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INTRODUCCION

La biotecnologa consiste en el aprovechamiento de sistemas biolgicos


naturales para obtener productos de utilidad para el ser humano. No se trata de
una tcnica nueva; desde hace siglos se vienen realizando cruces selectivos en
plantas y animales para conseguir un determinado fenotipo o se han utilizado
las propiedades bioqumicas de los microorganismos para obtener alimentos.

En la actualidad, gracias a la manipulacin gentica de las bacterias, se


han podido obtener sustancias qumicas de inters para el ser humano,
protenas que se usan como vacunas o drogas para curar determinadas
enfermedades.

La biotecnologa como toda aplicacin tecnolgica que utilice sistemas


biolgicos y organismos vivos o sus derivados para la creacin o modificacin
de productos o procesos para usos especficos (Secretara del Convenio
sobre la Diversidad Biolgica, 1992). Esta definicin incluye las aplicaciones
mdicas e industriales, as como muchos de los instrumentos y tcnicas
habituales en la agricultura y la produccin de alimentos.

La biotecnologa toda tcnica que utiliza organismos vivos o sustancias


obtenidas de esos organismos para crear o modificar un producto con fines
prcticos. La biotecnologa puede aplicarse a todo tipo de organismos, desde
los virus y las bacterias, a los animales y las plantas, y se est convirtiendo en
un elemento importante de la medicina, la agricultura y la industria modernas.
I. TITULO

Sistemas Biolgicos: Su manipulacin, cultivo de


tejidos y el desarrollo de plantas reales y virtuales.

II. OBJETIVOS

Conocer los sistemas biolgicos y su manipulacin.


Conocer los diferentes tipos de cultivo de tejidos en los sistemas
biolgicos.
Conocer el desarrollo de las plantas reales y virtuales.
III. REVISION DE BIBLIOGRAFIA

3.1 SISTEMAS BILOGICOS


Es un sistema material capaz de realizar por s mismo tres funciones
denominadas funciones vitales: nutricin, relacin y reproduccin.
Unidad estructural y funcional de un sistema biolgico = LA CLULA

3.1.1 Componentes principales de un sistema biolgico


BIOELEMENTOS: Son los elementos qumicos que
mayoritariamente forman a los sistemas biolgicos. Los bioelementos
primarios constituyen el 95% de la materia viva y son C, H, O, N, P, S.

Los bioelementos se asocian y dan lugar a las BIOMOLCULAS


o PRINCIPIOS INMEDIATOS:

H2O: componente mayoritario e imprescindible de la materia viva.


Sales minerales.
Hidratos de carbono: proporcionan energa inmediata.
Lpidos: proporcionan energa a largo plazo.
Protenas: molculas con informacin; responsables de los
caracteres.
cidos nucleicos, ADN y ARN, portadores de la informacin
gentica.

3.2 MANIPULACION DE LOS SISTEMAS BIOLOGICOS

La manipulacin de agentes biolgicos comporta unos riesgos, cuya


prevencin debe responder a unas estrictas pautas de comportamiento.
Desde la recepcin de las muestras, hasta la eliminacin de los residuos
generados, todas las operaciones que se realizan en un laboratorio de
estas caractersticas deben estar debidamente sistematizadas. Por tales
motivos, presentamos a continuacin las directrices a tener en cuenta en
estos lugares de trabajo, con el fin de que las actividades que en ellos se
realizan habitualmente, transcurran en las mejores condiciones de
seguridad posibles.

3.2.1 Recepcin de muestras

Ante la recepcin de una muestra biolgica, cualquiera que sea su


naturaleza y el tipo de laboratorio, debern tomarse las siguientes
medidas preventivas:

Recoger siempre la muestra con guantes de ltex o de silicona.


Lavarse las manos tras la recogida de la muestra.
Si se sospecha que la muestra puede contener agentes infecciosos no
esperados, utilizar barbijo o mascarilla y notificarlo inmediatamente al
supervisor del laboratorio y al Servicio de Prevencin de Riesgos
Laborales.

3.2.2 Operaciones diversas de laboratorio

Las medidas preventivas a tomar en la realizacin de cualquier


operacin que se lleve a cabo en un laboratorio de biotecnologa o de
tipo biolgico (cultivos, centrifugaciones, anlisis, etc.) son las
siguientes:

Precauciones generales relativas al local.


Establecimiento de normas de seguridad en el trabajo en cada
laboratorio, acordes a sus caractersticas.
Implicacin de todo el personal del laboratorio en el cumplimiento de las
normas de seguridad que se dictaminen.
Acceso limitado al laboratorio, permitiendo la entrada nicamente al
personal autorizado.
Sealizacin de riesgo biolgico en todas las reas de los laboratorios
catalogados de nivel de contencin 2 en adelante.
Limpieza y desinfeccin diaria de todas las superficies de trabajo, as
como siempre que se produzca un derrame.
Mantenimiento del laboratorio limpio y ordenado evitando utilizar los
pasillos como almacn. Siempre debe quedar un espacio libre no inferior
a 120 cm para poder evacuar el local en caso de emergencia.
Precauciones durante el desarrollo del trabajo.
Evitar el empleo de libros y material de escritorio en el rea de trabajo,
ya que el papel contaminado es difcil de esterilizar.
Est rigurosamente prohibido pipetear con la boca. El pipeteo se llevar
a cabo con dispositivos especialmente diseados al efecto, debiendo
entrenarse adecuadamente al personal para su correcto uso.
Debe limitarse el uso de agujas hipodrmicas y jeringas, debiendo
utilizarse nicamente las unidades ya montadas.
No debe volver a ponerse la capucha a las agujas y stas no deben ser
dobladas ni separadas de la jeringa.
Las agujas y jeringas usadas, as como los bistures, deben desecharse
nicamente en contenedores especiales diseados para este propsito.
Cuando se centrifugue material biolgico potencialmente infeccioso
deben utilizarse tubos cerrados. La centrfuga deber disponer de
rotores o cestillos de seguridad que eviten la formacin de aerosoles.
La rotura accidental de un tubo y su vertido en la cubeta representa una
incidencia importante que debe ser comunicada inmediatamente al
responsable del laboratorio y al Servicio de Prevencin de Riesgos
Laborales, procediendo inmediatamente a la desinfeccin segura del
equipo.
No deben utilizarse centrfugas que no dispongan de sistema de cierre
de seguridad, ni manipular tales equipos de forma que puedan abrirse
mientras estn en funcionamiento y formar aerosoles.
Si el laboratorio dispone de ultracentrfugas, es fundamental llevar a
cabo el equilibrado cuidadoso del rotor.
Los derrames y accidentes, como cortes y pinchazos, deben ser
informados inmediatamente al responsable del laboratorio y al Servicio
de Prevencin de Riesgos Laborales, y hacerse constar por escrito.

Reglas de higiene personal


Cubrir heridas y lesiones con apsitos impermeables antes de comenzar
el trabajo. Si las lesiones no pueden cubrirse adecuadamente, no
exponerse hasta que curen.
Retirar anillos y otras joyas.
Evitar el contacto de la piel con materiales potencialmente infecciosos.
Para ello, cuando se manipulen muestras que contengan posibles
agentes patgenos deber usarse guantes de ltex o de silicona, que
debern retirarse siempre antes de salir del rea de trabajo.
Jams se abandonar el laboratorio con los guantes puestos ni se
coger con ellos el telfono.
Tras quitarse los guantes, se proceder al lavado de manos utilizando
jabones antispticos.
Se usarn gafas protectoras y mascarillas faciales si existe riesgo de
salpicaduras o de formacin de aerosoles.
No debern usarse lentes de contacto.
No comer, beber o fumar ni aplicarse cosmticos en las reas de trabajo.
Asimismo, queda prohibido guardar alimentos o bebidas en las citadas
reas.
El personal con el cabello largo debe llevarlo recogido.

3.2.3 Transporte de material biolgico

Se tendrn en cuenta las siguientes precauciones:

El transporte de las muestras dentro o entre laboratorios se realizar de


tal modo que, en caso de cada, no se produzcan salpicaduras.
Se aconseja llevarlo a cabo en cajas hermticas o neveras porttiles.
Estas cajas o neveras debern ser rgidas y resistentes a los golpes,
contar con materiales absorbentes en su interior y de fcil desinfeccin.
Se etiquetarn o identificarn de forma oportuna y no podrn ser
utilizadas para otros fines.
Bajo ningn concepto se transportarn muestras a mano.
Cuando sea necesario transportar material biolgico que pueda
presentar riesgo de infeccin, se recurrir a la utilizacin del
llamado sistema bsico de embalaje que se compone de:
Recipiente primario estanco, a prueba de filtraciones,
etiquetado, que contiene la muestra. El recipiente debe
envolverse en material absorbente.
Recipiente secundario estanco, a prueba de filtraciones, que
encierra y protege el recipiente primario.
Recipiente externo de envo. Es un paquete que protege el
recipiente secundario y su contenido de los elementos externos.

3.2.4 Almacenamiento de muestras biolgicas

Las muestras biolgicas deben almacenarse en zonas de acceso


restringido, con el fin de minimizar la posibilidad de contaminacin del
personal o del ambiente.
El almacenamiento en congeladores de nitrgeno lquido, debe
realizarse utilizando viales que soporten las bajas temperaturas del
medio sin romperse. En caso de rotura, debe vaciarse el recipiente, dejar
que el nitrgeno lquido se evapore y proceder a su limpieza.
Cuando se maneja el material almacenado en este tipo de congeladores,
siempre se debern utilizar gafas o mascarillas de proteccin para evitar
salpicaduras de nitrgeno lquido.

3.2.5 Tratamiento de los residuos generados por los laboratorios que


manipulan agentes biolgicos

Todos los desechos biolgicos tienen que ser descontaminados antes de


su eliminacin, debiendo seguirse las normas sobre gestin de residuos
de mbito nacional (Ley 10/1998, de 21 de abril, de Residuos), as como
las de mbito autonmico (Decreto 240/1994, de 22 de noviembre, de la
Generalitat Valenciana, por el que se aprueba el Reglamento Regulador
de la Gestin de los Residuos Sanitarios; Orden de 14 de julio de 1997,
de la Consellera de Medio Ambiente de la C.V., por la que se desarrolla
el Decreto 240/1994; Ley 10/2000, de 12 de diciembre, sobre Residuos
de la Comunidad Valenciana).
Residuos biolgicos asimilables a urbanos: Habitualmente se trata
de materiales slidos no cortantes ni punzantes, como papeles, guantes,
plsticos, gasas, etc., contaminados con sangre y fluidos biolgicos.
Para la recogida de estos residuos se recomienda el uso de bolsas de
220 mg/cm2 de galga, en contenedores de basura especiales. Su
eliminacin se efectuar como residuos asimilables a los urbanos.

Residuos slidos biolgicos especiales: Tienen un potencial


infeccioso superior a los residuos slidos urbanos. La gestin de estos
residuos se realizar conforme a lo establecido por la Ley 10/1998, de
21 de abril y su normativa de desarrollo, as como segn lo dispuesto por
las normas legales de mbito comunitario, citadas al comienzo de este
epgrafe.
En este tipo de residuos se incluyen materiales punzantes y cortantes
como agujas, hojas de bistur, restos de vidrio roto, etc., que han estado
en contacto con sangre y fluidos biolgicos o con material procedente de
actividades microbiolgicas. Estos residuos especiales deben
acumularse separadamente de todos los dems tipos, en envases
exclusivos rgidos, impermeables e interiormente inaccesibles. Estos
envases son de un solo uso y una vez cerrados no se pueden volver a
abrir. Han de mantenerse intactos hasta su recogida, evitando presiones
y golpes que puedan afectar su integridad durante su almacenamiento o
transporte. Su eliminacin final debe realizarse por una entidad
autorizada.

Residuos slidos procedentes de cultivos microbiolgicos no


patgenos: Estn constituidos por placas de Petri, tubos de ensayo,
matraces, etc., que contienen medio slido de cultivo.
Estos residuos se colocan en bolsas resistentes a la autoclave para su
esterilizacin con este medio. Una vez realizada la operacin, los
residuos se recogen por el personal encargado de esta actividad.

Residuos biolgicos lquidos: Se inactivan con leja de uso domstico


(hipoclorito sdico al 10%) durante 30 minutos, pudiendo eliminarse a
continuacin por el desage.
Conviene precisar que el uso indiscriminado de leja puede provocar
contaminacin ambiental. La disolucin de leja domstica aqu indicada
es suficiente, no debindose utilizar disoluciones ms concentradas.

3.3 CULTIVO DE TEJIDOS


3.3.1 Cultivo de tejidos In Vitro de tejidos vegetales

El trmino cultivo in vitro de tejidos significa cultivar algunas partes


de las plantas tambin llamados explantes, como segmentos de
hoja, tallo y races, adems de otros tejidos u rganos vegetales,
dentro de un frasco de vidrio en un ambiente artificial, en los que
deben de controlarse la asepsia, el crecimiento y el desarrollo de
estos diferentes tejidos. No deben de crecer microorganismos como
bacterias y hongos, y los tejidos o plantas deben de mostrar un
ptimo desarrollo.

Para lograr un cultivo in vitro de plantas, los tejidos y rganos


(incluyendo semillas) deben ser esterilizados de manera superficial
(asepsia) y se cultivan en soluciones nutritivas especiales, con
frecuencia en medios solidificados con agar. A estos medios de
cultivo se le incorporan combinaciones adecuadas de auxinas y
citocininas, dos de las principales fitohormonas del crecimiento
vegetal. Con la aplicacin de stas y el cultivo controlado como el
pH, la luz y la temperatura, es posible reproducir todos los factores
que puedan incidir en el crecimiento y desarrollo de los tejidos o de
las plantas in vitro.

En los protocolos utilizados durante el cultivo in vitro se pueden


distinguir las siguientes etapas:

1) Eleccin de la planta y/o tejido donante de explantos.


2) Establecimiento, que consiste en la desinfeccin de los explantos
(generalmente con hipoclorito de sodio) y su posterior adaptacin al
medio artificial de modo de inducir callo, brote, raz o embrin
somtico segn se desee.
3) Multiplicacin, para generar una masa vegetal suficiente para la
regeneracin del nmero de plantas necesarias.
4) Enraizamiento, en la que se busca la formacin de races con el
fin de convertir los brotes o embriones somticos en plntulas
completas.
5) Rusticacin, que es la aclimatacin de las plntulas obtenidas in
vitro a las condiciones ambientales ex vitro (suelo o algn sustrato
inerte).
El xito de la tcnica depende de muchos factores, entre ellos la
edad de la planta (a mayor edad, menor potencial de regeneracin),
el genotipo y las condiciones ambientales. Entre las ventajas del
cultivo in vitro de material vegetal, se pueden incluir los tiempos ms
cortos, y la posibilidad de ocupar un espacio mucho ms pequeo
que si se desea propagar material en tierra.
Figura N1. Etapas de regeneracin In Vitro del maz.
Cuadro N1. Composicin de medios de cultivo para clulas
vegetales
3.3.2 EL CULTIVO IN VITRO Y LA BIOTECNOLOGIA
A) La micropropagacin
La propagacin de plantas in vitro es una tcnica muy utilizada en
cultivos de importancia econmica. Permite cultivar clulas, tejidos,
rganos, semillas, embriones y obtener individuos selectos en forma
rpida. Los cultivos son realizados por personal especializado en
medios especficos (hormonas, minerales, vitaminas, fuente de
carbono, agente gelificante, agua, etc.) y condiciones ambientales
controladas (temperatura, humedad y luz). Una vez ajustados los

protocolos para la especie o cultivo de inters, es posible


automatizar el proceso de modo de llevarlo a mayor escala de
produccin.
La micropropagacin (propagacin clonal por cultivo in vitro)
constituye uno de los mtodos biotecnolgicos que mayores logros
ha aportado al desarrollo de la agricultura, ya que se la usa en la
produccin masiva de especies hortcolas, aromticas, medicinales,
frutcolas, ornamentales y forestales.

Figura N 2. Micropropagacin vegetal.

Entre las ventajas de la micropropagacin se pueden mencionar:


Posibilita incrementar rpidamente nuevos materiales.
Permite controlar las condiciones ambientales, debido a su
independencia de los mismos (luz, temperatura y humedad
controlada).
Permite estudiar diversos procesos fisiolgicos.
Evita el riesgo de contaminacin con patgenos, ya que se realiza
en medios esterilizados.
Se pueden obtener gran cantidad de individuos en espacios
reducidos.
Permite la obtencin de individuos uniformes.
Facilita el transporte del material.

B) El cultivo de meristemas
En la yema apical se encuentran un grupo de clulas que
conforman el meristema apical (tiene un tamao entre 0,01 y 0,3
mm), tejido embrionario que tiene la capacidad de formar todos
los tejidos de la planta. A partir de ellos se pueden regenerar
plantas completas.

Figura N 3. Cultivo de meristemas.

El cultivo de meristemas tiene numerosas aplicaciones. Una de


las ms importantes es la obtencin de plantas libres de virus, ya
que esta pequea zona de tejido generalmente no es afectada
por estos patgenos vegetales. Otra muy importante es la
multiplicacin vegetal. La potencialidad de la tcnica se
demuestra con un ejemplo: a partir de una yema apical, se
pueden obtener 4.000.000 de claveles en un ao. La tcnica
permite tambin multiplicar especies de plantas con reproduccin
lenta o dificultosa (como las orqudeas), o acelerar la produccin
de plantas bianuales.

C) Cultivo de clulas y rganos vegetales en biorreactores

Una vez obtenidos los callos a partir de algn explanto, los


mismos pueden disgregarse para obtener una suspensin de
clulas. Esta suspensin puede utilizarse para generar
embriones somticos (la base de las semillas sintticas), o
puede directamente cultivarse para producir metabolitos
secundarios, que son compuestos qumicos sintetizados por las
clulas vegetales en determinadas condiciones, con gran utilidad
para las industrias farmacutica y alimenticia, entre otras. Por
ejemplo, son metabolitos secundarios el mentol y las drogas
anticancergenos vincristina y taxol, y algunos edulcorantes. Los
cultivos celulares se llevan a cabo en biorreactores, que son
recipientes de distinta capacidad (de unos pocos a miles de
litros), diseados para propiciar el crecimiento y/o la
multiplicacin de distintos tipos de clulas y/o rganos.
Las races vegetales tambin pueden ser cultivadas en
biorreactores, especialmente aquellas transformadas por
Agrobacterium rhizogenes, que produce un aumento abrupto en
el tamao y ramificacin de la raz, aumentando as la biomasa,
y por ende la cantidad del producto deseado. Un ejemplo de
compuesto farmacolgico producido por cultivo de races es el
paclitaxel, o taxol, que es utilizado como anticancergeno.
Figura N 4. Cultivo de clulas y rganos vegetales.

3.4 DESARROLLO DE PLANTAS REALES Y VIRTUALES


IV. CONCLUSIONES

La biotecnologa consiste en el aprovechamiento de sistemas biolgicos


naturales para obtener productos de utilidad para el ser humano. No se trata de
una tcnica nueva; desde hace siglos se vienen realizando cruces selectivos en
plantas y animales para conseguir un determinado fenotipo o se han utilizado
las propiedades bioqumicas de los microorganismos para obtener alimentos.

La biotecnologa toda tcnica que utiliza organismos vivos o sustancias


obtenidas de esos organismos para crear o modificar un producto con fines
prcticos. La biotecnologa puede aplicarse a todo tipo de organismos, desde
los virus y las bacterias, a los animales y las plantas, y se est convirtiendo en
un elemento importante de la medicina, la agricultura y la industria modernas.
V. BIBLIOGRAFIA

file:///C:/Users/ANGEL-PC/Downloads/21_Ago._Exp._1_
_Dr._Alexander_Grobman.pdf

https://www.sprl.upv.es/msbiotecnologia.htm#p44

http://kokemj.webcindario.com/apuntes%20eso/sistemas%20biologicos.p
df

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