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INFORME DE PRÁCTICA 7

ESTUDIO DE LOS PARÁMETROS CROMATOGRÁFICOS A SER APLICADOS EN MUESTRAS AMBIENTALES

María Yesenia Contreras Acuña. Código: 1.122.142.938

Universidad Nacional Abierta y a Distancia. Escuela de Ciencias Básicas, Tecnología e Ingeniería ECBTI. Escuela de Ciencias Agrícolas, Pecuarias y del Medio Ambiente - ECAPMA. Química Ambiental (Evaluación y Control de la Contaminación). Grupo # 2 CEAD ACACIAS. Acacías - Colombia.

Sesión 1: 07, octubre de 2017 Entrega informe: 29, octubre de 2017

OBJETIVOS:

General

Estudiar los parámetros cromatográficos que aplican para el análisis de

muestras ambientales.

Específicos

Manejar el simulador de HPLC para el estudio de compuestos orgánicos

presentes en muestras ambientales

Identificar las características necesarias para el uso del simulador de

HPLC.

Identificar cromatográficamente los compuestos orgánicos presentes en

muestras ambientales.

MARCO TEÓRICO

La determinación de los parámetros cromatográficos es indispensable para una correcta separación de analitos por medio de cromatografía líquida de alta eficiencia, CLAE (HPLC, por sus siglas en inglés High Performance Liquida Chomatography). La optimización de los parámetros cromatográficos, como la composición de la fase móvil, las características de la fase estacionaria (columna) y la naturaleza química de los compuestos, permite separaciones eficientes en términos de tiempo, costos y calidad analítica. Si bien, esta optimización puede llevarse a cabo por medio de diseños experimentales o a través del ensayos de error. En equipos CLAE, esto implica altas inversiones de

tiempo por parte del analista y costos en el empleo de disolventes, por lo que el uso de simuladores constituye una alternativa estratégica en la optimización. Este es justamente el trabajo que nos convoca: simular por medio de un software libre la optimización de algunos parámetros cromatográficos, como una interesante introducción al mundo de las separaciones cromatográficas más usadas en los campos de la investigación y la industria.

En muestras ambientales este método es altamente utilizado para el estudio de residuos de plaguicidas en matrices de agua y suelo, por otro lado para las pruebas de aire se suele utilizar cromatografía de gases.

INTRODUCCIÓN

En el desarrollo de la práctica se identifican parámetros cromatográficos en cromatografía liquida de alta eficiencia y otros conceptos (incluidas las estructuras de los solutos). Los compuestos estudiados en el HPLC son Acetofenona, Butilparabeno, Ketoprofeno, Benzofenona, Propiofenona, 3- nitrofeno, Etilparabeno, Propilparabeno y 4-nitrofenol, durante el desarrollo de hicieron varias medicaciones al HPLC simulador, es decir, sus propiedades generales, propiedades cromatográficas y de la columna donde se observaron diferentes resultados. Para este caso, se utilizó como solvente A (agua), y para solvente B (Metanol y Acetonitrilo respectivamente).

PARTE I

Reconocimiento de los parámetros cromatográficos en cromatografía líquida de alta eficiencia (CLAE)

Defina y explique cómo se relacionan los siguientes conceptos. Incluya cuando corresponda, el símbolo y ecuación que representa al concepto

Factor de Separación: Es un parámetro definitorio de la selectividad cromatografía, referido a la separación entre sí de dos analitos, Se define como la reacción entre los tiempos de retención ajustados, o entre los factores de capacidad o retención respectivos, es una columna para separar dos picos. La columna puede ser selectiva a una separación, que se identifica por un valor alto de este factor, El factor selectivo a de una columna para dos especies A y B se define como :

Calculo:

=

,

=

= ( )

( )

Donde es el coeficiente de distribución para la especie más fuertemente retenida B, y es el coeficiente de distribución para la menos retenida, o que fluye con más rapidez, la especie A.

Resolución: Es el parámetro que expresa el grado de separación que se puede obtener es un sistema cromatográfico para dos componentes dados. Relaciona la capacidad separadora de un sistema cromatográfico para dos componentes, se define como:

=

( + )

Donde es la resolución, y son los tiempos de retención de los componentes A y B, y aA y bB son las anchuras de los picos del cromatograma de los anteriores componentes.

Los parámetros que influyen en la resolución de una separación cromatografía son: la eficiencia de la columna, la selectividad y el factor de retención:

= (

4

) . ( − 1

) . (

+ )

1

Eficiencia: El número de platos teóricos mide la capacidad de la columna para separar los componentes, no la retención de los mismos: la eficiencia o el número de platos se puede observar directamente a partir del cronograma, observando la agudeza de los picos.

= = ( ´ )

Donde N es el número de platos teóricos, L es la longitud de la columna, SI H es la altura de cada plato, ´ es el tiempo corregido de retención de un componente y ahí es la anchura del pico cromatográfico, y:

=

( ´

)

Factor de retención: Es un parámetro que describe la velocidad de migración de los solutos en la columna. Para una especie A, el factor de capacidad se define como :

´ =

´ =

Tiempo de retención ( ): Tiempo transcurrido desde la introducción de la muestra hasta que el componente alcanza el detector.

Tiempo Muerto: Tiempo requerido para que una especie no retenida alcance el detector, es el tiempo de migración de la especie no retenida; es el tiempo necesario para que , por término medio una molécula de la fase móvil pase a través de la columna.

Ancho de Banda ( Sigma total ): Corresponde al intervalo de longitudes de onda comprendido entre los puntos en donde la transmitancia alcanza la mitad de su máximo de transmisión o en intervalos de 6 longitudes de onda que contiene el 75 % de la energía radiante que provienen del monocromador. La anchura de banda se puede expresar en términos de la apertura o amplitud de las rendijas, S, y la dispersión lineal reciproca del monocromador como : SBW= S.D-1

Cromatografía liquida en fase normal: La fase estacionaria presenta puntos activos de alta polaridad y las interacciones que se producen con el soluto son específicas del grupo activo. Las fases estacionarias pueden ser un sólido adsorbente (sílice-alúmina) o un soporte al que se unen

químicamente moléculas orgánicas que presentan grupos funcionales de alta polaridad.

Cromatografía liquida en fase reversa: También llamada fase inversa, la fase estacionaria tiene una naturaleza apolar y las interacciones que producen son inespecíficas.

Gradiente de elución: Los diferentes compuestos son eludidos modificando gradualmente la composición de la fase móvil durante la cromatografía. El resultado sobre la elución es un acortamiento de los tiempos de retención, el factor de retención disminuya conforme aumenta la variación de flujo del gradiente y el compuesto fluye.

La relación del cambio de la composición de la fase móvil durante el transcurso de la elución en gradientes:

=

∆∅

Dónde:∅ = Volumen de fase del modificador

= El tiempo del gradiente

= La pendiente del frente o la relacion lineal de la fuerza del solvente

Elución isocrática: Los compuestos eluyen usando una fase móvil de composición constante durante toda la cromatografía. Todos los compuestos acaban migrando a través de la columna hasta el final. Sin embargo cada uno migra con una velocidad diferente, resultando en una relación de elución más rápida o más lenta.

La separación de los compuestos mediante elución isocratica puede describirse utilizando las ecuaciones:

- Tiempo de retención: = . ´ +

- Factor de capacidad: ´ = ( )/

- Resolución: = [(

4 ) . (( − 1)/) 1/2 ] . [´/(1 + ´)]

1

PARTE II

Efecto de la estructura de los compuestos (solutos) y de la composición de la fase móvil sobre la retención y la resolución.

1. Dibuje estructuras de los siguientes compuestos utilizando las convenciones de cuña/slash representando los ángulos de enlace adecuados:

Nombre del

Estructura

Propiedades

Compuesto

Molecular

Acetofenona

Acetofenona Densidad : 1030kg/m3; 1,03 g/cm3 Punto de fusión : 293,15k

Densidad : 1030kg/m3; 1,03 g/cm3 Punto de fusión : 293,15k

(20°C)

Punto de ebullición:

475,15 K (202 °C)

 
  Apariencia: Solido Blanco Densidad: 1110kg/m3;

Apariencia: Solido Blanco Densidad: 1110kg/m3;

Benzofenona

1,11g/cm3

Masa molar: 182.217 g/mol

Etilparabeno

Etilparabeno Densidad: 1,25 g/cm3 Masa molar: 166.17 g/mol

Densidad: 1,25 g/cm3 Masa molar: 166.17 g/mol

Butilparabeno

Butilparabeno Masa molar : 194.227 g/mol

Masa molar : 194.227 g/mol

Propiofenona

Propiofenona Apariencia liquida incoloro a amarillo pálido Punto de fusión: 18°C Punto de ebullición:

Apariencia liquida incoloro a amarillo pálido Punto de fusión: 18°C Punto de ebullición:

218°C

Propilparabeno

Propilparabeno Masa Molar: 180,2 g/mol Densidad: 1,06 g/cm3

Masa Molar: 180,2 g/mol Densidad: 1,06 g/cm3

Ketoprofeno

Ketoprofeno Masa molar: 254,281 g/mol Punto de fusión: 94-97°C

Masa molar: 254,281 g/mol Punto de fusión: 94-97°C

3-nitrofenol

3-nitrofenol Peso molecular : 139,11 g / mol

Peso molecular : 139,11 g / mol

4-nitrofenol

4-nitrofenol
4-nitrofenol

2. Sobre la base de sus estructuras:

a) Prediga el orden de elución de los compuestos, partiendo del menos al más retenido en RPLC (Cromatografía líquida en fase reversa). Justifique su respuesta.

Etilparabeno< Propilparabeno<Butilparabeno<

Propiofenona <Benzofenona

Ketoprofeno<Acetofenona

El orden de elución de un compuesto se incrementa al aumentar la polaridad de la fase móvil o eluyente. Este puede ser un disolvente único o dos miscibles de distinta polaridad.

b) ¿Cuáles son los principales usos de cada uno de estos compuestos?

Acetofenona:

Es un compuesto orgánico de formula 6 5 () 3 es la cetona aromática más simple, este líquido viscoso incoloro es un precursor en la preparación de numerosas resinas y fragancias.

Usos:

Precursor de Resinas: La resina de interés comercial son producidas por la acción del formaldehido en una base sobre la acetofenona, los polímeros resultantes son convencionalmente descritos por la formula

aldolica y son

[( 6 5 ())( 2 )], Resultante de la condensación utilizados en la confección de tintas y recubrimientos.

Precursor del estireno: La conversión de acetofenona en estireno se hace comúnmente en los laboratorios académicos a través de un proceso de dos pasos, que ilustra la reducción del carbonilo y deshidratación de los alcoholes:

Uso farmacéutico: Es materia prima para la síntesis de diversos productos farmacéuticos y también es un portador están aprobados para su uso por las autoridades sanitarias.

Benzofenona:

Es un compuesto importante en fotoquímica orgánica, perfumería y como reactivo en síntesis orgánicas. Es una sustancia blanca cristalina insoluble en agua y con olor a rosas. Su punto de fusión es de 49 °C y su punto de ebullición de 305-306 °C.

Actúa como filtro para las radiaciones UV ya que es capaz de absorberla y disiparla en forma de calor. Esto es posible debido a que posee sus estados de singlete y triplete energéticamente muy próximo entre sí.

Debido a esta propiedad la benzofenona se utiliza en productos tales como perfumes y jabones para evitar que la luz ultravioleta degrade el olor y el color de estos perfumes.

Butilparabeno:

Es uno de los dos parabenos, de formula 4 9 ( 6 4 ()). Es un éster butílico de ácido para- hidroxibenzoico utilizando como preservativo anti fúngico en cosméticos.

Propiofenona:

Reactivos comunes, productos farmacéuticos, perfumes y la industria de síntesis orgánica.

Etilparabeno:

Son utilizados como conservadores protegiendo a los productos de las levaduras y los hongos. No obstante, no son muy efectivos contra las bacterias, su actividad es independiente de la acidez, y adicionalmente, son poco solubles, lo que limita sus aplicaciones en formas farmacéuticas liquidadas como jarabes, soluciones, suspensiones e inyecciones, son usados en una gran variedad de alimentos y cosméticos.

Propilparabeno:

Usado como conservador de cosméticos y en combinación con metilparabeno se utiliza en formulaciones farmacéuticas parentales. Para productos de cuidado para la piel y comida, tiene una toxicidad generalmente baja por ingestión. Puede irritar los ojos, la piel, el tracto

intestinal y el respiratorio con el contacto, la ingestión y la inhalación, respectivamente también es combustible.

Ketoprofeno :

Es un antiinflamatorio no esteroide dotado de potente actividad analgésica, muy eficaz en el tratamiento de enfermedades reumáticas, traumatológicas y procesos inflamatorios en general. El principio activo Ketoprofeno se utiliza en el tratamiento de la artritis reumatoide, osteoartrosis, espondilitis, anquilosante y episodios agudos de gota.

3-nitrofenol:

Usado principalmente para manufactura de tinturas, pigmentos, productos de caucho y sustancias funguicidas.

4-Nitrofenol: Es usado principalmente en la manufactura de medicamentos, funguicidas, tinturas y para oscurecer el cuerpo. Es un producto de la degradación de plaguicidas como el paration y el fluoridifen. Puede producir enfermedades de la sangre.

3.

Ejecute el HPLC simulator (http://www.hplcsimulator.org/)

4.

Configure el simulador según las características descritas en la Tabla 19.

Tabla 19, primera configuración del HPLC Simulator

Composición

Solvente A:

Solvente

Elución:

Fracción de B

fase móvil

agua

B:

Isocrático

(%v/v)=50

metanol

Propiedades

     

cromatografías

 

T= 25°C

Inyección(μL):10

Flujo (mL/min):20

   

Constante de

Desplazamiento de la señal

Ruido:

Puntos

Propiedades

tiempo: 0.1s

2.0

marcados:300

generales

(min):0.0

   

Fase

Longitud

Diámetro

Tamaño

Propiedades

estacionaria:

(mm):

Interno

Partícula

de la

agua

100.0

(mm): 4.6

(μm): 3.0

columna

Tabla 20, resultados de la primera configuración

Compuesto

Tiempo de retención (tR)

Factor de retención (k’)

Ancho de banda (sigma total)

Acetofenona

0,1343

1,5254

0,2111

Butilparabeno

0,7494

13,0915

1,0414

Ketoprofeno

0,3564

5,7020

0,5031

Benzofenona

0,6690

11,5799

0,9308

Propiofenona

0,2434

3,5762

0,3513

3-nitrofenol

0,1349

1,5371

0,2119

Etilparabeno

0,2007

2,7739

0,2952

Propilparabeno

0,3832

6,2047

0,5394

4-nitrofenol

0,1262

1,3728

0,2013

Imagen Primera Configuración

6,2047 0,5394 4-nitrofenol 0,1262 1,3728 0,2013 Imagen Primera Configuración Acetofenona Butilparabeno
Acetofenona Butilparabeno
Acetofenona
Butilparabeno

Ketolprofeno

Ketolprofeno

Benzofenona

Benzofenona

Propiofenona

Propiofenona

3-nitrofenol

Etilparabeno

Propilparabeno

3-nitrofenol Etilparabeno Propilparabeno
3-nitrofenol Etilparabeno Propilparabeno
3-nitrofenol Etilparabeno Propilparabeno
4-nitrofenol
4-nitrofenol

7. Se cambió la composición de la fase móvil de metanol a Acetonitrilo como se muestra en la Tabla 21.

Tabla 1 Segunda configuración del HPLC Simulator

Composición de la fase móvil

Solvente

Solvente B:

Modo de

Fracción del

A: Agua

Acetonitrilo

elución:

solvente B

 

Isocrático

(%v/v): 50

Tabla 22, resultados de la segunda configuración

Compuesto

Tiempo de retención (tR)

Factor de retención (k’)

Ancho de banda (sigma total)

Acetofenona

0,0809

0,5208

0,1267

Butilparabeno

0,1611

2,0296

0,1838

Ketoprofeno

0,1114

1,0948

0,1463

Benzofenona

0,2493

3,6878

0,2586

Propiofenona

0,1247

1,3452

0,1558

3-nitrofenol

0,0763

0,4345

0,1241

Etilparabeno

0,0745

0,4012

0,1231

Propilparabeno

0,1037

0,9498

0,1411

4-nitrofenol

0,0732

0,3760

0,1223

Imagen Segunda Configuración

Acetofenona Butilparabeno
Acetofenona Butilparabeno
Acetofenona
Butilparabeno
 
 

Ketoprofeno

Ketoprofeno

Benzofenona

Benzofenona

Propiofenona

3-nitrofenol

Etilparabeno

Propiofenona 3-nitrofenol Etilparabeno
Propiofenona 3-nitrofenol Etilparabeno
Propiofenona 3-nitrofenol Etilparabeno
Propilparabeno 4-nitrofenol
Propilparabeno
4-nitrofenol

9. Explique por qué se da el cambio en los tiempos de retención y en la separación de los compuestos cuando el metanol es sustituido por el Acetonitrilo. ¿En qué caso se obtiene una mejor separación?

Cuando un soluto se disuelve en agua, las fuerzas de atracción entre las moléculas de agua se distorsionan o se rompen. Únicamente los solutos altamente polares o iónicos pueden interaccionar con la estructura del agua. Los solutos no polares casi no interactúan con estas estructuras y como consecuencia “abandonan” la fase móvil para adsorberse al hidrocarburo de la fase estacionaria. La fuerza motriz de la retención no es la interacción favorable del soluto con la fase estacionaria, sino el efecto de repulsión del disolvente por el soluto.

Se observó una mejor separación en el caso de Agua/Metanol

10. ¿Cuál es la importancia del agua en la composición de la fase móvil?

El agua de alta polaridad adsorberá fuertemente sobre la superficie, evitando la adsorción de los solutos, por lo que estos no se retendrán.

La alta presencia de agua da lugar a que compuestos cargados se disuelvan perfectamente en ella y no sean repetidos hacia la fase estacionaria, en estos casos es necesario anular la carga del soluto mediante la presencia de un modificador incluido en la fase móvil.

¡Error! No se encuentra el origen de la referencia.12. Calcule y reporte la diferencia en los cambios de energía libre (ΔΔG) para la retención de los solutos en las fases móviles MeOH/Agua 50/50 y ACN/Agua 50/50, según las siguientes ecuaciones:

Ecuaciones a Utilizar:

∆∆ = ∆ 1 − ∆ 2

1 = − 1

1 = − 2

Acetofenona:

1 − 0,082

. . ∗ 298° ∗ ln(1.5254) = −10,31

2 − 0,082

. . ∗ 298° ∗ ln(0,5208) = 15,94

∆∆ = −10,31

− 15,94

= −,

Butilparabeno

. . ∗ 298° ∗ ln(13,0915) = −62,84

. . ∗ 298° ∗ ln(2,0296) = −17,29

− −17,29

= −.

1 − 0,082

2 − 0,082

∆∆ = −62,84

Ketoprofeno

1 − 0,082

2 − 0,082

. . ∗ 298° ∗ ln(5,7020) = −42,53

. . ∗ 298° ∗ ln(1,0948) = −2,21

∆∆ = −42,53

− −2,21

= −,

Benzofenona

1 − 0,082

2 − 0,082

. . ∗ 298° ∗ ln(11,5799) = −59,85

. . ∗ 298° ∗ ln(3,6878) = −31,88

∆∆ = −59,85

− −31,88

= −,

Propiofenona

1 − 0,082

. . ∗ 298° ∗ ln(3,5762) = −31,13

2 − 0,082

. . ∗ 298° ∗ ln(1,3452) = −7,24

∆∆ = −31,13

− −7,24

= −,

1 − 0,082

2 − 0,082

. . ∗ 298° ∗ ln(1,5371) = −10,50

. . ∗ 298° ∗ ln(0,4345) = 20,36

∆∆ = −10,50

− 20,36

= −,

Etilparabeno

1 − 0,082

2 − 0,082

. . ∗ 298° ∗ ln(2,7739) = −24,93

. . ∗ 298° ∗ ln(0,4012) = 22,31

∆∆ = −24,93

− 22,31

= −,

Propilparabeno

1 − 0,082

. . ∗ 298° ∗ ln(6,2047) = −44,60

2 − 0,082

. . ∗ 298° ∗ ln(0,9498) = 1,25

∆∆ = −44,60

− 1,25

= −,

4-nitrofenol

1 − 0,082

. . ∗ 298° ∗ ln(1,3728) = −7,74

2 − 0,082

. . ∗ 298° ∗ ln(0,3760) = 23,90

∆∆ = −7,74

− 23,90

= −,

Tabla 23 Resultados de energía al cambiar la fase móvil

Compuesto

Fase móvil

ΔΔG

MeOH/Agua

ACN/Agua

(50/50)

(50/50)

ΔG1

ΔG2

Acetofenona

−10,31

15,94

−26,25

Butilparabeno

−62,84

−17,29

−45.55

Ketoprofeno

−42,53

−2,21

−40,32

Benzofenona

−59,85

−31,88

−28,04

Propiofenona

−31,13

−7,24

−23,89

3-nitrofenol

−10,50

20,36

−30,86

Etilparabeno

−24,93

22,31

−47,24

Propilparabeno

−44,60

1,25

−45,85

4-nitrofenol

−7,74

23,90

−31,54

13. ¿Cuáles solutos poseen las diferencias más grandes y más pequeñas en la energía libre asociada a la retención, comparando las fases móviles MeOH/Agua (50/50) y ACN/Agua (50/50)? Explique la naturaleza de esos cambios.

Energías más Grandes

Energías más pequeñas

Etilparabeno: -47,24 J/mol

Propiofenona: -23,89 J/mol

Butilparabeno: -45.55 J/mol

Acetofenona: -26,25 J/mol

La ausencia de un solvente polar que compita por las interacciones electrostáticas con alguno de los componentes, incrementa la energía de interacción entre los componentes del par.

PARTE III Efecto del porcentaje del modificador en la composición de la fase móvil sobre la retención y la resolución.

1. En el listado de compuestos, elimine 7 solutos dejando solo a Acetofenona y Etilparabeno.

Tabla 24 Tercera configuración del HPLC Simulator

Composición de la fase móvil

Solvente A:

Solvente B:

Modo de

Fracción

Agua

Metanol

elución:

del

 

Isocrático

solvente B

(%v/v): 95

Propiedades

Temperatura

Volumen de inyección (μL):

Flujo (mL/min): 10

cromatográficas

(°C): 25

5.0

Propiedades

Constante

Desplazamiento de la señal (min): 0.0

Ruido: 2.0

Puntos

generales

de tiempo

marcados:

(s): 0.1

3000

Propiedades de la columna

Fase

Longitud

Diámetro

Tamaño de

estacionaria:

(mm): 100.0

interno

partícula

 

Agua

(mm): 4.6

(μm): 3.0

Tabla 2 Resultados tercera configuración del HPLC Simulator

Compuesto

Tiempo de retención (tR)

Factor de

Ancho de banda (sigma total)

retención

 

(k’)

 

Acetofenona

0,1119

0,0516

0,1261

Etilparabeno

0,1120

0,0526

0,1261

0,1261 Etilparabeno 0,1120 0,0526 0,1261 3. Cambie gradualmente el porcentaje de metanol en

3. Cambie gradualmente el porcentaje de metanol en intervalos de 10% iniciando en 95% y terminando en 5% (95%, 85%, 75%,…, 5%) y registre en la Tabla 26 y para cada compuesto: el tiempo de retención (tR), el factor de retención (k’) y el ancho de banda (sigma total). Adjunte una imagen del cromatograma obtenido

%

Compuesto

Tiempo de retención (tR)

Factor de

Ancho de banda (sigma total)

MeOH

retención

 

(k’)

 

95

Acetofenona

0,1119

0,0516

0,1261

Etilparabeno

0,1120

0,0526

0,1261

85

Acetofenona

0.1180

0,1096

0,1350

Etilparabeno

0,1199

0,1270

0,1360

75

Acetofenona

0,1311

0,2325

0,1494

Etilparabeno

0,1390

0,3066

0,1543

65

Acetofenona

0,1588

0,4935

0,1759

Etilparabeno

0,1851

0,7399

0,1959

55

Acetofenona

0,2177

1,0472

0,2310

Etilparabeno

0,2963

1,7856

0,3003

45

Acetofenona

0,3427

2,2222

0,3497

Etilparabeno

0,5647

4,3094

0,5610

35

Acetofenona

0,6079

4,7157

0,6001

Etilparabeno

1,2125

10,4002

1,1843

25

Acetofenona

1,1707

10,0070

1,1087

Etilparabeno

2,7760

25,0997

2,6201

15

Acetofenona

2,3650

21,2358

2,1085

Etilparabeno

6,5493

60,5755

5,8382

5

Acetofenona

4,8995

45,0642

4,0224

Etilparabeno

15,6557

146,1926

12,8494

Imagen del cromatograma obtenido

%MeOH: 95 %MeOH: 85
%MeOH: 95
%MeOH: 85

%MeOH: 75

%MeOH: 65

%MeOH: 75 %MeOH: 65 %MeOH: 55 %MeOH: 45 %MeOH: 35 %MeOH: 25
%MeOH: 75 %MeOH: 65 %MeOH: 55 %MeOH: 45 %MeOH: 35 %MeOH: 25

%MeOH: 55

%MeOH: 45

%MeOH: 75 %MeOH: 65 %MeOH: 55 %MeOH: 45 %MeOH: 35 %MeOH: 25
%MeOH: 75 %MeOH: 65 %MeOH: 55 %MeOH: 45 %MeOH: 35 %MeOH: 25

%MeOH: 35

%MeOH: 25

%MeOH: 75 %MeOH: 65 %MeOH: 55 %MeOH: 45 %MeOH: 35 %MeOH: 25
%MeOH: 75 %MeOH: 65 %MeOH: 55 %MeOH: 45 %MeOH: 35 %MeOH: 25
%MeOH: 15 %MeOH: 5
%MeOH: 15
%MeOH: 5

Se repitió el mismo proceso cambiando el metanol por Acetonitrilo y registre los resultados en la Tabla 27.

Tabla 3 Resultados quinta configuración del HPLC Simulator

%

Compuesto

Tiempo de retención (tR)

Factor de

Ancho de banda (sigma total)

ACN

retención

 

(k’)

 

95

Acetofenona

0,1074

0,0098

0,1163

Etilparabeno

0,1066

0,0023

0,1161

85

Acetofenona

0,1089

0,0237

0,1186

Etilparabeno

0,1071

0,0072

0,1181

75

Acetofenona

0,1125

0,0573

0,1219

Etilparabeno

0,1088

0,0227

0,1206

65

Acetofenona

0,1211

0,1385

0,1275

Etilparabeno

0,1140

0,0717

0,1247

55

Acetofenona

0,1420

0,3349

0,1394

Etilparabeno

0,1304

0,2260

0,1340

45

Acetofenona

0,1925

0,8099

0,1696

Etilparabeno

0,1841

0,7125

0,1637

35

Acetofenona

0,3147

1,9584

0,2519

Etilparabeno

0,3453

2,2465

0,2727

25

Acetofenona

0,6100

4,7355

0,4703

Etilparabeno

0,8597

7,0832

0,6553

15

Acetofenona

1,3243

11,4509

1,0197

Etilparabeno

2,4818

22,3339

1,9043

5

Acetofenona

3,0514

27,6893

2,3613

Etilparabeno

7,5963

70,4198

5,8737

%

ACN: 95

%

ACN: 85

% ACN : 95 % ACN : 85 % ACN : 75 % ACN : 65
% ACN : 95 % ACN : 85 % ACN : 75 % ACN : 65

%

ACN: 75

%

ACN: 65

% ACN : 95 % ACN : 85 % ACN : 75 % ACN : 65
% ACN : 95 % ACN : 85 % ACN : 75 % ACN : 65

%

ACN: 55

%

ACN: 45

% ACN : 95 % ACN : 85 % ACN : 75 % ACN : 65
% ACN : 95 % ACN : 85 % ACN : 75 % ACN : 65

%

ACN: 35

%

ACN: 25

% ACN : 35 % ACN : 25 % ACN : 15 % ACN : 5
% ACN : 35 % ACN : 25 % ACN : 15 % ACN : 5

%

ACN: 15

%

ACN: 5

% ACN : 35 % ACN : 25 % ACN : 15 % ACN : 5
% ACN : 35 % ACN : 25 % ACN : 15 % ACN : 5

BIBLIOGRAFIA

- Ruíz, M. (2002). Simulación de la contaminación atmosférica generada por fuentes móviles en Bogotá. Bogotá, Colombia. Ediciones Universidad Nacional de Colombia, pág. 34.