Planta Piloto de Fermentaciones

Departamento de Biotecnologa

Adsorcin
(Tomado de Tejeda y col., 1995)

Sergio Huerta Ochoa

UAM-Iztapalapa
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La adsorcin es una de las operaciones ms utilizadas en la etapa

de concentracin de caldos acuosos diluidos.

Mediante la adsorcin, las molculas de un soluto se concentran

en una superficie slida por la accin de fuerzas intermoleculares
entre el soluto y el slido.

Debido a estas fuerzas el fenmeno es fcilmente reversible.

La adsorcin es esencialmente un fenmeno de superficie.

1. Contacto del adsorbente y la solucin

2. Al efectuarse la adsorcin el soluto se une preferentemente a la

superficie del adsorbente respecto a otros solutos
La operacin de adsorcin
requiere de cuatro pasos 3. Lavado de la columna con una solucin que no provoque la
desorcin del soluto de inters

4. Finalmente se efecta la recuperacin del soluto utilizando un

fludo que favorezca la desorcin, elucin
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El establecimiento de las relaciones de

equilibrio y de la capacidad de adsorcin de
los sistemas

El establecimiento de la rapidez de la
adsorcin con respecto a los fenmenos
difusivos y cinticas de superficie
El anlisis de la operacin de
adsorcin mediante la formulacin
de algunos modelos requiere:

Los balances de masa y energa del sistema

de adsorcin especfico (intermitente, continuo,
serie, paralelo, etc.)

Las condiciones iniciales y de frontera

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Fundamentos

Las operaciones de adsorcin son utilizadas en la obtencin de varios tipos de productos

biotecnolgicos como aminocidos, antibiticos, vitaminas y protenas.

Debido a lo anterior cada vez existe una mayor necesidad de profundizar en los aspectos
fundamentales de la operacin, tales como:

Los tipos de adsorcin segn el tipo de

interaccin soluto-adsorbente.

Los tipos de adsorbente

Aspectos fundamentales que
requieren mayor anlisis
Las relaciones de equilibrio

La cintica de la adsorcin
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Tipos de adsorcin segn el tipo de interaccin soluto-adsorbente

Fsica

Inica

Se pueden distinguir cuatro

tipos bsico de adsorcin:
Hidrofbica

Por afinidad
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Relaciones de equilibrio

En el anlisis de los procesos de adsorcin los datos de equilibrio se expresan normalmente como
isotermas de adsorcin:
Las isotermas son parte esencial para modelar la adsorcin y por lo tanto para el diseo, clculo de
eficiencias y costos de la adsorcin.
Las isotermas nos permiten estimar el grado de purificacin que puede ser alcanzado, la cantidad de
adsorbente requerido, y la sensibilidad del proceso respecto a la concentracin del producto.

Freundlich
(Adsorcin por intercambio inico)

Lineal
Cuatro tipos bsicos (Aprox. de isotermas en la regin baja de concentracin del soluto)
de isotermas

Langmuir (Adsorcin por afinidad)

Irreversible
(Sistemas altamente especficos)
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Isoterma de Freundlich: se describe por medio de una ecuacin exponencial emprica:

q = Ky n
q = cantidad de soluto adsorbida por cantidad de
adsorbente
y = concentracin de soluto en la solucin
n = constante adimensional
K = constante cuyas unidades dependen de n
n < 1 isoterma favorable
n > 1 isotermas desfavorables

Isoterma lineal: se describe por medio de una

ecuacin recta que pasa por el origen:

q = Ky
Isoterma Langmuir: se describe por medio de expresiones del tipo:
q0 y
q=
Kd + y
q0 = capacidad mxima del adsorbente
Kd = constante de equilibrio de desorcin
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Cintica de la adsorcin
El estudio de las isotermas de adsorcin nos permite determinar para un sistema soluto-adsorbente
dado, el grado de separacin que puede ser logrado y la sensibilidad del proceso respecto a la
concentracin del soluto.

Sin embargo, para el desarrollo del modelo de la adsorcin es necesario poder establecer, mediante el
empleo de coeficientes de transferencia de masa, la velocidad de la adsorcin o el tiempo necesario
para alcanzar una cierta separacin.

La velocidad efectiva de la adsorcin depende tanto de las condiciones de operacin (Flujo,

temperatura, composicin y presin), como de la configuracin del sistema (intermitente, columna,
etc.) y del tamao del equipo donde se realizar la operacin. El estudio de estos efectos se divide en
dos grandes conceptos:

Los mecanismos de transporte (fsicos y qumicos)

Los efectos de mezclado

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Mecanismos de transporte
Para que una partcula de soluto pueda ser adsorbida en la superficie de un poro del adsorbente, el
soluto tiene que pasar del seno de la fase lquida a la superficie del adsorbente. Varias resistencias al
movimiento del soluto existen en este proceso que pueden visualizarse principalmente como:

Resistencia de la pelcula del lquido que rodea al adsorbente

El soluto difunde desde el seno del lquido a travs de la pelcula de lquido que rodea a la partcula
de adsorbente

Resistencia a la difusin en el seno del adsorbente

El soluto difunde a travs del seno del adsorbente, llamado difusin en la fase del adsorbente

Resistencia a la difusin dentro del poro

La adsorcin se efecta principalmente dentro del poro, por lo que el soluto debe difundir a travs
del lquido al interior de los poros.

Resistencia a la reaccin en la superficie

El soluto se une al sitio de adsorcin por medio de una reaccin de superficie, la cual es ms rpida
que los procesos anteriores.
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Control de la resistencia en la pelcula

Cuando la resistencia de la pelcula es mucho mayor que la del poro o la de la reaccin de superficie,
la velocidad de adsorcin est controlada a nivel local por el flujo del soluto a travs de la pelcula que
rodea al adsorbente. En este caso la velocidad de adsorcin puede expresarse como:

(
R = kL a y y* )
kL = Coeficiente de transferencia de masa
a = rea del adsorbente por unidad de volumen del lecho (adsorbente y lquido)
y = Concentracin de soluto en el seno de la fase lquida
y* = Concentracin hipottica de soluto en el lquido, en equilibrio con la concentracin de soluto en el
adsorbente
R =Velocidad de adsorcin referida al volumen del lecho (adsorbente y solucin)

El parmetro a puede ser correlacionado con la porosidad del lecho (volumen de lquido sin incluir
el lquido de los poros/volumen del lecho) y el dimetro de la partcula del adsorbente dp de acuerdo a
la expresin:
6(1 )
a=
dp
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La resistencia de la pelcula por si misma rara vez controla la rapidez de la transferencia de masa,
excepto en los casos en que la partcula de adsorbente es pequea y la difusividad en el poro es grande.
Para sistemas de adsorcin en columnas, kL generalmente puede correlacionarse con una expresin de
la forma:

Sh = C1 + C2 (Re ) (Sc )
a b

donde C1, C2, a y b son constantes y Sh, Re y Sc son los nmeros adimensionales de Sherwood,
Reynolds y Schmidt dados por las siguientes relaciones:

kLd p
Sh =
DAB

v L d p
Re =

L
Sc =
L DAB
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Control de la difusin del soluto en el seno del adsorbente

La difusin en la fase slida del soluto una vez que ha pasado del seno del lquido a la fase slida, se
presenta en algunos slidos homogneos permeables como las resinas que se utilizan en intercambio
inico o en adsorbentes con poros cubiertos con pelculas mviles, o en lquidos utilizados para
impregnar la partcula porosa.
Considerando una geometra esfrica uniforme el balance de soluto en la pelcula est dado por:

q 2q 2 q
= D S +
t r 2
r r

DS = Difusividad efectiva del soluto en la fase slida [L2/t]

r = La coordenada radial al interior de la partcula [L]
q = Concentracin de soluto en la fase slida [M/L3]

La velocidad de transferencia de masa entre las fases puede ser expresada por la Ley de Fick como:
q
R = aD S r = Ra
r
Ra = es el radio externo de la partcula
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El balance de masa del soluto suele ser aproximado utilizando una fuerza impulsora lineal de la
siguiente forma:

q
t
(
= S ksa q* q )
q* = Concentracin hipottica de equilibrio con la concentracin de soluto en el seno de la fase lquida
S = Factor de correccin adimensional que se introduce al linearizar la expresin
ks = Coeficiente de transferencia de masa (L3total/rea-tiempo)

Con la linearizacin anterior la expresin de la velocidad de transferencia de masa por unidad de

volumen de lecho es:

(
R = (1 ) S k s a q * q )
ksa se correlaciona con la difusividad mediante la ecuacin:
60 D S
ksa =
d p2
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Control de la difusin del soluto en la fase lquida al interior de los
poros
Cuando la velocidad de adsorcin est controlada por la difusin del soluto al interior de los poros de
la partcula de adsorbente, hasta el sitio de adsorcin, el balance de soluto al interior de la partcula
est dado por la expresin:

yi 2 yi 2 yi qi
i = D p + (1 )
t r
2
r r t
yi = Concentracin de soluto en la fase lquida al interior del poro [M/L3]
qi = Concentracin de soluto en la fase slida [M/L3]
Dp = Difusividad efectiva del soluto al interior del poro [L2/t]
i = Porosidad de la partcula al soluto de inters [L3/L3]

Para el caso en que la acumulacin del soluto al interior del poro sea mucho menor que la velocidad
de adsorcin, el balance de soluto puede ser escrito como:
qi 1 2 yi 2 yi
= D p +
t 1 i r 2
r r
La velocidad de transferencia de masa entre las fases puede ser expresada por la ley de Fick como:
yi
R = aD r = Ra
r
p
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Para lquidos la difusividad Dp puede ser expresada como:
D
D p = AB i
0
0 = Tortuosidad del adsorbente (una medida de la estructura de los slidos)
DAB = Difusin molecular del soluto en un lquido libre de adsorbente
i = Porosidad de la partcula al soluto de inters [L3/L3]
El balance de soluto puede aproximarse utilizando una fuerza impulsora lineal:
q p k p a (q q )
*

=
t q R (1 )
yA

de tal manera que, p k p a (q * q )

R =
qR
yA
q* = Concentracin hipottica de equilibrio con la concentracin de soluto en el seno del lquido
q = Concentracin promedio de soluto en el adsorbente
qR = Concentracin de la fase slida en equilibrio con la concentracin yA de la solucin que se va a tratar
p = Factor de correccin por linearizacin

kpa puede correlacionarse con la difusividad efectiva del poro mediante la expresin
60 D p (1 )
k pa =
d p2
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Control de la reaccin de superficie

Generalmente la reaccin de adsorcin en la superficie del adsorbente es mucho ms rpida que los
otros mecanismos y rara vez es el mecanismo controlante.

En las expresiones cinticas ms utilizadas la reaccin de superficie es tratada como una reaccin
qumica, reversible o irreversible, de un cierto orden.

Dos expresiones comunmente utilizadas principalmente para sistemas de intercambio inico son:

Cintica reversible de primer orden:

R = (k 1 y k 2 q )
Cintica reversible de segundo orden:
R = [k 1 y (q 0 q ) k 2 q ]
k1 y k2 son las constantes cinticas de adsorcin y desorcin, respectivamente.
q0 es la capacidad mxima de adorcin del adsorbente.
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Efectos de mezclado
La velocidad de adsorcin efectiva tambin puede disminuir por efectos de un mezcaldo imperfecto.

Uno de los modelos ms utilizados para describir la desviacin del comportamiento ideal del flujo al
interior de las columnas, es el modelo de flujo tapn con dispersin, donde los efectos de la dispersin
axial debida a remolinos y de la difusin molecular, se agrupan en el concepto del coeficiente efectivo de
dispersin axial, en funcin del cual se puede definir un coeficiente aparente de transferencia de masa
dado por: 2
v
kd a =
E

E = Coeficiente de dispersin axial [L2/t]

v = Velocidad superficial de flujo [L/t]

Para flujo laminar en lechos empacados el nmero de Reynolds basado en el dimetro de las partculas de
lecho es menor a 10. Bajo esta consideracin el nmero de Peclet (grado de dispersin en la columna)
toma un valor constante de 2
d pv
Pe = =2
E
De tal manera que la velocidad de adsorcin se puede expresar en funcin de un coeficiente aparente de
transferencia de masa por dispersin
R = kd a y y* ( )
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Resistencias combinadas
En algunos sistemas, la cintica de adsorcin puede ser descrita en forma ms adecuada utilizando
un modelo donde la combinacin de resistencias (p. ej. Pelcula y poro) describen en forma ms
precisa la cintica.

En estos casos, la combinacin de resistencias se presenta por medio de un coeficiente de

transferencia de masa global que agrupa el efecto de las resistencias individuales.

Para el establecimiento del coeficiente global de transferencia de masa es necesario fijar la forma
en que las resistencias individuales estn relacionadas: en serie o en paralelo.

Si se considera como ejemplo el caso de la resistencia de la pelcula y la del poro actuando en

serie, para el clculo del coeficiente global se deben sumar los inversos de los coeficientes
individuales (para equilibrios lineales).

1 1 1
= +
K0 kL k p

K0 = Coeficiente global de transferencia de masa referido a la fase lquida

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Tipos de cromatografa lquida segn el principio de separacin

Cromatografa lquido-lquido

Tipos bsicos de cromatografa Cromatografa de filtracin en gel

por elucin
Cromatografa por adsorcin

Fsica

Por intercambio inico

De interaccin hidrofbica
Cromatografa por adsorcin
De fase inversa

De afinidad
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Tipos de cromatografa de acuerdo a la presin de operacin

Presin baja (1 atm, 90-100 m)

(Cromatografa de baja presin, FPLC)

De acuerdo a la presin de
Presin moderada (2-50 atm, 30-50 m)
operacin y al tamao de partcula

Presin alta (51-350 atm, 5-10 m)

(Cromatografa de alta resolucin, HPLC)
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Cromatografa por elucin

Eluyente
La cromatografa por (fase mvil)
elucin es un mtodo
Muestra a t = 0
para separar en sus
componentes una
mezcla de solutos y es Adsorbente
empleada con el (fase estacionaria)

propsito de purificar
productos de inters
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Tipos de cromatografa por elucin

Eluyente Eluyente
(composicin constante) (composicin vara gradualmente)

Muestra a t = 0 Muestra a t = 0

Elucin Elucin
isocrtica por gradiente

La operacin de una columna de cromatografa por elucin es similar a la de una columna

de adsorcin. Sin embargo, en la cromatografa por elucin la columna no se satura
completamente con soluto.
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Adsorcin frontal o cromatografa por elucin?

Eluyente Eluyente
+ A y B diluidos + A y B concentrados

Adsorcin Cromatografa
frontal por elucin

En la cromatografa por elucin el soluto se purifica a expensas de un cierto grado de

dilucin, mientras que en la adsorcin el soluto se retiene en la columna y posteriormente
se eluye concentrado.
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Filtracin en gel
Mezcla

Separacin por tamao

Flujo

Flujo
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Intercambio inico
Gradiente salino
+ - Mezcla

+ +
+ +
+ + + -
+
+ Matriz cargada
+ +
+ positivamente
+ +
+ Las cargas en las protenas son debidas a:
+ +
+ Cargas positivas: Histidina, lisina, argenina y en menor
+ + + grado N-aminos terminales
+ + Cargas negativas: cidos asprtico y glutmico,
+ + C-grupos carboxilo terminales y
+ + en menor grado residuos de cisteina

Arriba de su pI las protenas tienen carga neta negativa

Debajo de su pI las protenas tienen carga neta positiva
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Cromatoenfoque

pH 9 pH 6 pH 6

pH 9 pH 9

Intercambio inico Cromatoenfoque

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Cromatoenfoque
Buffer de elucin
a pH 8 Tasa de
8 Tasa de flujo
pH
migracin
4
+
8.5
+
5 +
+
9 Protena
con pI 9
6 + + +
9.5
- - -
10 7

Columna equilibrada a pH 10
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Cromatografa de interaccin hidrofbica

Gradiente salino
Mezcla

Matriz cargada
con grupos no-
inicos
La hidrofobicidad en la superficie de las protenas
ocurre debido a:
La presencia en la superficie de cadenas de amino-
cidos no polares tales como: alanina, metionina,
triftofano y fenilalanina

Iones del salting out decrecen la disponibilidad de agua

en solucin, incrementan la tensin superficial y mejoran
las interacciones hidrofbicas
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Protein Lab
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