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Fiche D.

2 Lpreuve au bleu de
Outils de fromagerie
mthylne sur le lait
Un outil pour vrifier
sa qualit microbiologique
Ce test donne une ide de la quantit de germes prsents dans le lait, de leur acti-
vit et de leur vitesse de multiplication.
Il permet didentifier des diffrences de niveau de contamination du lait et de
mettre en vidence des problmes ventuels dhygine notamment du matriel et
de la traite.
Les germes prsents dans le lait et actifs 37 C (temprature du bain-marie
pendant le test) consomment loxygne dissout dans le lait.
Le bleu de mthylne se dcolore quand le milieu sappauvrit en oxygne.
Le temps de dcoloration du bleu de mthylne donne ainsi une mesure du niveau
de contamination du lait :
Dcoloration rapide  beaucoup de germes dans le lait activit leve

Comment faire ?
Matriel  Schma 1
bleu de mthylne concentr 5 mg/100 ml
bain-marie 37 C (thermos grande 2 retournements
ouverture et rsistance daquarium ou successifs
chauffe biberon)
1 tube essai de 40 ml
pipettes striles de 1 ml et 10 ml.

Mthode  Schma 2
1. Se laver soigneusement les mains.
2. Striliser un tube dans leau bouillante (5
minutes) (cf. schma 1).
3. Avant ensemencement, agiter le lait et en
prlever 10 ml.  Schma 3
4. Introduire dans le tube 10 ml de lait et 1 ml
de bleu de mthylne. Bien mlanger par 2 Aurole bleue
retournements successifs (attention mlan-
ger par des retournements et non par agita-
tion) (cf. schma 2). 37C Temps de 37C
dcoloration
5. Incuber 37 C dans un bain-marie,
parois et couvercle opaques de prfrence
40 ml de lait
(cf. schma 3). 1 ml de bleu
6. Retourner les tubes toutes les heures. de mthylne
a 5 mg/100 ml
7. Faire une lecture au bout de 2 heures, puis  Schma 4
ventuellement au bout de 4 heures.

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8. Observer sil y a dcoloration, sans tenir compte de lanneau bleu qui peut persister en surface,
Fiche D.2 par suite de la roxydation du colorant au contact de lair (cf. schma 4).
NB : Ce test peut tre associ dans le mme tube au test de la lactofermentation (cf. fiche correspon-
dante), il permet den confirmer le rsultat.

Interprter les rsultats


Comparez le temps de dcoloration du bleu la moyenne tablie sur votre exploitation, vous
pouvez ainsi dceler un problme de contamination.

Quelques repres : Contamination


Lait trs contamin moins de 2 heures +
Lait contamin entre 2 et 4 heures
Lait faiblement contamin plus de 4 heures

Comment intervenir ?
Une dcoloration trop rapide du bleu par rapport un temps de rduction normal moyen tabli sur
lexploitation doit dclencher un contrle de lhygine notamment du matriel et de la traite.

Limites-Avantages-Inconvnients
Ce test est intressant surtout dans une utilisation quotidienne pour une interprtation par
comparaison dun jour lautre. Il permet ainsi de tenir compte des variations journalires de
la contamination du lait.
Il est peu coteux.
Il permet didentifier rapidement des variations de qualit bactriologique du lait.

Ce test ne permet pas de connatre les familles de bactries prsentes dans le lait et met en
vidence essentiellement la prsence de germes msophiles qui consomment loxygne du
lait.

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Fiche D.2 La qualit microbiologique
du lait avant ensemencement
Pour un suivi rgulier,
enregistrez vos rsultats

Anne : . . . . . . . . . . . . .

Temps de dcoloration Lactofermentation


Bleu de mthylne* Note obtenue*
Date Infrieur Entre 2 et Suprieur 1 2 3 4 Diagnostic - Actions correctives
2 heures 4 heures 4 heures

* : cochez la case correspondante

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