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4 BIOACUMULACIN Y DAOS GENOTXICOS EN CULTIVOS DE
5 CEBADA CERVECERA (Hordeum distichon L) Y HABAS (Vicia faba)
6 POR PRESENCIA DE ARSNICO EN AGUAS Y SUELOS DE
7 ZIMAPN, HIDALGO, MXICO.
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12 Autores: Francisco Prieto Garca*; Judith Callejas Hernndez; Alma D. Romn Gutirrez; Judith Prieto
13 Mndez; Rosa I. Beltrn Hernndez
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17 Universidad Autnoma del Estado de Hidalgo; Centro de Investigaciones Qumicas,
18 Carretera Pachuca-Tulancingo km. 4.5, C.P. 42076, Pachuca, Hidalgo, Mxico
19 *prietog@uaeh.reduaeh.mx
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2 RESUMEN
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4 La contaminacin por arsnico en aguas, suelos y cultivos de Zimapn, estado de Hidalgo, Mxico,
6 lo que los cultivos que se cosechan, con esos recursos presentan apreciables concentraciones de
7 arsnico, tal es el caso de los cultivos de cebada y haba. Los suelos estudiados presentaron texturas
9 redox y contenidos de materia orgnica. El cultivo de habas present mayor bioacumulacin en sus
10 etapas de desarrollo comparado con el cultivo de cebada, esto est directamente afectado por el
11 tiempo de exposicin (mayor perodo vegetativo), as como mayor nmero de riegos. En la raz de los
12 dos cultivos se presentaron las ms altas concentraciones de As acumuladas, seguidas por el tallo y
13 las hojas; ste ltimo es el que present los mas altos valores de ndice de bioacumulacin (IBA) lo
14 cual sirve como indicativo para estimar niveles de contaminacin por As en suelos. Los IBA obtenidos
-1
15 en ambos cultivos los clasifican como de niveles medios (entre 10 y 1), como plantas verdes. En los
17 raz, por la presencia de arsnico en aguas de Zimapn con respecto al grupo control (agua de
18 Pachuca). La frecuencia de clulas en divisin, la distribucin de stas por etapa del ciclo celular y el
19 nmero de MNs encontrados en las muestras presentaron diferencias significativas. Esto es indicativo
20 de que no existe slo un dao genotxico, sino que el compuesto sea ms txico que mutgeno y el
21 efecto mutagnico est encubierto por el efecto txico. El ndice mittico como criterio para evaluar el
22 dao fisiolgico que provoca el As como agente xenobitico demostr que produce inhibicin de la
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1 INTRODUCCIN
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3 La acumulacin de los metales pesados en slidos, sedimentos y tejidos vegetales, por adsorcin y/o
6 consecuencias negativas para el entorno ecobiolgico, ya que variaciones del medio circundante a los
8 disuelto y con ello accesibles a los sistemas acuosos y seres vivos; por otra parte su acumulacin en
9 tejidos vegetales, pueden llegar a producir daos genotxicos en sus clulas. No slo resulta de
10 inters el conocimiento de los niveles de concentracin total de los elementos metlicos que se
12 vegetales de alta sensibilidad, que provocan daos genotxicos en sus clulas y su incorporacin en
13 seres humanos y animales a travs de productos de consumo. Se puede decir que la toxicidad o
17 general, la absorcin de elementos traza por las plantas se ve afectado, en la disponibilidad especfica
18 del cultivo en cuestin, y por otros factores del suelo; entre los ms significativos se pueden sealar el
19 pH, potencial redox (Eh), el contenido de materia orgnica (M.O.), la capacidad de intercambio
20 catinico (CIC), el rgimen del agua (Riegos), el contenido de arcilla (Textura del suelo), el balance y
22 generalmente una temperatura ambiental influye en una mayor absorcin de elementos traza en la
23 planta [1].
24 El contenido en metales de los alimentos tanto de origen vegetal como animal dependen de muchos
25 factores; entre los que hay que destacar las condiciones medio-ambientales, los mtodos de
27 del suelo. El margen entre toxicidad y deficiencia es muy pequeo por lo que no siempre es posible
28 delimitar claramente que metales son esenciales y cules txicos; una simplificacin de las leyes del
29 mnimo y el mximo en el campo de la nutricin indica que por cada elemento nutriente existe una
30 cantidad mnima y otra mxima entre las cuales el desarrollo del organismo es adecuado. Fuera de
1 estos mrgenes aparecen manifestaciones patolgicas como las enfermedades de deficiencia y las
2 intoxicaciones, respectivamente.
3 A travs del estudio de dieta total (EDT) se ha determinado la ingesta del arsnico [2]. Estos autores
4 reportaron que en un EDT para el perodo 1990/95 la ingesta de este elemento se estim a partir de su
5 determinacin en los 16 grupos de la dieta que fueron sometidos a estas evaluaciones. En la tabla 1
6 aparecen los resultados junto con los valores de referencia de la FAO/OMS Ingestas Semanales
8 INSERTA TABLA 1
12 susceptibles a ser fitodisponibles que otros [3]; en este trabajo se evalan los IBA para dos cultivos:
14 aunque es absorbido por las plantas en concentraciones a la de sus suelos [4]. La captacin del
15 arsnico es mayor en las races, que en las semillas y los frutos. En algunos casos, niveles de
16 arsnico tan bajos como de 0.7 ppm pueden reducir el rendimiento de los cultivos en un 50% [5]. Para
20 una planta monocotilednea anual perteneciente a la familia de las gramneas, representada por dos
21 importantes especies cultivadas: Hordeum distichon L., y Hordeum hexastichon L., su perodo
23 El haba, Vicia faba L., es una especie dicotilednea anual, perteneciente a la familia de las
24 papilionceas; el perodo vegetativo del haba puede ser hasta de 7 meses dependiendo del tipo de
25 variedad, es posible distinguir tres variedades botnicas, las cuales se diferencian fundamentalmente
26 en el tamao de sus semillas [8]: Vicia faba L. var. Minor, sus semillas son de tamao pequeo, de
27 forma elipsoidal, sus vainas son cilndricas y contienen de tres a cuatro semillas; Vicia faba L. var.
28 equina Pers., sus semillas son de tamao mediano, de forma aplastada, las vainas, que son de
29 tamao intermedio, presentan una dehiscencia moderada y contienen tres a cuatro semillas y Vicia
1 faba L. var. major, es la ms usada para consumo en verde; sus semillas son de tamao grande, sus
3 La ciudad de Zimapn, Hidalgo, se encuentra ubicada dentro del distrito minero del mismo nombre, y
4 pertenece a la regin hidrolgica RH-26 del Pnuco, parte Norte de la Cuenca del Valle de Mxico, y
5 pertenece a la Sub-cuenca del Ro Moctezuma (figura 1). Los contenidos de As natural resultan
7 Rejalgar, As2S2; Oropimento, As2S3; Loellingita, FeAs2 y Tennantita, Cu12As4S13 entre otros [6]. As
8 tambin, las actividades mineras para la extraccin de Pb, Zn, Cu, Fe, Ag y Au de los recursos
9 minerales de la zona [10] pueden traer como consecuencia un incremento en el contenido de As en las
10 aguas de los pozos, norias y manantiales de la regin, rebasando los lmites mximos permitidos (0.02
11 mg/L) por la Normativa Oficial Mexicana [11], por lo que la poblacin que actualmente se estima
12 cercana a los 42,000 habitantes [12], estn afectadas y/o habituadas a este elemento.
13 INSERTAR FIGURA 1
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15 METODOLOGA EXPERIMENTAL
16 Se tom una muestra de suelo del poblado El Salitre (crculo negro en la figura 1), cultivable
-1
17 sistemticamente y con contenidos de As que oscilan entre 10.45-13.58 mg.Kg [13]. Se realiz en un
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18 rea de 180 m , considerando una profundidad de 30 cm. de suelo (capa arable); en iguales
19 cantidades, se tomaron muestras de suelo de una regin de Actopan no contaminada por As. Fueron
20 sometidas a homogenizacin y cuarteo para el llenado de 25 macetas para cebada y 25 para habas.
21 Otras muestras fueron las semillas de cebada de la variedad Esmeralda D-130, suministrada por el
24 control, las aguas utilizadas para el riego en macetas, aguas del Distribuidor general de Zimapn y
25 aguas de pozo de Pachuca; las primeras con contenidos de As de 0.40 mg/L y las segundas sin este
26 elemento. A los suelos se les realiz los anlisis segn [14] y a las aguas segn [11]. Los riegos se
27 realizaron dos veces al mes con adiciones de 500 ml de agua por maceta. El montaje en maceta se
28 realiz segn el esquema que se muestra en la figura 2. Se colocaron 5 rplicas de macetas por cada
29 serie (de la A a la E); cada una de stas conteniendo 5 semillas de cada cultivo.
30 INSERTAR FIGURA 2
1 La bioacumulacin de arsnico se evalu como un ndice relativo al contenido en suelos y aguas. Se
2 tom en cuenta la concentracin media bioacumulada por cada parte del cultivo para cada etapa del
[ As ] pc
4 IBAs = donde:
[ As ]a + s
5
-1
6 [As] pc es la concentracin de As, en mg.kg en la parte del cultivo en evaluacin
-1
7 [As]a+s es la concentracin total de As en mg.kg como suma de agua y suelo.
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11 RESULTADOS Y DISCUSIN
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13 Del anlisis fsico-qumico de suelos en fase inicial se observ que ambos presentan pH
14 moderadamente alcalinos, son reductores intermedios (Eh) y contenidos medios de materia orgnica
15 (MO) y difieren en sus valores de Salinidad (CE), humedades, texturas y contenidos de arsnico (Tabla
16 2). Los contenidos de As en semillas fueron despreciables (Tabla 3); y los resultados de los anlisis de
17 aguas reflejaron caractersticas similares y slo difieren en los contenidos de As (Tabla 4), el agua de
19 moderadamente alcalinos pueden favorecer la absorcin del As que lixivie as como los contenidos
21 medios acuosos. Los resultados de [As] en las semillas indican que estn prcticamente libres de este
22 contaminante por tanto son vlidas para el experimento. A pesar de que en Mxico no est normado el
24 considerar como libres de As. Por ota parte los anlisis de las aguas muestran que ambas son
25 similares en pH, potencial redox (Eh) y conductividad, pero se diferencian en los contenidos de As,
26 donde el agua de Zimapn rebasa la norma oficial mexicana 20 veces [14, 15] y unas 40veces la
28 INSERTAR TABLAS 2, 3 Y 4
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1 En las figuras 3 y 4 se indican los niveles de bioacumulacin de As por etapas del desarrollo y rganos
2 de cebada y haba, respectivamente. Se resaltan los niveles de acumulacin en races, hojas y tallos,
4 muestran los IBA de As y de manera similar se aprecia que los mayores niveles se alcanzaron en
5 races, hojas y tallos. Pero adems tanto en granos de cebada como de habas se observ que los
7 sobrepasa 4 y 8 veces los ndices normados como lmites mximos permisibles para As en granos,
9 INSERTAR FIGURAS 3, 4 Y 5
11 habas se pudo apreciar (Tabla 5) una inhibicin en la divisin celular en sus diferentes etapas del ciclo
12 de divisin celular, por presencia de As, sin poder definir en cual etapa del ciclo celular se produce;
13 asimismo un efecto de aparicin de MNs que pone de manifiesto el efecto citotxico del As pero a su
14 vez un cierto efecto mutagnico tal vez encubierto por ser ms txico este elemento.
15 INSERTAR TABLA 5
16 Segn la valoracin del ndice mittico se apreci diferencia significativa y se corrobor que el efecto
17 citotxico acta de forma independiente a la etapa de divisin celular (Tabla 6). En la figura 6 se
18 muestran las clulas de los meristemos y la presencia de MNs por la incidencia del As presente en el
19 agua de Zimapn.
20 INSERTAR TABLA 6
21 De todo este estudio se podido concluir que el cultivo de habas presenta mayor bioacumulacin entre
22 sus etapas de desarrollo comparado con el cultivo de cebada, esto tal vez por tener un perodo
23 vegetativo mayor que la cebada. Esto nos permite definir que este cultivo puede servir como indicador
24 biolgico de la contaminacin de suelos por As. En la raz de los dos cultivos se presentan las ms
25 altas concentraciones de As acumuladas, seguidas por las hojas y el tallo; ste ltimo rgano es el de
26 valores de IBA ms altos, los cuales sirven a su vez como rganos particulares del cultivo para
27 estimar los niveles de contaminacin de suelos por As. Se ha podido apreciar que la textura de los
29 La frecuencia de clulas en divisin, su distribucin por etapa del ciclo celular y el nmero de MNs en
30 las muestras control y experimentales indican que la frecuencia de aparicin de MNs en los grupos
1 experimentales difiere del grupo control, presentando pequeas diferencias significativas desde el
2 punto vista estadstico. Esto sugiere la idea de que no exista un dao genotxico, sino que el
3 compuesto sea mas txico que mutgeno y el efecto mutagnico est encubierto por el efecto txico.
4 El ndice mittico como criterio para evaluar el dao fisiolgico que provoca el As (agente xenobitico)
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8 BIBLIOGRAFA
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12 1. MARTNEZ PEZINA H. F. Estudio de la acumulacin de los metales pesados en cultivos de
13 secano, en el distrito de riego 03 del valle del Mezquital. 2002. Tesis de Licenciatura. Universidad
15 2. GMEZ, M.; URIETA, I.; MACHO, M.L.; AZPIRINI, M. Vigilancia de la Contaminacin Qumica
17 publicaciones del gobierno Vasco, Ed. Victoria Gastsis, Espaa, 1997, p. 32-41.
18 3. KABATA-PENDIAS, A.; PENDIAS H. Trace elements in Soils and Plants, CRC Press LLC, Third
20 4. O'NEILL, P. Arsenic. Heavy Metals in Soils. Part. B. Alloway, ed. London: Blackie Press. 1990.
21 5. PETERSON, P. & GIRLING, C. Other Trace Metals. Impact of Heavy Metal Pollution on Plants.
22 Volume 1: Effects of Trace Metals on Plant Function, N. Lepp, ed. London: Applied Science
23 Publishers. 1980.
25 presencia de Arsnico. Informe final. IICT-Universidad Autnoma del Estado de Hidalgo, Mxico.
30 8. BIANCO, V. V. & F. PIMPINI. Orticultura. Ptron Editore, Bologna, Italia. 1990. p.991.
1 9. CARDENAS, V. J. Geological-Mining monograph of the State of Hidalgo. Secretaria de Energa
7 11. NOM-127-SSA1-1994 Norma Oficial Mexicana (Revisin 2000). Salud ambiental, agua para
8 uso y consumo humano. Lmites permisibles de calidad y tratamiento a que debe someterse para
10 12. PREZ MORENO F. Lixiviacin y Precipitacin de Arsnico en aguas y lodos de pozos del
11 distribuidor general de Zimapn, Hidalgo. 2004. Tesis Doctoral. Universidad Autnoma del Estado
14 sensibles por presencia de arsnico en aguas y suelos de Zimapn, Hidalgo. 2002. Tesis de
19 15. BEZ RAMREZ A., PRIETO GARCA F. GALN VIDAL C. A. Bioacumulacin y daos
20 genotxicos en Pez Cebra (Danio rerio) por arsnico en aguas de Zimapn, Hidalgo (Mxico).
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1 Tabla 1. Ingesta de arsnico e Ingestas Semanales Tolerables Provisionales (ISTPs) de 1990
2 1995 [2].
3
Lmites FAO/OMS
Metal INGESTA ISTP g/Kg. (*)
(ao) g/da
(*) g/da
Peso/semana
(**)
ARSNICO
1990 255
1991 326 7
1992 271 (OMS,1993) Nr
1993 282
1994 345
1995 303
4 * Considerando un peso corporal de 68 Kg., que es el peso medio de los participantes en la encuesta
5 nutricional.
6 ** No aplicable. ISTP para arsnico inorgnico, slo para arsnico total.
7 Organizacin Mundial de la Salud (OMS)
8 Nr: NO REPORTADO
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24 Figura 1. Ciudad de Zimapn, Hidalgo, pertenece a la regin hidrolgica RH-26 del Pnuco,
25 parte Norte de la Cuenca del Valle de Mxico, Sub-cuenca del Ro Moctezuma. Lnea en color
26 gris: Zona limtrofe en la parte Norte de la Cuenca del Valle de Mxico. Crculo negro: Zona de
27 estudio [12].
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4 rea para semillas de cebada rea para semillas de
5 haba
6 5 5
7
4 4
8
9 3 3
10 2 2
11 1 1
12
13 A
Ac B CcC Dc DEc
Bc A
Ah B
Bh ChC Dh DEh E
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16 Figura 2. Esquema representativo del estudio de bioacumulacin de arsnico en macetas para
17 cultivos de cebada y haba.
18 Leyenda:
19 c: Cebada; h: Habas
20 Ac y/o h: SZ-Suelo de Zimapn (Salitre), regado con AZAgua de Zimapn (Distribuidor). EXPERIMENTO I. (A)
21 Bc y/o h: SZ-Suelo de Zimapn (Salitre), regado con AP-Agua de Pachuca (Pozo UAEH). EXPERIMENTO II. (B)
22 Cc y/o h: SA-Suelo de Actopan (Huaxtho), regado con AZ-Agua de Zimapn (Distribuidor). EXPERIMENTO III. (C)
23 Dc y/o h: SA-Suelo de Actopan (Huaxtho), regado con AP-Agua de Pachuca (Pozo UAEH). CONTROL NEGATIVO. (D)
24 Ec y/o h: SZ-Suelo de Zimapn (Salitre), regado con AC-Agua contaminada con arseniatos. CONTROL POSITIVO. (E)
25
26 Tabla 2. Resultados de anlisis fisicoquimicos de los suelos.
27
28 pH Eh CE
-1
% MO % N total [As]
-1
% Humedad Textura
Suelo (mV) (dS.m ) (mg.Kg )
29 %Arcilla %Arena
30 Actopan 8.1450 -81.84 2.38 2.2753 0.7790 1.6583 19.0816 26.00 42.00
31 (0.0520) (1.2661) (0.1950) (0.2202) (0.3150) (0.1073) (0.1876) (2.00) (2.00)
Zimapn 7.9006 -70.34 0.22 1.7046 0.1450 12.7353 6.3313 7.3333 72.67
32 (0.0348) (2.1755) (0.0179) (0.1682) (0.0350) (0.3183) (0.1045) (0) (3.05)
33
34 Tabla 3. Concentracin de As en semillas
35
S e mi l l a [As] mg.Kg-1
Cebada 0.0137 (0.0019)
Haba 0.0138 (0.0020)
36
37 Tabla 4. Anlisis fisicoqumicos de aguas
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39 Agua de Agua de
40 Pachuca Zimapn
Parmetros
41 [15] [12]
42 pH 8.35 (14.53) 7.5(1.0)
43 Eh (mV) -86.2 (1.55) -61.6 (3.09)
44 Conductividad
45 0.69 (10.91) 0.52 (6.0)
(dS.cm-1)
46 -1
[ As] mg.L-1 < L.D. 0.40 (0.05)
47
1
2
3
4
5 [As]
mg.kg-1 [As] por rgano/etapa
6
9
10
S1 S2 R1 R2 R3 R4 R5 H1 H2 H3 H4 H5 T2 T3 T4 T5 E4 E5 G4 G5
11
12 Figura 3. Bioacumulacin de As en el desarrollo de la cebada rgano
13
14
15 [As] [As] por rgano/etapa en Habas
mg.kg-1
16 5.10
17 4.80
18 4.50
19 4.20
20 3.90
21 3.60
3.30
22 3.00
23 2.70
24 2.40
25 2.10
26 1.80
27 1.50
28 1.20
29 0.90
30 0.60
31 0.30
S1 S2 R1 R2 R3 R4 R5 H1 H2 H3 H4 H5 T2 T3 T4 T5 E4 E5 G4 G5
0.00
32 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20
33 A B C D
34 rgano
35 Figura 4. Bioacumulacin de As en el desarrollo del haba
1
ndice de Bioacumulacin en cebada
2
IBA S1 S2 R1 R2 R3 R4 R5 H1 H2 H3 H4 H5 T2 T3 T4 T5 E4 E5 G4 G5
3
8.00
4
5 7.00
6 6.00
7 5.00
8
9 4.00
10 3.00
11 2.00
12
1.00
13
14 0.00
15 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20
16 A B C D E
17 rgano
18 A)
19
ndice de Bioacumulacin en Haba
20 IBA S1 S2 R1 R2 R3 R4 R5 H1 H2 H3 H4 H5 T2 T3 T4 T5 E4 E5 G4 G5
21 10.00
22 9.00
23
8.00
24
25 7.00
26 6.00
27 5.00
28 4.00
29
3.00
30
31 2.00
32 1.00
33 0.00
34 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
A
13
B
14 15
C
16
D
17 18
E
19 20
35 rgano
36 B)
37
38 Figura 5. IBA de As a) Cultivo de cebada; b) Cultivo del haba
39
40
41 Tabla 5. Frecuencia de clulas en divisin por etapas del ciclo celular y de induccin de MNs
42
Clulas en divisin por etapa del ciclo
Frecuencia de
clulas celular Microncleos
en divisin I P M A T
Control 55/1000 15 19 1 15 4 1
Experimental 37/1000 7 7 4 4 4 11
1
2
3 Tabla 6. Frecuencia de clulas en divisin por etapas del ciclo celular por ndice mittico. (+)
2
4 Indica diferencia significativa por prueba de X .
5
Frecuencias de
Interfase Profase Metafase Anafase Telofase
Clulas en divisin
Control 46/1000 15 20 1 9 1
Experimental 17/1000(+) 4 6 0 6 1
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20 A) B)
21 Figura 6. Clulas meristemticas de habas en etapas de divisin celular. Presencia de MNs por
22 presencia de As en aguas. A) En agua de Pachuca, B) En agua de Zimapn.
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