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INSTITUTO POLITECNICO NACIONAL

ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLOGICAS (ENCB)


La tcnica al servicio de la patria

Bioquimica General
Profa. Dra. Lourdes Vega Rasgado
Grupo 3fm1

Reporte Practica 10

Obtencion de DNA plasmidico


Seccion 1:

Ortega vila Rodrigo Sebastin 2014500485


Osorio Ramirez Brenda Viridiana 2010500773

Introduccion
Los plasmidos son molculas de DNA extracromosomales los cuales estn presentes en algunas
clulas bacterianas, levaduras y hongos. Los mismos poseen DNA de doble hebra, mayormente
son circulares pero tambin se han encontrado plasmidos lineales. Los plasmidos poseen un
inters singular en ingeniera gentica por ser uno de los sistemas vectores mas sencillos de usar.
Existen unos requerimientos bsicos que un plasmido debe poseer para que sea un buen vector al
aplicar su uso en la biologa molecular.Debe poseer un origen de replicacin, un gen para un
marcador de seleccin y un lugar de clonaje multiple.
Objetivos
*Obtener DNA plasmdico (MINI-PREP)
*Realizar una electroforesis en gel de agarosa del plsmido obtenido y la discusin sobre las
formas moleculares obtenidas

Discusin de resultados
El producto final obtenido era incoloro, y dentro del gel de agarosa para la
electroforesis era difcil de distinguir, por ello agregamos azul de bromofenol
para tener una referencia.

Al realizar la electroforesis vemos el desplazamiento de los distintos tipos de


ADN y RNA respectivamente segn su estructura.

Las estructuras conforme se fueron separando es DNA plasmidico, DNA lineal,


DNA circular super enrrollado, y finalmente RNA.

Conclusiones

El mtodo para obtencin del plasmido se basa en la desnaturalizacin y precipitacin selectiva de


DNA cromosmico en medios con NaOH y SDS. En estas condiciones el DNA plasmidico
premanece intacto debido a su pequeo tamao y su naturaleza circular superenrrollada

La purificacin de DNA plasmidico se completa por precipitacin con EtOH. Es posible obtener
DNA plasmidico con diferente grado de super enrollamiento y se visualiza tras la separacin por
electroforesis y tincin con BrEt.

Bibliografia

*Carey Frames A.; Qumica orgnica; Mc Graw Hill, Espaa, 1999, Oxidacin-reduccin
*IUPAQ, Compendio de la terminologa qumica; Edicin internet