Caracterizacin y evaluacin de cidos hmicos como

biosurfactante, con uso potencial en tratamiento de suelos

contaminados con hidrocarburos
Vctor ngel Ramrez Coutio, *Francisco Javier Rodrguez Valadez, Luis Torres Bustillos
*
frodriguez@cideteq.mx

Resumen
Los cidos hmicos son macromolculas orgnicas presentes en suelos, generadas por la
descomposicin de plantas y animales con una amplia gama de pesos moleculares. Su estructura
molecular es heterognea, sin embargo los grupos funcionales que se encuentran en mayora son los
COOH y OH unidos a estructuras aromticas y estas a su vez a largas ramificaciones alifticas. En
este trabajo se caracterizaron cidos hmicos de diferentes orgenes, mediante determinacin de
grupos COOH, OH, relaciones espectromtricas E4/E6, FT-IR, cambios en la tensin superficial
del agua con aumentos en la concentracin de cidos hmicos, diferentes condiciones de pH y
adicin de cationes, con el objetivo de correlacionar los resultados y evaluar cul de estas
posiblemente influyen mayoritariamente en las mejores caractersticas surfactantes para uso
potencial en lavados de suelos contaminados con hidrocarburos (naftaleno, antraceno y pireno). Los
resultados obtenidos nos sugieren que posiblemente las caractersticas que repercuten ms en los
cidos hmicos son el tamao molecular y el contenido de grupos COOH, pudiendo obtener
menores tensiones superficiales del agua con aumento en la concentracin de cidos de menor
571 tamao molecular y mayor contenido de grupos COOH. Los mayores cambios en las tensiones
superficiales a diferente pH y adicin de cationes se presentaron tambin en los cidos con estas
caractersticas. Los lavados de suelo mostraron la viabilidad de utilizar cidos hmicos como
biosurfactantes para remover hidrocarburos, obteniendo diferentes porcentajes de remocin
dependiendo del contaminante, del cido hmico empleado y de su concentracin.

Palabras claves: tensin superficial, lavado de suelo, macromolculas orgnicas

1. Introduccin

Entre las tcnicas de remediacin se encuentra el lavado de suelos, en las que se emplean soluciones
de surfactantes sintticos para la remocin del contaminante [1]. Sin embargo el uso de stos puede
ser limitado debido a su costo y toxicidad biolgica. Los cidos hmicos (AH) son sustancias las
cuales posiblemente pueden utilizarse como biosurfactantes debido a su carcter anfifilico
[2],[3].Los AH al ser generados por la degradacin microbiana de restos de plantas y animales [4],
se encaminan a ser una mejor opcin por ser ambientalmente amigables, de ah la importancia de
evaluar sus caractersticas surfactantes.

2. Metodologa

Tres diferentes cidos hmicos fueron empleados en este trabajo: LPM) Composta producida de
lodo residual-pasto de corte-residuos de maleza; LPT) Composta empleando lodo residual-pasto de
recorte-piedra tezontle y LC) Un comercial producto consistiendo en humus de lombricomposta.

2.1 Extraccin de cidos hmicos

Hacia la sustentabilidad: Los residuos slidos como fuente de energa y materia prima
2011 pp 571-579 ISBN 978-607-607-015-4
Los cidos hmicos fueron extrados de 10 g de muestra con 100 mL de Na4P2O7 0.1 M en
agitacin por 24 h. Los extractos fueron centrifugados durante 20 min a 4000 g, el sobrenadante fue
cuidadosamente removido y filtrado a 0.45 m con membrana de celulosa. La solucin fue
acidificada con 5 M HCl a pH 2 mantenindolo por 24 h a 4 C; posteriormente fue centrifugado
por 20 min a 4000 g y separamos el precipitado conteniendo la fraccin AH, lavando 2 veces con
0.1 M HCl y agua desionizada. Los AH fueron purificados con 0.06 M HCl por 12 h, centrifugando
y lavando con agua desionizada. El AH obtenido fue secado a temperatura ambiente para usar en
los posteriores anlisis.

2.2 Anlisis UV-Vis (E4/E6)

Las muestras de AH (3 mg) fueron disueltas en 10 mL de 0.05 M NaHCO3. Los espectros UV-Vis
fueron medidos en un rango de 200-800 nm con un espectrofotometro Hach D/R 100. Las
relaciones E4/E6 fueron calculados como la relacin de absorbancia entre 465 y 665 nm [5].

2.3 Cuantificacin de grupos funcionales

La acidez total y grupos carboxilicos de los AH fueron medidos por titulacin con hidrxido de
bario y acetato de calcio respectivamente, de acuerdo al mtodo convencionas descrito por
Schnitzer (1977). El contenido de grupos OH fue calculado por la diferencia entre la acidez total y
grupos carboxilicos. El contenido acido-base de los HA fue reportado como un promedio de tres
titulaciones.

2.4. Tensin superficial para soluciones de AH

Soluciones conteniendo diferentes concentraciones de los tres AH fueron preparados con el fin de
determinar el comportamiento de la tension superficial en solucin. Las soluciones fueron
preparados con HA seco y 0.1 M NaOH en concentraciones entre 10 and 6000 mg/L, ajustando el 572
pH a 11.8 con 0.1 M HCl y filtrado a 0.45 m. Las soluciones fueron permitidad reposar 12 h antes
de su medicin. Todas las tensiones superficiales (ST) fueron desarrollados por duplicado y la
temperatura fue mantenida a 25+ 0.2. En un segundo paso, las soluciones conteniendo 1,000 mg/l
de HA disuelto en 0.1 M NaOH fueron ajustados a diferentes pH con 0.1 M HCl en el rango de 2-
7unidades. En el tercer paso, las soluciones de diferentes AH a 1,000 mg/L fueron preparadas
como en el segundo paso, ajustando el pH a 6 con 0.1 M HCl. Los cationes Ca++ o Fe+++ fueron
adicionados con en concentraciones entre 1 x 10-5 and 1 x10-2 M.
Todas las soluciones fueron caracterizadas usando la metodologa del anillo de Du-Noy con un
tensimetro en laboratorio (Cole Palmer, USA). El anillo de platino fue lavado despus de cada
medicin y limpiado con acetona (J.T.Baker, Mexico) y secado con llama con el fin de quitar
cualquier particular orgnica la cual producira errores en los resultados.

2.5 Lavados de suelo con AH

Para los lavados, se contaminaron 10 g de suelo con naftaleno, antraceno y pireno disueltos en
acetonitrilo de tal forma que la concentracin final en suelo fuera de 200 mg/kg de suelo. Despus
de 24 hr de contacto, se realiza el lavado con soluciones de cidos hmicos a 150, 2000, 5000, y
6000 mg/l, a diferentes medios de pH preparadas como en los experimentes de las TS, cabe
mencionar que se realizo un lavado con agua destilada la cual fue tomada como control.
Posteriormente se lleva a centrifugacin, el residuo solido obtenido se lleva a secado en horno a 40
C por 48 hr. Se procede a la extraccin del contaminante por el mtodo soxhlet durante 4 hr, al
finalizar se solubiliza el contaminante con acetato de etilo para cuantificacin en equipo HPLC.

3. Resultados

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 En la Tabla 1. Se puede observar que existe una mayor acidez total en el AH extrado de la
composta LPM y que la elevada acidez total es atribuida al alto contenido de grupos OH fenlicos.
Por otro lado este mismo AH tiene el menor contenido de grupos carboxlicos. Las relaciones
E4/E6 muestran que el mayor contenido de grupos aromticos esta presente en LC en comparacin
con la gran cantidad de grupos alifticos presentes en LPM y LPT. Las diferencias entre los AH son
debidas a los diferentes orgenes de cada uno de ellos.
Tabla 1. Cuantificacin de grupos funcionales de cidos hmicos.
Origen del cido Acidez total COOH-OH COOH OH
E4/E6
hmico (meq/g) (meq/g). (meq/g)
LPM 13.11 1.49 11.52 7
LPT 10.11 2.12 7.99 7.6
LC 12.30 2.96 9.34 5
La Figura 1, se muestra la disminucin de TS con aumentos en la concentracin del AH, fenmeno
caracterstico de un surfactante. La concentracin micelar crtica (CMC) se encuentra en 2000 mg/l
con una TS de 51 Dinas/cm, 3000 mg/l con TS 53 Dinas/cm y 5000 mg/l con TS de 65 Dinas/cm
para LPM, LPT y LC respectivamente. Por lo que se puede ver la ms baja CMC y TS se genero en
LPM, lo cual indica que se necesita menos cantidad de cido hmico para lograr disminuciones
significativas en la tensin superficial del agua lo que lo lleva a ser el producto ms econmico si se
aplicara en la prctica.

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Figura 1. Disminucin de la tensin superficial del agua con aumentos en las concentraciones de los cidos
hmicos

Figura 2. Efecto del pH sobre la tensin superficial del agua con a una concentracin fija de cidos hmicos
(1000mg/l)
Se puede notar en la Figura 2, similares tendencias en los tres AH decreciendo la TS con
decrementos en el pH, obteniendo la menor TS de 61 Dinas/cm en LPM a pH 3. Los decrementos
de la TS en los AH es debido a la neutralizacin de los grupos cidos principalmente carboxilos los
cuales se protonan paulatinamente con la disminucin del pH, siendo mas evidente en LPM puesto
que tiene menor contenido de grupos carboxilos provocando la mayor disminucin de TS.

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Figura 3. Variacin de la tensin superficial del agua mediante incorporacin de iones Ca 2+ y Fe 3+a una
concentracin fija de cidos hmicos (1000mg/l a pH 6)
En la Figura 3. Es interesante notar como con la simple incorporacin de los iones la tensin
superficial disminuye en todos los AH, siendo mas evidente en Fe 3+ en la mnima concentracin.
Posteriormente con el aumento en la concentracin de los iones, existen aumentos en la TS siendo
mas estable LC al aumentar los iones, no as LPM el cual presente aumentos y disminuciones en la
TS pudindose atribuir estos cambios a la interaccin intra-intermolecular de los grupos carboxilos
con los iones originando una modificacin en la estructura del AH.

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 Figura 4. Remocin de Naftaleno, antraceno y pireno en suelo mediante lavado con cidos hmicos
La Figura 4. Muestra los lavados de suelos contaminados, donde se puede observar que no existe
una correlacin entre la concentracin de las soluciones de AH con los % de remocin de
contaminantes, ya que se nota en algunos casos que a menor concentracin mayor remocin. Sin
embargo se puede notar como todos los AH tienen prometedores porcentajes de remocin, adems,
se ve que existe una mayor remocin de los contaminantes a pH 7 que a pH 4, esto debido a que los
grupos cidos de los AH a pH 7 se encuentras cargados negativamente pudiendo presentar fuerzas
electrostticas que provocan el alargamiento de la estructura de tal forma que los grupos
hidrofbicos quedan mayormente expuestos y facilitan la interaccin con los contaminantes
eficientando su remocin.

4. Conclusiones

575 El cido que tiene mejores caractersticas surfactantes es LPM, por disminuir ms la TS a menor
CMC lo cual hace ms econmico su uso. El medio de pH influye grandemente en la disminucin
de las TS de los AH siendo ms evidentes a pH bajos. La incorporacin de iones puede ayudar
disminuir la TS a ciertas concentraciones, pudiendo eficientar el carcter surfactante del AH. Las
concentraciones de las soluciones de lavado de AH no son proporcionales a los porcentajes de
remocin sin embargo se observaron buenas remociones a bajas concentraciones. A pesar de que a
pH bajos se obtienen menores TS, los mejores porcentajes de remocin se obtuvieron a pH 7, lo
cual indica que influye mas el reordenamiento estructural del AH a ese medio de pH, facilitando el
contacto de grupos hidrofbicos con los contaminantes.

Referencias Bibliogrficas

[1] Conte P., A. Agretto, R. Spaccini and A. Piccolo. Soil remediation: humic acids as natural
surfactants in the washings of highly contaminated soils. Environmental Pollution. 2005. 135:515-
522.
[2] Berselli S., G. Milone, P. Canepa, D. Di Giola, F. Fava. Effects of cyclodextrins, humic
substances, and rhamnolipids on the washing of a historically contaminated soil and the aerobic
remediation of the resulted effluents. Biotechnology and Bioengineering. 2004. 88(1): 111-120.
[3] Maris, K., Oscar, P. Humic Substances as Surfactants. Environ. Chem. Springer. 2009.
[4] Stevenson, F.J. Humus Chemistry: Genesis Composition Reactions. Wiley Intersciencie New
York. 1994.pp. 1-54, 288-300.
[5] Schnitzer, M. Recent findings on the characterization of humic substances in the soil organic
matter studies simposyum. International Atomic Energy, Vienna 1977. pp. 117-131

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