm3 de
alcohol etlico (5.2). Repetir la cristalizacin y secar el producto de la estufa elctrica
(6.5) a una temperatura de 378 - 383 K (105-110C) durante una hora. Retirar de la
estufa y dejar enfriar a temperatura ambiente en desecador.

5.2 Alcohol Etlico absoluto (CH3CH2OH), 99.5 %

5.3 Disolucin de sulfato de cobre (CuSO4.5H2O)

Pesar 15 g de sulfato de cobre, transferir a un matraz volumtrico de 1000 cm3, agregar


agua hasta disolver completamente, llevar a la marca con agua y homogeneizar.

5.4 Disolucin de almidn [(C6H10O5)n]

Pesar 1 g de almidn, transferir a un vaso de precipitados de 100 cm3, agregar 10 cm3 de


agua fra, triturar para formar una pasta delgada y verter gradualmente en 150 cm3 de
agua hirviendo, conteniendo 1 g de cido oxlico. Calentar hasta que la disolucin se
aclare, enfriar y diluir a 200 cm3 con agua. La disolucin debe ser preparada
recientemente, es estable durante una semana.

5.5 Disolucin de hidrxido de potasio (KOH), 20 %

5.6 Disolucin amortiguadora de pH 13.4

Pesar 24.6 g de hidrxido de potasio (KOH) y 30 g de cloruro de potasio (KCl),


transferirlos a un matraz volumtrico de 1000 cm3, agregar agua hasta disolver
completamente, llevar a la marca y homogeneizar.

5.7 Disolucin de cido clorhdrico (HCl), 1 N

5.8 Disolucin patrn de Biuret de 400 g de biuret/cm3

Pesar, al 0.0001 g, exactamente 0.4000 g de biuret purificado (5.1), transferir a un


matraz volumtrico de 100 cm3, agregar agua tibia hasta disolver completamente,
enfriar, llevar a la marca con agua y homogeneizar.
NMX-Y-246-1983

5.9 Disolucin patrn de cobre de 100 g de Cu/cm3

Pesar al 0.0001 g, exactamente 1.0000 g de cobre metlico, transferir a un matraz


volumtrico de 1000 cm3, agregar disolucin de cido ntrico (1+1) en mnima cantidad
para disolver completamente el cobre y 5 cm3 de cido clorhdrico concentrado
(HCl 36-38 %). Evaporar casi a sequedad, dejar enfriar llevar a la marca con disolucin
de cido clorhdrico 0.1 N y homogeneizar.

5.10 Disolucin indicadora de prpura de bromocresol

Pesar 0.1 g de prpura de bromocresol, transferir a un matraz volumtrico de 250 cm3,


agregar 19 cm3 de disolucin de hidrxido de sodio (NaOH) 0.1 N, disolver, llevar a la
marca con agua y homogeneizar.

5.11 Suspensin de pulpa de papel en alcohol etlico (5.2)

6 APARATOS

Aparatos usuales de laboratorio y:

6.1 Balanza analtica, capaz de pesar 0.000 1 g.

6.2 Espectrofotmetro de absorcin atmica, capaz de operar a una longitud


de onda de 324.7 nanmetros, con quemador de aire-acetileno.

6.3 Placa de calentamiento con regulador de temperatura

6.4 Crisol de vidrio con fondo poroso

6.5 Estufa elctrica capaz de mantener la temperatura

6.6 Crisol Gooch

6.7 Agitador magntico con barra

7 MUESTREO Y MUESTRAS

Tomar las porciones de anlisis de la muestra de anlisis obtenida de acuerdo a la


Norma NOM-Y-035.

8 PROCEDIMIENTO

8.1 Porcin de anlisis

Pesar al 0.0001 g, una cantidad de muestra, que contenga menos de 40 mg de biuret.


NMX-Y-246-1983

8.2 Determinacin

8.2.1 Transferir la porcin de anlisis a un vaso de precipitados de 250 cm3,


agregar 1 cm3 de agua por cada gramo de muestra (5g de muestra como mximo).
Entibiar y adicionar 65 cm3 de alcohol etlico (5.2) y 7 gotas de disolucin indicadora
(5.10) y ajustar al pH a 6-7, hasta la aparicin del primer color azul, agregando
disolucin de hidrxido de potasio (5.5).

8.2.2 Calentar a ebullicin, enfriar, y si el pH ha cambiado, reajustar


nuevamente a pH 6-7.

8.2.3 Filtrar la disolucin con ayuda de vaco, por medio de un crisol Gooch
(6.6), usando como medio filtrante suspensin de pulpa de papel en alcohol etlico
(5.11).

Lavar el precipitado con tres porciones de 10 cm3 de alcohol etlico (5.2).

NOTA: Si el filtrado no es claro, se realiz mal ajuste del pH. Adicionar


disoluciones de cido clorhdrico (5.7), reajustar el pH a 6.7 y filtrar nuevamente.

Transferir el filtrado a un matraz volumtrico de 100 cm3, llevar a la marca con alcohol
etlico (5.2) y homogeneizar.

8.2.4 Transferir una alcuota de 25 cm3 a un matraz volumtrico de 100 cm3.

8.2.5 Agitar utilizando agitador magntico (6.7), agregar 2 cm3 de disolucin


de almidn (5.4), 10 cm3 de disolucin de sulfato de cobre (5.3) y 20 cm3 de disolucin
amortiguadora de pH 13.4 (5.6). Quitar la barra magntica, enjuagar y llevar a la marca
con alcohol etlico (5.2). Mezclar vigorosamente, transferir el contenido a un vaso de
precipitados de 250 cm3 y dejar reposar durante 10 minutos.

8.2.6 Filtrar la disolucin con ayuda de vaco, por medio de un crisol de vidrio
de fondo poroso (6.4).

NOTA: No utilizar papel filtro porque el complejo cobre-biuret es retenido por el


papel filtro.

8.2.7 Transferir una alcuota de 25 cm3 del filtrado a un matraz volumtrico de


250 cm3, acidificar con 5 cm3 de disolucin de cido clorhdrico (5.7), llevar a la marca
con agua y homogeneizar.

8.2.8 Ajustar el espectrofotmetro de absorcin atmica (6.2) a 324.7


nanmetros y, utilizando flama de aire-acetileno, alimentar agua para ajustar el cero de
absorbancia. Posteriormente alimentar la disolucin problema bajo las mismas
condiciones y anotar la lectura de absorbancia correspondiente.

8.3 Curvas de calibracin

8.3.1 Factor de equivalencia cobre - Biuret


NMX-Y-246-1983

8.3.1.1 De la disolucin patrn de biuret (5.8), medir las alcuotas indicadas en la


tabla 1.

TABLA 1 ALICUOTAS PARA LA CURVA DE CALIBRACION DEL FACTOR DE


EQUIVALENCIA

Transferirlas a sendos matraces volumtricos de 100 cm3, diluir a 30 cm3 con agua y
adicionar 25 cm3 de alcohol etlico (5.2) a cada uno y continuar como en 8.2.5 a 8.2.7.

8.3.1.2 Utilizando las mismas condiciones de 8.2.8, alimentar cada una de las
disoluciones obtenidas en 8.3.1.1 y anotar las lecturas de absorbancia correspondientes.
Tomar al memos 3 lecturas de cada disolucin. Utilizar el valor promedio para elaborar
la grfica.

8.3.1.3 Elaborar una grfica, colocando como abscisas los g de biuret/cm3 y


como ordenadas los g de cobre/cm3. Los g de cobre/cm3, se obtienen directamente de
la curva de calibracin 8.3.2.

8.3.1.4 Ajustar la curva obtenida a una recta por el mtodo de mnimos


cuadrados y determinar el factor f (g Biuret / g Cu) como la pendiente de la recta
ajustada.

8.3.2 Curva de calibracin de cobre

8.3.2.1 Transferir una alcuota de 10 cm3 de la disolucin patrn de cobre de


1000 g/cm3 (5.9), a un matraz volumtrico de 100 cm3, llevar a la marca con agua y
homogeneizar. De la disolucin obtenida, medir las alcuotas indicadas en la tabla 2.
NMX-Y-246-1983

TABLA 2 ALICUOTAS PARA LA CURVA DE CALIBRACIN DE COBRE

Transferirlas a sendos matraces volumtricos de 100 cm3, y adicionar 7 cm3 de alcohol


etlico (5.2), 4 cm3 de disolucin amortiguadora, de pH 13.4 (5.6) y 1 cm3 de disolucin
de cido clorhdrico (5.7) a cada uno, llevar a la marca con agua y homogeneizar.

8.3.2.2 Utilizando las mismas condiciones de 8.2.8, alimentar cada una de las
disoluciones obtenidas en 8.3.1 y anotar las lecturas de absorbancia correspondientes.

8.3.2.3 Elaborar una grfica, colocando como abscisas los g de Cu/cm3 y como
ordenadas las lecturas de absorbancia correspondientes.

9 EXPRESION DE RESULTADOS

9.1 Mtodo de clculo y frmulas

9.1.1. El contenido de biuret en la muestra, expresado como porcentaje en masa


de biuret, se calcula como la siguiente expresin:

f x C x V1 x V3%
Biuret = x 100
mO x V2

En donde:

F es el factor, de g de biuret equivalentes a 1 g de cobre, determinado por la


curva de calibracin (8.3.1).

C es la concentracin, en g de Cu/cm3, ledos en la curva de calibracin (8.3.2)


para la muestra.

mO es la masa, en microgramos, de la porcin de anlisis.

V1 es el volumen, en cm3, de la disolucin de la porcin de anlisis.

V2 es el volumen, en cm3, de la alcuota tomada para la determinacin.


NMX-Y-246-1983

V3 es el volumen, en cm3, al cual se llev la alcuota (V2).

9.2 Repetibilidad

La diferencia entre los valores de dos determinaciones efectuadas por un analista, no


debe ser mayor de 0.026 unidades de por ciento de biuret. En caso contrario se
recomienda repetir la determinacin.

9.3 Reproducibilidad

La diferencia entre valores extremos de una serie de determinaciones efectuadas en


diferentes laboratorios para una misma muestra, no debe ser mayor de 0.041 unidades
de por ciento de biuret.

10 INFORME DE RESULTADOS

El informe correspondiente a los resultados obtenidos para la muestra de laboratorio


debe incluir las siguientes indicaciones:

a) Datos relacionados con la muestra como:

- Identificacin y/o descripcin.

- Datos sobre toma de la misma.

- Fecha de recepcin de la muestra.

- Fecha de terminacin del anlisis.

b) Referencia al mtodo empleado.

c) Resultados y mtodos de expresin usados.

d) Aspectos irregulares observados durante la prueba.

e) Cualquier operacin no includa en esta norma o que fuese opcional y pudiera


afectar los resultados.

11 BIBLIOGRAFIA

11.1 Horwitz, W. Editor. Official Methods of Analysis of the Association of


Official Analytical Chemists. 13th Edition. Association of Official Analytical Chemists,
Washington. 18, 20-21.
NMX-Y-246-1983

11.2 Woodis, T.C., Hunter, G.B., and Johnson, F.J.An. Indirect De


Determination of Biuret in Mixed Fertilizers and Urea by Atomic Absorption
Spectrophotometry. Journal of the AOAC. Vol. 59. N5 1. 1976. 22 25.

11.3 Cuijosa, F. F. Informe 521/78/251. "Estudio comparativo de mtodos


para la determinacin de Biuret en urea". Departamento de Experimentacin.
FERTIMEX. 1978.

11.4 Association of Official Analytical Chemists. Changes in Methods. J.


Assoc. Off. Anal. Chem. Vol. 63. N5 2, 1980. 374 Ist Supplement to 13th Edition.

Naucalpan de Jurez, Edo. de Mxico, Junio 3, 1883

EL DIRECTOR GENERAL DE NORMAS.

LIC. HECTOR VICENTE BAYARDO MORENO.

Fecha de aprobacin y publicacin: Junio 13, 1983