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EFICIENCIA DEL USO DE MICROORGANISMOS PARA EL TRATAMIENTO

DE AGUAS RESIDUALES DOMSTICAS EN UNA PLANTA DE TRATAMIENTO

DE AGUA RESIDUAL

MARIA ELIZABETH BEJARANO NOVOA

MAURICIO ESCOBAR CARVAJAL

UNIVERSIDAD DE LA SALLE

FACULTAD DE INGENIERA

PROGRAMA DE INGENIERA AMBIENTAL Y SANITARIA

BOGOT D.C.

JUNIO 2015
EFICIENCIA DEL USO DE MICROORGANISMOS PARA EL TRATAMIENTO DE AGUAS RESIDUALES
DOMSTICAS EN UNA PLANTA DE TRATAMIENTO DE AGUA RESIDUAL 2015

EFICIENCIA DEL USO DE MICROORGANISMOS PARA EL TRATAMIENTO

DE AGUAS RESIDUALES DOMSTICAS EN UNA PLANTA DE TRATAMIENTO

DE AGUA RESIDUAL

MARA ELIZABETH BEJARANO NOVOA

COD: 41091011

MAURICIO ESCOBAR CARVAJAL

COD: 41082068

PROYECTO DE GRADO PARA OPTAR AL TTULO DE INGENIERO


AMBIENTAL Y SANITARIO

DIRECTOR
OSCAR FERNANDO CONTENTO RUBIO
INGENIERO QUMICO

UNIVERSIDAD DE LA SALLE
PROGRAMA DE INGENIERA AMBIENTAL Y SANITARIA
BOGOT D.C.
2015

2 Elizabeth Bejarano Mauricio Escobar


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Nota de aceptacin:

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Firma de la Director

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Firma del jurado

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Firma del jurado

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Bogot D.C., Septiembre de 2015

DEDICATORIA

Agradezco de antemano a Dios por haberme puesto en este punto de la vida profesional y

por llenarme de conocimiento y sabidura para hacer posible este gran logro de ser

Ingeniera Ambiental y Sanitaria. Tambin agradezco a mi familia principalmente a mis

padres y hermanas que con su apoyo emocional e incondicional, son mi gran motivacin y

siempre me impulsaron a ser una gran persona y fueron el gran apoyo para el desarrollo de

mis metas y proyectos. Por ltimo agradezco al Ingeniero Oscar Contento que con su gran

conocimiento hizo posible el desarrollo de este trabajo de grado.

Mara Elizabeth Bejarano Novoa

Agradezco de antemano a Dios y a mi familia por el apoyo incondicional que me brindaron

a lo largo de este proceso para lograr cumplir con la meta de convertirme en Ingeniero

Ambiental y Sanitario, su apoyo y perseverancia siempre fueron clave para continuar cada

vez con ms ahnco en este camino. Tambin agradezco a los docentes de la facultad por

brindarme sus conocimientos y sabidura, ya que sin ellos no habra sido posible llevar

acabo el presente proyecto. Finalmente agradezco de manera especial al Ingeniero Oscar

Contento por guiarme en este proceso y hacer posible el logro de esta meta.

Mauricio Escobar Carvajal

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AGRADECIMIENTOS

A la Universidad de La Salle y todos los docentes del Programa de Ingeniera Ambiental y

Sanitaria, por brindarnos de la mejor manera el conocimiento y apoyo da a da en sus

diferentes espacios acadmicos.

A su vez le damos nuestros sinceros agradecimientos al Ingeniero Qumico el seor Oscar

Fernando Contento, director de la tesis, por su colaboracin y dedicacin para hacer posible

el desarrollo del siguiente proyecto, mediante la transmisin de sus conocimientos hacia

nosotros. Tambin agradecemos a externos y compaeros de la Universidad de la Salle,

que con su apoyo contribuyeron emocionalmente y profesionalmente a que el desarrollo del

proyecto se diera de manera correcta

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NDICE DE CONTENIDO

1. INTRODUCCIN ....................................................................................................... 18
2. OBJETIVOS ................................................................................................................ 20
1.1 Objetivo General ................................................................................................ 20
1.2 Objetivos especficos .......................................................................................... 20
3. MARCO TERICO .................................................................................................... 21
3.1 AGUA RESIDUAL (AR) ................................................................................... 21
3.2 AGUA RESIDUAL DOMSTICA (ARD) ...................................................... 21
3.3 TRATAMIENTO BIOLGICO DE AGUAS RESIDUALES ...................... 22
3.3.1 Tratamiento de aguas residuales aerobios ................................................................................. 23
3.3.2 Sistema de lodos activados ........................................................................................................ 25
3.3.3 Uso de Microorganismos eficientes (EM) en el tratamiento de Agua Residual Domstica ...... 27
3.3.4 Microorganismos presentes en el tratamiento de Aguas residuales mediante el Sistema de lodos
activados .................................................................................................................................................. 28
3.3.4.1 Bacterias ............................................................................................................................... 28
3.3.4.2 Hongos ......................................................................................................................................... 32
3.3 PLANTA DE TRATAMIENTO DE AGUA RESIDUAL (PTAR)................ 37
3.3.4 Planta de tratamiento de agua residual tipo REDFOX .............................................................. 39
3.3.5 PTARD Objeto de estudio ......................................................................................................... 40
3.3.6 Estructuras que componen la PTARD objeto de estudio ........................................................... 41
3.3.6.2 Pretratamiento ...................................................................................................................... 41
3.3.6.4 Mdulo sistema de tratamiento de tipo aerobio ................................................................... 43
4 MARCO NORMATIVO .............................................................................................. 47
5 METODOLOGA ........................................................................................................ 49
5.3 Descripcin metodolgica .................................................................................. 51
Fuente: Autores 2015 .......................................................................................................... 58
6 RESULTADOS Y DISCUSIN ................................................................................. 58
6.3 Identificacin del estado inicial de la PTARD ................................................. 58
6.2 Dimensionamiento del Reactor Aerobio ................................................................ 60
6.4 FASE DIAGNSTICA ...................................................................................... 61
6.2.1 Clasificacin de bacterias ............................................................................................................... 62
6.5 Morfologa de las bacterias ............................................................................... 66
6.6 Identificacin de Hongos por microscopa mediante clave dicotmica............... 67
6.4 RESULTADOS FASE SEGUIMIENTO Y EVALUACIN .............................................................. 1

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6.4.2 pH ............................................................................................................................. 3
6.4.3 FSFORO ............................................................................................................... 5
6.4.4 NITRGENO .......................................................................................................... 6
6.4.4.1 Nitratos .......................................................................................................................................... 7
6.4.4.2 Nitritos ........................................................................................................................................... 8
6.4.4.3 Nitrgeno amoniacal ...................................................................................................................... 9

TABLA DE ILUSTRACIONES

Ilustracin 1. Reaccin proceso aerobio .............................................................................. 24


Ilustracin 2. Metabolismo microbiano en el proceso de respiracin aerobia ..................... 24
Ilustracin 3. Tratamiento biolgico del agua residual ........................................................ 26
Ilustracin 4. Zooglea ramigera ......................................................................................... 29
Ilustracin 5. Pseudomonas ................................................................................................ 29
Ilustracin 6. Bacillus........................................................................................................... 30
Ilustracin 7. Corynebacterium ........................................................................................ 30
Ilustracin 8.Beggiatoa ........................................................................................................ 30
Ilustracin 9. Flculo de Lodos Activados .......................................................................... 31
Ilustracin 10. Nitrobacter ................................................................................................... 32
Ilustracin 11. Leptomituslacteus......................................................................................... 33
Ilustracin 12. Fusarium ...................................................................................................... 33
Ilustracin 13. Penicillium ................................................................................................... 34
Ilustracin 14. Aspidisca Cicada ......................................................................................... 35
Ilustracin 15. Rotfero ........................................................................................................ 37
Ilustracin 16. Mapa de la ubicacin PTARD ..................................................................... 40
Ilustracin 17. Rejillas de cribado ........................................................................................ 42
Ilustracin 18. Trampa de grasas ......................................................................................... 42
Ilustracin 19. Bombas Tanque de Bombeo (Homogenizador) ........................................... 43
Ilustracin 20. Mdulo de Tratamiento por Lodos activados ............................................. 44
Ilustracin 21. Equipo de recirculacin de Lodos ................................................................ 46
Ilustracin 22. Metodologa Propuesta ............................................................................... 49
Ilustracin 23. Diagnstico inicial de la PTARD ................................................................ 59
Ilustracin 24. Condicin inicial del Reactor Aerobio........................................................ 59
Ilustracin 25. Vista de planta del Reactor Aerobio y sus partes......................................... 60
Ilustracin 26. Vista de perfil del Reactor Aerobio y sus partes .......................................... 61
Ilustracin 27. Bacterias Gram positivas de la muestra de lodos activados observadas al
microscopio .......................................................................................................................... 65
Ilustracin 28. Bacterias Gram positivas encontradas en la muestra de lodos activados .... 66
Ilustracin 29. Aspecto macroscpico de las colonias de hongos ...................................... 68
Ilustracin 30. Comportamiento de la temperatura en el perodo de operacin .................... 3
Ilustracin 31. Comportamiento del pH en el perodo de operacin ..................................... 4
Ilustracin 32 Consumo de Fsforo en el perodo de operacin ............................................ 6

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Ilustracin 33. Consumo de Nitratos en el perodo de operacin .......................................... 8


Ilustracin 34 Consumo de Nitritos en el perodo de operacin ............................................ 9
Ilustracin 35. Consumo de Nitrgeno Amoniacal en el perodo de operacin .................. 10
Ilustracin 36. Evolucin de los slidos sedimentables en el perodo de operacin ........... 11
Ilustracin 37 Comportamiento de la DQO en el perodo de operacin .............................. 12

NDICE DE TABLAS

Tabla 1. Normatividad del presente estudio ......................................................................... 47


Tabla 2. Visitas previas al desarrollo de las fases que hacen parte de la metodologa del
estudio .................................................................................................................................. 50
Tabla 3. Descripcin de la Fase I Diagnstico (Clasificar la poblacin bacteriana mediante
la tincin de Gram e identificar los tipos de hongos por microscopa mediante la clave
dicotmica en una muestra control de lodos activados)....................................................... 52
Tabla 4. Descripcin de la Fase II Ejecucin (Determinacin de las condiciones necesarias
para los microorganismos) ................................................................................................... 56
Tabla 5. Descripcin de la Fase III Seguimiento y Evaluacin (Pruebas fisicoqumicas de
control y seguimiento).......................................................................................................... 57
Tabla 6. Seguimiento realizado mediante Tincin de Gram para la clasificacin bacteriana
de la muestra control ............................................................................................................ 63
Tabla 7. Identificacin de los hongos por microscopa mediante clave dicotmica. ............ 1

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GLOSARIO DE TRMINOS

Las siguientes definiciones deben tomarse como elementos conceptuales para la

interpretacin del documento escrito.

Aerobio: Proceso por el cual un compuesto se oxida, utilizando oxgeno molecular como

aceptor final de electrones.

Aireacin: Proceso por el cual se provee al sistema el oxgeno necesario, para que los

microorganismos oxiden la materia orgnica, se mantengan los niveles operativos de

oxgeno disuelto y se proporcione la mezcla apropiada.

Anxico: Proceso anaerobio por medio del cual las bacterias desnitrificantes obtienen

energa para su crecimiento a travs de la conversin del nitrgeno de los nitratos en

nitrgeno gaseoso.

Bacterias: Microorganismos unicelulares y microscpicos, que se reproducen por la fisin

de esporas, carecen de ncleo diferenciado y se reproducen por divisin celular.

Caudal: Cantidad de lquido que fluye por un rea en un determinado tiempo, se

caracteriza por ser un flujo de agua superficial a travs de un sistema de tratamiento de

aguas.

Conductividad: Es la medida de la capacidad de una solucin para conducir la Corriente

elctrica, es una variable de calidad del agua expresada en (s/cm).

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Cono Inhoff: Recipiente en forma cnica usado para medir el volumen de solidos

sedimentables durante 30 minutos en un litro de agua, por lo general se expresa en unidades

de ml/l.

Demanda bioqumica de oxgeno (DBO5): Es una prueba de laboratorio estndar que se

utiliza para evaluar el potencial de desperdicios de aguas tratadas y no tratadas para

absorber el oxgeno del cuerpo receptor de agua. DBO5 mide la cantidad de oxgeno que

usan las bacterias cuando consumen materia orgnica de una muestra de agua de

desperdicio por un periodo de 5 das a una temperatura de 68 F bajo condiciones

aerbicas.

Eficiencia del tratamiento: Relacin entre la masa o concentracin removida y la masa o

concentracin en el efluente para un proceso o planta de tratamiento.

Efluente: Aguas negras tratadas o no tratadas que fluyen desde un proceso hasta el medio

ambiente.

F/M: Es la relacin de alimento con respecto a los microorganismos, se define como la

cantidad de alimento disponible para su consumo.

Hongos: Los hongos son protistas superiores (eucariotas) no fotosintticos y se dividen en

tres grupos principalmente: mohos, que son hongos filamentosos; levaduras, los hongos no

filamentosos; y las setas, que son hongos macroscpicos.

Inoculacin: Introduccin de lodos activados a un reactor aerobio o anaerobio, con el fin

de que arranque el mismo.

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Microorganismos eficientes (EM): Los Microorganismos Eficientes proceden de cinco

especies diferentes: bacterias fototrficas o fotosintticas, bacterias cido lcticas,

levaduras, actinomicetos y hongos de fermentacin. Estos microorganismos son muy

conocidos, puesto que se llevan utilizando en medicina y en la produccin de alimentos

desde la antigedad, siendo muy beneficiosos para los suelos, agua, plantas, animales y, por

supuesto, para el ser humano.

Oxgeno disuelto (OD): Es un parmetro fisicoqumico que es el fundamento del clculo

de la DQO y de la valoracin de las condiciones de aerobicidad de un agua. En general,

todo proceso aerobio requiere una concentracin de OD mayor a 0,5 mg/l

Planta de tratamiento de aguas residuales domsticas (PTARD): Es un conjunto de

obras de infraestructura, diseados hidrulica y simultneamente para poder remover o

quitar la carga contaminante de las aguas residuales que provienen de una comunidad o

institucin denominada (Ignacio Gmez 2011).

PTAR Red Fox: Planta de tratamiento de aguas residuales domesticas diseada por la casa

matriz Norte Americana RED FOX ENVIRONMETAL SERVICES, que cuenta con un

tratamiento con lodos activados donde el agua residual y el lodo biolgico

(microorganismos) son mezclados y aireados en un tanque.

Procesos aerobios: Son los procesos de tratamiento biolgico que se dan en presencia de

oxgeno.

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pH: Un valor utilizado para indicar la acidez o alcalinidad de una solucin, el rango de

valores de pH es de 1 a 14. Un valor de 1 es una solucin extrema de una solucin acida, un

valor de 14 sera el extremo de una solucin caustica

Procesos anaerobios: Son los procesos de tratamiento biolgico que se dan en ausencia de

oxgeno.

Sedimentacin: Proceso de separacin por accin de la gravedad, de las partculas slidas

suspendidas cuyo peso especfico es mayor que el del agua.

Slidos totales: Es la materia que permanece como residuo despus de evaporacin y

secado a 103C.

Sustrato: Trmino utilizado para indicar que la materia orgnica o los nutrientes que se

transforman durante los tratamientos biolgicos, o aquella que puede ser limitante en

dichos tratamientos, por ejemplo la materia orgnica de las aguas residuales se considera

como el sustrato que se transforma durante el tratamiento biolgico.

Tincin diferencial de Gram: Es una tincin diferencial, que clasifica las bacterias en

Gram + y Gram -, de acuerdo a las propiedades de su pared celular (T.S. Walker 2000).

Total de Slidos Disueltos: La cantidad de partculas suspendidas en el fluido se llaman

TSS, un TSS alto en el efluente puede causar daos al ambiente como bloquear la luz es

importante para el crecimiento de algas, un valor alto indica comnmente que la DBO5

elevado debido al sedimento orgnico suspendido, el valor TSS lo determina una prueba de

laboratorio.

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Tratamiento de lodos activados: El lodo activado es un proceso de tratamiento por el cual

el agua residual y el lodo biolgico (microorganismos) son mezclados y aireados en un

tanque denominado reactor. Los flculos biolgicos formados en este proceso se

sedimentan en un tanque de sedimentacin, lugar del cual son recirculados nuevamente al

tanque aireador o reactor (sin autor 2008).

Total de Slidos Disueltos (TSS): la cantidad de partculas suspendidas en el fluido se

llaman TSS, un TSS alto en el efluente puede causar daos al ambiente como bloquear la

luz es importante para el crecimiento de algas, un valor alto indica comnmente que la

DBO5 elevado debido al sedimento orgnico suspendido, el valor TSS lo determina una

prueba de laboratorio.

Zona muerta: Espacio inutilizado de un reactor en el cual las partculas se acentan,

aumentando el tiempo de retencin hidrulico y disminuyendo la eficiencia de remocin de

contaminantes.

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RESUMEN

Un manejo inadecuado de las aguas residuales domsticas puede tener una serie de

impactos negativos hacia el entorno, de ah la importancia de un buen manejo y tratamiento

de las mismas. El presente trabajo tiene la finalidad evaluar la eficiencia del uso de

microorganismos para el tratamiento de aguas residuales domsticas en una planta de

tratamiento de agua residual ubicada al norte de la ciudad de Bogot. La PTARD objeto de

estudio, es una Planta tipo REDFOX con un caudal de 0.5 LPS que trata el agua mediante

un sistema de lodos activados.

El estudio se realiz mediante tres fases: Fase diagnstica, fase de ejecucin y fase de

evaluacin. En la fase diagnstica, a partir de una muestra de lodos activados se realiz una

clasificacin bacteriana por medio de la Tincin de Gram, y a su vez se hizo la

identificacin de hongos por microscopa con clave dicotmica. Seguido a esta fase se llev

a cabo el monitoreo de la concentracin de carga contaminante en el sistema de lodos

activados y el monitoreo de factores ambientales operativos, los cuales permitieron

establecer las condiciones necesarias para el desarrollo de los microorganismos. Y

posteriormente se realizaron pruebas fisicoqumicas de control y seguimiento al agua

residual, a fin de determinar las condiciones iniciales y cargas contaminantes que contiene

el agua residual, as mismo, se monitorearon sus condiciones intermedias y finales durante

la implementacin de los microorganismos en el reactor.

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Al realizar la comparacin de las concentraciones iniciales y finales de los parmetros

fisicoqumicos DQO, DBO, y SST y partiendo de la implementacin de microorganismos

aerobios previamente identificados en el sistema de tratamiento de lodos activados; se

encontr que el uso de estos microorganismos permiti la remocin de un 79.8 % de carga

orgnica en el reactor, contribuyendo a un buen funcionamiento de la PTARD y a su vez

dando cumplimiento a la normatividad ambiental legal vigente. Se pudo identificar que las

bacterias que realizan el proceso de remocin son las GRAM y que los hongos que trabajan

en conjunto son del gnero Fusarium, Penicillium y Aspergillus.

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ABSTRACT

Improper handling of domestic wastewater can have a number of negative impacts to the

environment, hence the importance of good management and treatment of the same. The

present study aims to evaluate the efficiency of the use of microorganisms for the treatment

of domestic sewage in a treatment plant wastewater in the north of Bogota. The PTARD

under study is a Redfox type plant with a throughput of 0.5 LPS which treats water by

activated sludge system.

The study was conducted in three major phases: diagnostic phase, implementation phase

and evaluation phase. In the diagnostic phase, from a control sample a bacterial sorting

through Gram staining was performed, and in turn became the identification of fungi by

microscopy with dichotomous key. Followed this phase was conducted to monitor the

concentration of pollutant load in the activated sludge system operating and monitoring

environmental factors, which allowed to establish the necessary conditions for development

of microorganisms conditions. And then physicochemical tests of control and monitor the

wastewater were performed in order to determine the initial conditions and pollutant loads

containing wastewater, also, its intermediate and final conditions will be monitored during

the implementation of the microorganisms in the reactor.

When comparing the initial and final concentrations of the physicochemical parameters

COD, BOD, and TSS and based on the implementation of previously identified aerobic

microorganisms in the system of activated sludge treatment; It found that the use of these

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microorganisms allowed the removal of a 79.8% organic loading in the reactor,

contributing to a proper functioning of the PTARD and in turn fulfilling the legal

environmental regulations in force. He was able to identify the bacteria that perform the

removal process are the GRAM and fungi are working together Fusarium, Penicillium and

Aspergillus.

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1. INTRODUCCIN

El tratamiento de las aguas residuales domsticas ha tomado fuerza durante los ltimos

aos, lo anterior a fin de que este recurso no renovable pueda ser aprovechado y que pueda

as mismo cumplir a cabalidad con los requerimientos exigidos por la normatividad

ambiental existente. En la actualidad existen sistemas que utilizan microorganismos

eficientes para el tratamiento de estas aguas, a fin de minimizar las diversas problemticas

causadas por el mal manejo de las mismas.

El presente proyecto, consisti en la determinacin de la eficiencia del uso de

microorganismos para el tratamiento de aguas residuales domsticas en una PTARD tipo

REDFOX ubicada al norte de Bogot. La PTARD presentaba varios problemas que

impedan su correcto funcionamiento, una de las problemticas que se identific fue la falta

de condiciones apropiadas para el desarrollo de microorganismos eficientes (EM) en el

Sistema de lodos activados, dando como resultado una disminucin en la eficiencia del

proceso de tratamiento del agua residual domstica.

Por lo anterior y con el fin mejorar la eficiencia en el sistema de lodos activados de la

PTARD, se realizaron dos inoculaciones al reactor aerobio de la PTARD con lodos

activados trados de una PTARD con unas eficiencias altas de remocin de carga

contaminante; posteriormente se tom una muestra de estos lodos y se llev a cabo una

clasificacin de bacterias mediante la tincin de Gram y la identificacin de hongos

mediante clave dicotmica. Consecutivamente se determin la eficiencia del Sistema

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mediante el monitoreo a la entrada y salida del reactor analizando los siguientes parmetros

relacionados a la remocin de carga orgnica en el tratamiento de lodos activados: demanda

bioqumica de oxgeno (DBO), demanda qumica de oxgeno (DQO), oxgeno disuelto

(OD), temperatura, grasas y aceites, pH, conductividad elctrica, slidos en suspensin y

caudal.

Podemos decir que mediante la clasificacin bacteriana y la identificacin de hongos

mediantes tinciones bsicas como lo es la tincin de Gram para bacterias y Azul de

Lactofenol para hongos, se pueden sugerir microorganismos eficientes especficos que

garanticen el aumento de las eficiencias de las PTARD, en los sistemas de lodos activados.

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2. OBJETIVOS

1.1 Objetivo General

Evaluar la eficiencia del uso de microorganismos para el tratamiento de aguas residuales

domsticas en una Planta de Tratamiento de Agua Residual.

1.2 Objetivos especficos

Clasificar la poblacin bacteriana mediante la tincin de Gram e identificar los tipos

de hongos por microscopa mediante la clave dicotmica en una muestra control de

lodos activados.

Establecer las condiciones necesarias para el desarrollo de los microorganismos con

el propsito de mejorar la eficiencia en el sistema de lodos activados de la PTARD.

Evaluar la eficiencia de los microorganismos en el proceso de remocin de carga

contaminante en el sistema de lodos activados de la PTARD.

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3. MARCO TERICO

3.1 AGUA RESIDUAL (AR)

El agua residual es aquella que ha sufrido una alteracin en sus caractersticas fsicas,

qumicas o biolgicas por la introduccin de contaminantes como residuos slidos

qumicos, municipales, industriales, agrcolas, etc., afectando as los ecosistemas acuticos

y su entorno (Metcalf., 2003).

3.2 AGUA RESIDUAL DOMSTICA (ARD)

Las aguas residuales domsticas, son aquellas provenientes de las viviendas y edificios

institucionales que contienen desechos humanos (tales como orina, excrementos y agua de

lavaplatos, lavamanos, cocinas etc.). Estas aguas tienen principalmente contenidos de

excrementos humanos y orina, los cuales estn constituidos por: Materia orgnica, slidos

suspendidos y Coliformes fecales. Por consiguiente es necesario realizar un adecuado

tratamiento de las mismas, mitigando los diferentes impactos que pueden llegar a tener para

el entorno.

Los principales parmetros que se miden al agua residual, para poder determinar el grado

de contaminacin de la misma son (Gmez, 2011):

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DBO: Demanda bioqumica de oxgeno

DQO: Demanda qumica de oxgeno

SST: Slidos suspendidos totales

3.3 TRATAMIENTO BIOLGICO DE AGUAS RESIDUALES

Los tratamientos biolgicos de aguas residuales se basan en la utilizacin de organismos

vivos (microorganismos), tales como bacterias, hongos e incluso macrfitos (plantas), los

cuales son capaces de eliminar numerosos tipos de contaminantes orgnicos presentes en

las aguas, ya que se utilizan como fuente de carbono y/o energa para su propio desarrollo.

(Archila, 2012)

En el nivel ms fundamental, el tratamiento biolgico comprende: la conversin de la

materia orgnica carboncea disuelta y en estado coloidal en diferentes gases y tejidos

celulares, la formacin de flocs biolgicos compuestos de materia celular y de los coloides

orgnicos presentes en las aguas residuales, y la subsecuente remocin de dichos flocs por

medio de sedimentacin por gravedad. Con el paso de los aos se ha encontrado que, con

anlisis adecuado y control ambiental, casi todas las aguas residuales se pueden tratar

biolgicamente. (Tchobanoglous, 2000)

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Existen los siguientes grupos principales de procesos biolgicos: aerobios, anxicos, y

combinados que comprenden anxicos con aerobios y anxicos con anaerobios. Dentro de

cada grupo podemos encontrar crecimiento biolgico suspendido, crecimiento biolgico

adherido o una combinacin de ellos.

En los procesos de tratamiento aerobio el tratamiento se efecta en presencia de oxgeno.

Los procesos anaerobios son aquellos en los cuales el tratamiento biolgico ocurre en

ausencia de oxgeno. En el proceso anxico se remueve nitrgeno, mediante conversin de

nitrato en nitrgeno gaseoso, en ausencia de oxgeno. (Tchobanoglous, 2000)

3.3.1 Tratamiento de aguas residuales aerobios

El proceso aerobio es un proceso de respiracin de oxgeno en el cual el oxgeno libre es el

nico aceptador final de electrones; el oxgeno es reducido y la materia orgnica o

inorgnica es oxidada. Todos los organismos que usan oxgeno libre como aceptor de

electrones son aerobios. En la Ilustracin 1 se muestra la reaccin del proceso aerobio.

(Romero, 2002)

23 Elizabeth Bejarano Mauricio Escobar


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DOMSTICAS EN UNA PLANTA DE TRATAMIENTO DE AGUA RESIDUAL 2015

Ilustracin 1. Reaccin proceso aerobio

Fuente: (Rojas R. , 2002)

El metabolismo microbiano en el proceso de respiracin aerobia se puede representar

grficamente como se muestra en la Ilustracin No. 2:

Ilustracin 2. Metabolismo microbiano en el proceso de respiracin aerobia

Fuente: (Rojas R. , 2002)

El proceso se ejecuta con el propsito de obtener la energa necesaria para la sntesis de

tejido celular nuevo. En ausencia de materia orgnica, el tejido celular ser respirado

endgenamente y convertido en productos gaseosos. (Rojas R. , 2002)

24 Elizabeth Bejarano Mauricio Escobar


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DOMSTICAS EN UNA PLANTA DE TRATAMIENTO DE AGUA RESIDUAL 2015

En definitiva, los tratamientos biolgicos que se fundamentan en el consumo de los

contaminantes del agua residual por medio de microorganismos eficientes (EM) como

bacterias, que necesitan oxgeno para poder consumir los desechos. Entre estos

tratamientos se encuentran: (Gmez, 2011)

Plantas de tratamiento de lodos activados

Zanjones de oxidacin

Lagunas de oxidacin

La PTARD objeto de estudio es una planta diseada de tipo aerobio con un sistema de

lodos activados.

3.3.2 Sistema de lodos activados

El sistema de lodos activado es un proceso de tratamiento por el cual el agua residual y el

lodo biolgico (microorganismos) son mezclados y aireados en un tanque denominado

reactor. Los flculos biolgicos formados en este proceso se sedimentan en un tanque de

sedimentacin, lugar del cual son recirculados nuevamente al tanque de aireacin o reactor

aerobio, como se visualiza en la Ilustracin 3.

25 Elizabeth Bejarano Mauricio Escobar


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Ilustracin 3. Tratamiento biolgico del agua residual

Fuente: Biologa de los microorganismos - Brock - 10ed

En el proceso de lodos activados los microorganismos son completamente mezclados con la

materia orgnica en el agua residual de manera que sta les sirve de sustrato alimenticio. Es

importante indicar que la mezcla o agitacin se efecta por medios mecnicos superficiales

o sopladores sumergidos, los cuales tiene doble funcin, primero, producir mezcla completa

y segundo, agregar oxgeno al medio para que el proceso se desarrolle. El proceso de

tratamiento tiene dos importantes caractersticas:

Eficiente remocin de materia orgnica.

Eficiente separacin de slidos

26 Elizabeth Bejarano Mauricio Escobar


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3.3.3 Uso de Microorganismos eficientes (EM) en el tratamiento de Agua

Residual Domstica

El uso de microorganismos eficientes para el tratamiento de aguas residuales ha sido

exitosamente utilizado en diversos estudios, ya que los microorganismos que contienen,

segregan cidos orgnicos, enzimas, antioxidantes y quelantes metlicos, los cuales crean

un ambiente antioxidante que ayuda al proceso de separacin slido/lquido, el cual es el

fundamento de la depuracin del agua. (Cardona, 2008). Dentro de los efectos de la

aplicacin de microorganismos eficientes para el tratamiento de aguas residuales estn, la

reduccin de olores ofensivos, el mejoramiento de la capacidad de digestin biolgica de

los lodos, mejora de la calidad del agua, la reutilizacin de lodos, entre otros. (Quiroga,

2008).

La limpieza y depuracin de las aguas residuales, implica operaciones unitarias como son la

sedimentacin y la filtracin, pero los procesos biolgicos y/o de lodos activados que se

llevan a cabo en el proceso de tratamiento son los de mayor importancia ya que son los

microorganismos los que realizan el proceso de depuracin. Un aspecto importante del

proceso de tratamiento de aguas mediante lodos activados, es la formacin de flculos

biolgicos en los lodos activados, los cuales contienen partculas orgnicas, inorgnicas y

bacterias. El tamao de las partculas vara entre 1 m y 100 m y las clulas vivas del

flculo representan entre el 5 y el 20% del total de bacterias. (Gemic, 2008)

27 Elizabeth Bejarano Mauricio Escobar


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DOMSTICAS EN UNA PLANTA DE TRATAMIENTO DE AGUA RESIDUAL 2015

3.3.4 Microorganismos presentes en el tratamiento de Aguas residuales mediante

el Sistema de lodos activados

Los microorganismos ms comunes presentes en los flculos de lodo activado son

bacterias, hongos, protozoos y rotferos. A continuacin se describen cada uno de ellos.

3.3.4.1 Bacterias

Las bacterias son eubacterias procariotas, tpicamente unicelulares (sin membrana celular).

Morfolgicamente son redondas (cocos), cilndricas (bacilos), curvadas (vibriones), en

espiral (espiroquetas) o filamentosas.

Las bacterias constituyen el grupo ms importante de microorganismos en el tratamiento de

aguas residuales, utilizan sustrato en solucin, son hetertrofas o auttrofas, aerobias,

anaerobias o facultativas. Un centmetro de agua residual puede tener miles de millones de

bacterias.

El crecimiento ptimo de bacterias ocurre generalmente a pH entre 6,5 y 7,5 y la mayora

no toleran pH mayor de 9,5 o inferior a 4,0.

La temperatura afecta en forma importante la actividad bacterial; en general se afirma que

la tasa de crecimiento bacterial se dobla para un incremento de 10C, hasta que se alcanza

la temperatura ptima.

28 Elizabeth Bejarano Mauricio Escobar


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Las bacterias son el principal constituyente del flculo biolgico ya que oxidan la materia

orgnica y producen polisacridos y otros polmeros extracelulares que facilitan la

floculacin. Los principales gneros son Zooglea (Ilustracin 4), Pseudomonas (Ilustracin

5), Flavobacterium, Alcaligenes, Bacillus (Ilustracin 6), Achromobacter,

Corynebacterium (Ilustracin 7), y Acinetobacter; tambin se pueden encontrar formas

filamentosas como Beggiatoa (Ilustracin 8). (GENMIC, 2008)

Ilustracin 4. Zooglea ramigera

Fuente: (Madigan, M. Martinko, & Parker, 2003)

Ilustracin 5. Pseudomonas

Fuente: (Madigan, M. Martinko, & Parker, 2003)

29 Elizabeth Bejarano Mauricio Escobar


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Ilustracin 6. Bacillus

Fuente: (Madigan, M. Martinko, & Parker, 2003)

Ilustracin 7. Corynebacterium

Fuente: (Madigan, M. Martinko, & Parker, 2003)

Ilustracin 8.Beggiatoa

Fuente: (Madigan, M. Martinko, & Parker, 2003)

30 Elizabeth Bejarano Mauricio Escobar


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Las bacterias representan una fraccin importante cuyo nmero vara inversamente

al tamao del flculo puesto que la difusin de O2 al interior se va viendo ms

dificultada. En la Ilustracin 9 se puede observar cmo en los flculos de gran

tamao el interior es anaerobio y permite el crecimiento de anaerobios estrictos

(tales como metangenos), los cuales han sobrevivido a fases de mayor aerobiosis

en pequeas bolsas anaerobias internas en flculos de menor tamao. (Gemic, 2008)

El nmero de bacterias en el sistema de lodos activados llega a 10-8 micrones y entre

ellas el grupo ms importante numricamente es el de Pseudomonas.

Ilustracin 9. Flculo de Lodos Activados

Fuente: Diversidad Microbiana y Taxonoma

En los lodos activados tambin se pueden encontrar bacterias auttrofas tales como

las nitrificantes (Nitrosomonas y Nitrobacter) e incluso algunas bacterias

fotosintticas, tal como se visualiza en la Ilustracin 10 y 11.

31 Elizabeth Bejarano Mauricio Escobar


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Ilustracin 10. Nitrobacter

Fuente: Diversidad Microbiana y Taxonoma

3.3.4.2 Hongos

Los hongos son eucariticos, aerobios, multicelulares, no fotosintticos y hetertrofos.

La mayora son saprfitos, pues obtienen su alimento de la materia orgnica muerta.

Junto con las bacterias son responsables principales de la descomposicin de la materia

orgnica y, a diferencia de las bacterias, pueden tolerar ambientes de humedad baja y

pH cido. Requieren aproximadamente la mitad del nitrgeno exigido por las bacterias

y son importantes en el tratamiento de residuos cidos y de concentracin de nitrgeno

baja. La mayora de hongos son aerobios, tienen un pH ptimo de crecimiento de 5,6

con un intervalo de 2 a 9.

Adems de bacterias las aguas residuales contienen numerosos hongos sobre todo las

aguas ricas en principios orgnicos como las aguas residuales. Las aguas residuales

domsticas contienen por regla general, muchas esporas e hifas de hongos. Las

32 Elizabeth Bejarano Mauricio Escobar


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especies Leptomituslacteus y Fusarium son hongos tpicos de estas aguas y se muestran

en las Ilustraciones 11 y 12 respectivamente.

Ilustracin 11. Leptomituslacteus

Fuente: (Universidad de Valencia)

Ilustracin 12. Fusarium

Fuente: (Tangarife, 2011) Fuente: (W. Koneman, 1985)

No obstante, los hongos no se encuentran con frecuencia en los flculos de lodos

activados, slo bajo condiciones ambientales muy especiales (bajo pH, deficiencia de

33 Elizabeth Bejarano Mauricio Escobar


EFICIENCIA DEL USO DE MICROORGANISMOS PARA EL TRATAMIENTO DE AGUAS RESIDUALES
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nitrgeno, presencia de productos txicos). Pueden aparecer ciertos hongos de los

gneros Penicillium (Ilustracin 13) y Cephalosporium, entre otros.

Ilustracin 13. Penicillium

Fuente: (Tangarife, 2011) Fuente: (W. Koneman, 1985)

Protozoos: Los protozoos son organismos unicelulares, en su mayora aerobios

heterotrficos que poseen un flagelo o cola generalmente utilizada para su

movilidad, su tamao oscila entre 10 micras y 4 milmetros pudiendo ser solitarios o

coloniales.

Estos pueden ser considerados como bioindicadores del estado del funcionamiento

de las plantas de tratamiento de agua residual, y constituyen una herramienta til

para el control de las mismas as como para la deteccin y prevencin de posibles

problemas operativos. Adicionalmente, los protozoos son los principales

consumidores de las poblaciones bacterianas en los sistemas acuticos e intervienen

en la formacin de flculos sedimentables. (Pabello, 2006)

34 Elizabeth Bejarano Mauricio Escobar


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La presencia de protozoos en sistemas de depuracin biolgica ayuda

significativamente a la mejora de la calidad de los efluentes, reduciendo la DBO, la

turbidez del medio y la cantidad de bacterias. Entre los protozoos ms comunes de

encontrar en aguas residuales se encuentran los ciliados, flagelados y rizpodos.

Ciliados: Los ciliados son microorganismos de estructura compleja (Fig. 12), y de

entre los protozoos son de los ms grandes, llegando a medir 4 mm de longitud.

Son de gran importancia en los sistemas de tratamiento de agua residual, ya que

contribuyen de manera directa a la clarificacin de los efluentes a travs de la

floculacin y la depredacin, siendo esta ltima la ms importante; ya que al

alimentarse de bacterias patgenas contribuyen a la disminucin de las mismas.

(Pabello, 2006)

Ilustracin 14. Aspidisca Cicada

Fuente: (Luna Pabello, 2006)

Es posible clasificar a los ciliados presentes en los sistemas de tratamiento por la

forma en que se encuentran asociados al flculo biolgico de la siguiente manera:

35 Elizabeth Bejarano Mauricio Escobar


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Ciliados asociados al flculo: Aqu se encuentran dos grupos de ciliados, los

reptantes y los pedunculados; los primeros utilizan estructuras como cirros o cilios

para su movimiento sobre el flculo en donde se alimentan de las bacterias que se

encuentran en la superficie del mismo. Los segundos presentan una estructura de

fijacin, el pednculo, que los mantiene unidos al flculo, entre estos se encuentran

a los suctoriosque se alimentan de otros protozoos y a los peritricos que se

alimentan de bacterias libres en el medio.

Ciliados no asociados al flculo: Son los ciliados libres nadadores, que se

encuentran en el lodo activado por lo que cuando estos se purgan se pierden, siendo

organismos colonizadores de los sistemas de tratamiento de agua.

Rotferos: Son metazoos de tamao entre 100 y 500 m. Son organismos que se

unen al flculo y desarrollan dos importantes funciones en l: (a) eliminan las

bacterias libres que no se han agregado al flculo, y (b) contribuyen a la formacin

del flculo mediante la produccin de materia fecal rodeada de capas de mucus.

36 Elizabeth Bejarano Mauricio Escobar


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Ilustracin 15. Rotfero

Fuente: (Pabello, 2006)

3.3 PLANTA DE TRATAMIENTO DE AGUA RESIDUAL (PTAR)

Las plantas de tratamiento de agua residual (PTAR), son un conjunto de obras de

infraestructura, diseados hidrulica y sanitariamente para poder remover o quitar la carga

contaminante de las aguas residuales que provienen de una comunidad o institucin

determinada. Estas son de gran importancia ya que minimizan diversos problemas causados

por el mal manejo de las aguas residuales que en consecuencia afectan el entorno. (Gmez,

2011)

Las plantas de tratamiento de agua residual, minimizan los problemas causados por el

manejo de las aguas residuales afectando condiciones de vida en todo el entorno, entre estas

se pueden destacar:

37 Elizabeth Bejarano Mauricio Escobar


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Salud: La PTAR limpia el agua residual de los contaminantes en ms de un 80%,

evitando as la proliferacin de enfermedades transmitidas por virus y bacterias que

se encuentran en este tipo de aguas. (Gmez, 2004)

Econmicos: Al evitar que se desvalorice el sitito y los terrenos aledaos por

vertimientos del agua residual cruda (sin ningn tratamiento), por otro lado, los

lodos se pueden aprovechar como abono. (Gmez, 2004)

Ecolgicos Ambientales: Eliminar el agua residual sin ningn tratamiento ocasiona

contaminacin del suelo, el aire y el agua afectando el ecosistema inmediatamente

alrededor de nuestro ambiente cotidiano. Estos vertimientos afectan principalmente

a las fuentes naturales de agua como ros, arroyos, caos y reservorios, generando

cada vez menos posibilidad del disfrute de este recurso el cual abunda en nuestro

pas. (Gmez, 2004)

Estticos: El impacto visual, olfativo generado sobre los paisajes naturales impiden

el disfrute de la naturaleza que existe a nuestro alrededor afectando de forma la

valorizacin social, y econmica los sectores donde se localizan estos vertimientos.

(Gmez, 2004)

Por todas las anteriores razones es de gran importancia un buen funcionamiento en la

PTAR, ya que soluciona problemticas del entorno.

38 Elizabeth Bejarano Mauricio Escobar


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3.3.4 Planta de tratamiento de agua residual tipo REDFOX

Las plantas de tratamiento de agua residual tipo RED FOX, las cuales toman este nombre

debido a que son un tipo de planta compacta fabricada por la compaa Red Fox

Environmental Services, Inc. Es sin lugar a duda un sistema de lodos activados en la

modalidad de aireacin extendida para el tratamiento de aguas residuales domsticas, en

donde los microorganismos son capaces de remover la materia orgnica presente en el

agua, favoreciendo el uso de reactores que provean de las condiciones necesarias para la

biodegradacin

As mismo en el sistema lo primordial ser remover la DBO soluble, mediante procesos

biolgicos, en donde se efectan las mismas reacciones que ocurrirn en una corriente de

agua residual pero de manera acelerada para facilitar la descomposicin de los

contaminantes orgnicos proporcionando condiciones ambientales apropiadas (temperatura,

pH), adecuado tiempo de contacto (materia orgnica y microorganismos), buen suministro

de oxgeno.

La degradacin biolgica de la materia orgnica en las plantas con reactores aerobios

produce:

Gran parte de la materia orgnica se convierte en energa, CO2, H2O y NH4 (27%).

El 63% pertenece a los lodos digeridos (bacterias que deben ser eliminadas del

reactor Aerobio para que no haya deficiencia de alimento y se disminuya la

39 Elizabeth Bejarano Mauricio Escobar


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efectividad del tratamiento y elementos inertes que no pudieron ser degradados o

ingeridos por las bacterias).

El 10% de materia orgnica permanece remanente en el agua efluente. (Gmez,

2011)

3.3.5 PTARD Objeto de estudio

La planta de tratamiento de agua residual domstica objeto de estudio es una planta de 0.5

LPS tipo REDFOX, y se encuentra ubicada al Norte de la ciudad de Bogot. La siguiente

figura muestra la ubicacin espacial de la misma.

Ilustracin 16. Mapa de la ubicacin PTARD

Fuente: Google maps

40 Elizabeth Bejarano Mauricio Escobar


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3.3.6 Estructuras que componen la PTARD objeto de estudio

La PTARD es una planta de tipo modular, que contiene un sistema de funcionamiento

automtico, para la inyeccin de los qumicos y el sistema de aireacin en operacin

normal, garantizando el tratamiento adecuado para que el agua obtenida cumpla con las

especificaciones de las Normas y Decretos nacionales exigidos por las Autoridades

competentes.

A su vez cuenta con un sistema de lodos activados de tipo Aerobio. Este tipo de sistemas

de tipo aerobio, corresponde a tratamientos biolgicos que se fundamentan en el consumo

de los contaminantes del agua residual por medio de bacterias que necesitan oxgeno para

poder consumir los desechos (Gmez, 2011).

A continuacin se describen cada una de las estructuras hidrulicas que componen el

Sistema de tratamiento de agua residual de la PTARD REDFOX de 0.5 LPS.

3.3.6.2 Pretratamiento

Cribado: Canal de dos rejillas con barras separadas 1 cm (Foto 1 numeral 1) para desbaste,

con el fin de retener material como plstico o vidrio que llegue en el agua residual y pueda

en dado caso obstruir las bombas de alimentacin.

41 Elizabeth Bejarano Mauricio Escobar


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Ilustracin 17. Rejillas de cribado

Fuente: Autores 2015

Trampa de grasas: Esta estructura retiene grasas y aceites del agua al flotarlas en su parte

superior, su limpieza se debe hacer manual. En la foto 2 se puede evidenciar la grasa que

por tener una menor densidad que la del agua queda suspendida en la parte superior.

Ilustracin 18. Trampa de grasas

Fuente: Autores, 2015

42 Elizabeth Bejarano Mauricio Escobar


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3.3.6.3 Equipos de impulsin de aguas negras

Equipo de bombeo Tanque de bombeo inicial y tanque homogenizador: Este equipo

consta bsicamente de una Bomba sumergible de aguas negras con su backup, y su funcin

principal es elevar el agua al tratamiento inicial. Esta bomba se controla desde un tablero

de control de nivel (Ver Ilustracin 19).

Ilustracin 19. Bombas Tanque de Bombeo (Homogenizador)

Fuente: Autores 2015

1 y 2. Bombas de succin de 3 de marca IHM, modelo MS12 1TW. La potencia es

de 1 hp.

3.3.6.4 Mdulo sistema de tratamiento de tipo aerobio

En este mdulo de tratamiento, el agua residual llega hasta el reactor. En el reactor el agua

cruda se mezcla completamente con el licor bacterial en el tanque de aireacin (Ilustracin

20 Numeral 1). Despus del tanque de aireacin, ste pasa al sedimentador de tasa alta

43 Elizabeth Bejarano Mauricio Escobar


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(Ilustracin 20 Numeral 2) y posteriormente al compartimiento de agua clarificada donde es

bombeado a la batera de filtracin. Los lodos que se han sedimentado en el sedimentador

secundario, son retornados al tanque de aireacin para mantener as una concentracin de

SSV en el licor mezclado garantizando la eficiencia del tratamiento biolgico. El mdulo

est construido en lmina de acero al carbn A36 grado C. (Gmez, 2011)

Ilustracin 20. Mdulo de Tratamiento por Lodos activados

Fuente: Autores 2015

1. Cmara de aireacin
2. Cmara de sedimentacin

3.3.6.5 Reactor Aerobio

Esta estructura est construida en lmina de Acero al carbn A36 Grado C, tiene como

objetivo la eliminacin de la carga orgnica por medio de bacterias que trabajan en

presencia de oxgeno. El agua residual llega a este reactor, es aireada por un sistema de

difusores con membrana microporosa que inyecta aire a presin a travs del compresor

44 Elizabeth Bejarano Mauricio Escobar


EFICIENCIA DEL USO DE MICROORGANISMOS PARA EL TRATAMIENTO DE AGUAS RESIDUALES
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rotodinmico y mantienen la mezcla de agua dentro del reactor agitado, proporcionando a

las bacterias el oxgeno necesario para degradar la materia orgnica. Finalmente, el agua

tratada es evacuada por dos salidas ubicadas en la parte superior del mismo y va hacia la

cmara de sedimentacin. (Gmez, 2004)

El reactor aerobio, tiene como objetivo principal la eliminacin de la carga orgnica por

medio de colonias de bacterias aerobias, ya que trabajan en presencia del oxgeno. El agua

residual llega al reactor, y es aireado por un sistema de difusores con membrana

microporosa que inyecta aire a presin a travs del compresor rotodinmico y asimismo

mantiene la mezcla de agua dentro del reactor agitado, proporcionando as a las bacterias el

oxgeno que necesitan para que puedan as realizar la degradacin de la materia orgnica.

Sedimentador secundario

Esta estructura es un sedimentador donde se decantan los flocs biolgicos que han salido

del reactor. Para el proceso de limpieza o drenaje de estas estructuras est instalada una

vlvula. Estas vlvulas deben ser abiertos o cerradas por el operador para drenar los lodos

a los lechos de secado (Gmez, 2004).

Soplador de aire

Soplador rotativo Elmo Rietsschle modelo 2BH7500AH268 con motor trifsico de 3.42

Hp, programado para trabajar de forma automtica controlado por el tablero que comanda

toda la planta. ste suministra aire por una red de tubera galvanizada y PVC de 2 y

finalmente por difusores de disco de burbuja fina de 12. El sistema est dotado con filtro

manmetro y vlvula de alivio de aire (Gmez, 2011).

45 Elizabeth Bejarano Mauricio Escobar


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DOMSTICAS EN UNA PLANTA DE TRATAMIENTO DE AGUA RESIDUAL 2015

Equipo de recirculacin de Lodos

El proceso de recirculacin de lodos es de suma importancia, ya que mantiene la

concentracin de SSV en el licor de mezcla y garantizar la remocin de la carga orgnica

en los porcentajes adecuado para obtener un agua clarificada de excelentes condiciones

fisicoqumicas.

La recirculacin de lodos se hace a travs de un Sistema Airlif que utiliza aire del soplador

para hacer el trasiego de los lodos (Ilustracin 21). Nota: Las derivaciones de aire tienen

que estar abierta mnimo en un 30% y se pueden regular para permitir ms o menos paso de

lodos a la cmara de aireacin.

Ilustracin 21. Equipo de recirculacin de Lodos

Fuente: Autores 2015

1. Recirculacin de lodos
2. Desnatador
3. Derivaciones de aire por airlif

46 Elizabeth Bejarano Mauricio Escobar


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4 MARCO NORMATIVO

En la siguiente tabla No. 1 se presenta la normativa nacional vigente:

Tabla 1. Normatividad del presente estudio

NORMA AUTORIDAD DESCRIPCIN


COMPETENTE
Congreso de la Mediante la cual se prev a la conservacin de agua y se dictan
Ley 79 Repblica otras disposiciones.

Mediante la cual se crea el Ministerio del Medio Ambiente, se


reordena el Sector Pblico encargado de la gestin y conservacin
Congreso de la del medio ambiente y los recursos naturales renovables, se
Ley 99 republica organiza el Sistema Nacional Ambiental, SINA, y se dictan otras
disposiciones. La explotacin de los recursos naturales deber
hacerse sin desmedro de la integridad cultural, social y econmica
de las comunidades indgenas.

Ministerio de Por el cual se dicta el Cdigo Nacional de Recursos Naturales


Decreto 2811 Ambiente y Renovables y de Proteccin al medio ambiente.
desarrollo
sostenible

Mediante este decreto, el Presidente de la Repblica en ejercicio


Ministerio de de las facultades que le confiere el artculo 120, ordinal 3, de la
Ambiente y Constitucin Nacional, decreta que los propietarios de predios
Decreto 1449
desarrollo rurales han cumplido en lo esencial con las normas establecidas
sostenible sobre la conservacin de los recursos naturales renovables, cuando
en relacin con ellos se hayan observado las disposiciones
previstas el presente Decreto.

Ministerio de El Presidente de la Repblica en ejercicio de sus facultades


Decreto 1541 Ambiente y constitucionales, en especial de las que le confiere el orinal 3 del
desarrollo artculo 120 de la Constitucin Nacional decreta que tiene como
sostenible finalidad reglamentar las normas relacionadas con el recurso de
aguas en todos sus estados.
Reglamenta los usos del agua y el manejo de los residuos lquidos,
Ministerio de quienes recolecten, transporten y dispongan de residuos lquidos,
Decreto 1594 Ambiente y tendrn que seguir los lineamientos establecidos en las normas
desarrollo referentes al vertimiento, y adems obtener el permiso
sostenible correspondiente expedido por la autoridad competente.

47 Elizabeth Bejarano Mauricio Escobar


EFICIENCIA DEL USO DE MICROORGANISMOS PARA EL TRATAMIENTO DE AGUAS RESIDUALES
DOMSTICAS EN UNA PLANTA DE TRATAMIENTO DE AGUA RESIDUAL 2015

NORMA AUTORIDAD DESCRIPCIN


COMPETENTE

Ministerio de Esta norma habla de la necesidad de regular los vertimientos que


Ambiente y se realicen sobre aguas superficiales, marinas, a los sistemas de
Decreto 3930
desarrollo alcantarillado pblico y al suelo. Para lo cual este decreto busca
sostenible establecer la nueva norma de vertimientos la cual ha sido
modificada por el decreto 4728 de 2010.
En ejercicio de las atribuciones constitucionales y legales, en
Ministerio de especial las que le confiere el numeral 11 del artculo 189 de la
Ambiente y Constitucin Poltica y en desarrollo de lo dispuesto en el artculo
desarrollo 42 de la Ley 99 de 1993, mediante el cual se reglamentan las tasas
Decreto 3440
sostenible retributivas por la utilizacin directa del agua como receptor de
los vertimientos puntuales y se toman otras determinaciones.

Reglamento Tcnico para el sector de agua potable y saneamiento


Resolucin 1096
2000 ttulo E bsico. Parmetros de diseo para unidades de tratamiento de
agua potable.

Por la cual se establece la norma tcnica, para el control y manejo


de los vertimientos realizados al recurso hdrico del Distrito
Resolucin 3956
Capital.

Por la cual se establece la norma tcnica para el control y manejo


de los vertimientos realizados a la red de alcantarillado pblico en
Resolucin 3957 el Distrito capital.

Fuente: Autores, 2015

48 Elizabeth Bejarano Mauricio Escobar


EFICIENCIA DEL USO DE MICROORGANISMOS PARA EL TRATAMIENTO DE AGUAS RESIDUALES
DOMSTICAS EN UNA PLANTA DE TRATAMIENTO DE AGUA RESIDUAL 2015

5 METODOLOGA

Para llevar a cabo el estudio de la eficiencia del uso de microorganismos en el proceso de

lodos activados en una PTAR, se realiz una investigacin descriptiva - cualitativa, con

el fin de identificar y caracterizar los microorganismos presentes en la muestra de lodos

activados que fue tomada de una PTARD de eficiencias altas (Fase diagnstica).

Seguidamente el proyecto se basa en un estudio de caso ya que se analiz la problemtica a

la cual se enfrenta la poblacin de un sector del norte en la Sabana de Bogot, relacionado

con sus aguas residuales domsticas; para ello se establecieron las condiciones necesarias

para el desarrollo de los microorganismos en la PTAR (Fase de Ejecucin). Posteriormente

se llev a cabo un seguimiento y evaluacin de la eficiencia de los microorganismos en la

remocin de carga contaminante en el sistema de lodos activados de la planta (Fase de

seguimiento y evaluacin).

Ilustracin 22. Metodologa Propuesta

FASE 1. FASE FASE 2. FASE


DIAGNSTICA DE EJECUCIN

FASE 3. FASE DE
SEGUIMIENTO Y
EVALUACIN

Fuente: Autores 2015

49 Elizabeth Bejarano Mauricio Escobar


EFICIENCIA DEL USO DE MICROORGANISMOS PARA EL TRATAMIENTO DE AGUAS RESIDUALES
DOMSTICAS EN UNA PLANTA DE TRATAMIENTO DE AGUA RESIDUAL 2015

Fue necesario un reconocimiento del estado inicial de la PTARD ubicada al norte de la

ciudad, a fin de determinar las condiciones en las que se encontraba en general la planta de

tratamiento. Sin embargo, se tiene en cuenta que principalmente se realiz la identificacin

del estado en el que se encontraba el Reactor aerobio ya que es la estructura objeto de

estudio.

La siguiente tabla No. 2 muestra las actividades realizadas en las tres visitas que se

realizaron previas al inicio del desarrollo de la metodologa.

Tabla 2. Visitas previas al desarrollo de las fases que hacen parte de la metodologa
del estudio
Visita Actividades desarrolladas Fotografa

1 Reconocimiento visual del estado y


funcionamiento de la PTARD.
18/10/2014
Identificacin de los diferentes
componentes fsicos del sistema de
la PTARD.

Cribado
Trampa grasas
Equipo de bombeo tanque
de bombeo inicial y tanque
homogeneizador
Reactor aerobio
Sedimentador secundario
Soplador de aire
Equipo de recirculacin de
lodos
Equipo de filtracin
Desinfeccin
Tratamiento de lodos

50 Elizabeth Bejarano Mauricio Escobar


EFICIENCIA DEL USO DE MICROORGANISMOS PARA EL TRATAMIENTO DE AGUAS RESIDUALES
DOMSTICAS EN UNA PLANTA DE TRATAMIENTO DE AGUA RESIDUAL 2015

2 Revisin detallada del mdulo


sistema de tratamiento que
25/10/2014 comprende las siguientes
estructuras:

Reactor aerobio
Sedimentador secundario
Soplador de aire
Equipo de recirculacin de
lodos

3 En la tercera visita se realiz el


Dimensionamiento del reactor
01/11/2014 aerobio y sus componentes.

La medicin se realiz con cinta


mtrica y posteriormente se
realizaron los planos respectivos del
reactor correspondientes a vista de
perfil y vista de la PTARD (Ver
Anexo 1).

Fuente: Los autores

5.3 Descripcin metodolgica

Fase I diagnstico: La tabla No. 3 describe la metodologa desarrollada en la Fase I

que corresponde a la fase Diagnstico, en cumplimiento al objetivo: Clasificar la

poblacin bacteriana mediante la tincin de Gram e identificar los tipos de hongos

51 Elizabeth Bejarano Mauricio Escobar


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DOMSTICAS EN UNA PLANTA DE TRATAMIENTO DE AGUA RESIDUAL 2015

por microscopa mediante la clave dicotmica en una muestra control de lodos

activados.

Tabla 3. Descripcin de la Fase I Diagnstico (Clasificar la poblacin bacteriana mediante la tincin de


Gram e identificar los tipos de hongos por microscopa mediante la clave dicotmica en una muestra
control de lodos activados)

Inoculacin del Reactor Aerobio

La inoculacin se realiz alimentando el


reactor por cochadas, evitanto as un bombeo
continuo que arrastrara el lodo hasta la
cmara de sedimentacin.

El reactor fue inoculado dos veces con un


volumen de 100 L de lodos concentrados.
Los 200 L con los que se inocul el Reactor,
corresponden al 30% del volumen del
reactor.

Los lodos con los que se inocul el reactor


son provenientes de la Planta de tratamiento
de agua residual domstica de Siemens que
se encuentra ubicada en la Autopista
Medelln Km 8 Vereda Punta Tenjo.

Los lodos fueron tomados de esa planta, ya


que en ella se tienen eficiencias de remocin
de materia orgnica superiores al 85%,
garantizando as que los microorganismos
inoculados son (EM) y potencialmente
degradadores de la materia orgnica.

52 Elizabeth Bejarano Mauricio Escobar


EFICIENCIA DEL USO DE MICROORGANISMOS PARA EL TRATAMIENTO DE AGUAS RESIDUALES
DOMSTICAS EN UNA PLANTA DE TRATAMIENTO DE AGUA RESIDUAL 2015

Muestra control

A parte del volumen de lodos que fue


inoculado en el reactor, se tom una muestra
de 1.000 ml.

La muestra fue llevada al laboratorio de


microbiologa de la Universidad de La Salle
en una botella de plstico a fin de ser
analizada.

Clasificacin bacteriana

La Clasificacin bacteriana que se le realiz


a la muestra control, se desarroll mediante
la tincin de Gram y se describe paso a paso
a continuacin.

1. Preparacin de las lminas: Se prepar


el extendido de la muestra sobre la
lmina portaobjeto y se fij,
posteriormente se aadi a l los
colorantes y observ la muestra teida
bajo el microscopio de luz.

2. Preparacin del extendido:

Se colocaron las lminas extendidas y


fijadas en una bandeja adecuada y se
cubri su superficie con cristal violeta
por un minuto. Pasado el minuto se lav
con agua destilada y se puso a escurrir.
Despus se Cubri la superficie de la
lmina con la solucin de lugol por un
minuto. Posteriormente se lav con
agua destilada y se puso a escurrir.
Se colocaron cada una de las lminas en
posicin inclinada y decoloradas con
alcohol a 95 hasta que el color libre deje
de salir (aproximadamente 10-20
segundos). Se lav con agua destilada y
se dej escurrir. (Es el paso ms
importante de la coloracin ya que una
excesiva adicin de alcohol permite la
salida del colorante primario de las
clulas Gram positivas).

53 Elizabeth Bejarano Mauricio Escobar


EFICIENCIA DEL USO DE MICROORGANISMOS PARA EL TRATAMIENTO DE AGUAS RESIDUALES
DOMSTICAS EN UNA PLANTA DE TRATAMIENTO DE AGUA RESIDUAL 2015

Se cubrieron las lminas con safranina


por 30 segundos. Posteriormente se lav
con agua destilada y se puso a escurrir.
Por ltimo se secaron las lminas
utilizando papel absorbente.

3. Observacin en el microscopio:

Se coloc una gota de aceite de


inmersin sobre las lminas teidas y
secas y se examinaron bajo el Fuente: Autores
microscopio de luz, utilizando el
objetivo de inmersin. (90x-100x).
Se observaron varios campos hasta
encontrar aquel donde las clulas
estaban adecuadamente separadas, lo
cual permite la visualizacin de la
morfologa, arreglo de las clulas,
presencia de endosporas y su reaccin al
Gram.

Identificacin de la Tipologa de Hongos

La metodologa previa para la identificacin


mediante clave dicotmica se describe en el
Anexo 2, que corresponde a la preparacin
del medio y a la siembra de los hongos de la
muestra de lodos activados.

La identificacin del gnero y especie de los


hongos que se encuentran en la muestra
control, se realiz mediante microscopa con
clave dicotmica (Ver Anexo 3).

54 Elizabeth Bejarano Mauricio Escobar


EFICIENCIA DEL USO DE MICROORGANISMOS PARA EL TRATAMIENTO DE AGUAS RESIDUALES
DOMSTICAS EN UNA PLANTA DE TRATAMIENTO DE AGUA RESIDUAL 2015

Fuente: Autores 2015

II Fase de Ejecucin

En esta fase se establecieron las condiciones necesarias para el desarrollo de los

microorganismos eficientes (EM) que se inocularon en el bioreactor de la planta de

tratamiento de agua residual domstica-PTARD ubicada al norte de la ciudad. Lo anterior

se llev a cabo a travs del monitoreo de parmetros fisicoqumicos como: Demanda

bioqumica de oxgeno (DBO5), demanda qumica de oxgeno (DQO), oxgeno disuelto

(OD), slidos en suspensin (SS) y Solidos sedimentables (SSed).

La tabla No. 4 describe paso a paso la metodologa utilizada para el desarrollo de este

objetivo.

55 Elizabeth Bejarano Mauricio Escobar


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DOMSTICAS EN UNA PLANTA DE TRATAMIENTO DE AGUA RESIDUAL 2015

Tabla 4. Descripcin de la Fase II Ejecucin (Determinacin de las condiciones


necesarias para los microorganismos)
Fases Descripcin Evidencia Fotogrfica

Monitoreo de parmetros fisicoqumicos


indicadores de carga contaminante

Se llev a cabo el monitoreo de los parmetros


indicadores de carga contaminante tales como
DQO (Demanda Qumica de Oxgeno), DBO5
(Demanda Biolgica de Oxgeno), SS (Slidos
Suspendidos) y SSed (Slidos Sedimentables)
en el sistema de lodos activados.

EL monitoreo se realiz durante 12 semanas a


fin de determinar la eficiencia de los
microorganismos que fueron inoculados en el
reactor aerobio.

Monitoreo de factores ambientales


operativos

Se monitorearon In-situ los parmetros


fisicoqumicos como: temperatura, pH,
Conductividad y Nutrientes durante 12 semanas
a partir de la inoculacin de los
microorganismos en el reactor.

En cuanto a los nutrientes, se monitorearon ex-


situ en el laboratorio los siguientes: Nitratos,
Nitritos, Amonio y Fosfatos.

Cabe resaltar que los parmetros fisicoqumicos


se encontraron dentro del rango permisible
segn los lmites establecidos en el Decreto
1594 de 1984 y se mantuvieron constantes sin
necesidad de realizar alguna variacin en los
mismos.

56 Elizabeth Bejarano Mauricio Escobar


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Fase III Evaluacin y seguimiento

Para verificar la eficiencia del sistema de tratamiento analizado se extrajeron muestras

puntuales de agua en la entrada y en la salida del sistema. Es de inters la caracterizacin

tanto del agua de entrada como de la salida del sistema con respecto a los parmetros:

demanda bioqumica de oxgeno (DBO), demanda qumica de oxgeno (DQO), oxgeno

disuelto (OD), temperatura, grasas y aceites, pH, conductividad elctrica, slidos en

suspensin y caudal.

Tabla 5. Descripcin de la Fase III Seguimiento y Evaluacin (Pruebas fisicoqumicas


de control y seguimiento)
Fases Descripcin Evidencia Fotogrfica

Fundamento

En esta fase se realizaron pruebas


fisicoqumicas de control y seguimiento
al agua residual, a fin de determinar las
condiciones iniciales y cargas
contaminantes que contiene el agua
residual, as mismo, se monitorearn sus
condiciones iniciales y finales durante la
implementacin de los microorganismos
en el reactor de lodos activados.

El monitoreo de estas pruebas se realiz


semana a semana durante 12 semanas.

57 Elizabeth Bejarano Mauricio Escobar


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Fases Descripcin Evidencia Fotogrfica

Seguimiento y evaluacin
Se realizaron muestreos a la entrada y a
la salida del sistema de tratamiento
despus del sedimentador con el
propsito de evaluar la remocin de la
carga contaminante y por consiguiente la
eficiencia de los microorganismos en el
tratamiento de lodos activados.
Para lo anterior se realiz la medicin de
los siguientes parmetros: pH,
conductividad, DQO, DBO5 SS, SSed
OD, temperatura, nitrgeno amoniacal y
fosfatos.

Fuente: Autores 2015

6 RESULTADOS Y DISCUSIN

6.3 Identificacin del estado inicial de la PTARD

Se realiz un reconocimiento inicial de la PTARD, y de cada una de las unidades y

elementos que la componen. Se encontr que la PTARD en general presenta varios

problemas que impiden su correcto funcionamiento; los problemas identificados fueron los

siguientes:

58 Elizabeth Bejarano Mauricio Escobar


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Inadecuado mantenimiento por parte de los operarios (revisin de bombas, mala

operacin de vlvulas, no hay monitoreo de la calidad del producto del sistema,

pintura).

Carencia de implementacin de microorganismos eficientes que contribuyan a que

el proceso de lodos activados se lleve de manera correcta.

Se evidencia que las condiciones del agua al final de los procesos, poseen casi las

mismas caractersticas fisicoqumicas que al inicio del tratamiento, lo cual conlleva

a problemas en el entorno.

En las siguientes fotos se evidencian las problemticas nombradas anteriormente.

Ilustracin 23. Diagnstico inicial de la PTARD

Fuente: Autores 2015


Ilustracin 24. Condicin inicial del Reactor Aerobio

59 Elizabeth Bejarano Mauricio Escobar


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Fuente: Autores 2015

6.2 Dimensionamiento del Reactor Aerobio

EL dimensionamiento del reactor aerobio permiti la realizacin de dos planos, uno que

corresponde a vista de perfil (Ilustracin 24) y otro que corresponde a la vista en planta

(Ilustracin 25). Los planos realizados se muestran a continuacin:

Ilustracin 25. Vista de planta del Reactor Aerobio y sus partes

Fuente: Autores 2015

60 Elizabeth Bejarano Mauricio Escobar


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En la foto No. 6 podemos identificar cada una de las partes que componen el Modulo

Sistema de tratamiento. A su vez, se pueden observar las dimensiones de cada una de las

estructuras que componen el reactor aerobio: Soplador de aire, sedimentador secundario,

tanque de equilibrio.

Ilustracin 26. Vista de perfil del Reactor Aerobio y sus partes

Fuente: Autores 2015

6.4 FASE DIAGNSTICA

En esta fase se realiz la clasificacin de la poblacin bacteriana, y la identificacin de

hongos por microscopa mediante clave dicotmica.

61 Elizabeth Bejarano Mauricio Escobar


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6.2.1 Clasificacin de bacterias

La tincin de Gram permiti identificar la morfologa celular, el tamao, la forma y la

clasificacin taxonmica (Gram positivo o Gram negativo) de acuerdo al color que toman

las bacterias despus de la tincin; la tincin de Gram es una tincin bsica de clasificacin

de las bacterias, no permite llegar hasta gnero y especie de las bacterias.

Para la identificacin de la especie y gnero de las bacterias, era necesario realizar un

ensayo Vitek el cual consiste en un sistema automatizado de identificacin bacteriana y

estudio de sensibilidad antimicrobiana. La identificacin de las bacterias se basa en la

inoculacin de una suspensin de microorganismos en tarjetas con determinados paneles de

reacciones bioqumicas. Cabe aclarar que no fue posible la utilizacin del ensayo Vitek

debido a la falta de disponibilidad de tarjetas Vitek.

En la tabla 6 se muestran los resultados obtenidos despus de haber realizado la Tincin de

Gram a la muestra de lodos activados inoculados en la PTARD. Se realizaron tinciones

da de por medio con el fin de determinar las clases de bacterias que se pueden encontrar en

las muestras.

62 Elizabeth Bejarano Mauricio Escobar


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Tabla 6. Seguimiento realizado mediante Tincin de Gram para la clasificacin


bacteriana de la muestra control

Da Resultados Descripcin

1 En la Fotografa 1 se observan bacterias


encontradas el primer da que se realiz la
tincin de Gram con la muestra tomada de
los lodos activados de la PTARD de alta
eficiencia.

Las bacterias observadas son bacterias que


se clasifican como Gram positivas, su
presencia se evidencia ya que se tien de
color violeta.

En cuanto a la morfologa de las bacteria


que se observan en la fotografa 1, se
evidencia que las bacterias presentan una
forma cilndrica con bordes redondeados,
Fuente: Autores 2015 pertenecientes a bacterias de tipo bacilo.

3 Para el da 3 se evidencian bacterias no


solo de morfologa de bacilos sino
tambin del tipo cocos, las cuales
representan un amplio gnero de bacterias.

A su vez se puede ver en la fotografa que


se evidencia la presencia de levaduras.

Fuente: Autores 2015

63 Elizabeth Bejarano Mauricio Escobar


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DOMSTICAS EN UNA PLANTA DE TRATAMIENTO DE AGUA RESIDUAL 2015

Da Resultados Descripcin

En esta fotografa se puede observar que


5 en el da 5, se evidencian bacterias que
segn su morfologa son de los tipos
bacilos y cocos; su vez se evidencia la
presencia de hongos levaduriformes.

Por lo anterior, se puede videnciar que los


microorganismos presentes en la muestra
son un consorcio y que no solo se pueden
encontrar en ellos bacterias, si no tambin
se puede evidenciar la presencia de
Fuente: Autores 2015 hongos.

En el da 7 se pueden evidenciar bacterias


7 Gam negativas ya que se ven teidas de
color rosado tenue. Esta caracterstica
est ntimamente ligada a la
estructura didrmica dada por
la envoltura celular, pues presenta doble
membrana celular (una externa y la otra
citoplasmtica), lo que refleja un tipo
natural de organizacin bacteriana

A su vez se ve la presencia de algas lo cual


nos permite inferir que el medio es ptimo
para el crecimiento de microorganismos
Fuente: Autores 2015 diferentes a los hongos y las bacterias.

64 Elizabeth Bejarano Mauricio Escobar


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Las bacterias Gram positivas, presentan este color ya que la envoltura celular de las

bacterias cubren la membrana citoplasmtica y una pared celular compuesta por una gruesa

capa de peptidoglicano que rodea la anterior. La pared celular se une a la membrana

citoplasmtica mediante molculas de cido lipoteicoico. (Martinez, 2013)

La capa de peptidoglicano le proporciona una gran resistencia a estas bacterias y es la

responsable de retener el tinte durante la tincin de Gram

al poseer una gran proporcin de este polmero complejo (murena) la cual no la hace

susceptible a la accin del solvente orgnico, sino que este

acta deshidratando los poros cerrndolos, lo que impide que pueda escaparse el complejo

cristal violeta/yodo, y manteniendo la coloracin azul-violcea.

Ilustracin 27. Bacterias Gram positivas de la muestra de lodos activados observadas al


microscopio

65 Elizabeth Bejarano Mauricio Escobar


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Fuente: Autores 2015

6.5 Morfologa de las bacterias

En la Ilustracin 27 se pueden observar que en cuanto a la morfologa de las bacterias se

observan bacilos de bordes redondeados. Los bacilos tienen forma cilndrica o de bastn, y

pueden ser cortos o largos, a su vez pueden estar aislados en cadenas o en filamentos. A su

vez podemos evidenciar que se encuentran aglomerados en forma de cadena, adems se

observan algunos ms largos que otros.

Ilustracin 28. Bacterias Gram positivas encontradas en la muestra de lodos activados

Bacilos de bordes redondeados


dispuesto en cadenas.

Levaduras

Fuente: Autores 2015

66 Elizabeth Bejarano Mauricio Escobar


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6.6 Identificacin de Hongos por microscopa mediante clave dicotmica

Los hongos crecen en medios de cultivo artificiales con una variedad de formas; aunque

puede ser posible reconocer una especie bien conocida en base a su morfologa

macroscpica, ms frecuentemente es necesario el examen microscpico antes de poder

hacer una identificacin definitiva.

Cuando se evala y describe la morfologa macroscpica de las colonias, debe considerarse

el tipo de medio de cultivo empleado y las condiciones ambientales en las cuales el hongo

ha crecido. (W. Koneman, 1985)

El aspecto macroscpico del mismo hongo puede variar enormemente cuando se cultiva en

medios diferentes. Para el presente caso objeto de estudio, se utiliz agar Sabouraud como

medio de cultivo selectivo para el crecimiento de las colonias.

La siembra se hizo de manera directa e indirecta para evaluar el efecto en el crecimiento y

desarrollo de las colonias. De manera directa se sembraron 6 cajas de Petri, y de manera

indirecta se sembraron otras 6 cajas; se observ que las colonias de mayor crecimiento e

identificacin morfolgica evidente fueron 3 de las cajas sembradas indirectamente

(Ilustracin. 29), esto puede deberse a que la dilucin con agua destilada gener una menor

concentracin de microorganismos ocasionando por ende una mayor disponibilidad de

nutrientes.

67 Elizabeth Bejarano Mauricio Escobar


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Ilustracin 29. Aspecto macroscpico de las colonias de hongos

Fuente: Autores 2015

Despus de realizar la identificacin macroscpica, se realiz la descripcin microscpica

dnde se encontraron tres gneros de hongos, Penicillium, Fusarium y Aspergillus, hongos

comunes de un sistema de lodos activados.

Aspectos del gnero Penicillium

Microscpicamente, el aspecto caracterstico de este gnero es la ramificacin en forma de

cepillo de los conidiforos que semejan los dedos de una mano. Largas cadenas de

pequeos conidias esfricas se originan en filides con forma de botella en la parte superior

de las mtulas ramificadas. El aspecto aserrado romo de las porciones terminales de las

filides es una caracterstica til para diferenciar al Penicillium. (Koneman, 1987)

68 Elizabeth Bejarano Mauricio Escobar


EFICIENCIA DEL USO DE MICROORGANISMOS PARA EL TRATAMIENTO DE AGUAS RESIDUALES
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Aspectos del gnero Fusarium

Microscpicamente, el Fusarium es uno de los pocos hongos saprofitos que producen

macroconidias y microconidias. Microconidias unicelulares se originan en pequeas

cabezuelas en las puntas de filides cortas. (W. Koneman, 1985)

Aspectos del gnero Aspergillus

Microscpicamente, este gnero se caracteriza por cadenas de conidios pequeas u ovales a

esfricas sostenidas en cadenas en las puntas de filides radialmente ubicadas sobre la

superficie de pice dilatado del conidiforo, denominado vescula. (W. Koneman, 1985)

69 Elizabeth Bejarano Mauricio Escobar


Tabla 7. Identificacin de los hongos por microscopa mediante clave dicotmica.

Descripcin Descripcin microscpica Gnero Fotografa


macroscpica

Color: Colonia
verde azulado Forma: Filamentosa Segn las Foto 1. Imagen macroscpica del
Borde: Blanco Estructura somtica: caractersticas hongo Penicillium sp.
Textura: Hifas Septadas macroscpicas y
Algodonosa generativas (tabicado
microscpicas se
Apariencia: con paredes delgadas).
deduce y asevera
Filamentosa, Tipo de espora:
Conidifora que el hongo
vellosa.
Pigmento al Estructura encontrado es
medio: Pigmento Anamrfica: Penicillium sp.
difusible de color Conidiforos
Naranja. ramificados y hialinos,
Siembra: con fialides y conidias
Indirecta, tubo 2 producidas en cadena,
de forma elipsoidal.

Fuente: Autores 2015


EFICIENCIA DEL USO DE MICROORGANISMOS PARA EL TRATAMIENTO DE AGUAS RESIDUALES
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Foto 2. Imagen microscpica del


hongo Penicillium sp.

Fuente: Autores 2015

Foto 3. Imagen macroscpica del


hongo Fusarium sp
Color: Colonias Forma: Filamentosa Segn las
de color blanco. Estructura somtica: caractersticas
Borde: No Hifas Aseptadas macroscpicas y
presenta un borde esquelticas (no microscpicas se
regular. ramificadas con deduce y asevera
Textura: paredes gruesas). que el hongo
Algodonosa Tipo de espora: encontrado es
Apariencia: Esporngica Fusarium sp.
Aterciopelada Estructura
Pigmento al Anamrfica:
medio: Pigmento Esporangios hialinos,
Fuente: Autores 2015
difusible de color pigmentos

2 Elizabeth Bejarano Mauricio Escobar


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amarillo. intraparietales Foto 4. Imagen microscpica del


verdosos. hongo Fusarium sp

Siembra:
Indirecta, tubo 3

Fuente: Autores

Foto 5. Imagen macroscpica del


hongo Aspergillus sp
Color: Colonias de color Forma: Filamentosa Segn las
blanco que con el tiempo caractersticas
se tornan granulosas, cafs macroscpicas y
e ilimitadas. Estructura somtica: Hifas microscpicas se
Septadas generativas (tabicado deduce y asevera
con paredes delgadas). que el hongo
Borde: No presenta un encontrado es
borde regular. Aspergillus sp.

Tipo de espora: Conidifora


Fuente: Autores

3 Elizabeth Bejarano Mauricio Escobar


EFICIENCIA DEL USO DE MICROORGANISMOS PARA EL TRATAMIENTO DE AGUAS RESIDUALES
DOMSTICAS EN UNA PLANTA DE TRATAMIENTO DE AGUA RESIDUAL 2015

Textura: Aterciopelada

Estructura Anamrfica: Foto 6. Imagen microscpica del


hongo Aspergillus sp
Apariencia: Colonias Conidiforos ramificados y
Granuladas. hialinos, con fialides que
nacen sobre mtulas y conidias
no ramificadas de forma
elipsoidal.
Pigmento al medio: No
presenta pigmento difusible
al medio.

Siembra: Indirecta, Tubo 1

Fuente: Autores

4 Elizabeth Bejarano Mauricio Escobar


6.4 RESULTADOS FASE SEGUIMIENTO Y EVALUACIN

6.4.1 Temperatura

La temperatura afecta y altera la vida acutica, modifica la concentracin de saturacin de

oxgeno disuelto, la velocidad de las reacciones qumicas y de la actividad bacterial, de ah

su importancia del monitoreo de ste parmetro en el tratamiento de lodos activados.

La Ilustracin 30 muestra la evolucin temporal de la temperatura en el afluente y del

lquido de mezcla (LM) del reactor durante las doce semanas de monitoreo. Los valores

registrados de temperatura en el afluente oscilaron entre 16.9 y 19.2C, con un valor medio

de 17.9C.

Se puede visualizar que entre la primera semana y la tercera la temperatura flucto entre

16.9 y 17.7C ello debido a la condicin ambientalmente fra en este perodo; a partir de la

cuarta semana y hasta la sptima hubo un aumento de temperatura entre 17.3 y 19.2C que

correspondi con una condicin de temperatura ambiente clida; finalmente a partir de la

octava semana y hasta la doceava nuevamente hubo un descenso de temperatura en el que

se presentaron valores oscilantes entre 17.4 y 18.1C.


EFICIENCIA DEL USO DE MICROORGANISMOS PARA EL TRATAMIENTO DE AGUAS RESIDUALES
DOMSTICAS EN UNA PLANTA DE TRATAMIENTO DE AGUA RESIDUAL 2015

Los valores registrados de temperatura en el licor de mezcla del reactor (R) oscilaron entre

23.5 y 26.5C, con un valor medio de 25.1C. Se puede visualizar en la grfica de la

ilustracin 29 que entre la primera semana y la cuarta semana hubo un aumento de

temperatura entre 23.5 y 26.2C ello debido a que la temperatura del agua residual en el

reactor es mayor que la temperatura ambiente en perodos fros; a partir de la cuarta semana

y hasta la sptima hubo una disminucin de temperatura del orden de 3 grados desde

26.2C hasta 23.5C que correspondi con una condicin de temperatura ambiente clida,

esto ocurre porque la temperatura del agua residual es menor que la temperatura ambiente

en perodos clidos; finalmente a partir de la octava semana y hasta la doceava nuevamente

hubo un aumento de temperatura en el que se presentaron valores oscilantes entre 17.4 y

18.1C.

La temperatura ptima para la actividad bacterial es de 25C a 35C. La digestin aerbica

y la nitrificacin se suspenden cuando la temperatura alcanza los 50C. Cuanto la

temperatura es menor de 15C la digestin metanognica es muy lenta, y a temperaturas de

5C la bacteria autotrfica nitrificante deja de operar. (Rojas J. A., 2000)

Por lo anterior podemos inferir que los valores de temperatura registrados en el licor de

mezcla del reactor (R) se encuentran dentro de los valores de temperatura ptimos para la

actividad bacterial, los cuales oscilan entre los 25C. y los 35 C.. Cabe aclarar que la

actividad microbiana se incrementa a medida que aumenta la temperatura del sistema,

especialmente en el caso de las bacterias nitrificantes, que son las ms sensibles a las

posibles variaciones de este parmetro.

2 Elizabeth Bejarano Mauricio Escobar


EFICIENCIA DEL USO DE MICROORGANISMOS PARA EL TRATAMIENTO DE AGUAS RESIDUALES
DOMSTICAS EN UNA PLANTA DE TRATAMIENTO DE AGUA RESIDUAL 2015

Ilustracin 30. Comportamiento de la temperatura en el perodo de operacin

TENDENCIA DE LA TEMPERATURA EN EL
PERODO DE OPERACIN
28,0
27,0
26,0
25,0
24,0
Temperatura (C)

23,0
22,0
21,0 Temperatura A (C)
20,0
Temperatura R (C)
19,0
18,0
17,0
16,0
15,0
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13
Semanas

Fuente: Autores 2015

6.4.2 pH

La Ilustracin 31 muestra la evolucin temporal del pH en el afluente y del lquido de

mezcla del reactor (A y R en la ilustracin 31) durante las doce semanas de monitoreo.

Los valores registrados del potencial de Hidrgeno (pH) en el afluente oscilaron entre 6.31

y 6.60 indicando que el afluente presentaba una disolucin cida. Los valores registrados de

pH en el LM oscilaron entre 6.85 y 7.42, indicando que el Lquido de mezcla presentaba

una disolucin alcalina.

3 Elizabeth Bejarano Mauricio Escobar


EFICIENCIA DEL USO DE MICROORGANISMOS PARA EL TRATAMIENTO DE AGUAS RESIDUALES
DOMSTICAS EN UNA PLANTA DE TRATAMIENTO DE AGUA RESIDUAL 2015

Los valores de pH registrados en lquido de mezcla del reactor se encuentran dentro de los

valores recomendados para el desarrollo de la actividad biolgica de este tipo de proceso,

ya que los valores estn en un rango entre 6.5 y 7.5.

El crecimiento ptimo de bacterias ocurre dentro de los intervalos de pH entre 6,5 a 7,5

generalmente no toleran pH mayor que 9,5 o inferior a 4.

Las aguas con pH menor de 6, en tratamiento biolgico, favorecen al crecimiento de los

hongos de hongos sobre las bacterias. El valor de pH adecuado para diferentes procesos de

tratamiento y para la existencia de la mayora de la vida biolgica puede ser muy restrictivo

y crtico, y generalmente es de 6,5 a 8,5

Ilustracin 31. Comportamiento del pH en el perodo de operacin en el A (afluente) y R (Reactor)

TENDENCIA DEL pH EN EL PERODO DE OPERACIN


10,00
9,00
8,00
pH (Unidades de pH)

7,00
6,00
5,00
Ph Afluente
4,00
Ph Reactor
3,00
2,00
1,00
0,00
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13
Semanas

Fuente: Autores 2015

4 Elizabeth Bejarano Mauricio Escobar


EFICIENCIA DEL USO DE MICROORGANISMOS PARA EL TRATAMIENTO DE AGUAS RESIDUALES
DOMSTICAS EN UNA PLANTA DE TRATAMIENTO DE AGUA RESIDUAL 2015

6.4.3 FSFORO

En todo proceso de tratamiento biolgico se requiere que los microorganismos reciban

elementos necesarios para formar el protoplasma. Las aguas residuales domsticas

normalmente contienen los elementos requeridos, aun cuando ciertos residuos son

deficientes en algunos alimentos importantes, especialmente nitrgeno y fsforo.

La naturaleza de los compuestos orgnicos, en el agua residual que se va a tratar, determina

la especie biolgica predominante en el floc biolgico de lodo activado. Por ejemplo, un

residuo deficiente en nitrgeno estimula el crecimiento de hongos en vez de bacterias. Si

predominan los hongos filamentosos habra una sedimentacin pobre y una baja eficiencia

en remocin de DBO.

Al igual que el nitrgeno, es esencial para el crecimiento de protistas y plantas. En las

aguas residuales domsticas el contenido de fsforo oscila entre 6 y 20 mg/L.

La Ilustracin 32 muestra el consumo temporal de Fsforo en el afluente (A en la

ilustracin 32) y del lquido de mezcla del reactor (R en la ilustracin 32) durante las doce

semanas de monitoreo. Los valores registrados de fsforo en el afluente oscilaron entre

17,92 y 18.47 mg/L PO.Los valores registrados de consumo de fsforo en el LM

oscilaron entre 13.38 y 17.81 mg/L PO, indicando que hubo un buen consumo del

nutriente por parte de los microorganismos en el sistema.

5 Elizabeth Bejarano Mauricio Escobar


EFICIENCIA DEL USO DE MICROORGANISMOS PARA EL TRATAMIENTO DE AGUAS RESIDUALES
DOMSTICAS EN UNA PLANTA DE TRATAMIENTO DE AGUA RESIDUAL 2015

Los valores del contenido de fsforo registrados en el LM del reactor se encuentran dentro

de los valores recomendados, ya que el contenido del mismo para un agua residual

domstica est en un rango entre 6 y 20 mg/L PO.

Ilustracin 32 Consumo de Fsforo en el perodo de operacin en el perodo de operacin en el A (afluente)


y R (Reactor)

CONSUMO DE FSFORO EN EL PERODO DE OPERACIN


20,0

18,0
Fsforo (mg/L PO)

16,0

Fsforo A (mg/L PO)


14,0 Fsforo R (mg/L PO)

12,0

10,0
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13
Semanas
Fuente: Autores 2015

6.4.4 NITRGENO

El nitrgeno es un nutriente esencial para el crecimiento de los protistas y de las plantas, de

ah su importancia en la evaluacin y monitoreo en los sistemas de tratamiento de aguas

residuales.

6 Elizabeth Bejarano Mauricio Escobar


EFICIENCIA DEL USO DE MICROORGANISMOS PARA EL TRATAMIENTO DE AGUAS RESIDUALES
DOMSTICAS EN UNA PLANTA DE TRATAMIENTO DE AGUA RESIDUAL 2015

Las formas de inters en aguas residuales son las de nitrgeno orgnico, nitrgeno

amoniacal, nitrgeno de nitritos y nitratos. Sin embargo la forma predominante del

nitrgeno en aguas residuales domsticas frescas es el nitrgeno orgnico; las bacterias

rpidamente descomponen el nitrgeno orgnico en nitrgeno amoniacal y, si el medio es

aerobio como para el caso del tratamiento de lodos activados, se descompone en nitritos y

nitratos. El predominio de los nitratos indica que el residuo se ha estabilizado con respecto

a su demanda de oxgeno.

6.4.4.1 Nitratos

La Ilustracin 32 muestra el consumo temporal de nitrgeno en su forma de Nitratos en el

afluente y en el lquido de mezcla (LM) del reactor durante las doce semanas de monitoreo.

Los valores registrados de Nitratos en el afluente oscilaron entre 10,3 y 10,8 mg/L N-NO.

Los valores registrados de consumo de Nitratos en el LM oscilaron entre 7,2 y 9,2 mg/L N-

NO indicando que hubo un buen consumo del nutriente por parte de los microorganismos

en el sistema.

El predominio de Nitratos en el agua residual indica que el residuo se ha estabilizado con

respecto a su demanda de oxgeno. Los Nitratos, pueden ser utilizados por las algas y otros

microorganismos para formar protenas, por ello puede necesitarse la remocin de

nitrgeno para prevenir dichos crecimientos.

7 Elizabeth Bejarano Mauricio Escobar


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DOMSTICAS EN UNA PLANTA DE TRATAMIENTO DE AGUA RESIDUAL 2015

Ilustracin 33. Consumo de Nitratos en el perodo de operacin en el perodo de operacin en el A


(afluente) y R (Reactor)

CONSUMO DE NITRATOS EN EL PERODO DE OPERACIN


13,0

12,0

11,0
Nitratos (mg/L N-NO)

10,0 Nitratos A (mg/L N-NO)


Nitratos R (mg/L N-NO)

9,0

8,0

7,0
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13
Semanas
Fuente: Autores 2015

6.4.4.2 Nitritos

La Ilustracin 33 muestra el consumo temporal de nitrgeno en su forma de Nitritos en el

afluente y en el lquido de mezcla (LM) del reactor durante las doce semanas de monitoreo.

Los valores registrados de Nitritos en el afluente oscilaron entre 3,6 y 4,5 mg/L N-NO.

Los valores registrados de consumo de Nitritos en el LM oscilaron entre 0,85 y 3,2 N-NO

indicando que hubo un buen consumo del nutriente por parte de los microorganismos en el

sistema.

8 Elizabeth Bejarano Mauricio Escobar


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DOMSTICAS EN UNA PLANTA DE TRATAMIENTO DE AGUA RESIDUAL 2015

Ilustracin 34 Consumo de Nitritos en el perodo de operacin en el perodo de operacin en el A


(afluente) y R (Reactor)

CONSUMO DE NITRITOS EN EL PERODO DE OPERACIN


5

4
Nitritos (mg/L N-NO)

Nitritos A (mg/L N-NO)


2
Nitritos R (mg/L N-NO)

0
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13
Semanas

Fuente: Autores 2015

6.4.4.3 Nitrgeno amoniacal

La Ilustracin 35 muestra el consumo temporal de nitrgeno amoniacal en el afluente (A en

la ilustracin 35) y en el lquido de mezcla (LM) del reactor (R en la ilustracin 35) durante

las doce semanas de monitoreo. Los valores registrados de nitrgeno amoniacal en el

afluente oscilaron entre 22,89 y 24,01 mg/L N-NH. Los valores registrados de consumo

de nitrgeno amoniacal en el LM oscilaron entre 0,64 y 2,04 mg/L N-NH indicando que

hubo un buen consumo del nutriente por parte de los microorganismos en el sistema. Se

observa en la grfica que hubo un consumo de nitrgeno amoniacal de cerca del 80%.

9 Elizabeth Bejarano Mauricio Escobar


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DOMSTICAS EN UNA PLANTA DE TRATAMIENTO DE AGUA RESIDUAL 2015

Ilustracin 35. Consumo de Nitrgeno Amoniacal en el perodo de operacin en el perodo de operacin


en el A (afluente) y R (Reactor)

CONSUMO DE NITRGENO AMONIACAL EN EL PERODO DE


OPERACIN
27,00
24,00
21,00
Nitrgeno Amonical (mg/L N-NH)

18,00
15,00
Nitrgeno Amonical A (mg/L N-
12,00 NH)
9,00 Nitrgeno Amonical R (mg/L N-
NH)
6,00
3,00
0,00
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13
Semanas

Fuente: Autores 2015

6.4.5 Slidos Sedimentables

La grfica de la Ilustracin 36 muestra la evolucin de los slidos sedimentables en el

afluente (A en la Ilustracin 36) y en el lquido de mezcla (LM) del reactor (R en la

Ilustracin 36) durante las doce semanas de monitoreo. Los valores registrados de los

mismos en el afluente oscilaron entre 92 y 110 ml/L. Los valores registrados de slidos

sedimentables en el LM oscilaron entre 130 y 400 ml/L indicando que hubo un buen

consumo de nutrientes por parte de los microorganismos en el sistema, lo que gener que

hubiese ms sedimentacin y por ende ms slidos.

10 Elizabeth Bejarano Mauricio Escobar


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Los valores registrados de slidos sedimentables en el efluente oscilaron entre 7 y 30 ml/L

indicando que el sistema tiene una eficiencia superior al 75%.

Ilustracin 36. Evolucin de los slidos sedimentables en el perodo de operacin en el perodo de


operacin en el A (afluente) y R (Reactor)

Fuente: Autores 2015

11 Elizabeth Bejarano Mauricio Escobar


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DOMSTICAS EN UNA PLANTA DE TRATAMIENTO DE AGUA RESIDUAL 2015

6.4.6 Demanda qumica de oxigeno (DQO)

La Ilustracin 37 muestra el comportamiento de la Demanda Qumica de Oxigeno en el

afluente (A en la ilustracin 37) y en el lquido de mezcla (LM) del reactor (R en la

ilustracin 37) durante las doce semanas de monitoreo. Los valores registrados de los

mismos en el afluente oscilaron entre 679 y 690 mg/L O2. Los valores de la DQO en el LM

oscilaron entre 139 y 468 mg/L O2 indicando una reduccin en la cantidad de oxgeno que

requeran los microorganismos para oxidar la materia orgnica biodegradable.

Se puede deducir de la Ilustracin 35 que hubo un porcentaje de remocin de la carga

orgnica cerca del 80% indicando la eficiencia en el sistema de lodos activados y por ende

de los microorganismos.

Ilustracin 37 Comportamiento de la DQO en el perodo de operacin

COMPORTAMIENTO DE LA DQO EN EL TIEMPO DE


OPERACIN
750
700
650
600
DQO (mg/L O2)

550
500
450
400
350
300 DQOA (mg/L O2)
250
200 DQOR (mg/L O2)
150
100
50
0
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13
Semanas

Fuente: Autores

12 Elizabeth Bejarano Mauricio Escobar


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DOMSTICAS EN UNA PLANTA DE TRATAMIENTO DE AGUA RESIDUAL 2015

7 CONCLUSIONES

La clasificacin de los microorganismos mediante tinciones bsicas como la

Tincin de Gram para bacterias y azul de Lactofenol para hongos, permite tener un

acercamiento de los tipos de microorganismos que pueden contribuir a una mejor

eficiencia en las PTARD.

Los microorganismos encontrados en el agua residual, tal como bacterias y hongos

son los principales responsables de la degradacin de la materia orgnica en un

sistema biolgico.

El crecimiento y reproduccin de las colonias de microorganismos se ven afectadas

por parmetros ambientales como el pH y la temperatura. En el presente proyecto

los valores de pH en el reactor oscilaron en un rango entre 6.5 y 7.5., valores

recomendados para el desarrollo de la actividad biolgica para este tipo de proceso.

Con respecto a la temperatura, la actividad microbiana se incrementa a medida que

aumenta la temperatura del sistema, especialmente en el caso de las bacterias

nitrificantes, ya que estas son las ms sensibles a las posibles variaciones de este

parmetro.

Al inocular la PTARD con lodos activados de una PTAR con eficiencias altas, se

demostr mediante el monitoreo de parmetro fisicoqumos, que gracias a la accin

de los microorganismos existentes en ellos se puede evidenciar una remocin de

carga orgnica alta como para este caso que fue de 79.8%.

13 Elizabeth Bejarano Mauricio Escobar


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Son caractersticos del agua residual domstica los hongos del gnero Fusarium,

Aspergillius y Penicillium segn la identificacin microscpica que se realiz

mediante la clave dicotmica.

En las muestras de lodos activados se pueden encontrar bacterias Gram positivas y

Gram negativas que presentan diferentes morfologas como bacilos y cocos, lo cual

permite tener un acercamiento a los microorganismos degradadores de la carga

orgnica.

Para determinar la eficiencia del uso de microorganismos en una PTARD es

necesario monitorear parmetros como Slidos sedimentables, DQO, ya que indican

la remocin de carga contaminante en el Sistema de lodos activados.

Una eficiencia mayor al 70% en las PTARD permitir minimizar los impactos

negativos que genera un manejo inadecuado de las aguas residuales domsticas.

14 Elizabeth Bejarano Mauricio Escobar


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8 RECOMENDACIONES

Para realizar la identificacin de bacterias hasta gnero y especie, se sugiere utilizar

el Sistema automtico Vitek ya que garantiza una alta seguridad y rapidez en la

identificacin.

Se recomienda hacer un seguimiento ms riguroso de la planta debido a que la

ausencia del control operativo y por ende del mantenimiento ha generado que la

planta de tratamiento no opere en las condiciones ptimas.

Se recomienda el uso de microorganismos eficientes en el sistema de lodos

activados de la planta, para generar una mayor remocin de carga contaminante del

sistema y as funcione de una manera eficiente

Realizar un continuo monitoreo y operacin a la PTARD para que se realice el

tratamiento del agua residual domstica de manera efectiva y la eficiencia de la

planta aumente y se mantenga en ptimas condiciones.

15 Elizabeth Bejarano Mauricio Escobar


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ANEXO 1. Metodologa para la siembra de hongos

Para la identificacin de hongos en la muestra de lodo obtenido de la PTARD de Siemens,


se utiliz y prepar el Agar Sabouraud Dextrosa como medio, ya que el bajo pH del mismo
resulta favorable para el crecimiento de hongos y ligeramente inhibitorio para las bacterias.
A continuacin se explica detalladamente cmo se llev a cabo la identificacin de hongos.
1. Preparacin del medio

Se suspendieron 26 g de medio deshidratado (Agar Sabouraud Dextrosa) en 400 ml de agua


destilada, ello teniendo en cuenta que la proporcin es de 65 g de agar por litro y que se
emplean aproximadamente 20 ml de medio por cada caja de petri. Luego de agitar
frecuentemente se dej hervir la mezcla durante 1 minuto para que as se disolvieran
completamente los ingredientes.

Ilustracin 1. Preparacin del medio

Fuente: Autores 2015


2. Esterilizacin

Fue necesario esterilizar previamente el material con el fin de evitar interferencias por
contaminacin de los mismos. El material que se esterilizo fue respectivamente, doce cajas
de petri, dos pipetas graduadas de 10 ml, dos tubos de ensayo cada uno con 9 ml de agua
destilada, 12 puntas para micropipeta y 400 ml de medio Agar Sabouraud Dextrosa, todo
ello se llev a 121C durante 15 minutos.

Ilustracin 2. Preparacin del medio

Fuente: Autores 2015

16 Elizabeth Bejarano Mauricio Escobar


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3. Siembra

Una vez esterilizado y enfriado un poco el medio, se procedi a distribuir el Agar en 20


cajas de Petri, y se dej enfriar a temperatura ambiente.
Ilustracin 3. Siembra

Fuente: Autores 2015

Despus de haberse solidificado el medio en las cajas, se procedi a hacer la siembra de la


siguiente manera:

Siembra Directa: Se inocularon 6 cajas de Petri, cada una con 100 L de la muestra, la
siembra se realiz con rastrillos, uno para cada caja. Para cada una de las siembras se
utiliz una punta para micropipeta estril.

17 Elizabeth Bejarano Mauricio Escobar


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Ilustracin 4. Toma de punta Ilustracin 5.Toma de muestra Ilustracin 6.Siembra


esterilizada

Fuente: Autores Fuente: Autores Fuente: Autores

Ilustracin 7.Siembra Ilustracin 8.Siembra Ilustracin 9.Siembra

Fuente: Autores Fuente: Autores Fuente: Autores

Siembra Indirecta: Se tomaron los dos tubos de ensayo (cada uno con 9 ml de agua
destilada) y se les realiz una dilucin 1:10 a cada uno; lo que quiere decir que se tom
1 ml de la muestra y se diluyo respectivamente en cada uno de los tubos de ensayo.
Enseguida se procedi a mezclar las soluciones en un vrtex y se realiz la siembra de
100 L en cada una de las 6 cajas de Petri. La siembra se realiz con rastrillos, uno para
cada caja y se utiliz una punta para micropipeta estril por siembra.

18 Elizabeth Bejarano Mauricio Escobar


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Ilustracin 9.Toma de muestra Ilustracin 10. Dilucin 1:10 Ilustracin 11.Muestra diluida

Fuente: Autores Fuente: Autores Fuente: Autores

Ilustracin 12. Homogenizacin Ilustracin 13. Siembra Ilustracin 14. Siembra


de la solucin

Fuente: Autores Fuente: Autores Fuente: Autores

4. Incubacin

Se encubaron las cajas de petri durante 5 das a 25C. Despus de los cinco das, se realiz
una identificacin microscpica por colonia a travs de la tcnica de tincin de estructuras
fngicas tambin llamada tincin de Azul de Lactofenol, la cual preserva e identifica a los
componentes estructurales de los hongos. Una vez identificados los componentes
estructurales se realiza una clave dicotmica para identificar el tipo de hongo que es.

19 Elizabeth Bejarano Mauricio Escobar


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Ilustracin 14.Cajas despus de la Ilustracin 15.Identificacin por colonia


incubacin

Fuente: Autores Fuente: Autores

Ilustracin 16.Tcnica de tincin de Ilustracin 17.Observacin de la


estructuras fngicas estructura fngica - 40X

Fuente: Autores Fuente: Autores

20 Elizabeth Bejarano Mauricio Escobar


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ANEXO 2. Tincin con Azul de Lactofenol

1. Sobre un portaobjeto limpio y seco depositar 2 gotas de azul de lactofenol.


2. Cortar un trozo de cinta celo y la pegarla en el extremo del asa estril.
3. Con cuidado pasar el extremo del celo por el borde exterior de la colonia.
4. Pegar la cinta celo en el portaobjetos que tiene el colorante retirando con cuidado el
asa.
5. Aadir una gota de colorante sobre el celo.
6. Cubrir la preparacin con un cubreobjetos.
7. Observar al microscopio.

21 Elizabeth Bejarano Mauricio Escobar


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ANEXO 3. CLAVE DICOTMICA PARA IDENTIFICACIN DE HONGOS

22 Elizabeth Bejarano Mauricio Escobar


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