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UNIVERSIDAD TCNICA DE AMBATO

FACULTAD DE CIENCIA E INGENIERA EN ALIMENTOS


INFORME DE PRCTICA DE LABORATORIO

DATOS INFORMATIVOS:
Nombre: Diego Tobar
Carrera: Ingeniera Bioqumica
Ciclo Acadmico: Septiembre Febrero
Asignatura: Microbiologa I
Nivel: Tercero A
Profesor: Lic. Danae Fernndez Rivero
Prctica de Laboratorio N: 02
Fecha de Realizacin: 02/09/2017
Fecha de Presentacin: 10/10/2017
Ayudante de laboratorio: Maura Fiallos

TEMA: USO DEL MICROSCOPIO Y PREPARACION DE FROTIS


1. OBJETIVO
Identificar la importancia del microscopio ptico en el laboratorio de microbiologa.

Reconocer las distintas partes que conforman el microscopio ptico y sus funciones.
Preparar frotis de diferentes muestras biolgicas y observarlas en el microscopio

2/3.- RESULTADOS / DISCUCIN

Grfico 1.-Obseracin espirilos con


azul de metileno, aumento 400.
Microscopio OLYMPUS CX21

La preparacin de un frotis sobre un portaobjetos es imprescindible para poder aplicar


los mtodos habituales de tincin que permiten la observacin al microscopio de las
bacterias. Se realiza tomando una pequea cantidad de cultivo bacteriano, extendindola
sobre un portaobjetos limpio y fijndola como seala (Dionisio 2009), en su manual de
prcticas microbiolgicas. Puesto que la mayora de las bacterias carecen de coloracin,
resulta indispensable teirlas para poder observarlas al microscopio y determinar su
tamao y morfologa, como se observa en el Grfico 1, fijando de manera adecuada la
muestra para evitar la prdida de la muestra en la tincin.

De igual forma al teir nuestra muestra (Grfico 1) con un colorante como es el azul de
metileno que nos ayuda a observar la estructura de los microorganismos presentes , ya
que los colorantes tienen una afinidad por sustancias celulares especificas , como los
colorantes bsicos que al estar cargados positivamente se combinan con sustancias
cargadas negativamente como cidos nucledos y polisacridos cidos lo cual permite su
coloracin , as lo seala (Hylary, 2014), en su artculo sobre la funcin de los
colorantes. Ejm: azul de metileno.
Observando los microorganismos de la muestra podemos notar la presencia de
espirilos(Grfico 1), que son microorganismos en forma de helicoidal o de espiral con
diferentes dimetros y en gran cantidad en la muestra, los cuales pueden poseer flagelos
como lo detalla (Rodriguez, 2008) en su diferenciacin de bacterias.

Tabla 1.- Poder de magnificacin de los lentes


Aumento del Aumento del ocular Aumento Total
Objetivo
4x 10x 40x
10x 10x 100x
40x 10x 400x

El poder de aumento de una lente est determinado por el grado de curvatura de su


superficie y la distancia focal. Para conocer en el microscopio ptico el aumento
definitivo de una imagen se aplica la siguiente frmula:

AUMENTO TOTAL: Aumento del objetivo * Aumento del ocular

Tabla 2.- Resolucin y limite de resolucin


Limite de
Resolucin
Ojo humano 0,2 mm.
Microscopio Fotnico 0,2 m.

Microscopio 0,2 nm.


electrnico
Microscopio ptico 200 nm

La resolucin de un microscopio es la capacidad para determinar con claridad dos


puntos separados. Si los objetos estn tan cerca que tu capacidad de resolucin, los
objetos se mezclan en una sola imagen y es imposible de diferenciarlos. Utiliza el poder
de resolucin de los lentes para ajustar la resolucin del microscopio. Dado que el lmite
de resolucin se da por la longitud que onda que reciben entre mas separados estn la
distancia de onda que reciben ser menor se vern distintos y este ser su lmite as lo
seala (Smith, 2012), por medio de esta ecuacin.
Donde:
=longitud de onda en m
LR=C/N C=constante de proporcionalidad
A NA=ABERTURA NUMERICA
4.- Cuestionario
Qu es el poder de magnificacin?
Es la multiplicacin del lente ocular por el lente objetico, el ocular normalmente
tiene un aumento de 10x (la "x" indica "aumento") por lo que amplifica una
imagen 10 veces su tamao normal. Lo normal es encontrar tres objetivos de
distinto aumento (4x, 10x y 40x) montados sobre una base giratoria que permite
intercambiarlos para aumentar, en forma creciente, el tamao de la imagen
Qu es el poder de resolucin?
Es la capacidad que tiene un microscopio (o el ojo humano, etc.) de percibir por
separado dos puntos pequeos, adyacentes y cercanos, el poder resolutivo
aumenta a medida que disminuye la distancia que separa dichos puntos. (Reyes,
2013)
Cul es el objetivo de usar un colorante al realizar un frotis?
Las tinciones se usan para revelar el tamao, la forma y la agrupacin de los
microorganismos. Para mostrar la presencia de varias estructuras internas y
externas y para producir reacciones fsicas y qumicas especficas a las tinciones,
ayudar a la identificacin de los microorganismos.
Cul es la funcin del aceite de inmersin?
El aceite de inmersin sirve para aumentar la resolucin de un microscopio
mediante la inmersin de la lente objetivo y el espcimen en un aceite
transparente de alto ndice de refraccin.
Mencione los cuidados que se debe tener al manipular el microscopio
(mnimo 3).
1.-Sostenerlo del brazo y la base para transportar el microscopio.
2.- Al finalizar el uso del microscopio bajar la platina al fono y girar el revlver
hasta el lente de menor aumento, despus cubrirlo con su bolsa y dejarlo en el
lugar indicado.
3.- No debe utilizarse alcohol para limpiar el microscopio pues tiende a
deteriorar la pintura.
Cul es la funcin de la Caja de Prismas?
La cual hay un prisma quien es el que se encarga de desviar la imagen que se
recibe desde el lente objetivo hacia el lente ocular formando un ngulo de 120
grados. Esta es la razn por la cual no se debe arrastrar o golpear el microscopio
a la hora de movilizarlo, pues estos prismas de pueden mover se su posicin, la
cual es la que permite el enfoque.
*Grafique un microscopio, seale sus partes y describa su funcin.
5.- Conclusiones

*Se determin que con la ayuda del microscopio ptico es posible observar la estructura
de microorganismos, que no son visibles para el ojo humano.

*La importancia de conocer las partes de un microscopio para obtener mejores


resultados de un anlisis y la manera adecuada de realizar un enfoque con el mismo.

*Se concluyo que realizar una tincin y un frotis de manera adecuada nos ayuda a
generar una excelente observacin en de la muestra en el microscopio, y los cuidados
que se deben tener al realizar un frotis.

6.-Recomendaciones

*Realizar la tincin con otro tipo de colorante para observar y comparar las diferencias
que tiene con el azul de metileno.
*Tomar diferentes tipos de muestras de diferentes cajas Petri y observar las diferencias
entre ellas.
*Utilizar distintos mtodos para fijar una muestra biolgica y comparar la efectibilidad
de cada uno.

7.-Bibliografia

Hylary, Q. (29 de Octubre de 2014). http://microbiologia3bequipo5.blogspot.com/.


Recuperado el 07 de Octubre de 2017, de
http://microbiologia3bequipo5.blogspot.com/: https://goo.gl/6RV6NS
Reyes, J. (16 de Enero de 2013). histoptica.com. Recuperado el 07 de Octubre de 2017,
de histoptica.com: https://histoptica.com/apuntes-de-optica/microscopios-
2/caracteristicas-de-los-microscopios/microscopio-simple-optico-y-compuesto/
Rodriguez, E. (13 de Abril de 2008). books.google.com.ec. Recuperado el 07 de
Octubre de 2017, de books.google.com.ec: https://goo.gl/Qydvfa
Smith, B. (03 de Julio de 2012). muyfitness.com. Recuperado el 07 de Octubre de 2017,
de muyfitness.com: https://muyfitness.com/cual-es-la-resolucion-de-un-
microscopio_13164374/
Manual de prcticas de laboratorio de microbiologa I y II: diversidad y estructura de los
microorganismos. (2009). Mxico, D.F., MX: Universidad Autnoma de Guerrero.
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