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Bacteriologa

Seminario 3

Bacterias Gram
negativas Parte 1
Microbiologa 1
II Ctedra
Facultad de Medicina (UBA)
Objetivos

1. Recordar la estructura de las bacterias gram negativas

2. Reconocer la estructura y la funcin del LPS, como endotoxina

3. Diferenciar entre Bacteria entrica y enterobacterias

4. Reconocer los factores de patogenicidad en general de las


bacterias gram (-)

5. Caracterizar Virotipos de E. coli

6. Identificar factores de patogenicidad de las bacterias del gnero


Shigella y Salmonella

7. Reconocer los factores de patogenicidad principales del gnero


Pseudomonas spp
Bacterias Gram negativas

Cocos /
Cocobacilos Bacilos

Aerobios Anaerobios Anaerobios Anaerobios


Aerobios Anaerobios
Estrictos Facultativos Estrictos Facultativos
Estrictos Estrictos

Bacteroides
Oxidasa (+) Veillonella Porphyromonas
Oxidasa (+) Oxidasa (-) Oxidasa positiva
Pseudomonas Fcil desarrollo Fastidiosas Prevotella
Acinetobacter Fusobacterium
Pasteurella
Neisseria
Moraxella

Bordetella
Oxidasa (+) Brucella
Oxidasa (-) Vibrio Haemophilus
Aeromonas Campylobacter
Helicobacter
Legionella

Fermentadoras de No fermentadoras de
lactosa lactosa

Escherichia Shigella
Enterobacter Salmonella
Klebsiella Proteus Yersinia
ENVOLTURA EN GRAM NEGATIVOS

Cpsula

Membrana
externa

Periplasma Pared celular

Membrana
citoplasmtica
(bicapa lipdica)

Solo en gramnegativas
Diferencias en las envolturas de las
gramnegativas:
Pared celular:
Es una pared mas delgada
Presenta baja cantidad de peptidoglicanos (murena)
Carece de cidos teicoicos
Se encuentra sumergida en el periplasma

Periplasma:
Gel formado por agua, sales, peptiglicanos y protenas.
Participa en el transporte de solutos, secrecin de protenas y
actividades hidrolticas.
MEMBRANA EXTERNA

Solo en Gram Negativos


Bicapa lipdica ASIMETRICA
Lado externo: LPS (posee actividad de endotoxina)
Lado interno: Lipoprotena de Braun (une membrana
externa con pared celular).

Presenta porinas (nutricin y ATB) [ej: OmpC y OmpF de la


E.coli]
ESTRUCTURA DEL LIPOPOLISACRIDO
El LPS constituye una endotoxina que se libera cuando la bacteria se divide o
muere.
Est formado por fosfolpidos y protenas de membrana externa.

v ANTGENO SOMTICO O:
Es un potente estimulador de la
respuesta inmune

v CORE

v LPIDO A:
Es responsable de la actividad endotxica
del LPS
ENDOTOXINA
Respecto a las Exotoxinas, son menos potentes y menos
especficas en su accin, ya que no actan enzimticamente.
Son estables al calor (no se desnaturalizan a 100C durante 30
minutos), pero se degradan por ciertos agentes oxidantes
potentes (superxido, perxido, hipoclorito).
No pueden ser convertidas en toxoides.
Son txicas para la mayora de los mamferos.
Son antignicas, pero rara vez provocan respuestas
inmunitarias que dan plena proteccin frente a la exposicin
secundaria a la endotoxina.
ENDOTOXINAS
ENTEROBACTERIAS
Familia
ENTEROBACTERIAS
Bacilos gramnegativos.
Anaerobias facultativas.
Fermentan la glucosa.
Reducen los nitratos.
Son catalasa-positivas y oxidasa-negativas.
Ubicuas.
Inmviles o mviles con flagelos pertricos.
No forman esporas.
Algunas presentan cpsulas prominentes, mientras
que otras estn rodeadas de una capa viscosa,
difusible y suelta.
Poseen antgeno comn enterobacteriano
Se adquieren de un reservorio animal, de un portador
humano o por diseminacin endgena.
Incluye gneros que pueden ser:
Patgenos primarios.
Flora comensal normal y producir infecciones
oportunistas.
Flora comensal que deviene patgena cuando
adquiere genes con factores de virulencia presentes
en plsmidos, bacterifagos e islas de patogenicidad.
Familia Enterobacteriaceae
Es el grupo ms grande y heterogneo de
Gnero Escherichia bacilos gramnegativos con importancia
Gnero Klebsiella clnica.
Gnero Salmonella
Estos gneros se han clasificado segn
Gnero Shigella sus propiedades bioqumicas (bateras
Gnero Citrobacter bioqumicas), estructura antignica
Gnero Enterobacter (serotipificacin) e hibridacin y
secuenciacin de su material gentico.
Gnero Morganella
Gnero Proteus A pesar de la complejidad de la familia
Gnero Serratia menos de 20 especies son responsables de
Gnero Yersinia la mayor parte de las enfermedades
humanas.
Factores de patogenicidad
Fimbrias comunes adherencia a receptores especficos.
Pili sexuales transferencia gentica horizontal entre bacterias.
Endotoxina lpido A del LPS que se libera durante la lisis celular.
Cpsula evasin de la respuesta inmune.
Variacin de fase antignica El antgeno capsular K y el antgeno flagelar H
se pueden expresar alternativamente o no expresarse en absoluto (variacin de
fase).
Sistemas de secrecin tipo III facilita la secrecin de factores de virulencia
bacterianos. Sus efectos son diferentes, y su ausencia comporta prdida de
virulencia.
Secuestro de factores de crecimiento siderforos y hemolisinas.
Resistencia al efecto bactericida del suero evasin del complemento.
Resistencia antimicrobiana a travs de plsmidos transferibles entre
especies, gneros y familias de bacterias.
Lipopolisacrido (LPS)
Principal antgeno de la pared celular, termoestable,
formado por:

1.Polisacrido O somtico (ms externo):


permite la clasificacin epidemiolgica de las cepas
dentro de una especie.

2.Antgeno comn bacteriano: polisacrido


central compartido por la familia.

3.Lpido A: responsable de la actividad de


endotoxina.
La clasificacin epidemiolgica (serolgica) de
las enterobacterias se basa en 3 grupos de
antgenos:

Polisacridos somticos O (termoestable)


Reactividad cruzada con gneros relacionados
(Salmonella/Citrobacter, Escherichia/Shigella)

Antgenos capsulares K (termolbil).

Protenas flagelares H (termolbil)


Pueden estar ausentes, sufrir variaciones antignicas y
estar presentes en 2 fases.
Medio de cultivo especifico para enterobacterias:

El cultivo en agar MacConkey permite distinguir a


las Enterobacterias segn su capacidad de
fermentar la lactosa:
Cepas fermentadoras de Cepas que no fermentan
lactosa lactosa o lo hacen lentamente

Escherichia, Klebsiella, Proteus, Salmonella*,


Enterobacter, Citrobacter y Shigella*, Yersinia spp.
Serratia

* Presentan resistencia a las sales biliares en algunos


medios selectivos.
Escherichia coli
Flora habitual del tubo digestivo.
Indicador de contaminacin fecal
Crecimiento rpido en la mayora de los
medios de cultivo. (Fermentadora de Lac)

Produce principalmente 3 tipos de infecciones en humanos,


(dependientes de los determinantes de patogenicidad de
E.coli) :
Infecciones del tracto urinario (ITU)
Meningitis neonatal
Enfermedades intestinales
Clasificacin
La reactividad serolgica frente al antgeno O identifica el serogrupo y
frente al antgeno H identifica el serotipo.

La virotipificacin analiza:
Los patrones de adherencia de la bacteria a las clulas del husped.
Los efectos de la adherencia sobre las clulas del husped.
La produccin de toxinas.
Las caractersticas de invasividad de la bacteria.

Se conocen 6 virotipos definidos:


1. E. coli enterotoxignica (ECET).
2. E. coli enteropatgena (ECEP).
3. E. coli enterohemorrgica (ECEH).
4. E. coli enteroinvasiva (ECEI).
5. E. coli enteroagregativa (ECEA).
6. E. coli de adherencia difusa (ECAD).
Infecciones del Tracto Urinario (ITU)
E. coli uropatgena causa el 90% de las ITU no complicadas
(Vas anatmicas normales, sin obstruccin)
La bacteria coloniza regin perineal y asciende a vejiga
Las UTI son ms frecuentes en mujeres
En las ITU complicadas (Ej. sondados), la etiologa en variada

Factores de virulencia:
Fimbria P y Fimbrias tipo 1: adherencia evitando la
eliminacin durante la miccin.
Siderforos.
Hemolisinas: lisis de eritrocitos y otras clulas.
Antgenos K.
Meningitis neonatal
Se relaciona con la produccin del antgeno capsular K-1
Invade el torrrente sanguneo de nios desde nasofaringe o
tracto gastrointestinal (TGI) y llega a meninges
En el diagnstico puede realizarse cultivo o deteccin del Ag K
-1 por mtodos rpidos (atencin: reaccin cruzada con Ag
capsular tipo B de N.meningitidis)
Factores de virulencia:
Cpsula K-1 (a pesar de que slo 18% de las cepas
involucradas sintetizan K-1)
Enfermedades intestinales
Recordar los distintos virotipos:
E. coli enterotoxignica (ECET).
E. coli enteropatgena (ECEP).
E. coli enterohemorrgica (ECEH).
E. coli enteroinvasiva (ECEI).
E. coli enteroagregativa (ECEA).
E. coli de adherencia difusa (ECAD).
En todos los casos, se asocian con el estado
socio-sanitario y la gravedad depender del
estado inmune del paciente
Escherichia coli Enterotoxignica (ECET)
Adhesinas Exotoxinas

Fimbrias o pili tipo I. Toxina termolbil (LT-1)


Antgenos del factor de colonizacin (CFA/I, CFA/II, CFA/III) Toxina Termoestable (STa)

Diarrea de viajero: acuosa profusa autolimitada.


Transmisin fecal-oral, no persona-persona
Adultos en zona endmica: inmunidad

CFA: Adherencia al epitelio y entre bacterias, receptores


para bacterifagos portadores de enterotoxinas u otros
factores de virulencia. Plasmdica
LT-1. Estructura A-B, funcin homloga a la toxina del
clera: [AMPc] excrecin de electrolitos con arrastre
de agua. Plasmdica
STa. Efecto semejante a la toxina termolbil a travs de la
estimulacin de la guanilatociclasa: [GMPc] excrecin
de electrolitos con arrastre de agua. Plasmdica
Escherichia coli Enteropatgena (ECEP)
Adhesinas Exotoxinas

Pili formadores de haces (Bfp). Ninguna.


Intimina.

Diarrea infantil. Transmisin persona-persona y


fecal-oral.
Moderadamente invasivas. Heces con mucus, sin
sangre.
Efecto de adherencia y borrado de las
microvellosidades: Prdida de la capacidad de
absorcin de la mucosa.

BFP: adherencia y secrecin activa de protenas


hacia el interior de la clula epitelial (sistema de
secrecin tipo III bacteriano).
Intimina (adhesina no fimbrial, es una protena de
membrana externa): polimerizacin de actina,
prdida de la integridad celular muerte celular.
Escherichia coli Enterohemorrgica (ECEH)
Adhesinas Exotoxinas

Pili formadores de haces (Bfp); Toxinas de Shiga (Stx-1, Stx-2) obtenidas a partir de
Intimina. bacterifagos lisognicos. Se unen a clulas que
expresan Gb3 (glicolipido de membrana).
Diarrea acuosa seguida de colitis hemorrgica a los 2 das, sin
fiebre o con febrcula, puede progresar a SUH (insuficiencia
renal aguda, trombocitopenia y anemia hemoltica
microangioptica).
Moderadamente invasiva
Cepa ms frecuente: O157:H7
Transmisin persona-persona (inculo o DI bajo).
Incidencia mxima en menores de 5 aos.
Los casos y brotes se han asociado con el consumo de carne
mal cocida (especialmente carne picada), leche cruda, jugo
de manzana sin pasteurizar, aguas contaminadas y brotes de
alfalfa, y tambin se ha aislado de aves de corral, carne de
cerdo y de cordero..
Mediada por las toxinas Shiga, que interrumpen la sntesis de
protenas. Lesiones unin/borrado con la destruccin de la
vellosidad intestinal, que produce malabsorcin (dem ECEP)
Escherichia coli Enteroinvasiva (ECEI)
Adhesinas Exotoxinas

Antgeno del plsmido invasivo (lpa). Hemolisina (HlyA).


No produce toxina de Shiga.

Contagio por alimentos contaminados.


Colonizan el intestino grueso.
Invaden las clulas colnicas, lisan las vacuolas
fagocticas y se replican en el citoplasma de la
clula.
Se diseminan lateralmente a las clulas
adyacentes por polimerizacin de actina
(relacionadas con Shigella y Listeria).
Destruccin del epitelio con infiltracin
inflamatoria.
Produce diarrea acuosa que puede evolucionar a
disentera y a ulceracin colnica.
Escherichia coli Enteroagregativa (ECEA)
Adhesinas Exotoxinas

Fimbrias adherentes agregantes (AAF/I, AAF/II, AAF/III). Toxina termoestable enteroagregante (EAST).
Toxina codificada con plsmidos (Pet).

Diarrea infantil, acuosa y persistente, con


presencia de mucus. Diarrea del viajero.
Diarrea crnica con retraso del crecimiento,
gastroenteritis.
BFP. Adherencia entre bacterias, bacteria-epitelio,
bacteria mucus.
AAF. Adherencia con agrupacin en pilas de
ladrillos.
Formacin de una biopelcula gruesa por
produccin de moco sobre las clulas epiteliales
que las protege de la fagocitosis y los ATB
prolongada colonizacin y malabsorcin.
EAST y Pet. Secrecin de lquido, dao de las
clulas intestinales. Plasmdicas
Escherichia coli de Adherencia Difusa (ECAD)
Adhesinas Exotoxinas

Patrn de adherencia a clulas Hep-2 en cultivo. Se desconoce.

Aparecen dispersas sobre la superficie celular.


Formacin de proyecciones largas de la
membrana de la clula eucariota que
envuelven a la bacteria.
Existe poca informacin acerca de sus
factores de virulencia.
Producen diarreas acuosas sin sangre ni
leucocitos fecales.
Gastroenteritis producidas por Escherichia coli
Microorganismo Lugar de accin Enfermedad Patogenia

E. coli enterotoxignica Intestino delgado. Diarrea del viajero; diarrea infantil; Enterotoxinas termoestables y/o
(ECET) diarrea acuosa, vmitos, espasmos termolbiles mediadas por plsmidos
abdominales, nuseas, febrcula. que estimulan la hipersecrecin de
lquidos y electrolitos.
E. coli enteropatgena Intestino delgado. Diarrea infantil, diarrea acuosa y Histopatologa unin/borrado
(ECEP) vmitos, heces no sanguinolentas. mediada por un plsmido con
alteracin de la estructura normal de
la microvellosidad, dando
malabsorcin y diarrea.
E. coli enteroagregativa Intestino delgado. Diarrea infantil, diarrea del viajero; Adherencia agregativa de los bacilos
(ECEAg) diarrea acuosa persistente con mediada por un plsmido con
vmitos, deshidratacin , febrcula y acortamiento de las
hemorragia; disminucin de la microvellosidades; infiltracin
absorcin de lquidos. mononuclear.
E. coli enterohemorrgica Intestino grueso. Diarrea acuosa seguida de colitis Mediada por las toxinas Shiga, que
(ECEH) hemorrgica, sin fiebre o con interrumpen la sntesis de protenas.
febrcula, puede progresar a SUH. Lesiones unin/borrado con la
destruccin de la vellosidad
intestinal, que produce malabsorcin.

E. coli enteronvasiva Intestino grueso. Fiebre, espasmos, diarrea acuosa, Invasin mediada por un plsmido y
(ECEI) puede progresar a disentera. destruccin de las clulas que
recubren el colon.
E. coli enteroadherente Diarreas acuosas sin sangre ni Formacin de proyecciones largas de
(ECEAd) leucocitos fecales. la membrana de la clula eucariota
que envuelven a la bacteria.
Otras infecciones extraintestinales
En todas estas infecciones, es importante el estado del paciente,
ya que la mayora son infecciones oportunistas, especialmente
en el ambiente hospitalario (sondas, asistencia respiratoria
mecnica, cirugas, prevalencia de cepas resistentes, etc)

Bacteriemia, sepsis, septicemia


Infecciones del tracto respiratorio
Infecciones de piel y de heridas
Shigella
Enterobacteria
Bacilo gram (-)
Inmvil
Anaerobio facultativo
Oxidasa negativo
No fermenta lactosa pero si la glucosa (no hay produccin de gas)
Los humanos son los nicos reservorios
Transmisin fecal-oral (persona a persona)
Se requiere una baja dosis infectiva

Cuatro especies (todas patgenas para los humanos):


S. dysenteriae (grupo A; infecciones ms graves, espec. tipo 1))
S.flexneri (grupo B)
S.boydii (grupo C)
S.sonnei (grupo D)
Shigella dysenteriae: La tipo I es la invasiva y produce Toxina
de Shiga.

TOXINA de SHIGA
Exotoxina tipo A-B
Codificada en el cromosoma (diferencia con ECEH)
Mecanismo:
Acta sobre el endotelio vascular.
Subunidades B se unen a Gb3 (componente de la membrana celular)
El complejo entra en la clula.
La subunidad A interacta con los ribosomas para inactivarlos. A es una
N-glicosidasa que modifica el componente RNA del ribosoma para
inactivarlo-interrumpir la sntesis proteica- muerte celular.
Deterioro del endotelio y hemorragia (diarrea con sangre)
La toxina es efectiva contra pequeos vasos sanguneos (en el tracto
digestivo, rin y pulmones), pero no contra los grandes vasos (arterias
o venas ms importantes). Un sitio de dao es el endotelio vascular del
glomrulo
SHIGELOSIS: Se caracteriza por la presencia de espasmos abdominales,
diarrea, fiebre elevada (diferencia con la ECEI) y heces sanguinolentas.
Los sntomas aparecen 1 a 3 das tras la ingestin de los bacilos
1. Enfermedad diarreica aguda: profusa diarrea acuosa sin invasin
mucosa.
2. Enfermedad sistmica sin bacteriemia: espasmos abdominales con
abundante pus y sangre en las heces (DISENTERIA). Es consecuencia
de la invasin de la mucosa colnica por las bacterias.

SUH: Puede ocurrir luego de la infeccin por S.dysenteriae tipo 1.


Produce insuficiencia renal, anemia hemoltica, trombocitopenia y
defectos de la coagulacin. A menudo es mortal y con frecuencia
debilitante. Argentina: 400 nuevos casos por ao.

SINDROME DE REITER:
Puede ocurrir en 3% de los casos de diarrea por S.flexneri luego de meses o
aos . Cursa con dolor articular, irritacin ocular y dolor al orinar. Existe
predisposicin en personas HLA-B27.
Prevencin:

Cloracin del agua no potable


Higiene personal
Adecuado manejo de alimentos
Salmonella
Enterobacteria (patgeno primario)
Bacilo gram (-)
Mvil (flagelos)
Anaerobio facultativo
Oxidasa negativo
No fermentan lactosa y producen SH2
La especie Salmonella enterica presenta distintos
serotipos:
Salmonella typhi (infeccin sistmica)
Salmonella paratyphi
Salmonella cholerae-suis
Salmonella enteritidis (infeccin localizada autolimitada)
Estructura y antgenos de Salmonella
Antgeno O (somtico)
Resistente al calor y al alcohol
Secuencias repetidas de polisacridos
de la porcin variable del LPS.

Antgeno H (flagelar)
Antgenos proteicos (termolbil).
Presentan variacin de fase.

Antgeno Vi (capsular)
Polisacrido capsular
Slo en S.typhi, S.paratyphi C y
S.dublin
Puede colonizar casi todos los animales (ganado, roedores,
animales domsticos) y al ser humano.
Solo la especie Salmonella enterica es patgena para el hombre.
Las cepas S. typhi y S. paratyphi pueden sobrevivir en la vescula
biliar (portadores crnicos).
Las vas de infeccin son la ingesta de alimentos contaminados
(aves, huevos, productos lcteos) y la transmisin fecal-oral.
S. typhi se contrae al ingerir agua o alimentos contaminados por
un manipulador infectado. No existe reservorio animal.
Factores de virulencia:
ADHERENCIA E INVASIN
Adhesin (fimbrias)
Splash (reorganizacin del citoesqueleto)
Internalizacin en una vescula endoctica
Divisin bacteriana en la vescula BACTERIA INTRACELULAR
Fusin de vesculas FACULTATIVA
vescula grande, llena de bacterias

SOBREVIDA EN FAGOCITOS
Dos estrategias:
Resistir a las formas reactivas del oxgeno
Resistir a las defensinas (pptidos txicos que matan bacterias)
RESISTENCIA AL EFECTO BACTERICIDA DEL SUERO
Capacidad para producir una infeccin sistmica.
La cpsula evade los Ac. generados contra los Ag. somticos y escapa al
sistema del complemento.
LPS
Actividad de endotoxina dependiente del lpido A.
Se libera durante la lisis celular
Causante de las manifestaciones sistmicas : activacin del complemento,
liberacin de citocinas, leucocitosis, CID, fiebre , shock y muerte.
ANTGENO Vi
Ag. Capsular que protege a las bacterias encapsuladas de la fagocitosis
Interfieren en la unin de los Ac. a las bacterias y son poco inmunognicos (no
activan complemento)
VARIACIN DE FASE ANTIGNICA (expresin alternativa de los Ag. H y Vi)

PLSMIDOS (resistencia a los ATB)

SIDERFOROS (protenas con alta afinidad por el hierro)


S. typhi:
Coloniza solo al hombre
Va de transmisin fecal-oral (se elimina por heces)
Fuentes de contagio:
alimentos o bebidas contaminados por manipuladores infectados.
Aguas contaminadas
Mariscos que concentran (mejillones, ostras), consumidos crudos o
mal cocidos
Agente causal de la FIEBRE TIFOIDEA (cuadro sistmico grave)

RECORDAR: La fiebre tifoidea es causada por la


Salmonella Typhi. En cambio el TIFUS es causado por
las especies de Rickettsia (del grupo tfico)
Patogenia
Se adhiere a las clulas M del leon y se produce transcitosis hacia la
placa de Peyer.
Luego es fagocitada por los macrfagos (dentro de la placa de
Peyer)
Evade los mecanismos bactericidas del macrfago y se replica en el
interior de las vacuolas (diferencia con shigella)
Luego se disemina por la circulacin sangunea donde las bacterias
son capturadas por los macrfagos del sistema reticuloendotelial.
El LPS y los productos del macrfago producen fiebre elevada.
Luego por medio de la bilis (colonizacin de la vescula biliar)
vuelven a localizarse en el intestino produciendo alteraciones
locales (ulceracin de la mucosa)
Colonizacin asintomtica:
El sitio primario de portacin de S. typhi es el conducto y la
vescula biliar
Es difcil de erradicar
Hay portadores crnicos (colonizacin crnica luego de una
enfermedad sintomtica). Los ATB no son generalmente
efectivos (a pesar de que las bacterias pueden ser sensibles)
debido a la poca penetracin del ATB en el sitio de portacin
Manifestaciones clnicas:

1ra. semana:
Letargo, fiebre, malestar general, dolores generalizados, constipacin

2da. semana:
Paciente gravemente enfermo, fiebre sostenida +40C, abdomen doloroso
a la palpacin y con rosola tfica, exantema maculopapular rosado en
trax y abdomen.

Entre la 2da y 3ra. semana:


Diarrea

Despus de la 3ra. semana:


Mejora si no aparecen complicaciones: perforacin intestinal, hemorragia
severa, colecistitis, abscesos, neumona
S. paratyphi

Causa una enfermedad febril mas leve: FIEBRE


PARATIFOIDEA.
Tiene un cuadro clnico similar pero de
carcter ms benigno.
S. enteritidis
Es una zoonosis.
Las salmonellas son los patgenos ms frecuentes en
la diarrea bacteriana.
Hay adherencia e invasin de la mucosa intestinal
pero la bacteria no pasa a la circulacin sangunea
(diferencia con S. typhi).
En Argentina la causa ms frecuente es por consumo
de mayonesa casera (preparada con huevo
contaminados)
Ingreso de las bacterias

Invasin de clulas de la mucosa

Respuesta inflamatoria: dolor y liberacin


de prostaglandinas

Prostaglandinas aumentan cAMP

Se inhibe la captacin de Na y se estimula


la secrecin de K

Prdida de agua, diarrea


S. cholerae-suis:

Causa mas frecuente de septicemia por Salmonella.


El riesgo de bacteriemia es ms alto en pacientes
peditricos, geritricos o inmunodeprimidos.
Se caracteriza por fiebre y bacteriemia crnica sin
manifestaciones de enterocolitis ni fiebre entrica.
Pueden desarrollarse lesiones supurativas locales en
tracto biliar, articulaciones y pulmn.
DIAGNSTICO
1. Directo: aislamiento en cultivo
Hemocultivo: para las especies que pueden producir bacteriemia (se
positiviza al mismo tiempo que aparece la fiebre)
Coprocultivo:
Se utilizan muestras de heces que no tengas mas de media hora
de obtenidas, en un frasco estril, o muestras tomadas
directamente del recto con un hisopo de algodn.
La muestra puede enriquecerse en medio con selenito de sodio
Cultivo en MacConkey, Levine y S-S (colonias no fermentadoras de
lactosa)
Primero se identifica el gnero salmonella y luego mediante
aglutinacin con antisueros especficos, la determinacin del
serotipo.
Urocultivo: se positiviza a la 3 semana de la aparicin de los sntomas
de la Fiebre tifoidea
2. Indirecto: diagnstico serolgico para Fiebre tifoidea: Se buscan Ac.
aglutinantes para los Ag. H y O en la prueba de Widal. Aparecen entre la
segunda y cuarta semana.
Vibrio spp.
Vibrio cholerae
Bacilo Gram negativo y curvo

Son oxidasa positivo

Agente etiolgico del Clera

Sensible a los cidos (deben ingerirse grandes cantidades


para superar la barrera de la acidez gstrica) y sensibles a
temperatura mayor de 56C por 30 min.

Sobreviven en estanques, ros, aguas cloacales, agua de mar,


crustceos y peces
Clasificacin: V.cholerae
Por su antigeno O: 139 serogrupos

Serogrupo O1 presenta 3 antgenos distintos: A, B y C que


permiten la clasificacin en serotipo:
- Ogawa (A, B)
- Inaba (A,C)
- Hikojima (A,B yC)

Serogrupo O1 se clasifica dependiendo de las pruebas


bioqumicas en biotipos :
- Clsico: Enfermedades ms severas, excretan periodos
cortos, DI alta
- El Tor: Enfermedades moderadas, excretan periodos
largos ,DI baja
FACTORES DE VIRULENCIA
Flagelo polar : motilidad
Adherencia: hemaglutinina y el Pili metil-fenil-alanina
Factores de despegue: mucinasas dependientes de Ca y Zinc
TOXINA DEL CLERA:
Estructura AB
La subunidad B se une al receptor ganglosido GM1 del enterocito
La subunidad A acta sobre la protena Gs con la siguiente
estimulacin de la adenilato ciclasa y aumento del AMPc, esto lleva
a la hipersecrecin de Cl , K, HCO3 y agua hacia la luz intestinal
Toxina Zot
Acta sobre la zona ocludens , lo que afecta a la unin de los enterocitos

Toxina Ace
ATPasa transportadora de iones, que origina acumulacin de fluidos
Vibrio cholerae

Mecanismo de accin de la
toxina del clera (tipo A-B5)
DIAGNOSTICO:

Se toma la muestra a partir de materia fecal


El cultivo se realiza en medio de agar de sangre, agar
MacConkey medio TCBS (tiosulfato - citrato- bilis- sacarosa)
que favorece el crecimiento selectivo de V. cholerae ante otros
bacilos gramnegativos
Existe la tcnica de Elisa que detecta la toxina colrica sin
previo cultivo de la bacteria, directamente sobre el material
fecal
Pruebas Bioqumicas: Prueba de oxidasa (positiva)
Para la presencia de Ag O1 y O139 (mediante Ac)
Antisueros contra Ogawa e Inaba
Pseudomonas spp.
Pseudomonas aeruginosa
Bacilos gramnegativos, restos o ligeramente curvados, que se
disponen en parejas.
Aerobios, pueden crecer en forma anaerobia, no fermentadores,
oxidasa-positivos.
Cpsula mucoide de polisacridos biofilms.
Algunas especies producen pigmentos difundibles: piocianina
(azul), pioverdina (verde-amarillento) y piorrubina (pardo-rojizo).
Oportunistas, ubicuos en la naturaleza.
Reservorios hmedos hospitalarios,
soluciones desinfectantes, agua destilada.
Pseudomonas aeruginosa

Requerimientos nutricionales sencillos en medios normales de


laboratorio, versatilidad nutricional, produce colonias hemolticas,
pigmentadas.
Toleran amplias temperaturas (4-42C) y muchos desinfectantes
Pueden colonizar de forma transitoria el tracto respiratorio y digestivo
de los pacientes hospitalizados.
Multirresistencia (puede mutar a cepas an ms resistentes durante el
tratamiento) Sintetiza diferentes -lactamasas.
Prevencin: evitar uso innecesario de ATB de amplio espectro y contaminacin.
Factores de Patogenicidad
Adhesinas:
Flagelos y pili: movilidad
Alginato: cpsula mucoide (Slime-biofilm)
Proteasa alcalina : interfiere con la formacin de fibrina y puede
lisar fibrina. Juntos, elastasa y proteasa alcalina destruyen la
sustancia fundamental de la crnea y otras estructuras de soporte
compuesta de fibrina y elastina, y ambas pueden inactivar
interfern gamma y factor de necrosis tumoral
Elastasa: rompe el colgeno, IgG, IgA, y complemento. Tambin
lisa fibronectina para exponer receptores en la mucosa del pulmn.
Rompe el epitelio respiratorio e interfiere con la funcin ciliar.
Leucocidina: Citotxica
Fosfolipasa C y Lecitinasa: Actan sinrgicamente sobre los lpidos
y lecitina.
Factores de Patogenicidad
Exoenxima S: Actividad ADP-ribosilante. Puede alterar la funcin
de clulas fagocticas.
Exotoxina A (ETA): Exactamente el mismo mecanismo de accin
que la toxina diftrica pero en diferente receptor: ADP-
ribosilacin del factor de elongacin- 2, que resulta en la
inhibicin de la sntesis de protenas. La produccin de ETA est
regulada por el hierro exgeno. Acta en ambos procesos de
enfermedades locales y sistmicas. En septicemias, se observan
anticuerpos anti-ETA en el suero.
Piocianina: cataliza la produccin de superxido y perxido de
hidrgeno, estimula la liberacin de IL-8 (atrae neutrfilos).
Interrumpe la funcin normal de las cilias nasales y rompe el
epitelio frespiratorio
Factores de Patogenicidad
Piocianina : cataliza la produccin de superxido y perxido de
hidrgeno, estimula la liberacin de IL-8 (atrae neutrfilos).
Interrumpe la funcin normal de las cilias nasales y rompe el epitelio
frespiratorio

Pioverdina: siderforo, regula la secrecin de ETA.

LasA (serina proteasa) y LasB (metaloproteasa): degradacin de


elastina, del complemento, inhiben la quimiotaxis y funcin de los
neutrflos, en la infecciones crnicas promueven la formacin de
inmunocomplejos.

Lipopolisacridos (LPS): endotoxina


Manifestaciones Clnicas
Infecciones pulmonares (pacientes con fibrosis qustica, EPOC,
neutropnicos, pacientes en ARM) mortalidad 70%.
Infecciones cutneas primarias quemaduras
Foliculitis (aguas contaminadas: piletas, salones de belleza,
acn, depilacin).
Osteocondritis del pie tras una herida penetrante.
Infecciones urinarias sondas urinarias.
Infecciones del odo
Otitis externa/odo del nadador
Otitis externa maligna: invade tejidos subyacentes en
diabticos y ancianos.
Otitis media crnica
Manifestaciones Clnicas
Infecciones oculares traumatismos en la crnea, lentes de
contacto, con posterior exposicin a agua contaminada.
Ulceras corneales.
Bacteriemia
Virulencia inherente, afecta a inmunodeprimidos (neutropenia,
DBT, quemaduras extensas, neoplasias hematolgicas).
Mayor tasa de mortalidad que otros gramnegativos.
Ectima gangrenoso: lesiones cutneas caractersticas con
vesculas eritematosas que se tornan hemorrgicas, necrticas y
ulceradas.
Endocarditis adictos a drogas parenterales.
Infecciones en aparato digestivo, sistema nervioso central y
sistema musculoesqueltico.
Diagnstico
Cultivo en agar sangre o agar MacConkey en
aerobiosis
Morfologa de las colonias: tamao de la
colonia, actividad hemoltica, pigmentacin
verde, olor dulce semejante al de las uvas.
Reaccin positiva de la oxidasa.
-hemlisis.