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UNIVERSIDAD NACIONAL DE SAN

CRISTBAL DE HUAMANGA
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

ESCUELA DE FARMACIA Y BIOQUMICA

PROYECTO DE INVESTIGACIN
Bioequivalencia de doxiciclina capsulas de 100mg en
presentacin genrico y de marca en voluntarios sanos.
Ayacucho-2017.

PRESENTADO POR : ALVARADO CANCHARI, Mario E.

AYACUCHO PER
2017
I. GENERALIDADES

1. TTULO

Bioequivalencia de doxiciclina capsulas de 100mg en presentacin genrico


y de marca en voluntarios sanos. Ayacucho-2017.

2. PERSONAL INVESTIGADOR
2.1. Autor
ALVARADO CANCHARI, Mario Efran Estudiante de Farmacia y
Bioqumica, Facultad de Ciencias de la Salud, Universidad Nacional
de San Cristbal de Huamanga.

2.2. Asesor
Mg. Q.F.COMN VETURA Pablo Williams. Profesor asociado a
educacin exclusiva; adscrita a la escuela profesional de Farmacia
y Bioqumica de la Facultad de Ciencias de la Salud de la
Universidad Nacional de san Cristobal de Huamanga.

3. TIPO DE INVESTIGACIN
Bsica experiental.
4. RGIMEN DE INVESTIGACIN
Investigacin orientada.
5. LUGAR DE EJECUCIN DEL PROYECTO
Departamento: Ayacucho
Provincia: Ayacucho
Distrito: Huamanga
El desarrollo de la presente investigacin se llevara a cabo en los
laboratorios de la Escuela Profesional de Farmacia y Bioqumica de la
Facultad de Ciencias de la Salud de la Universidad Nacional San
Cristbal de Huamanga.

6. CRONOGRAMA DE TRABAJO
6.1. Tiempo de duracin
06 Meses.
6.2. Fecha de inicio
Junio de 2017
6.3. Fecha probable de trmino

Noviembre de 2017.
6.4. Cronograma de actividades

Tiempo

Junio Julio Agosto Septiembre Octubre Noviembre


Actividades
2017 2017 2017 2017 2017 2017
1. Revisin
bibliogrfica y
elaboracin de
2.
fichas Ajuste e
implementacin
bibliogrficas.
de la tcnica.
3. Revisin y
Aprobacin del
proyecto de
investigacin.
4. Ejecucin del
proyecto.

5. Redaccin del
informe en
6. Revisin
borrador. y
correccin del
borrador
7. Redaccin del
informe final.
8. Presentacin
del trabajo.

7. RECURSOS DISPONIBLES
7.1. Humanos
02 Qumicos Farmacuticos y 1 estudiante.
7.2. Materiales
Material Biolgico
- Plasma sanguneo
Materiales de vidrio
- 40 tubos de ensayo.
- 60 viales de 5 - 10ml.
- Fiolas de 10, 25, 50, 100 y 1000ml.
- Beacker 50, 100, 250 y 1000mL
- Pipetas de 1, 2, 5 y 10ml.
Reactivos
- Estndar de Doxiciclina USP.
- Acetonitrilo grado HPLC (como fase mvil)
- Metanol grado HPLC (como precipitante y separacin del p.a. del
plasma)
- Buffer fosfato pH 4.8 grado HPLC (fase mvil)
- Agua grado HPLC.
Equipos y aparatos
- HPLC (cromatografa liquida de alta resolucin) marca DIONEX.
- Centrfuga modelo: PLC-012E marca UNIVERSAL CENTRIFUGUE.
- Vortex
- Congeladora marca TECMAVENT.
- Micropipetas.

7.3. Otros

- 01 Computadora.
- Programa para anlisis estadstico (Software).
- 24 catter N 21
- Filtros de membrana de Nylon 0.45m.
8. PRESUPUESTO
Presupuesto total S/ 15000.00 (quince mil nuevos soles).

PARTIDAS OBJETO SOLES


30 Bienes 4000.00
39 Servicios de terceros 1000.00
50 Equipos 10000.00
TOTAL 15000.00

9. FINANCIAMIENTO
Autofinanciado S/. 5000.00
UNSCH S/. 10000.00

Total S/. 15000.00


1. PROBLEMA
1.1. Enunciado del problema:
Sern Bioequivalentes las capsulas de doxiciclina 100 mg en presentacin
genrico y de marca en voluntarios sanos ayacuchanos?
1.2. Definicin y delimitacin del problema:
En Europa y en los Estados Unidos de Norteamrica la autorizacin de
medicamentos genricos descansa en la demostracin de la
Bioequivalencia mediante estudios de biodisponibilidad comparada in
vivo. Estos argumentos son imprescindibles para la autorizacin de la
comercializacin de los frmacos genricos por parte de las autoridades
sanitarias europeas y norteamericanas. Como medida de la cantidad de
frmaco absorbido se utiliza el rea bajo la curva concentracin-tiempo
(AUC), y como indicador de la velocidad de absorcin se mide la
concentracin mxima (Cmax) alcanzada en la curva concentracin-tiempo
y el tiempo que tarda en alcanzarse (Tmax). Se entiende por
Bioequivalencia entre dos productos cuando presentan una
biodisponibilidad comparable en condiciones experimentales apropiadas.
El objetivo final de todo este proceso tiene como nico sentido poner a
disposicin de la sociedad frmacos de calidad, que adems puedan
contribuir a una utilizacin ms racional de los recursos econmicos en el
sistema sanitario. 4

En el Per, la Direccin General de Medicamentos Insumos y Drogas


(DIGEMID) del Ministerio de Salud es la entidad responsable de regular
y garantizar que los medicamentos en el mercado nacional sean de
calidad, seguros y eficaces.8

Este estudio se limita a determinar la Bioequivalencia de las cpsulas


de Doxiciclina de 100mg (Laboratorio Induquimica) con su innovador
Vibramicina (Laboratorio PFIZER, S.A), comparando sus valores de
Cmax, Tmax, y AUC, as como tambin sus parmetros y constantes
farmacocinticas, que deben cumplir con los requisitos establecidos por
la FDA de 85 125% para este tipo de estudio. 4

2. CONSTRUCCIN DEL MARCO TERICO


2.1. Antecedentes
En un estudio realizado por Pharmakin GmbH, Sociedad para la
farmacocintica, Alemania. El estudio consista en comparar la
biodisponibilidad de doxiciclina (CAS 564-25-0) frente a Monodox (como
preparacin de referencia) en 24 varones sanos. El estudio se realiz de
acuerdo a un estudio abierto, aleatorizado de dos perodos con diseo
cruzado, los parmetros farmacocinticos se determinaron mediante
mtodo de HPLC validado con deteccin UV. Obtenindose los siguientes
resultados: Cmax de 1,715.1 ng / ml (ensayo) y 1,613.3 ng / ml (de
referencia); AUC (0-infinito) de 28,586.5 ng xh / ml (ensayo) y 29,047.5 ng
xh / ml (referencia); Tmax mediana fue de 1,88 h (prueba) y 2.00 h
(referencia). Se determinaron de eliminacin de plasma vidas medias (t1 /
2) de 16.49 h (prueba) y 16,75 h (de referencia). Ambos parmetros de
destino primario AUC (0-infinito) y Cmax fueron probados
paramtricamente por anlisis de varianza (ANOVA) y el 92,39% -103,53%
(AUC (0-infinito)) y 98,45% -111,74% (Cmax). Bioequivalencia entre la
preparacin de prueba y de referencia se demostr ya que para ambos
parmetros AUC y Cmax los intervalos de confianza del 90% de las
relaciones T / R de datos transformados logartmicamente estaban en el
rango de aceptacin general de 80 0% -125%. 26

Un estudio realizado en los EE.UU tuvo como objetivo comparar la


biodisponibilidad de doxiciclina capsulas de 100 mg en 24 varones sanos.
El estudio se realiz de acuerdo a un estudio abierto, diseo aleatorio
cruzado, en dos periodos, dos secuencias con una fase de lavado de 16
das. Las muestras de sangre para perfiles farmacocineticos fueron
tomadas hasta 72 h despus de la dosis, y las concentraciones
plasmticas de doxiciclina se determinaron con un mtodo de HPLC
validado con deteccin UV. Se alcanzaron concentraciones plasmticas
mximas (Cmax) de 1,715.1 ng / ml (ensayo) y 1,613.3 ng / ml (de
referencia). Se calcularon las reas bajo la curva de concentracin
plasmtica-tiempo (AUC (0-infinito)) de 28,586.5 ng xh / ml (ensayo) y
29,047.5 ng xh / ml (referencia). El tmax media fue 1,88 h (prueba) y 2.00 h
(referencia). Se determinaron de eliminacin de plasma vidas medias (t1 /
2) de 16,49 h (prueba) y 16,75 h (de referencia). Ambos parmetros de
destino primario AUC (0-infinito) y Cmax fueron probados
paramtricamente por anlisis de varianza (ANOVA) y el 92,39% -103,53%
(AUC (0-infinito)) y 98,45% -111,74% (Cmax). Bioequivalencia entre la
preparacin de prueba y de referencia se demostr ya que para ambos
parmetros AUC y Cmax los intervalos de confianza del 90% de las
relaciones T / R de datos transformados logartmicamente estaban en el
rango de aceptacin general de 80% -125%.8

2.2. Seleccin de las variables para el estudio.


Variable independiente
- Doxiciclina 100mg genrico
- Doxiciclina 100mg marca
Indicador
Dosis de doxiciclina en mg.
Variable dependiente
Bioequivalencia
Indicadores
Parmetros farmacocinticos (Cmax, Tmax, AUC).

2.3. Redaccin del marco terico


2.3.1. Farmacologa de la doxiciclina

Doxiciclina

Las tetraciclinas son un grupo de antibiticos de amplio espectro frente a


Gram (+), Gram (-), Rickettsias, Clamidias e incluso Micoplasmas.
Actan como bacteriostticos a dosis habituales y como bactericidas a
dosis altas, generalmente txicas.5
La doxiciclina es una tetraciclina semisinttica, de accin bacteriosttica
activo frente a la mayora de microorganismos Gram (+) y Gram (-)
aerobios y anaerobios, excepto B. fragilis (50% son resistentes) y
enterococo.5
2.3.1.1. Mecanismo de accin y acciones farmacolgicas
Las tetraciclinas inhiben la sntesis de las protenas bacterianas por fijarse a
la subunidad ribosmica 30 S. Bloquean la fijacin del aminoacil ARNt al
sitio aceptor del complejo ARNm-ribosoma y, en consecuencia, la adicin de
nuevos aminocidos a la cadena peptdica en crecimiento22.
Adems de este mecanismo bsico, las tetraciclinas pueden quelar el
magnesio necesario para que se produzca la unin ribosmica e inhibir
algunos sistemas enzimticos bacterianos, entre otros los implicados en la
fosforilacin oxidativa. Mediante este mecanismo de accin, las tetraciclinas
producen un efecto bacteriosttico, aunque en ocasiones, si las bacterias
son muy sensibles y la concentracin alcanzada es elevada, pueden
provocar su destruccin25.
La penetracin en el citoplasma bacteriano se realiza mediante difusin
pasiva a travs de poros de la pared bacteriana y posteriormente por
mecanismos de transporte activo asociado a algn transportador.
Precisamente, la alteracin del sistema de transporte activo es el principal
sistema de resistencia de las bacterias a las tetraciclinas. Esta resistencia al
parecer est mediada por plsmidos y es inducible. Se han descrito otros
sistemas de resistencia, como la sntesis de enzimas inactivadoras. La
resistencia puede ser cruzada entre los diferentes frmacos de esta familia,
si bien la doxiciclina y la minociclina pueden continuar siendo activas dado
que, al ser ms lipfilas que otras tetraciclinas, pueden penetrar en el interior
del citoplasma bacteriano sin necesidad de sistema de transporte. La
resistencia de las bacterias se produce lentamente (escalones mltiples). 25

2.3.1.2. Caractersticas farmacocinticas


a) Absorcin: La absorcin de las tetraciclinas naturales es lente e
incompleta en el intestino delgado y destruyen la flora bacteriana, las
semisintticas no. La absorcin intestinal aumenta cuando el antibitico se
toma en ayunas, pues los alimentos interfieren con la absorcin de todas
las tetraciclinas, las que se deterioran en parte por el consumo de
productos lcteos y disminuye drsticamente por la administracin
concomitante de geles de hidrxido de aluminio, bicarbonato de sodio,
sales de calcio, magnesio, preparaciones de hierro, y Subsalicilato de
bismuto. Esto se debe a la formacin de quelatos insolubles que son mal
absorbidos del TGI. En su uso parenteral la absorcin es ptima.5
b) Distribucin: La doxiciclina se distribuye ampliamente en todo el
cuerpo, tejidos y fluidos, incluyendo lquido sinovial, pleural, prosttico y
seminal, secrecin bronquial, saliva y humor acuoso. LCR su penetracin
es pobre, se une un 25 a 96% a protenas plasmticas.24
Aun cuando algunas tetraciclinas circulan en plasma unidas a protenas en
gran proporcin, todas tienen un volumen de distribucin muy elevado,
superior al agua del organismo. La facilidad con que estos antibiticos
difunden a la mayora de los tejidos, parece que est relacionada con su
liposolubilidad. Minociclina y doxiciclina son las ms lipfilas a pH
fisiolgico, lo que puede explicar la mayor concentracin que alcanzan en
saliva y lgrimas, que son suficientes para eliminar el meningococo en
personas portadoras. 21
Las tetraciclinas pasan la placenta, alcanzando concentraciones en lquido
amnitico y plasma umbilical del 10-60 % de la concentracin plasmtica.
Se concentran en el tejido seo y dental del feto, por lo que no deben
administrarse a embarazadas. En el lquido cefalorraqudeo alcanzan
concentraciones del 5-25 % de la plasmtica, incluso sin inflamacin
menngea.25
c) Metabolismo y excrecin: Se excretan por orina, bilis, lgrimas, saliva
y leche materna, principalmente en forma activa. La va de eliminacin es la
renal a travs de la filtracin glomerular, aunque en el caso de las
tetraciclinas de larga duracin la va ms importante es la excrecin
biliofecal, tras sufrir circulacin enteroheptica. La minociclina y la
doxiciclina son metabolizadas en el hgado probablemente por conjugacin
con cido glucurnico. La proporcin de frmaco metabolizado puede ser
del 50 %. La insuficiencia renal afecta de forma diferente las tetraciclinas;
mientras que la doxiciclina y la minociclina no sufren modificacin alguna
de su aclaramiento, las restantes experimentan una reduccin de ste que
justifica la necesidad de realizar ajuste posolgico. Las tetraciclinas son
mal hemodializadas, especialmente las que circulan fijadas en alto
porcentaje a protenas, y no pueden ser eliminadas por dilisis peritoneal.
25

2.3.1.3. Reacciones adversas


Frecuentes: Decoloracin de dientes en nios, gastrointestinales (dolor
abdominal, nuseas o vmitos), vrtigos, trastornos visuales,
fotosensibilidad, nasofaringitis.
Poco frecuentes: Sobrecrecimiento mictico (oral, rectal, genital), hipertrofia
de la papila (lengua oscura), malabsorcin, enterocolitis, fotosensibilidad,
hiperpigmentacin, exacerbacin del dao renal.

Raras: Hepatotoxicidad, hipertensin intracraneana benigna, pancreatitis,


eosinofilia, neutropenia, anemia hemoltica, reacciones alrgicas, colitis
seudomembranosa.24

2.3.2. Bioequivalencia en Amrica Latina


En las Amricas, en noviembre de 1997, se llev a cabo la I Conferencia
Panamericana para la Armonizacin de la Reglamentacin Farmacutica.
En la Conferencia participaron todas las autoridades reguladoras de los
pases miembros de la OPS. Entre sus conclusiones se reconoci la
necesidad de armonizar los distintos temas de la reglamentacin
farmacutica en la regin.6
Acatando esa recomendacin, la OPS/OMS (Organizacin Panamericana
de la Salud/Organizacin Mundial de la Salud) realiz una reunin sobre
Biodisponibilidad/Bioequivalencia para analizar la implementacin de los
estudios de bioequivalencia y los requerimientos en la regin de las
Amricas. Los expertos que participaron y analizaron el tema de
bioequivalencia y su implementacin concuerdan en que, segn la
caracterstica de cada principio. 12

activo, estos estudios pueden ser llevados a cabo por mtodos in vitro o in
vivo, como fue descrito por la OMS y su gua de Intercambiabilidad y
reconocen que los estudios in vivo, denominados estudios de
Bioequivalencia, son ensayos clnicos complejos por sus caractersticas
ticas (participan voluntarios sanos) y metodolgicas que requieren ser
llevados a cabo por personal multidisciplinario entrenado en las reas
clnica, bioanalstica y estadstica, as como contar con un adecuado
plantel de evaluadores, tanto en nmero como en formacin, dentro de la
autoridad sanitaria, y adems, son ms costosos en tiempo y dinero que
los estudios in vitro, las recomendaciones de la Red PARF incluyen
los conceptos de gradualidad segn la realidad y posibilidades de cada
pas y de priorizacin segn riesgo sanitario para los estudios in vivo.7

2.3.3 Bioequivalencia en el Per


En el Per, la Direccin General de Medicamentos, Insumos y Drogas
(DIGEMID) del Ministerio de Salud es la entidad responsable de regular y
garantizar que los medicamentos en el mercado nacional sean de calidad,
seguros y eficaces.12
El artculo 33 de la Ley General de Salud N26842 establece: El qumico
farmacutico es el responsable de la dispensacin y de la informacin y
orientacin al usuario sobre la administracin, uso y dosis del producto
farmacutico, su interaccin con otros medicamentos, sus reacciones
adversas y sus condiciones de conservacin. As mismo est facultado
para ofrecer al usuario alternativas de medicamentos qumica y
farmacolgicamente equivalentes al prescrito en la receta, en igual forma
farmacutica y dosis. Es decir, un medicamento genrico debe ser
teraputicamente equivalente e intercambiable con el medicamento
innovador o con un medicamento genrico cuya BD y BE han sido
demostradas; lo que conlleva a una evaluacin dela equivalencia
teraputica.8

En el Per no se realizan estudios de BD (Biodisponibilidad) y BE


(Bioequivalencia), entre otras razones porque no es requisito indispensable
para obtener el registro sanitario y tambin porque se desconoce sobre lo
medicamentos del mercado farmacutico nacional que requieren dichos
estudios. En la actualidad se tiene una incipiente experiencia en los
ensayos in vivo, y la carencia de laboratorios con capacidad para realizar
estos estudios, la falta de mtodos, procedimientos y tcnicas validadas
as como de especialistas, limitan su aplicacin y desarrollo.9

La intervencin del Estado es importante para establecer las reglas que


permitan ordenar el sector farmacutico y asegurar el acceso de la
poblacin a los medicamentos; por lo tanto existe una necesidad de
promover la reglamentacin farmacutica con el objetivo de facilitar la
disponibilidad de productos farmacuticos seguros, eficaces y de buena
calidad y, as, proteger la salud pblica.10

2.3.4. Bioequivalencia de Medicamentos


La incorporacin en el mercado farmacutico de los llamados
medicamentos genricos, ha generado una problemtica compleja que
afecta un gran rango de entidades comenzando por el mbito de la salud
pblica hasta llegar a la propia industria farmacutica. 11

Un tratamiento efectuando con un genrico tiene un coste indudablemente


inferior a un medicamento de marca (el mismo principio activo y forma
farmacutica), y esta diferencia se debe principalmente a que el
medicamento de marca refleja el costo de la gran inversin para
desarrollarlo (estudios clnicos de eficacia y seguridad) que a diferencia del
medicamento genrico no lo precisan. Para poder realizar una comparacin
de estos dos tipos de medicamentos e investigar si son intercambiables se
recurre a la biodisponibilidad (BD) y Bioequivalencia promedio (BE).11

Dos medicamentos son bioequivalentes si ambos alcanzan la circulacin


sistmica de modo similar, logrando las mismas concentraciones en la
sangre, es decir que son igualmente biodisponibles y en consecuencia su
eficacia y seguridad son las mismas. Un estudio de bioequivalencia es un
ensayo clnico en voluntarios sanos, a los que se administra el
medicamento genrico o el innovador de referencia, en ayunas, separados
por un periodo de lavado de ms de 3 veces el tiempo de vida media.
Durante el estudio se toman muestras seriadas de sangre para construir
una curva tiempo-concentracin plasmtica del principio activo, si ambas
curvas se superponen existir bioequivalencia. Esta metodologa ha sido
ampliamente utilizada en los pases desarrollados como Estados Unidos
(1), Canad (2), Japn (3), y en la Unin Europea (4), siendo recomendada
por la OMS (5).23

2.3.5. Medicamento de marca

Un medicamento de marca es aquel que es trabajado bajo un nombre


comercial especifico, pues ha sido registrado por un laboratorio que ha
invertido recursos en la fase de investigacin y desarrollo de la molcula,
dinero que luego buscar recuperar (con creces) durante su fase de
comercializacin, para lo cual habr patentado el frmaco, lo que le
permite tener la exclusividad sobre el comercio de este, al menos hasta
que se cumpla el tiempo de caducidad de la patente. Para que un nuevo
medicamento sea sacado al mercado debe pasar por una serie de etapas
de desarrollo donde se determinan adems de su eficacia, eficiencia y
seguridad como molcula; la dosificacin, la mejor forma de fabricacin, el
vehculo ideal (otras sustancias con las que se mezcla el frmaco para
ayudar de diversas formas con su administracin, absorcin, etc.), las
condiciones de conservacin y transporte, su empaque, etc.12

2.3.6. Medicamento genrico


Un medicamento genrico es un medicamento que contiene un principio
activo ya conocido y previamente desarrollado e inventado por otros. El
costo de este tipo de productos debe ser menor que el de sus
contrapartidas originales porque su desarrollo y comercializacin es mucho
ms sencilla, puesto que no tiene que demostrar su eficacia y seguridad
en largos y costosos ensayos clnicos, dado que ha sido bien establecida
por el innovador y por el uso continuado en la prctica clnica. De hecho,
los fabricantes de estos medicamentos genricos slo tienen que
demostrar que su formulacin contiene el mismo principio activo que el
innovador y que se comporta en el organismo de la misma manera, es
decir de manera equivalente. Sin embargo, estos medicamentos genricos
son equivalentes farmacuticos con la marca registrada original en
trminos de ingredientes activos, pero pueden diferir en otros componentes
como los saborizantes, estabilizadores, y dems excipientes, adems del
proceso de fabricacin y en el propio laboratorio fabricante.4

2.3.7. Biodisponibilidad
De acuerdo a la FDA. La biodisponibilidad se define como la velocidad y
extensin a la cual el ingrediente activo o entidad se absorbe desde una
formulacin y llega a estar disponible en el sitio de accin. Para
formulaciones que no se absorban en el flujo sanguneo, la
biodisponibilidad se podra evaluar mediante mediciones que reflejasen la
velocidad y extensin en la que el ingrediente activo o entidad est
disponible en el sitio de accin. La definicin dada por la Agencia del
Medicamento Europea (EMEA, 2001) es casi la misma pero considera un
elemento adicional y especfico que se entiende que la extensin y la
velocidad de una sustancia activa o su entidad se libera desde una forma
farmacutica y llega a estar disponible en la circulacin.14

2.3.8. Equivalente Farmacutico


Se refiere a aquellas formulaciones que contienen la misma cantidad
molar del principio activo o entidad en la misma forma farmacutica y que
tiene los mismos estndares (identidad, calidad, potencia, pureza, etc.). La
equivalencia farmacutica no implica necesariamente bioequivalencia y/o
equivalencia teraputica pues se pueden encontrar algunas diferencias en
la calidad del producto, debido a los excipientes y/o procesos de
manifactura.14

2.3.9. Bioequivalentes
Dos especialidades farmacuticas sern bioequivalentes si siendo
equivalentes qumicos o alternativas farmacuticas tienen una misma
biodisponibilidad tras la administracin de las mismas dosis molares en
idnticas condiciones.13
2.4. Alternativa Farmacutica
Una alternativa farmacutica es un trmino referido a aquellos
medicamentos que contienen el mismo principio activo o entidad farmacutica,
pero difieren en la forma qumica (sal, ster, etc.) y/o forma farmacutica
(por ejemplo tabletas versus capsulas).14

2.5. Factores que pueden alterar la Biodisponibilidad de los frmacos

La biodisponibilidad es el porcentaje o fraccin de la dosis administrada que


alcanza la circulacin sistmica del paciente. Los ejemplos de factores que
pueden alterar la biodisponibilidad incluyen las caractersticas de absorcin
y disolucin inherentes a la forma qumica administradas (por ejemplo, sal,
ster), la forma de dosificacin (por ejemplo, comprimido, cpsula),
la va de administracin, la estabilidad del principio activo en el tracto
gastrointestinal, y el grado de metabolizacin del frmaco antes de alcanzar la
circulacin sistmica. Los frmacos se pueden metabolizar por las bacterias
gastrointestinales y a travs del hgado antes de alcanzar la circulacin
sistmica.15

2.6. Caractersticas farmacotcnicas.


En los estudios de biodisponibilidad es muy importante conocer los factores
que puede influir en la evaluacin del parmetro. La mayor de estas
propiedades fisicoqumicas puede tener una influencia relevante en la
velocidad de disolucin. Para aquellos principios activos en los que su
solubilidad y/o su velocidad de disolucin pueda ser un factor limitativo de su
absorcin, los factores reseados inciden directamente, en general, de forma
relevante en su biodisponibilidad. Por consiguiente, es importante conocer y
establecer dichos parmetros para evitar modificaciones en la
biodisponibilidad del frmaco en los distintos lotes de fabricacin. Los factores
de formulacin y los factores tecnolgicos tambin pueden jugar un papel
importante en la biodisponibilidad de los frmacos y su estudio constituye
una de las bases de la Biofarmacia, disciplina que describe de forma
cuantitativa las respuestas teraputicas en funcin de la mejor o peor
formulacin del medicamento.13

2.7. El rol de la Farmacocintica y parmetros farmacocinticos en


Bioequivalencia

La farmacocintica juega un rol muy importante en la biodisponibilidad. La


farmacocintica, es la rama de la farmacologa que estudia los procesos a
los que un frmaco es sometido a travs de su paso por el organismo. Su
objetivo principal es comprender qu ocurre con un medicamento desde el
momento en que este es administrado hasta su total eliminacin del
organismo. Para ello, se han utilizado modelos matemticos para
caracterizar y estimar parmetros clnicos relevantes asociados a la
absorcin, distribucin, metabolismo y eliminacin de las drogas. Estos
modelos y parmetros asociados. Por un lado, tienen algunas propiedades
que informan sobre la velocidad de absorcin, acumulacin, distribucin,
metabolismo y eliminacin y por otro lado permiten construir modelos que
incluyen factores importantes para el metabolismo de una droga.16

Los modelos utilizados para describir la dinmica del frmaco en el


organismo suelen estar basados en compartimentos, donde cada
compartimento se puede tomar como un espacio imaginario en el cuerpo que
representa una combinacin de tejidos y rganos en los cuales la
concentracin de una droga entra en equilibrio.17
El nmero de compartimentos se determina en forma emprica dependiendo
de los perfiles de la concentracin vs tiempo de la droga en el organismo.

El modelo compartimental permite:

- La comprensin conceptual de los ambientes de distribucin de una droga


entre el plasma (sangre) y otros tejidos y rganos en el cuerpo.
- Evaluar empricamente cambios en los proceso fisiolgicos como el
transporte de membranas o metabolismo sin efectuar las investigaciones del
mecanismo.
- Estimar los parmetros farmacocinticos, tales como: constante de
eliminacin, clearance y volumen aparente de distribucin.
- El modelo compartimental requiere de una anlisis matemtico (usualmente a
travs de regresiones no lineales), para estimar los parmetros a partir del
perfil Farmacocintico. El primer paso es determinar el modelo mono, bi o
multicomaprtimental.18

2.8. Modelos compartimentales:


El mtodo ms corriente utilizado para la caracterizacin farmacocintica de
un medicamento, consiste en representar el organismo como un sistema de
compartimientos, aun cuando, frecuentemente, estos compartimientos no
tengan realidad anatmica o fisiolgica manifiesta.15
2.8.1. Modelo monocompartimental

El modelo monocompartimental, que es el modelo ms sencillo, considera al


organismo como una sola unidad homognea. Este modelo es especialmente
til para el anlisis farmacocintico de los datos de concentracin en sangre,
plasma o suero y de excrecin urinaria, de aquellos frmacos que despus de
su ingreso en la circulacin sistmica se distribuyen con rapidez entre el
plasma y otros fluidos y tejidos del organismo. Suponer que el organismo se
comporta segn un modelo monocompartimental no significa necesariamente
que, en cualquier instante, exista la misma concentracin de medicamento en
todos los tejidos del organismo.19
Un segundo criterio para utilizar un modelo monocompartimental es el de
la eliminacin del medicamentos que se realiza en el organismo segn una
cintica de primer orden (es decir, la velocidad de eliminacin del
medicamento en el organismo es proporcional en cualquier instante a la
cantidad de medicamento presente en el organismo en dicho instante). La
constante de proporcionalidad que relaciona la velocidad y cantidad es la
constante de velocidad de eliminacin de primer orden, la cual se expresa en
unidades de tiempo recproco (por ejemplo, min, h-1). En el organismo, la
eliminacin del medicamento puede discurrir mediante distintos procesos
entre los que se incluyen la va renal y biliar, la biotransformacin y la
excrecin en el aire espirado. La filtracin glomerular en el rin y la difusin
pasiva en la bilis son sencillos proceso de filtracin de primer orden,
mientras que la secrecin tubular en el rin, la biotransformacin y la
secrecin biliar implican frecuentemente procesos activos. En la
farmacocintica no lineal, a concentraciones bajas, tambin puede describirse
de manera aproximada por cinticas de primer orden o lineales. Por lo tanto,
la constante de velocidad de eliminacin de primer orden aparente de un
medicamento (K) puede ser la suma de las constantes de velocidad de varios
procesos individuales (eliminacin renal y biliar).19

2.8.2. Modelo bicompartimental:


La mayora de los medicamentos que penetran en la circulacin sistmica
necesitan un tiempo finito para distribuirse por completo en todo el espacio
corporal disponible. Este hecho se pone de manifiesto en especial despus
de una inyeccin intravenosa rpida. Durante esta fase distributiva, las
concentraciones de medicamento en el plasma disminuyen ms rpidamente
que en la fase posterior a la distribucin. El que tal fase de distribucin sea o
no perceptible, depende de la frecuencia con que se tomen las muestras de
sangre. Una fase de distribucin puede durar nicamente unos minutos, horas
o incluso das.19

Puesto que la distribucin del medicamento est relacionada con el flujo


sanguneo, los rganos y tejido muy bien perfundidos, como el hgado y el
rin, han de alcanzar con gran rapidez su equilibrio de distribucin con la
sangre. Frecuentemente, la sangre y todos los fluidos y tejidos rpidamente
accesibles pueden tratarse cinticamente como una unidad homognea
comn que, generalmente, se conoce como compartimento central. Como ya
se ha hablado anteriormente en el modelo monocompartimental,
homogeneidad cintica no significa necesariamente que las concentraciones
de medicamento en todo los tejidos del compartimento central en cualquier
tiempo dado sean las mismas. 16

Sin embargo, si implica que cualquier cambio que se produzcan en los niveles
plasmticos de un medicamento se refleje cuantitativamente en otro en los
niveles de los tejidos del compartimento central. Por consiguiente, despus de
la inyeccin intravenosa de un medicamento que presenta una
farmacocintica bicompartimental, los niveles de medicamento en todos los
tejidos y fluidos en el compartimento central deben disminuir ms rpidamente
durante la fase de distribucin que durante la fase posterior a la
distribucin. Por el contrario, los niveles de medicamento en tejidos poco
perfundidos (por ejemplo: msculos, tejidos magros y grasas) han de
aumentar al principio, alcanzar un mximo y empezar a disminuir durante la
fase de distribucin. En un determinado momento, se alcanza un equilibrio de
pseudodistribucin entre los tejido y fluidos del compartimento central y los
tejidos poco perfundidos o menos accesibles. Una vez que se ha establecido
este equilibrio de pseudodistribucin, la prdida de medicamento en el
plasma podr describirse segn un proceso monoexponencial, lo que indica
homogeneidad cintica en todos los fluidos y tejidos del organismo. El
acceso del medicamento a los distintos fluidos poco perfundidos puede
realizarse a diferentes velocidades. Frecuentemente, sin embargo, para un
determinado medicamento, estas velocidades son muy similares y, por
ello, no pueden diferenciarse atendiendo slo a los datos de concentracin
plasmtica-tiempo.19
2.9. Pruebas de bioequivalencia
Las agencias reguladoras destacan como ms importantes los siguientes
parmetros farmacocinticos: rea bajo la curva de tiempo cero al tiempo
t, donde t es el ltimo punto al que es medible una concentracin en cada
formulacin (ABC0-t): rea bajo la curva de tiempo cero al tiempo infinito
(ABC0-), en donde ABC0-= ABC0-t+ Ct/Kel, donde Ct es la ltima
concentracin de droga medible y Kel, es la constante de eliminacin; la vida
media de eliminacin del frmaco (t1/2), la concentracin plasmtica mxima
(Cmax) y, el tiempo en que aparece esta concentracin mxima (Tmax).20

Los parmetros ABC0-ty ABC0-, nos permite conocer la cantidad de droga


absorbida en el organismo, y Cmax con Tmax nos indican la velocidad a la que
el frmaco se absorbe y llega a la circulacin sistmica.20

Hay un problema importante en el parmetro indicador de la velocidad de


absorcin. Tradicionalmente Tmax y Cmax representan en parte este fenmeno,
sin embargo, Tmax tiene la gran desventaja de su gran dependencia de la
frecuencia de muestreo y Cmax es una medida mixta que no solo representa
a la velocidad de absorcin sino tambin a la extensin o cantidad de droga
absorbida. A pesar de este inconveniente, Cmax siegue siendo el parmetro
Farmacocintico crtico a evaluar algn efecto adverso potencial en ciertos
medicamentos y en conjunto con Tmax proporcionan informacin clnica
muy importante en trminos de la velocidad de absorcin.20
3. HIPTESIS
- Hi: Las capsulas de doxiciclina 100mg en presentacin genrico y de marca
son bioequivalentes al ser administradas en dosis iguales.
- Ho: Las capsulas de doxiciclina 100mg en presentacin genrico y de marca
no son bioequivalentes al ser administradas en dosis iguales.

4. OBJETIVOS
4.1. Objetivo General
1. Determinar la bioequivalencia de doxiciclina capsulas de 100mg en
presentacin genrico y de marca en voluntarios sanos.

4.2. Objetivos Especficos


1. Determinar la Cmax de capsulas de doxiciclina 100 mg en presentacin
genrico y de marca.
2. Determinar la Tmax de capsulas de doxiciclina 100 mg en
presentacin genrico y de marca.
3. Determinar la AUC de capsulas de doxiciclina 100 mg en presentacin
genrico y de marca.
4. Determinar las constantes farmacocinticas como constante de
eliminacin (Kel) y tiempo de vida media (t1/2) de capsulas de doxiciclina
100 mg en genrico y de marca.

5. DISEO METODOLGICO
5.1. Tipo de investigacin.
Bsica
5.2. Definicin de la Poblacin y la muestra.
Poblacin:
- Todas las Capsulas de doxiciclina 100 mg como genrico del mismo
lote (Laboratorio Induquimica) expendidas en el hospital regional de
Ayacucho.

- Todas las Capsulas de doxiciclina 100 mg como Vibramicina


(doxiciclina hiclato) del mismo lote (PFIZER, S.A) adquiridas en un
establecimiento farmacutico reconocido privado en la ciudad de
Huamanga.
Criterios de inclusin:
- Mismo lote para Doxiciclina (Laboratorio Induquimica).
- Mismo lote para Vibramicina (Laboratorio PFIZER, S.A).
Muestra
- Doce Capsulas de Doxiciclina de 100mg como genrico (Laboratorio
Induquimica).
- Doce Capsulas de Doxiciclina de 100mg como medicamento de marca
(Vibramicina-Laboratorio PFIZER, S.A).
Criterios de inclusin:
- Mismo lote para Doxiciclina (Laboratorio Induquimica).
- Mismo lote para Vibramicina (Laboratorio PFIZER, S.A).

5.3. Mtodos instrumentales para la recoleccin de datos.


Para la recoleccin de datos se emplear el software Chromeleon v. 3.06 del
HPLC donde registrar el AUC de los picos obtenidos del estndar y la
matriz biolgica (plasma sanguneo), para luego ser exportados al Excel y
elaborar la curva de calibracin del estndar y definir el modelo
compartimental a la que se ajustara el estudio.

5.4. Procedimiento para la recoleccin de datos.


5.4.1. Unidad de Anlisis
Un individuo (Voluntario sano).

5.4.2. Muestreo
De acuerdo al clculo estadstico
5.5. Diseo del estudio
La administracin de las dos formulaciones a los voluntarios se llevar a
cabo de acuerdo con diseo aleatorio cruzado, en dos periodos, dos
secuencias y doble ciego. En el periodo 1, seis sujetos recibirn la
formulacin de prueba (doxiciclina 100 mg del Laboratorio Induquimica) y
los seis restantes la de referencia (Vibramicina); en el periodo 2; los
voluntarios recibirn la formulacin que no recibieron en la primera. Entre
ambos periodos se dejar transcurrir una semana. El nmero de sujetos se
obtuvo mediante un muestreo por conveniencia tomando en cuenta los
criterios de inclusin y exclusin ya mencionados. Segn estudios se rigen
para la normativa adoptada por la Asamblea de la Asociacin Mdica
Mundial en Helsinki en 1964 y modificada posteriormente en las reuniones
de Tokyo (1975), Venecia (1983) y Hong Kong (1989) estos estudios se
realizan en no menos de 12 voluntarios sanos.13

5.5.1. Protocolo Clnico

Criterios de inclusin
- Voluntarios sanos con adecuado perfil renal y heptico.
- Peso corporal de acuerdo a talla.
- Personas con edades comprendidas entre 18-24 aos de edad.
- Sujetos que radican en la ciudad de Ayacucho.
Criterios de exclusin
- Personas con antecedentes de alergias a las tetraciclinas.
- Personas con medicacin concomitante.

- Sujetos con antecedentes de VIH, Hepatitis B y embarazadas en caso


de mujeres.
- Personas con antecedentes de cualquier situacin que pudiera suponer
un aumento del riesgo o dificultad en la interpretacin de los resultados.
5.5.2. Toma y tratamiento de las muestras

Se tomar muestras de 5 mL de sangre de los participantes y se


recolectaran en tubos con heparina a los siguientes tiempos, en horas: 0.0,
0.5, 1.0, 1.5, 2.0, 2.5, 3.0, 3.5, 4.0, 5.0, 6.0, 8.0, 10.0, 12.0.Una vez
obtenidas las muestras se centrifugarn a 4.500 rpm durante 15 minutos, se
separar el plasma y se congelar a -20C hasta el da del anlisis.

5.5.3. Estndar
Se utilizarn estndares primarios para la curva de calibracin de
Doxiciclina USP.

5.5.4. Cuantificacin de Doxiciclina


5.5.4.1. Extraccin de la muestra:

La doxiciclina se extraer a partir de muestras de plasma humano por


precipitacin de protenas con acetonitrilo. Una parte de cada muestra de
plasma se transferir a un tubo de ensayo, seguidamente agregaremos
metanol frio para garantizar la extraccin del activo, para luego pasarlo a
centrifugacin a 5000 rpm por 15 minutos y el sobrenadante ser transferido
a los viales de inyeccin para su lectura en el HPLC empleado como
sistema cromatogrfico. Todas las muestras de un solo voluntario se
analizaran el mismo da con el fin de evitar la variacin de inter-ensayo.

5.5.4.2. Condiciones cromatogrficas


La cuantificacin se realizar por un sistema de cromatografa liquida de
alta resolucin marca Dionex acoplado a un detector UV por arreglo de
diodos (DAD), las lecturas de picos ser controlada mediante absorbancia
UV a una longitud de 229nm, empleando una columna Dionex C18
250x4.6mm, fase mvil constituido por una mezcla de buffer de fosfato de
sodio 0.01M y pH 4.8 - Acetonitrilo (95:5 v/v) a un volumen de flujo de
1.3ml/min. Se determinar el tiempo de retencin y el AUC (rea Bajo la
Curva) generado por la concentracin de doxiciclina presente en la muestra.

5.5.4.3. Preparacin de Estndar:


La solucin madre de doxiciclina (1mg/ml) se preparar en fase mvil
constituido por buffer fosfato (0.01mol/L) pH = 4.8 y Acetonitrilo (95:5 v/v).
Las soluciones de trabajo estndar se prepararan a partir de la solucin
madre por dilucin secuencial con fase mvil para dar concentraciones
finales de 1, 5, 10, 20, 40 y 50 g/ml. Las soluciones estndar sern
protegidas de la luz y se mantendr refrigerado hasta el momento del
anlisis.

6. ANLISIS DE DATOS
6.1. Clculos Farmacocinticos

Los clculos a realizar se harn de acuerdo a un modelo bicompartimental


lineal, por el mtodo de los residuales.

Determinacin de la Cmax:

Determinacin de la Tmax:


Determinacin de la AUC
0 :

6.2. Anlisis estadstico


La concentracin plasmtica mxima observada (Cmax) y el tiempo que
tarda en llegar a la mxima concentracin (Tmax) se obtendrn a partir de
las curvas de concentracin del frmaco frente al tiempo. Las reas bajo
las curvas de concentracin de doxiciclina vs tiempo a partir de 0-12 horas
(AUC0-8) se calcularan utilizando el mtodo trapezoidal y la constante de
eliminacin de primer orden de cambio (Ke) se estimar utilizando la
regresin por mnimos cuadrados de los puntos que describe el terminal
log-lineal fase decadente. T1/2 se derivarn de Ke (T1/2 = ln2/Ke). Cmax y
AUC0-12 sern analizados estadsticamente utilizando tanto paramtricos
(ANOVA de una va) y mtodos no paramtricos (test de Wilcoxon
formado filas). 17

Si la razn de medias geomtricas (GMR), de las medidas de


biodisponibilidad de las dos formulaciones (Prueba de Referencia)
comparadas cae dentro de uno lmites establecidos (80/125%) la
formulacin de prueba puede ser considerada como bioequivalente
respecto a la formulacin de referencia.21
7. REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS

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