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1. Qu es la temperatura de extensin y de qu factores depende?

Es la temperatura a la cual acta la DNA polimerasa, tomando el ADN molde para sintetizar la
cadena complementaria y partiendo del cebador como soporte inicial necesario para la
sntesis de nuevo ADN. La DNA polimerasa sintetiza una nueva hebra de ADN complementaria
a la hebra molde aadiendo los dNTP complementarios en direccin 5' 3', uniendo el grupo
5'-fosfato de los dNTP con el grupo 3'-hidroxilo del final de la hebra de ADN creciente.

La temperatura para este paso depende del DNA polimerasa que usemos. Para la polimerasa
Taq, la temperatura de mxima actividad est en 75-80 C (comnmente 72 C). El tiempo de
extensin depende tanto de la DNA polimerasa usada como de la longitud del fragmento de
DNA que se desea amplificar.

2. Qu es un primer y cul es su funcin?

Los cebadores o primers son pequeos segmentos de ARN (normalmente de 18 a 22


nucletidos) y con contenido de G y C entre 40-75%, quienes proporcionan el extremo
3-OH terminal para que la DNA polimerasa pueda iniciar la sntesis de ADN.

Delimitan la zona de ADN a amplificar. Al ser reconocidos por la enzima permiten


iniciar la reaccin. Normalmente se disean para ser exactamente complementarios al
molde de ADN para evitar su propia replicacin; as mismo deben carecer, en lo
posible, de estructuras secundarias as como de complementariedad entre s.
Bibliografa

Edgar Vsquez Contreras. Bioqumica y biologa molecular-Duplicacin del DNA. UNAM


(Mxico)-15 /03/04. Fecha de consulta: 16/10/17.
Enlace: http://laguna.fmedic.unam.mx/~evazquez/0403/duplicacion%20dna3.html
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