CHOLINESTERASE

REF 1119005
1x 55 mL COLINESTERASA
CONTENIDO TOTAL E INHIBIDA
R1.Reactivo 2 x 25 mL Mtodo enzimtico colorimtrico
R2.Reactivo 1 x 2 mL
R3.Reactivo 1 x 3 mL CINETICO
Slo para uso diagnstico in vitro

FUNDAMENTO MUESTRAS

La colinesterasa (CHE) cataliza la hidrlisis del sustrato Suero o plasma recogido con EDTA o heparina. Una hemlisis
butiriltiocolina formando butirato y tiocolina. Esta ltima reduce el moderada no interfiere.
cido 5,5-mercaptobis-2-nitrobenzoico (DMNB) a 5-mercapto-2- La colinesterasa en suero o plasma es estable varias semanas
nitrobenzoate (5-MNBA), un compuesto coloreado. tanto a temperatura ambiente como refrigerada y durante 3 meses
La reaccin se controla cinticamente a 405 nm a partir de la a 20C.
velocidad de formacin del color amarillo producido, proporcional a
la actividad CHE en la muestra1.
INTERFERENCIAS
CHE
Butiriltiocolina + H2O Butirato + Tiocolina
pH 7,7 Lipemia (intralipid), 20 g/L no interfiere.
+ Bilirrubina, 40 mg/dL no interfiere.
Tiocolina + DMNB Tiocolina oxidada + 5-MNBA + H
Hemoglobina, 16 g/L no interfiere.
Otros medicamentos y sustancias pueden interferir4-5.
La inhibicin por la dibucaina se efectua mediante un ensayo en
paralelo en el que se halla presente la dibucaina en el substrato,
evalundose el porcentaje de inhibicin por comparacin con la
EQUIPO ADICIONAL
actividad colinestersica total presente en el substrato no tratado.
El nmero de dibucaina resultante permite la clasificacin e
identificacin de las variantes homo y heterozigticas. Fotmetro o colormetro con compartimiento de medicin
termostatado a 25/30/37C, para leer a 405 nm.
Cronmetro, registrador grfico o impresora.
COMPOSICION DE LOS REACTIVOS Cubetas de 1-cm de paso de luz.
Pipetas de volumen variable para reactivos y muestras.
R1 Tampn/Cromgeno. Tampn fosfatos 50 mmol/L pH
7,7, DMNB 0,25 mmol/L. Polvo.
TECNICA
R2 Sustrato. Yoduro de butiriltiocolina 7 mmol/L. Liofilizado.

R3 Dibucaina. Clorhidrato de dibucaina 2,6 mmol/L. 1. Preincubar los reactivos de trabajo y muestras a la temperatura
de reaccin (ver NOTAS).
2. Ajustar a 0 el fotmetro con agua destilada.
ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD 3. Pipetear en cubetas rotuladas:

Conservar a 2-8C. Temperatura 25/30C 37C

Todos los componentes del kit son estables hasta la fecha de
Sin Con Sin Con
caducidad indicada en la etiqueta. Mantener los frascos cerrados, Tratamiento
inhibidor inhibidor inhibidor inhibidor
protegidos de la luz y evitar la contaminacin durante su uso.
Descartar si se observan signos de deterioro: Tampn/Cromgeno 1,5 mL 1,5 mL
- Presencia de partculas y turbidez.
- Los reactivos R1 y R2 si presentan una vez reconstituidos una Reactivo Inhibidor 1,5 mL 1,5 mL
absorbancia del Blanco (A) a 405 nm > 0,700 frente a agua Muestra 10 L 10 L
destilada en cubeta de 1 cm.
Muestra dil. 1:2 con
10 L 10 L
PREPARACION DE LOS REACTIVOS sol. salina
Sustrato 50 L 50 L 50 L 50 L
Reactivos de trabajo
1. Tampn/Cromgeno. Aadir 25 mL de agua destilada a un 4. Mezclar suavemente por inversin. Insertar la cubeta en el
vial de R1. Tapar. Agitar. Reposar 15 min. antes de su compartimiento termostatado del instrumento, poner el
empleo. Estable 6 semanas a 2-8C. cronmetro en marcha y anotar la absorbancia inicial.
2. Sustrato. Aadir 2,0 mL de agua destilada a un vial de R2. 5. Repetir las lecturas exactamente a los 30,60 y 90 segundos.
Mezclar. Estable 6 semanas a 2-8C. El sustrato en exceso 6. Calcular la diferencia entre absorbancias.
puede congelarse una vez. 7. Calcular el promedio de los resultados para obtener el cambio
3. Reactivo inhibidor. Mezclar 9 volmenes de Tampn/Cromgeno promedio en absorbancia por segundo (A/30seg).
con 1 volumen de R3.

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ISO 9001 ISO 13485 Telf. (+34) 934 694 990 Fax. (+34) 934 693 435. website www.linear.es
 CALCULOS Los niveles de colinesterasa en suero se han empleado como
prueba de la funcin heptica, como indicador frente a un posible
Colinesterasa total envenenamiento por insecticidas y para la deteccin de pacientes
con formas atpicas del enzima. Como medida de la funcin de la
U/L = A/ 1 min x 23111 (37C) enfermedad heptica no aporta ms que las tcnicas comunmente
U/L = A/ 30seg x 46222 (37C) empleadas en el laboratorio. Sin embargo, es un parmetro muy
U/L = A/ 30seg x 23111 (25/30C) sensible al envenenamiento por inhalacin o contacto con
compuestos organofosforados que inhiben la actividad
Muestras con A superiores a 0,250 a 405 nm deben diluirse 1:10 colinestersica. Entre ellos, insecticidas orgnicos como el
con solucin salina y repetir el ensayo. Multiplicar los resultados por Paration, Sarin y tetraetilpirofosfato4.
10. El control gentico de la actividad colinestersica srica tiene su
importancia prctica al haberse reconocido dos formas de enzima.
Para expresar los resultados en unidades SI aplicar: Una denominada normal y otra denominada atpica. Los
U/L x 16,67 = nkat/L individuos homozigotos para el gen atpico pueden fcilmente
distinguirse de los homozigotos normales. El homozigoto anormal
Colinesterasa inhibida tiene niveles muy bajos de colinesterasa y el enzima anormal no
es inhibido por la dibucaina. El homozigoto normal presenta
Para expresar el nmero de dibucaina aplicar: niveles mucho ms altos de colinesterasa srica inhibible por la
dibucaina, mientras que el heterozigoto tiene niveles intermedios y
U/mL con inhibidor respuesta al inhibidor. Este hecho posee una importancia clnica
Porcentaje de inhibicin = 1 x 100
U/mL sin inhibidor en relacin a la administracin de relajantes musculares
(succinilcolina). Los homozigotos anormales pueden desarrollar
una apnea prolongada tras la administracin de succinilcolina.
VALORES DE REFERENCIA
NOTAS
Colinesterasa total 3
1. El Tampn/Cromgeno y el Sustrato pueden mezclarse
Suero, plasma proporcionalmente en tests o en analizadores que empleen el
suero como iniciador de la reaccin. La mezcla es estable 2
Nios horas a 15-25C.
3,5-8,5 KU/L (58,3-141,7 ktal/L) 2. Este ensayo permite ser adaptado a distintos instrumentos
Hombres y mujeres > (40 aos)
automticos. Cualquier adaptacin a un instrumento deber
Mujeres, (16-39 aos) ser validada con el fin de demostrar que se cumplen las
2,8-7,4 KU/L (46,7-123,3 ktal/L)
No embarazadas. caractersticas analticas del mtodo. Se recomienda validar
Mujeres, (18-41) aos peridicamente el instrumento. Consultar con su distribuidor
2,4- 6,0 KU/L (40,0-100,0 ktal/L) para cualquier dificultad en la adaptacin del mtodo.
Embarazadas o tomando anticonceptivos
3. El diagnstico clnico no debe realizarse nicamente con los
resultados de un nico ensayo, sino que debe considerarse al
Colinesterasa inhibida mismo tiempo los datos clnicos del paciente.

Nmero de dibucaina % Inhibicin CARACTERISTICAS ANALITICAS

Homozigotos normales 70-90 - Limite deteccin: 244 U/L

Sujetos heterozigotos 35-75 - Linealidad. Hasta 10000 U/L
- Precisin
Homozigotos atpicos 0-20
g/dL Intraserial Interserial
Media 5,11 8,01 5,11 8,01
CONTROL DE CALIDAD DE 0,04 0,106 0,091 0,227
CV% 0,79 1,36 1,78 2,84
Para un control de calidad adecuado se incluirn en cada serie
controles valorados (normales y elevados) que se tratarn como N 10 10 10 10
muestras problema.
- Sensibilidad. 0,08 mA / U/L colinesterasa.
REF 1980005 HUMAN MULTISERA NORMAL - Correlacin. Este ensayo (y) fue comparado con un mtodo
Valorado. Nivel normal de colinesterasa. comercial similar (x). Los resultados fueron los siguientes:
N = 50 r = 0,995 y = 0,987x 0,005
REF 1985005 HUMAN MULTISERA ABNORMAL
Valorado. Nivel elevado de colinesterasa. Las caractersticas analticas han sido generadas usando un
instrumento automtico. Los resultados pueden variar segn el
Si los resultados obtenidos se encuentran fuera del rango de instrumento utilizado.
tolerancia, revisar el instrumento, los reactivos y la tcnica usada. REFERENCIAS
Cada laboratorio debe establecer su propio Control de Calidad y
sus medidas correctoras cuando los controles no cumplan con las
tolerancias exigidas. 1. Knedel, M. y Bttger. Klin. Wschr. 45 : 325 (1967).
2. Poppe, W.A. y Tritsler. J. Clin: Chem. Biochem. 21 : 381 (1983).
SIGNIFICADO CLINICO 3. Clinical Chemistry. Kaplan, L.A. y Pesce, A.S. The C.V. Mosby
Co. 3rd Ed. (1996).AACC
4. Tietz. N.W. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3th Edition.
La colinesterasa srica (CHE) se la denomina pseudocolinesterasa
W.B. Saunders Co. Philadelphia, PA.1995.
para distinguirla de la colinesterasa verdadera (AcCHE) de los
5. Young DS. Effects of drugs on clinical laboratory tests, 5th ed
hemates y del tejido nervioso.
Press, 2000.
B1119-3/0901
R1.cas

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