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UNIDAD 4:
Crecimiento Microbiano
Bibliografa:

Brock. 10ma edicin. Cap 6, 20.


Brock.12va Edicin. Cap 6, 27.

Lo que se obtiene con violencia, solamente se puede mantener con


violencia. -- Gandhi

CRECIMIENTO MICROBIANO
Definicin: Crecimiento mibrobiano es el aumento en nmero de clulas (y no
en tamao).

Divisin celular por fisin binaria

Tiempo de generacin: el tiempo


transcurrido desde que una clula
se divide y da 2 nuevas clulas.
Vara entre 0.5-6 horas.

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Fisin Binaria

Las protenas Fts son esenciales para la divisin celular en bacterias y


arqueas.
Forman una estructura llamada dividisoma.
Las molculas de FtsZ forman un anillo.
El dividisoma es responsable de la sntesis de membrana plasmtica y pared
celular, que formar el septo de divisin.

Crecimiento exponencial

La pendiente de la curva aritmtica, aumenta constantemente.

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Curva de Crecimiento
Es la tasa de crecimiento de una poblacin analizada en un sistema
cerrado, medida como el logaritmo del nmero de clulas vs. el
tiempo de incubacin.

Fase de latencia: es un perodo de inactividad en el cual las clulas se adaptan al


nuevo ambiente.
Fase exponencial: es un perodo donde los organismos crecen a su tasa mxima.

Fase estacionaria: el nmero de clulas vivas se mantiene constante. Tasa de Nacimientos


= Tasa de muerte.Se debe a la falta de nutrientes, deshechos txicos, etc.

Fase de muerte: los organismos mueren a una tasa exponencial.

Preguntas

Cunto tiempo vive una bacteria? Y una archaea?

En qu situacin podra ser que la curva de crecimiento de una bacteria no


tuviera una fase de latencia?

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Mediciones del crecimiento microbiano

Medicin del nmero de clulas:

- mtodos de recuento directo


- recuento de clulas viables.

Medicin de la densidad o masa celular:

- por peso seco


- por luz dispersada
- por determinaciones bioqumicas.

Mediciones del crecimiento microbiano

Medicin del nmero de clulas:

- metodos de recuento directo

Se utiliza una cmara de recuento (cmara de Neubauer) que se observa


al microscopio ptico para estimar el nmero total de clulas en el cultivo.

Desventajas:
El mtodo no sirve para cultivos poco densos o con clulas mviles.
Frecuentemente es necesario teir las clulas.

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Mediciones del crecimiento microbiano

Medicin del nmero de clulas:

- recuento de clulas viables.

Siembra por extensin

45-50C

Siembra por vertido en placa

Mediciones del crecimiento microbiano

Antes de la siembra, el cultivo debe diluirse para obtener 30-300 UFC en cada
placa.

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Mediciones del crecimiento microbiano

Medicin de la densidad o masa celular:

- por turbidez, mediante un espectrofotmetro.

Este mtodo requiere la preparacin de un estndard que relacione el


nmero de clulas con la turbidez.

Es problemtico para muestras de organismos que forman agregaciones


o biofilms. Se suele realizar agitacin.

Preguntas

Se ha visto que los recuentos de UFC revelan nmeros menores que los
recuentos directos al microscopio. Por qu?

Piensa que el mtodo de turbidez subestima o sobreestima el nmero de


bacterias presentes?

Si se le pide que realice una estimacin del nmero de bacterias


presentes en un cuerpo de agua contaminado. Qu mtodo utilizara
y por qu?

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Factores ambientales y el crecimiento


Temperatura

Las temperaturas cardinales son caractersticas de cada organismo

Temperaturas cardinales:
- mnima
- ptima
- mxima

La temperatura ptima est


ms cerca de la mxima que
de la mnima.

La amplitud de temperaturas
en que puede vivir un
organismo es de 25 a 40
grados.

Factores ambientales y el crecimiento

Temperatura Clases de organismos de acuerdo a la temperatura


Distintas especies tienen una tasa mxima (ptima) de crecimiento a
diferentes temperaturas.

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Factores ambientales y el crecimiento

Bajas temperaturas

Psicrfilo: organismo cuya temperatura ptima de crecimiento es <15C.

Psicrotolerante: organismo que puede vivir a 0C pero cuya


temperatura ptima de crecimiento es 20-40C.

Adaptaciones de los psicrfilos:


Enzimas con estructura secundarias que les permiten funcionar a bajas
temperaturas y que se desnaturalizan a bajas temperaturas.

Las membranas tienen mayor contenido de cidos grasos insaturados,


para que sea fluida a bajas temperaturas.

El lmite inferior de crecimiento es -12C (cuando hay pequeos


microhabitats con agua lquida).

Factores ambientales y el crecimiento

Altas temperaturas

A temperaturas > 65C, solo procariotas se han encontrado.

Termfilos: con temp. ptima de crecimiento >45C.


Hipertermfilos: con temp. ptima de crecimiento >80C.

Existen Bacteria y Archaea hipertermfilas.

Hbitats con altas temperaturas estn asociados a fenmenos


volcnicos: fuentes hidrotermales terrestres o submarinas.

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Fuentes hidrotermales submarinas


Asociados a centros de expansin del
fondo ocenico: el magma hace que el
fondo se separe.

Agua marina se filtra por grietas y sale a


gran presin.

Tipos de fuentes hidrotermales


submarinas:

Fuentes templadas: 6-23 0C

Fuentes calientes: 270-380 0C


(chimeneas negras: precipitados)

Vida en altas temperaturas

Estabilidad de monmeros: los monmeros como el ATP son estables hasta


130-1500C. Lmite de la vida?

Estabilidad de protenas: ncleos hidrofbicos, plegamiento particular con


chaperoninas especiales.
Estabilidad de DNA:
- altas cantidades de 2,3 difosfoglicerato potsico cclico (sal): evita dao qumico.
- DNA girasa reversa: vueltas positivas en el DNA.
- Protenas que aumentan el punto de fusin o desnaturalizacin del DNA.

Estabilidad de los lpidos: evitar la desintegracin de membranas:


- con cidos grasos saturados
- membrana con bifitanil tetrater (monocapa lipdica): en archaea.

Estabilidad del rRNA SSU: mayor proporcin de GC

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Factores ambientales y el crecimiento

pH (potencial de Hidrgeno): 0-14

Cada organismo tiene un pH ptimo de crecimiento.

Acidfilos: pH ptimo <6


Ej. Hongos, bacterias.

Acidfilos obligados: no pueden crecer a pH=>7.

Factor importante: estabilidad de la membrana

Alcalfilos: pH ptimo de crecimiento >9.

Factor importante: fuerza protn motriz es reemplazada


por Na+.

Factores ambientales y el crecimiento

pH (potencial de Hidrgeno)

Aunque algunos organismos sean


HABITAT
capaces de vivir a pH alto o bajo,
el pH interno de todas las clulas
es ~ pH neutro.

Neutrfilos

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Factores ambientales y el crecimiento

Disponibilidad de Agua Depende del contenido de agua en el ambiente y de la


concentracin de solutos.

Cuando la concentracin de sales aumenta, la disponibilidad de agua es limitante.


En un medio hipertnico, el agua tiende a salir de las clulas.

Efecto del sodio (Na) en el crecimiento de los microorganismos.

Halotolerantes: tasa ptima en


agua pura, pero toleran cierta
concentracin de NaCl.

Halfilos: tasa ptima de


crecimiento a concentraciones
de NaCl 3%.

Halfilos extremos: tasa ptima


de crecimiento a concentraciones
de NaCl 15-30%.

3% 15-30%

Factores ambientales y el crecimiento

Disponibilidad de Agua

Los organimos halfilos acumulan solutos intracelularmente para mantener un


balance positivo de agua.
Deben tomar solutos del ambiente, sintetizarlos o concentrar un soluto orgnico.
Ejemplos: azcares, alcoholes, amino cidos, iones

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Factores ambientales y el crecimiento

Oxgeno
- No todos los organismos necesitan oxgeno para vivir.
- Muchos habitats naturales son anxicos y hay microorganismos que
viven de forma ptima all.

Clases de organismos en relacin al oxgeno:

Anaerobios: no pueden utilizar el oxgeno.

Preguntas

Cree que la temperatura ptima de crecimiento refleja las de su habitat?

Entre un organismo aerobio facultativo y otro anaerobio obligado, cul


tiene ms probabilidades de sobrevivir en el mundo actual? Por qu?

Un organismo termfilo extremo, qu relacin tendr con el oxgeno?

Qu ocurrira si una bacteria halfila es colocada en agua destilada?

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Proxima clase 5 de septiembre:


Miercoles 15-18hs

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