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Menten
Integrao da equao de Michaelis-Menten
d [P]
v =
dt
d [P] Vmax ([A]0 [P])
[A] = [A]0 [P] =
dt K m + ([A]0 [P])
Vmax [A]
v =
K m + [A]
Integrao da equao de Michaelis-Menten
K m + [A]0 [P]
[A]0 [P] d [P] = Vmax dt
Usando a condio inicial [P]=0 quando t=0, fica =-Km , e rearranjando vem:
[A]0
Vmax t = [P] + K m ln
[A]0 [P]
Integrao da equao de Michaelis-Menten
[A]0
V app
max t = [P] + K app
m ln
[A]0 [P]
O uso das grandezas aparentes reala o facto de que esta equao muito
mais geral do que o caso a partir do qual foi deduzida.
Vmax(app) e Km(app) podem diferir muito de Km e Vmax , podendo at ser
negativos!
No entanto, a seguinte relao sempre vlida:
app
Vmax [A]0
v0 = app
K m + [A]0
A equao integrada,
[A]0
V app
t = [P] + K app
ln
max m
[A]0 [P]
t 1 [P] K mapp
= app + app
ln ([A]0 / ([A]0 [P]) ) Vmax ln ([A]0 / ([A]0 [P]) ) Vmax
t [P]
Portanto um grfico de em funo de
ln ([A]0 /([A]0 [P]) ) ln ([A]0 /([A]0 [P]) )
app
produz uma recta de declive 1/Vmax e ordenada na origem K mapp / Vmax
app
t
ln ([A]0 /([A]0 [P]) )
[A]0 / v0 app
1/Vmax
K mapp / Vmax
app
K m / Vmax
1/Vmax
[P] [A]0
ln ([A]0 /([A]0 [P]) )
Competio de substratos e especificidade
enzimtica
Competio de substratos e especificidade enzimtica
A eficincia cataltica kA = kcat/Km tambm se designa por constante de especificidade.
A razo torna-se clara se considerarmos uma situao de competio entre dois
substratos A e A, pelo centro activo de um mesmo enzima E:
E + A
k1
EA
k2
E+P
k1
k1
E + A k2
EA E + P
k 1
Estas so assim concentraes de [A] e [A] que conduzem a uma mesma velocidade
de catlise observada para cada substrato.
Teste de competio de substratos
Preparando uma srie de solues contendo uma mistura dos dois substratos tais que
as suas concentraes so interpoladas entre zero e [A]0 e [A]0 :
[A] = (1 r )[A]0
r [0,1]
[A] = r[A]0
Para cada uma destas solues, vtot ser a soma das velocidades observadas para a
catlise de A e A .
Teste de competio de substratos
A expresso de vtot assume a seguinte forma:
/ K m ) r[A]0
(Vmax / K m )(1 r )[A]0 + (Vmax
v tot =
1 + (1 r )[A]0 /K m + r[A]0 / K m
v0 [(1 r )(1 + [A]0 / K m ) + r (1 + [A]0 / K m )]
= = v0
(1 r )(1 + [A]0 /K m ) + r (1 + [A]0 / K m )
Concluso: se os dois substratos competirem para o mesmo centro activo, a
velocidade total observada ser a mesma em todas as misturas (vo).
hexocinase hexocinase +
galactocinase