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Procedimiento

Preparacin del extracto

Se tomaron 5 gramos de muestra y se homogenizaron con 100 ml solucin de metanol (80%)


durante 20 minutos con agitacin constante; los recipientes deben estar cubiertos de la luz (papel
aluminio).

Una vez transcurrido el tiempo, a muestra es filtrada y recuperada de igual modo en un recipiente
cubierto de la luz. Se almacena hasta su utilizacin.

Capacidad antioxidante

Preparacin de reactivo de DPPH. (C18H12N5O6 1,1-Difenil-2-picrilhidrazil) de grado analtico al 0.1N


para ello se pesaron 0.019716 gr de DPPH y se aforo en un matraz de 1000 mL con metanol (CH3OH)
puro de grado analtico. El material debe forrarse con aluminio para evitar el contacto con la luz. La
reaccin se realiz en celdas para espectrofotmetro, se pipetearon 1000 L de extracto,
posteriormente se tom 3900 L de la solucin de DPPH al 0.1 N se agito durante 5 segundos y se
dej reposar durante 30 minutos, y se realiz la lectura en un espectrofotmetro, a una longitud de
onda () de 515nM, los resultados se expresaron en porcentaje (%) de inhibicin. Con la siguiente
ecuacin todas las muestras se realizaron por triplicado, el blanco del equipo fue metanol (CH3OH)
puro al 100% de grado analtico.

Ecuacin para la determinacin del porcentaje de inhibicin para las muestras analizadas de cascara
de limn persa.

Ecuacin para el porcentaje de inhibicin

.
%

Para la medicin de la capacidad antioxidante, se toman tres lecturas de acuerdo a la formula


anterior, donde, la absorbancia de la muestra contiene 75uL del extracto de la muestra y 2925uL
reactivo de DPPH; la absorbancia patrn de referencia lleva 75uL de agua y 2925uL del reactivo de
DPPH y finalmente la absorbancia blanco se toman 75uL de extracto y 2925uL de metanol. El blanco
de las lecturas fue de metanol al 80%.
Solucin de control: cido ascrbico. Colocar 0.25 g en 100 mL de solucin de metanol al 80%.