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RESUMEN
El fique (Furcraea sp.) es una planta nativa de Colombia, de la cual se extrae slo un 4% de fibra natural y el otro 96% lo
componen el jugo y los bagazos. El jugo de fique contiene aproximadamente 9,71, 28,74 y 13,51 g/L de sacarosa, fructosa
y glucosa respectivamente, azcares que son aprovechados por algunos microorganismos para la produccin de bioetanol.
En este trabajo se realiz la fermentacin alcohlica empleando dos microorganismos seleccionados, Clavispora lusitaniae,
aislada del jugo de fique, y Saccharomyces cerevisiae, durante 48 h, a 25C y a un pH de 4,4, obtenindose 10,68 g/L y 5,26 g/L
de bioetanol respectivamente. La temperatura ms adecuada para realizar el proceso fermentativo de jugo de fique fue de
30C, obtenindose 12,3 g/L de bioetanol con Clavispora lusitaniae a las 48 h de fermentacin, producindose un 103% ms
bioetanol que la obtenida con Saccharomyces cerevisiae. En la fermentacin extractiva empleando Clavispora lusitaniae durante
48 h a 30C y a un pH de 4,4, se obtuvieron 7,87 g/L de bioetanol, 6,75 g/L en la fase acuosa y 1,12 g/L en la fase oleosa,
un 35% menor que al utilizar fermentacin tradicional.
Palabras claves
Bioetanol, jugo de fique, fermentacin alcohlica, fermentacin extractiva.
*Universidad Pontificia Bolivariana (UPB), Facultad de Ingeniera Qumica, Centro de Estudios y de Investigacin en Biotecnologa (CIBIOT), Medelln, Colombia. Contacto: oscar.vasco@upb.edu.co
Recepcin: 10-15-2013. Aceptacin: 08-06-2014.
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de los gases de efecto invernadero generados en el de la solucin acuosa. Para la produccin de bioe-
mundo por la utilizacin de combustibles fsiles. Sin tanol empleando la fermentacin extractiva y glu-
embargo, la produccin de bioetanol por medio de la cosa, Boudreau y Hill, utilizaron cido oleico como
fermentacin tradicional se ha visto cuestionada por solvente extractor, generando un bajo gasto ener-
el requerimiento energtico en la separacin agua-eta- gtico sin presentar toxicidad para la levadura.6 El
nol, dando paso a que algunos gobiernos revisen los coeficiente de particin indica la capacidad de un
subsidios de esta industria para hacerlo ms competi- solvente para atrapar un soluto determinado, y la
tivo con la gasolina.1 El bioetanol es el producto de longitud de la cadena carbonada del cido carbox-
la fermentacin anaerobia de azcares provenientes lico utilizado tiene una relacin inversamente pro-
de campos de cosecha, entre los que se destacan el porcional al coeficiente de particin y a la toxicidad
maz, la caa de azcar, la papa, la yuca, la cebada, de ste sobre la levadura. Se encontr que el cido
entre otros,2 productos empleados principalmente valrico presenta un coeficiente de distribucin de
para el consumo humano, generando el incremento 1,10, mientras que el cido oleico presenta un coe-
de los precios y la escasez de reservas alimenticias.3 ficiente de distribucin de 0,069, lo que indica que
El fique es una planta no alimentaria la cual cre- su capacidad de extraccin de bioetanol se reduce a
ce de los 1.300 m a los 2.800 m sobre el nivel del medida que se incrementa el nmero de carbonos
mar, es desrtica y no necesita de riegos especiales. de la cadena del cido carboxlico aunque es menos
Esta planta tiene una importancia socio-econmica txico para la levadura.6
en Colombia debido a la fibra natural extrada de Con la realizacin de este trabajo se propone
esta, que se utiliza para la elaboracin de ropa, cuer- como alternativa la produccin de bioetanol a par-
das, costales, hamacas y muchas otras aplicaciones. tir de jugo de fique. Con esta propuesta se plantea
En la obtencin de la fibra se realiza el proceso de ayudar a solventar las necesidades actuales en la in-
desfibrado, en el cual se generan residuos como el dustria de biocombustibles a partir de un residuo
bagazo de fique y el jugo de fique que corresponde contaminante, que no es explotado en este campo
cerca del 96%.4 El jugo de fique es una suspensin y que no compite con la industria de alimentos ni la
con caractersticas variables, dependiendo de la edad agricultura, debido a que no necesita de siembras en
de la planta, la estacin del ao y la fertilidad del suelos para tal fin. Adems se genera un valor agre-
suelo, es de color verde ocre y corrosivo, est for- gado a un residuo industrial y el costo del producto
mado por agua (85%), celulosa (6%), materia org- sera mucho ms econmico.
nica (8%) compuesta por clorofila, azcares, caro-
tenoides, saponinas, sapogeninas, esteroides, cidos
orgnicos, alquitranes, flavonoides, lignina, lipoides, MATERIALES Y MTODOS
urea, nitrgeno y minerales como el calcio, fsforo y
potasio que lo convierte en un insumo industrial que Sustrato
se puede utilizar para la produccin de bioetanol.5 El jugo de fique se obtuvo de la Vereda El Pantanillo
En Colombia cerca de 85 millones de litros de jugo de del Municipio de Barbosa, Antioquia. Se transport
fique son desechados en el campo, contaminando re- en recipientes plsticos expandibles refrigerados y se
ceptores de agua, debido al incremento de la demanda conserv en el mismo recipiente a -18C durante un
qumica de oxgeno.4 De esta forma, el jugo de fique tiempo mximo de 8 das.
representa un desecho industrial contaminante que
debe recibir un tratamiento fsico y qumico para su Caracterizacin del jugo de fique
vertimiento, o puede ser utilizado como materia pri- Al jugo de fique fresco se le determin el pH, los sli-
ma para la fabricacin de bioetanol, jabones o este- dos totales, las cenizas, la humedad y la DQO siguien-
roides generando un valor agregado al residuo. do mtodos normalizados.7,8 Adems se determin
La fermentacin extractiva es una tcnica alter- el DBO5 utilizando un equipo de biodegradabilidad
nativa para la reduccin en los costos, comparada a Sistema OxiTop 115 WTW con 100 mL de medio
la fermentacin tradicional que emplea un solven- de cultivo y 1,5 mL de inculo y se midi la cada
te extractor apolar afn a uno de los componentes de presin durante 5 das. La glucosa, fructosa, saca-
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rosa y bioetanol fueron cuantificados empleando un ron tomadas cada 24 h y centrifugadas a 6.000 rpm
HPLC (Shimadzu, prominence) con una columna IC durante 15 minutos, el sobrenadante se filtr me-
Pack Ion-exclusin 3,8 mm x 300 mm, fase mvil diante una membrana de 0,45 m y se llev HPLC
cido sulfrico 0,005N, detector RID en modo iso- para la medicin de azcares y etanol.
crtico a 25C, un flujo de 0,6 mL/min y un volumen
de inyeccin de 10 L. Los metales pesados se cuanti-
ficaron por espectrofotometra de absorcin atmica. RESULTADOS
pH 4,25
Fermentacin alcohlica tradicional Slidos totales (g/L) 68,8
La fermentacin alcohlica se realiz empleando
Cenizas (%) 1,34
Clavispora lusitanae y Saccharomyces cerevisiae en un Bio-
rreactor de 3 L (New Brunswick Scientific, BioFlo Humedad (%) 91,05
110), controlando la temperatura de 25C, un valor Fructosa (g/L) 28,74
de pH de 5,5 y una agitacin de 200 rpm utilizando
Glucosa (g/L) 13,51
un impeller tipo rushton y un 10% de inculo del
volumen de medio de cultivo, durante 48 h. Sacarosa (g/L) 9,71
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En la seleccin del jugo de fique se aislaron afectan la cintica y por tanto la productividad y la
ms de 6 microorganismos, entre ellos Arthrobac- conversin a bioetanol. Esto debido a que el proceso
ter sp., Ochrobactrum sp., Mucor sp., Trichoderma sp., de fermentacin alcohlica es exotrmico, y por tan-
Cunnighamella sp., Aspergillus niger y la levadura Clavis- to, pequeas variaciones en la temperatura pueden
pora lusitaniae, encontrndose que este ltimo fermen- desviar el proceso de las condiciones operacionales.7
ta algunas hexosas como la glucosa, pero adems es La temperatura de 30C, coincide con la temperatura
capaz de metabolizar xilosa, sacarosa, ribosa, entre ptima de crecimiento de diferentes levaduras, como
otras.10 Adicionalmente, este microorganismo, al ser Saccharomyces cerevisiae, Candida utilitis y la Candida
aislado del jugo de fique, hace que disminuya el tiem- shehatae utilizadas para la produccin de bioetanol.
po de adaptacin en el mismo sustrato empleado. El Siqueira y colaboradores (2008), estudiaron la pro-
otro microorganismo seleccionado para la produccin duccin de bioetanol a escala de laboratorio, piloto
de bioetanol fue la levadura Saccharomyces cerevisiae, la e industrial a partir de melaza utilizando Saccharomyces
cual convierte las hexosas en bioetanol en condiciones cerevisiae.1 Las condiciones de trabajo fueron 30C y
anaerbicas, generando dos moles del compuesto por 150 rpm en todos los experimentos, obtenindose 39
cada mol de hexosa consumida.11 g/L de bioetanol a escala de laboratorio y 10 m3/da
Las levaduras en general son de rpido crecimien- de bioetanol escala industrial para un total de 8 tan-
to, rpida dispersin de clulas y facilidad para replicar ques de fermentacin, cada uno de los cuales con un
cultivos,12 lo que hace que el tiempo de fermentacin volumen de 20 m3 de sustrato.1 Investigadores como
sea corto para ambos microorganismos. Se evalu Jeffries y Alexander (2012), estudiaron la produc-
cul de los dos microorganismos tena un mejor ren- cin de bioetanol a partir de xilosa utilizando Candida
dimiento en la produccin de bioetanol empleando shehatae obteniendo 25 g/L de bioetanol en condicio-
jugo de fique (Figura 1) y as seleccionar el microorga- nes operacionales de 30C y un pH de 4,5.15
nismo ms apto para la obtencin de bioetanol. En la fermentacin extractiva se utiliz solo la
Por otro lado, el jugo de fique est compuesto por levadura Clavispora lusitaniae como inculo para desa-
carotenoides, saponinas, sapogeninas, esteroides, en- rrollar la fermentacin alcohlica de jugo de fique
tre otros. Las saponinas son un grupo de glucsidos debido a su compatibilidad con el cido oleico y su
oleosos naturales que forman una espuma abundan- reconocida capacidad para metabolizar los azcares
te y relativamente estable cuando se agitan con agua, generando altos rendimientos en la produccin de
debido a la disminucin de la tensin superficial de bioetanol.15 Freer y Greene (1990), evaluaron el me-
stas.13 Las saponinas al igual que los taninos han canismo general a travs del cual la C. lusitaniae me-
sido reportadas con actividad herbicida, fungicida y taboliza la Celobiosa (disacrido formado por dos
bactericida. Tal como lo reportan Sliwinski y cola- molculas de glucosa), encontrando que la C. lusi-
boradores, quienes utilizaron extractos de saponinas taniae no presenta fase log durante la fermentacin
en el control de los microorganismos presentes en alcohlica lo que indica que este microorganismo
el rumen.14 Es por esto que este medio de cultivo tiene la capacidad de transportar estos azcares al
es agresivo para la mayora de los microorganismos interior de la clula.16 En este caso no se emple la
y que la produccin de bioetanol sea mayor con la levadura S. cerevisiae ya que no favorece su metabo-
levadura aislada del jugo de fique, Clavispora lusitaniae lismo lo cual confirma la decisin de trabajar con
en comparacin a Saccharomyces cerevisiae, obtenindo- la C. lusitaniae.
se 10,68 g/L y 5,26 g/L de bioetanol respectivamente. En la Figura 3 se observa que luego de 24 h de
En la Figura 2 se observa que la temperatura a fermentacin se alcanza una concentracin de bioe-
la cual el microorganismo produjo una mayor can- tanol de 7,03 g/L, de los cuales se transfieren a la
tidad de bioetanol fue de 30C, dado que en estas fase orgnica 1,17 g/L que corresponde a un 14,2%
condiciones el microorganismo metaboliza la mayor y 48 h despus se detectaron 6,8 g/L de bioetanol,
cantidad de azcares presentes para producirlo, ob- del cual se transfiri a la fase orgnica un 14,1%
tenindose una concentracin de 12,3 g/L. Rivera y equivalente a 1,11 g/L.
colaboradores (2006), realizaron un estudio donde Bajo las condiciones de operacin descritas an-
informan que pequeos cambios en la temperatura, teriormente para la fermentacin extractiva, se ob-
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