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Instituto Politcnico Nacional

Escuela Superior de Ingeniera


Qumica e Industrias Extractivas

Academia de Qumica Analtica

Laboratorio de Espectroscopia Molecular y Atmica


Prctica No.1: Rutinas de Diagnstico
OBJETIVOS
INTRODUCCIN
Espectroscopia
UV-Vis
Fundamento: Entre la Analiza: compuestos
radiacin electromagntica y Cromforos: grupos orgnicos conjugados
su efecto en la materia. insaturados y (cromforos), iones metlicos
heterotomos con de transicin y
pares de e- no macromolculas biolgicas.
compartidos
Haciendo que en los
compuestos haya transiciones
elctricas Cuando se analiza un
compuesto, se obtiene
Estos compuestos pueden un espectro que nos da
emitir o absorber. informacin de
Transiciones elctricas: absorbancia y longitud
Generalmente en el UV-Vis se
transferencia de electrones de de onda.
estudia la absorcin.
un nivel basal (n, , ) a uno
excitado (n*, *, *)

Cuando se usa la
regin UV-Vis, la
Cuando las transiciones alcanzan longitud de onda a
un orbital molecular ocupado de medir es la siguiente:
mayor energa se le llama HOMO,
UV (lmpara de
y cuando alcanzan un orbital
deuterio): 190nm 350
molecular desocupado de menor
nm
energa se le llama LUMO.
Visible (lmpara de
tungsteno): 350nm
800 nm.

A mayor longitud de onda, tendr


una energa y una frecuencia
menor, por lo tanto a una menor
longitud de onda, tendr una
energa y una frecuencia mayor.
Ilumina a la muestra con una bombilla
incandescente (tungsteno) para las
longitudes de onda visibles, o una
Fuente de luz lmpara de deuterio en el ultravioleta.

Asla las radiaciones de longitud de onda


Monocromador de la luz.

Separa todas las longitudes de onda de


Colimador un haz, logrando que se redireccione
hacia la rendija de salida.

Es donde se lleva a cabo la interaccin


Compartimiento de
entre la radiacin electromagntica y la
muestra
materia.

PARTES DEL
ESPECTROFOTMETRO El detector es el encargado de captar
la radiacin y, a su vez, dejarla en
Detector
evidencia para su estudio posterior.

Convierte el fenmeno fsico en nmeros


proporcionales al analito en cuesti
Registrador

En los instrumentos modernos se


encuentra una serie de
16 fotodetectores para percibir la seal
Fotodetectores
en forma simultnea en 16 longitudes
de onda, cubriendo el espectro visible.

Celdas Son los recipientes donde se depositan


las muestras lquidas a analizar. El
material del cual estn hechas vara de
acuerdo a la regin que se est
trabajando (vidrio, plstico o cuarzo).
Rutinas de diagnstico

Se usan estas rutinas para tener un anlisis


exacto y confiable.

Para esto se tiene que hacer una


calibracin adecuada en el instrumento.

Estas rutinas consisten en verificar el


equipo,

Exactitud fotomtrica Linealidad fotomtrica.


Ancho de la banda espectral

Es la cercana de una medida a Es muy importante ya que Capacidad para dar una
su valor real. diversos parmetros en sta relacin lineal entre
afectan a la exactitud potencia radiante incidente
fotomtrica. a su detector y la lectura.

El grado de error depende de la


magnitud de la incertidumbre
Si las rendijas son demasiado
(poca exactitud) en la longitud La linealidad se
anchas, la altura del pico
de onda y del ancho de la banda. fundamenta en la aditivitad
observado es mayor, dando una
de los valores de
absorbancia errnea.
absorbancia

Para la calibracin de la longitud


de onda se utiliza un filtro de
La abertura de las rendijas no La linealidad fotomtrica se
xido de holmio o la emisin de
debe disminuirse de lo necesario determina por medio de la
una lmpara de deuterio.
ya que afecta la relacin entre preparacin de estndares.
seal y ruido.

Estndares de K2Cr2O7 de diferentes


concentraciones, se mide valores de
absorbancia y se hace una grfica de
absorbancia contra concentracin.
METODOLOGA EXPERIMENTAL
Metodologa Experimental para Linealidad Fotomtrica

Revisar que el material correspondiente del laboratorio se


encuentre completo en la gaveta limpio y seco.

Una vez preparada la solucin madre realizar


tres estndares de 25, 50 y 75 ppm.

Aforar con H2SO4 0.2 N.

Transferir 2.5, 5 y 7.5 ml de K2Cr2O7 a un matraz baln.


Como se observa a medida que se incrementa la
concentracin el color en los estndares se nota ms
amarillo.

Seleccionar en el espectrofotmetro las operaciones


de operacin siguiente:

Lmpara UV-VIS
Modo ABS
Intervalo de 450 a 250 nm
Velocidad 120 nm/min
Ordenada lmite: 0-1.5
Velocidad de Carta 60 mm/min
Sin mesh

Imprimir las condiciones de operacin,


correr el espectro con el blanco.
Finalmente se proceden a correr los estndares preparados para reportar los espectrogramas arrojados por el
espectrofotmetro.

Metodologa Experimental empleando el Filtro de xido de Holmio


Es importante mencionar que, durante adems de seleccionar las condiciones de operacin
correspondientes en el espectrofotmetro, este en particular se utiliza como blanco aire.

Metodologa Experimental para obtener el espectro de vapor de benceno


De igual forma, para obtenerlo adems de elegir las condiciones de operacin pertinentes
se utiliza como blanco aire y despus se corre la celda que contiene benceno. De esta
forma obtenemos el espectrograma esperado de 5 picos.
TABLA DE DATOS EXPERIMENTALES

A) ANCHO DE BANDA ESPECTRAL

Lmpara Modo Intervalo Velocidad de Ordenada Velocidad de


barrido lmite carta
UV ABS 280-230 nm 15 nm/min 01 30 mm/min
Se obtiene el espectro del vapor de benceno bajo las siguientes
condiciones:

B) EMPLEANDO EL FILTRO DE XIDO DE HOLMIO

Se obtiene el espectro del filtro de xido de holmio bajo las siguientes


condiciones:

Lmpara Modo Intervalo Velocidad de Ordenada Velocidad de


barrido lmite carta
UV-VIS ABS 700-200 nm 120 nm/min 03 60 m/min
C) LINEALIDAD FOTOMTRICA

Lmpara Modo Intervalo Velocidad de Ordenada Velocidad de


barrido lmite carta
UV-VIS ABS 450-250 nm 120 nm/min 0 1.5 60 mm/min
RESULTADOS

1) Resultados para ANCHO DE BANDA ESPECTRAL

mxima mxima experimental % Error


terica(nm) (nm)
237.0
242.2
247.8
253.6
259.6
266.8

2) Resultados para XIDO DE HOLMIO

mxima mxima experimental % Error


terica(nm) (nm)
648.5
637.0
536.0
459.5
453.0
445.0
418.0
360.5
333.5
287.0
279.0

3) Resultados para LINEALIDAD FOTOMTRICA

ABSORBANCIAS TERICAS ABSORBANCIAS EXPERIMENTALES


mx. ( nm ) ABS C ( ppm ) mx. ( nm ) ABS C ( ppm )
350 25 350 25
350 50 350 50
350 75 350 75

CUESTIONARIO
1. Cul es el fundamento de los mtodos espectroscpicos de anlisis?
Se basa en las interacciones de la radiacin electromagntica con la materia. Y esta se divide en dos
absorcin y emisin (la absorcin de radiacin ultravioleta, visible y la espectroscopia de fluorescencia
molecular).
2. Qu se entiende por transicin electrnica?
Es la transferencia de un electrn que se halla en un nivel bajo de energa molecular, u orbital atmico, a un
orbital de mayor energa, es decir, es la transicin de un electrn entre los diferentes niveles de energa.
3. Cules son las principales transiciones electrnicas que se presentan en compuestos orgnicos?
Transiciones de los electrones n y , al estado excitado *, porque la energa requerida para estos procesos
lleva las bandas de absorcin hacia dentro de la regin de uv-visible (200 a 700 nm).
1) *
2) * *
3) n *
4) n *
4. Qu tipo de compuestos se pueden analizar
por la tcnica UV- Visible?
Se pueden analizar metales de transicin, compuestos orgnicos, inorgnicos y macromolculas biolgicas.

5. D la estructura de dos compuestos orgnicos que


absorban en la regin de UV-Visible

Antraceno cido Actico Etileno Benceno


6. Describa brevemente cul es el objetivo de la prctica
Manejar e identificar las partes del espectrofotmetro uv-visible, as como las condiciones de operacin.
7. Mencione cada una de las partes que constituyen a un espectrofotmetro UV-Vis
Fuente de luz (lmpara), monocromador, rejilla, compartimiento de muestra, celdas, detector y sistema de
procesamiento y lectura de seales.
8. Explique cul es el propsito de calibrar los equipos antes de realizar cualquier tipo de anlisis
Para disminuir la incertidumbre e intervalos de confianza y as asegurarnos de que se puede usar el
instrumento de manera segura y confiable obteniendo resultados certeros con la exactitud que se necesita.
9. Explique qu se entiende por barrido espectral
Es el anlisis que se realiza cuando no se conoce la naturaleza de la muestra en todo el intervalo del equipo,
permitindonos conocer la mxima longitud de absorcin del analito.
10. Qu tipo de informacin analtica proporcionan los resultados de un espectrograma?
Un grfico de la radiacin emitida en funcin de la frecuencia o de la longitud mxima de onda.
11. En qu industrias tiene aplicacin la tcnica UV-Vis? Mencione ejemplos especficos
Farmacutica, toxicolgica, alimentos, etc. Por ejemplo, en Comex el colormetro de pinturas.
Asimismo, se utiliza para el aseguramiento de la calidad hasta mediciones de desarrollo de producto de
textiles, colorantes, papel y vidrio.
Determinacin de grupos funcionales en molculas orgnicas.
Anlisis de muestras bioqumicas
Recubrimientos, reflejantes, anti reflejantes, correccin de color de recubrimientos.
Determinacin de metales en compuestos de coordinacin.
Anlisis de semiconductores.
Determinacin cuantitativa; caracterizacin superficial de slidos hasta el anlisis fotomtrico de
muestras turbias, coloidales, transparentes y traslcidas.

OBSERVACIONES

CONCLUSIONES

BIBLIOGRAFA

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