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Anlisis Cualitativo de Sales biliares

De Gracia, Carolina 4-786-1387


Romero, Gnesis 4- 788-2060
Montezuma, Rodrigo 4-799-17

Curso de Bioqumica (QM 106), Escuela de Enfermera, Facultad de


Enfermera, Universidad Autnoma de Chiriqu, David, Chiriqu, Republica de
Panam. e-mail Carolina23-26@hotmail.es

Resumen
En la prctica realizada para el laboratorio de anlisis cualitativo de sales biliares, se
utilizaron muestras de bilis de cerdo, aceite de oliva extra virgen, HNO3 entre otros, para a
obtencin de los resultados experimentales. Al momento de realizar de prueba de Gmelin, se
tuvo que filtrar la bilis de la vescula biliar para colocarla en papel filtro y as obtener una
mejor vista de los resultados, en donde se comprob lo que deca la teora con los resultados
obtenidos. Para la prueba de Pettenkofer, se procedi a aadir un pequea muestra de
sacarosa ms cido sulfrico, dando asi una formacin de capas, en la prueba de Hay se
observa que el azufre se va al fondo dando as una prueba positiva ya que hay presencia de
cidos biliares, y finalizando con la prueba de emulsificacion de la bilis, en esta se form una
emulsin en cada muestra, concluyendo as que las sales biliares forman parte de la digestin
en nuestro organismo ayudando a una mejor absorcin de los alimentos en nuestro cuerpo.

Objetivos: Palabras claves: Bilis,


emusilsificacion, cidos biliares,
Aplicar algunos ensayos para
vescula.
la deteccin de pigmento y
sales biliares Marco terico
Reconocer las propiedades La bilis en un lquido amarillento, dorado
emulsificante de las sales debido a la presencia de la bilirrubina, esta
biliares. secrecin es producida por el hepatocito,
tiene una densidad aproximada de 1,01; un
pH comprendido entre 5 a 7-8, y un
contenido de solidos que vara del 2-3%
segn se trate de bilis heptica o bilis poseen una parte de la molcula hidroflica
concentrada de la vescula biliar. El color y otra hidrofbica, condicin que les
de la bilis recin producida se torna permite ser hidrosolubles y con capacidad
verdoso al encontrase en la vescula, emulsificante. Durante la emulsificacin
debido a la oxidacin de la bilirrubina en disminuye la tensin superficial de los
biliverdina. Al almacenarse la bilis, todos lpidos, se fragmentan, fsicamente en
los pigmentos presentes en ella oscurecen pequeas partculas, aumentan
a mediada que van sido oxidados, pasando considerablemente su superficie expuesta
del amarillo verde al azul y finalmente al y de esta manera se facilita su accin
color caf. enzimtica.
Los principales componentes de la bilis Las sales biliares luego de ser sintetizadas,
son: Lecitina PC, como el fosfolpido ms son secretadas por el canalculo biliar,
abundante; colesterol libre; iones sodio, almacenada por la vescula biliar, pasan al
potasio, calcio y cloro; cidos biliares intestino para iniciar la digestin, transitan
conjugados en forma de sales biliares; todo por el intestino y posteriormente son
en presencia de pequeas cantidades de transportadas de nuevo por la vena porta al
bilirrubina y albumina y algunas enzimas hgado y ser secretados de nuevo por la
entre otras a la fosfatasa alcalina. bilis estableciendo esto la circulacin
enteroheptica que permite que las sales
La lecitina es el fosfolpido principal de la biliares sirvan de vehculo de algunos
bilis, posee dos cidos grasos de cadena cidos grasos facilitando su transporte. Las
largo con carcter hidrofbico; adems de sales biliares constituyen tambin en
la fosforilcolina, hidroflico; no posee gran balancear junto con las lecitinas, el
capacidad de solubilizacin pero si es equilibro de mantener disuelto el
posible que se renan varias molculas que colesterol libre y con ello evitar la litiasis.
oponen sus grupos hidrofbicos e (Herreras, Daz y Jimnez; 1996).
hidroflicos y dada la capacidad de estos
de hidratarse se logra la consistencia de un Materiales y Reactivos
gel, por la formacin de un cristal lquido.
Equipo
El colesterol compuesto con la estructura
del ciclopentano pehidrofenantreno, es Equipo cantidad capacidad
hidrofbico en la mayor parte de su
molcula, a excepcin del carbono 3 que
Probeta 1 50 mL
posee un OH y por ende en esa regin esta
molcula es hidroflica. Los cidos biliares
derivados del colesterol por Balanza 1 250 g
modificaciones en la cadena lateral:
disminuye su longitud, carboxilacion de Matraz 3 100, 250 y
esta y saturacin del ncleo esteroide, los aforado 500 mL
que para su utilizacin en la bilis son cuchara 1 -
transformados por el hgado, al conjugarse
con taurina y glicina y dan lugar a las sales
biliares, los cidos tauroclico y gliclico,
que se encuentran en relacin de 3:1 entre
ellos y tienen una funcin antiptica, pues
Materiales Cantidad Ingestin: puede
destruir los tejidos
bilis - gastrointestinales.
vesicular Produce salivacin, sed
intensa, dificultad para
Aceite de -
tragar, dolor y shock.
oliva
Sacarosa -
H2SO4 Inhalacin: causa
al 5% usualmente dolor de
garganta y tos. Puede
Reactivos: producirse un desarrollo
rpido de dificultades
Reactivo Toxicidad respiratorias con dolor
Sacarosa En contacto en el pecho, disnea,
con ojos: espasmos larngeos, y
causa edema pulmonar. La
irritacin. lesin de los pulmones
En contacto puede progresar a lo
con la piel: largo de varias horas,
puede causar fallo
causa irritacin
respiratorio.
leve.
Contacto con los ojos:
Ingestin: causa quemaduras
podra causar graves y prdida de
vmitos, visin.
diarrea, Contacto con la piel:
deshidratacin causa quemaduras
y problemas de profundas en la piel y en
tensin las membranas mucosas.
sangunea. Ingestin: Causa dao
inhalacin: corrosivo grave de las
puede ser membranas mucosas de
nocivo u la garganta y del
causar esfago.
irritacin leve. Azufre
HNO3 Inhalacin:
Destruccin de las
membranas nasales,
asfixia.
Contacto con los ojos: Parte experimental
Conjuntivitis temporal,
ceguera. A. Prueba de Gmelin
Contacto con la piel:
Irritacin, quemaduras
Espolvorear una Si el azufre se
pequea deposita en el
cantidad de fondo del tubo,
azufre sobre la hay presencia de
bilis diluida. acidos biliares.

Filtrar 1 o 2 Doble el
ml de bilis Cuidadosa papel filtro D-Prueba de emulsificacion de la bilis
vesicular mente y observar
diluida. colocar los circulos
Quitar el media gota concentrado
papel filtro de HNO3 s Aadir 5 gotas de
del embudo concentrado coloreados Aadir una gota bilis al tubo #1; 5
y colocarlo sobre el que rodean de aceite de oliva gotas de la
invertido vertice del el centro a 3 ml de agua solucion de sales
sobre la cono. del papel contenidos en biliares al tubo
mesa. filtro. cada uno de los #2 y 5 gotas de
tubos de ensayo. bilirrubina al
tubo #3.

Observar cuando
agitar bien cada se forma la
tubo. emulsion en cada
B. Prueba Pettenkofer tubo.

Agregar una
pequea Resultados:
porcion de esta Cuadro 1
A 1 ml de bilis mezcla sobre
diluida aadir 5 una pequea Prueba de Gmelin
gotas de cantidad de
solucion al 5% Acido Sulfurico Material +/- Observacin
de sacarosa. concentrado, de
tal manera que Biis + Se observa coloracin verde-
se formen 2 diluida azulada
capas.

Cuadro 2
Prueba De Pettenkofer
La aparicion de
un anillo rojo Material +/- Observacin
No agitar.
indica sales
biliares. Biis + Se observa la presencia de dos
diluida capas.
+ azufre

C- Prueba de Hay
Cuadro 3 que se utiliz. Esto se debe a que la
sal biliar reacciona con el
Prueba de Hay hidroximetilenofurfural y forma
Material +/- Observacin una solucin de color rojo. El
Biis + Se observa claramente hidroximetilenofurfural se forma
diluida como el azufre se del azcar que deshidrata con
mantiene en el fondo. cido sulfrico. El cido actico, y
aquellas sustancias que se
convierten en azcar mediante
Cuadro 4 cido sulfrico, cumplen la misma
funcin que el azcar. Al igual que
Prueba de Emulsificacion de la bilis
tambin es notable como el azufre
Material +/- Observacin se va al fondo del vaso.
Biis + Se observa emusilsificacion c- En la prueba del poder de
diluida en la bilis diluida y la otra. emulsificante de la bilis, En el tubo
1 se pudo observar que al aadir
bilis a un volumen igual de agua,
Discusiones esta primera fue soluble en agua.
a- En la prueba de Gmelin pudimos Esto se debe a que la bilis es una
observar que la muestra de bilis disolucin polar; puesto, que en su
diluida a la cual se le aadi HNO3 composicin se encuentran cidos
al una coloracin azul-verdosa biliares y sus conjugados, sales
dando positiva la prueba. Es biliares, que le transmiten cierta
probable la presencia de lutena. Si polaridad a la bilis; formando estos
el lquido contiene bilis compuestos enlaces por puentes de
concentrada, se observa una hidrgeno con el agua y de esta
coloracin violeta. manera siendo solubles en ella.

Esta prueba a su vez es de gran nos permite En el tubo al cual se le aadi al cierta
determinar la presencia de sales biliares en cantidad aceite de oliva. Se pudo observar
lquidos como la orina, en donde la que estos formaron una mezcla insoluble,
presencia de estas sales y pigmentos esto se debe a que el agua es un compuesto
biliares representa la presencia de alguna no polar mientras que el aceite es un
anormalidad en la reabsorcin de los compuesto no polar.
mismos y por lo tanto la mayor excrecin En el tubo al cual se le aadi a un
de estos compuestos. volumen de bilis, un volumen igual de
b- La Prueba de Pettenkofer se utiliza aceite; se pudo observar la formacin de
para probar la presencia de sales pequeas gotas dispersas de aceites a esto
biliares. En esta prueba pudimos se le llama emulsin. Una emulsin,
observar que se form un anillo cientficamente es la dispersin o mezcla
rojo entre ambas capas (muestra a de dos lquidos inmiscibles, en la cual la
analizar arriba y abajo el cido fase interna, en este caso el aceite, se
sulfrico aadido), la formacin de mezcl en forma de gotitas con la fase
este anillo indica la presencia de externa, el agua.
sales biliares en la muestra de bilis
La bilis, es una sustancia liberada por el Clnicas de la Universidad de
hgado, y participa en la digestin. Iowa, Iowa City, recuperado el 26
Tambin tiene una funcin emulsionante de junio de 2014 en:
como el detergente en el tubo 2. La bilis s3.gi.org/patients/gihealth/pdf/bili
emulsiona los cidos graos o lpidos, ary_sp.pdf
convirtindolos en gotitas permitiendo su
absorcin. Entonces, si nuestro
experimento fuera una parte del proceso de
digestin, el detergente sera la bilis, y
emulsionara las grasas, en este caso,
ejemplarizadas por el aceite.
Conclusiones
La prueba de gamelin permite
identificar la presencia de sales
biliares, en donde las muestran se
observa un coloracin azul verdosa
que indica que esta es positiva.
La bilis cuyos componentes
principales son las sales biliares y
cidos biliares, cumplen la funcin
de emulsionar grasas durante la
digestin.
La bilis juega un papel importante
en nuestro organismo permitiendo
que esta ayude en el proceso de los
alimentos, para un mejor
aprovechamiento del cuerpo
humano.
Bibliografa
Tratado De Hepatologa, J. M.
Herreras Gutirrez, A. Daz.
Belmont y M. Jimnez Senz,
Tomo Ll 1996, Pag 150-151.
(1) TRASTORNOS DEL
TRACTO BILIAR,
TRASTORNOS DE LA
VESCULA BILIAR Y
PANCREATITIS POR
CLCULOS BILIARES; escrito
por los doctores Young Choi y
William B. Silverman de la
Divisin de Gastroenterologa y
Hepatologa de los Hospitales y