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Prctica de microscopa

Madeleyn Bastidas- Diana Charfueln


Departamento de Automtica y Electrnica
Universidad Autnoma de Occidente
Santiago, de Cali Colombia
Madeleyn.bastidas@uao.edu.co
diana.charfuelan@uao.edu.co

Abstract This document will carry out the correct way El microscopio normalmente cuenta con 3 objetivos de
to work with the light microscope, recognize its parts and distinto aumento (4x, 10x, 40x) ejemplo 10 x donde la
functions. The microscope allows us to see details and x indica que se amplifica una imagen 10 veces en su
structures that we do not observe a simple view. Its use is tamao real. Estos objetivos van montados sobre la base
not allowed to carry out research and discoveries that are
important in the field of medicine, engineering and other
giratoria que nos permite intercambiarlos para aumentar
branches of research de nuestra visibilidad cada vez se observa de manera ms
I. INTRODUCCIN ampliada es importante conocer que existen 2 tipos de
objetivos en seco e inmersin. En seco el aumento vara
Hay gran cantidad de clulas y microorganismos que de 4x a 40x y alcanza con el ndice de refraccin del aire
influyen significativamente en la vida de un ser vivo y que para que la imagen se forme ntidamente. En inmersin
por ello es fundamental ser estudiadas para mejorar la los lentes tiene aumentos que oscilan entre 90x y 100x en
calidad de vida. El instrumento que ayuda a que se realice estos lentes es necesario aumentar el ndice de refraccin
ese estudio utiliza microscopia de luz, es un instrumento para esto es necesario utilizar aceite.
de uso fundamental en el laboratorio para poder observar
a fondo algunos elementos como una lmina delgada de
cebolla, la mucosa salival, sangre y diferentes tipos de
tejidos de algunas especies. Adems es importante
conocer en qu consiste la microscopa confocal y el uso
del aceite de inmersin. Todo esto con el fin de conocer
ms detalladamente el elemento que estamos estudiando
y poder determinar algunas de sus partes y funciones.

II. DESARROLLO DE CONTENIDOS

A. Microscopio.
Instrumento que permite observar objetos que son
demasiado pequeos para ser observados a simple vista. Fig. 1 Detalle del
revolver porta objetivos y objetivos de uso
El microscopio cuenta con tres sistemas principalmente. habitual (4X, 10X y 40X) en un microscopio Olympus BHT.
Sistema mecnico: Son las piezas que no
intervienen en la formacin de la imagen ni en el
cambio de la luz un ejemplo: tornillo micro, B. Microscopia de luz.
platina, columna, etc. La microscopia de luz permite el paso de luz no alterada a
Sistema de iluminacin: est integrado por los travs de un sistema de lentes de manera de producir un
componentes encargados de colectar la luz, campo brillante donde se pueden observar pequeos objetos.
dosificarla, y dirigirla ejemplo: Espejo Para poder estudiar microorganismos como bacterias, hongos,
condensador, diafragma. parsitos, etc.
Sistema ptico: Incluye todos los elementos que
ayudan en la ampliacin de la imagen es decir los
objetos oculares: lentes del microscopio. III. OBJETIVOS
Entender el principio de la microscopa de luz, gota de agua encima de dicho elemento y debe ser
conocer las partes del microscopio y sus cubierta con una lmina cubreobjetos; se ubica
respectivas funciones. esta lamina en la platina del carro, con el objeto
Observar e identificar partes estructurales y tipo haca arriba y sujeta con las pinzas, para lograr
de tejido de las muestras con las que se desarrolla mayor precisin de lo observado se usan tanto el
el laboratorio. macrmetro como el micrmetro el proceso antes
Utilizar correctamente el microscopio de luz para descrito ser utilizado en la 5 muestras que
la observacin de estructuras con el detalle que trabajamos en el laboratorio.
permite su correcto uso.
Poder identificar glbulos rojos, glbulos
blancos, plaquetas, etc. Que se pueden observar
en la muestra de sangre.
Entender el funcionamiento y la diferencia de
cada objetivo (4x, 10x, 40x y 100X) que se
encuentran en el porta objetivos con el fin de
identificar y poder observar con mayor aumento.
Comprender la importancia y la funcin del aceite
de inmersin en la microscopia de luz.

IV. MATERIALES Y MTODOS.

A continuacin se enuncian los materiales con los que se


desarroll la prctica de laboratorio.
Fig. 2 Desarrollo de prctica de laboratorio primera muestra
bulbo de cebolla con gotas de reactivo de lugol.
Microscopio de luz
Lmina portaobjetos
Lmina cubreobjetos Como segunda muestra se tom una muestra de
Aceite de inmersin mucosa salival de una de las integrantes del grupo
Colorante azul de metileno en el cual se realiz el mismo procedimiento
Fino corte de cebolla antes descrito. En esta muestra no se observa
Muestra de sangre claramente las clulas ni estructuras de la
Muestra de esfago de conejo muestra.
Muestra de mdula sea roja de la vaca Tercera muestra Sobre la lmina limpiada
Gotas de reactivo lugol anticipadamente con alcohol, se coloca una gota
de sangre, se realiza un extendido de esta con la
ayuda de otra lamina y deje secar; se Trata el
Para iniciar con el desarrollo de la actividad en el extendido con metanol hasta que se evapore y se
laboratorio se deben conocer las partes que componen cubra toda la lmina con colorante de Wright, este
el microscopio de luz con el fin de que se obtuvieran se deja operar de5-8 minutos para finalmente
buenos resultados en cada uno de las muestras. De igual lavarlo con agua. Se sita la lmina en la platina.
manera se debi dar un previo estudio a la gua de Para lograr observacin de la estructura de la
laboratorio. muestra se mueven cada uno de los objetivos
En primera instancia se tom un trozo muy desde el mnimo (10x) hasta el mximo sin mover
pequeo de una de las escamas internas del bulbo la lmina y se ajusta la imagen segn la
de cebolla, retirando una pequea fraccin de la necesidad. Despus de observar las anteriores 3
epidermis de esta. Se observan la forma muestras se procedi a elegir 2 lminas de
estructural de la clula, el ncleo de la clula, los coleccin las cuales fueron medula sea roja de
nuclolos al igual que los leucoplastos de esta la vaca y esfago de conejo las observamos y
muestra. En este procedimiento se agrega una
encontramos las caractersticas mostrados en
cada una de las lminas.

Fig. 3 Lminas de coleccin lamina superior medula


sea roja de la vaca, lamina inferior esfago de conejo.
Fig.5 Imagen de resultados obtenidos en la segunda muestra
(objetivo40x superior izquierda, objetivo 10x inferior izquierda,
objetivo 4x lateral derecha).

C. Muestra de sangre.
V. RESULTADOS Y DISCUSIN.

A. Muestra Bulbo de Cebolla.

Fig.4 Imagen de resultados obtenidos en la primera muestra (objetivo4x Fig.6 Imagen de resultados obtenidos en la tercera muestra (objetivo4x
superior izquierda, objetivo 40x inferior izquierda, objetivo 10x superior superior izquierda, objetivo 40x inferior izquierda, objetivo 10x superior
derecha y objetivo 100x inferior derecha). derecha y objetivo 100x inferior derecha).

En esta muestra de capa fina de cebolla con objetiv 4x En esta muestra Gracias al colorante Wright se pudo
, 10x,40x y 100x tinturadas con lugol para observar ms diferenciar los glbulos rojos de los glbulos blancos.
detalladamente la muestra en forma de celdas alargadas, Los glbulos rojos son los que se encuentran en mayor
con burbujas de agua se logr diferenciar la membrana y cantidad. Los glbulos blancos son un poco ms grandes
el citoplasma sin embargo es difcil ver los organelos pero es mucho ms difcil verlos lo cual necesitan ser
celulares tales como el ncleo y el nuclolo de la clula. teidos. Y las plaquetas los puntos negros que se ven en
ms cantidad.
B. Muestra Mucosa Salival.
E. Muestra de esfago de conejo.

Fig.7 Imagen de resultados obtenidos en la tercera muestra de sangre en el


objetivo 100x en la que observa 1. Glbulos blancos, 2.plaquetas y 3.
Glbulos rojos.
Fig.9 Imagen de resultados obtenidos en la quinta muestra
(objetivo4x superior izquierda, objetivo 40x inferior izquierda,
D. Muestra de medula sea roja de la vaca. Objetivo 10x superior derecha y objetivo 100x inferior derecha).

Descripcion de esta no se que ponerle

VI. CONCLUSIONES.

Se pudo observar y analizar varias muestras


del laboratorio en las cuales se hizo un
reconocimiento de las diferencia de cada una
ests especialmente de muestras animales y
vegetales.
Fig.8 Imagen de resultados obtenidos en la cuarta muestra Se trabaj con una muestra de sangre y se logr
(objetivo4x superior izquierda, objetivo 40x inferior izquierda, identificar plaquetas, glbulo blanco, glbulos
Objetivo 10x superior derecha y objetivo 100x inferior derecha).
rojos.
Descripcion de esta no se que ponerle Se practic y mejoro el uso adecuado del
microscopio
Se conoci el uso del aceite de inmersin y
algunos colorantes que nos permiten tener una
mejor visibilidad de la muestra.
bazo, ganglios linfticos, entre otros. Su funcin es
comerse distintos microorganismos o restos celulares.
En los glbulos blancos polimorfo nucleares estn los
neutrfilos; que son de tipo granulocito, tiene un periodo
de vida de das o incluso horas, sin embargo, es el ms
abundante en el cuerpo humano y es el encargado de la
fagocitosis de hongos y bacterias. Tambin se encuentran
los basfilos; son los menos abundantes en la sangre y su
funcin es la respuesta alrgica a travs de la liberacin
VII. MEJORAS AL PROCESO. de histamina y serotonina en bajas cantidades,
entendiendo esto como respuesta inmunitaria del cuerpo.
Sera conveniente que al momento de realizar la Y por ltimo estn los eosinfilos, que son responsables
prueba con la muestra de sangre se pueda obtener en la patognesis de las enfermedades alrgicas y la
diferentes muestras de sangre para poder hacer muerte de parsitos.
una diferenciacin entre ellas.
3. Cul es la funcin del aceite de inmersin en la
microscopa de luz?
El aceite de inmersin para microscopa tiene
VII.CUESTIONARIO.
aproximadamente el mismo ndice de refraccin que el
1. En qu consisten la microscopa confocal? vidrio. Mediante el aceite de inmersin se elimina casi
completamente la desviacin de los rayos de luz y se
El microscopio confocal cuenta con un lser y un sistema aumenta considerablemente la eficacia de los objetivos de
de barrido para permitir que la persona que lo est los microscopios. Funcin principal es aumentar la
utilizando tenga un imagen ms clara y especfica en el resolucin que ofrece el microscopio, se consigue cuando
plano que se requiera observar, sin ignorar ninguna de las se hace inmersin en aceite transparente que tiene alto
dimensiones. Cuenta con tres fuentes de luz las cuales son ndice refractivo del lente del objetivo como el objeto que
lmpara de luz visible, lmpara de vapor de mercurio y se tiene en observacin.
lser; que parte de aportar a la definicin de la imagen
modifican el contraste permitiendo que la observacin sea
ms precisa y detallada. En conclusin la microscopa
confocal permite observar imgenes tridimensionales de REFERENCIAS
la morfologa de la muestra con la que se est trabajando.

2. Cules son las clases de glbulos blancos que [1] Acosta, Karla. 2015. SlideShare. Normas de
existen y cul es la funcin de cada clase? bioseguridad en el laboratorio. [En lnea] 03 de abril de 2015.
[Citado el: 17 de Agosto de 2017.]
Los glbulos blancos o tambin llamados leucocitos son https://es.slideshare.net/KarliAcos95/normas-de-bioseguridad-
clulas de respuesta inmunitaria de nuestro organismo; se en-el-laboratorio-46956486.
encuentran en la sangre y son los llamados defensas de [2] Agronmica, Escuela Tcnica superior de Ingeniera. 2013.
nuestro organismo. Los glbulos blancos se clasifican de Uniersidad Politecnica de Valencia. [En lnea] 12 de Myo de
acuerdo a sus ncleos en mononucleares y polimorfo 2013. [Citado el: 19 de Septiembre de 2017.]
nucleares. http://www.euita.upv.es/varios/biologia/Pr%C3%A1cticas/Pr
%C3%A1ctica%201.pdf.
En los mononucleares estn los linfocitos; estos son [3] Dep. Ciencias Funcionales, Seccin de Fisiologa
glbulos blancos de menor tamao encargados de Fisiologa I. 2012. Universidad Centroccidental Lisandro
reaccionar frente a materiales extraos, son encargados de Alvarado. [En lnea] 02 de Abril de 2012. [Citado el: 19 de
la inmunidad especfica o adquirirla. Tambin estn los Septiembre de 2017.]
monocitos, que son glbulos blancos agrunolocitos, son http://www.ucla.edu.ve/dmedicin/departamentos/fisiologia/Ma
terial%20Skirzewski/Tema%2028.pdf.
ms grandes que los anteriores y se generan en la medula
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sea pero como viajan a diferentes rganos a travs de la
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sangre se pueden encontrar en tejidos como los pulmones, de 2017.]
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(Vikidia, 2017)