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resto s
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infinalrep resentaunp roblemaamb ien ta
l.
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insedes tinapa ralaa limen tac
inan imal,s
iendounp roceso
cos tosoyaquelasp lumassedebene ste
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.O t
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rradosonusado spa rasud isposi
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,pe roes tossonpocoam igab les
con e lamb iente. La quema de p lumas gene ra gases quecon tam inan e
la irey pa rasu
d
ispos ic
inenre llenosserequ iereng randeslo tesdet ierrasiendosudes compo s
ic
in muy
len ta(Fan ,X .2008 ).Lasp lumasco rrespondena l5-7%de lpesode lpo l
lo(Sch rooyenyco l
.,
2007 ;Fan ,X .,2008 ),estncon formadaspo runapa rtecen tra
lconoc idacomoraqu i
s,quele
s
irvedee jeyo torgalar igidezn ecesariapa ra mantene r
lafirme;lapa r
teinfer
iormsan chay
r
igidapo rlacua llap lumaseunealap ie
lsedenom inaCa lamu s ylasba rbassonl minas
delgada senpo sicinpe rpendicularalraqu is(Figura1 ).Lasp lumase s
tncompues ta sen
un90%dep rote
nacono cidacomoque rat
ina.

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inassonp rotenasf ibrosa sconoc idascomoes clerop rote
nas;sonres istentesa
losfac toresf s
i cos, qu mi cos y amb ientales y soninsen sibles a
la taque p roteol
tico
enzimticocomolat r
ipsinaylapeps ina.(Ko rni

owicz-Kowa lsk yco l
.,2011 ).Tienenuna
grancan t
idaddec istenap re sen tefo rmandoe lenlaced i sul
fu rodeld me rocis
tina .E stos
enlacesseen t
rec ruzanes tab lec iendounaredt rid
imen sionaldecadenaspo l
ipept
idi casyen
conjuntoconlosres iduo sh id r fobicoshacenquelaque ratinaseainso lubleenaguayen
solventes apolares;s in emba rgola ca racteri
rst
ica de so lub i
lidad dela p ro
tena puede
modif
icarse realizandoco rte ssob relosen lacesd isu
lfuro(Sch rooyenyco l .
,2000 ).Alguno s
mtodosf s
icoqum i
cos como e l ca lentam iento dela p rotena en a lguno s so lventes
orgnico s
,como e lD ime t
ilformam ida(DMF )y D ime t
il
sulfoxido(DMSO ) hans ido u sados
paraob tenerque rat
inaso lub le.(Ko rni
lloww icz- Kowalskayco l.;2011 )
.

Enla a ctua
lidad,elinters pore ldesa rro
llo de produc tossos tenib
les ambientalmente a
part
irdep ro
tena sdedesechos ,e stincrementando .(Schrooyenyco l
.,2000).
Las ap l
icaciones delos p roduc tos de r
ivados dela que ra t
ina a n ive
l co sm t
ico y
farma cet
icoson muyamp l
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ias
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lases decompue s
tosy en te jidos biodegradables .Lasca rac ter
st
icas de estetipo de
protena la hacenap rop
iadas pa rala manu factura def ib ras pa ra usoste xt
iles con
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i caciones md i
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rias.(Ko rn
i
owicz-Kowal skyco l.,2011 ).
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tirderes iduosde
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lo)con a l
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ibuyendo ala
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talcausadapo rdichores iduo.

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:Las p lumas congeladas selava ron con agua
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tacincon s
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irandoe l materia
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cos,f
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izunlavadof inalconuna
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tano l96%(50 :50)cone lf
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te.
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iormen te e scurr
ierony f i
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lac ribada ylienzopa raluego seca r
las en
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ieron y se
desengrasa roncon terdepe tr
leo(10mL /gdep lumaseca)conag itacincon s
tantepo r4
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turaamb ien
tepo r2hspa ra
remo vere lex cesodeso lvente;finalmenteseseca ronenestu
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tacincons
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.,2007).

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li
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l
.,
2007
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luc
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ina l
cal
inadeHidrxidodeSod
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il
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smafo rmaenque
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il
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lo,se uscomo agen te
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sul
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S-) dela p rote
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(Schrooyenyco l.
,2000 )
.40gdep lumasade cuadassed iso
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tanolenunbu f
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ida(H1 )sef i
l
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conlienzopararet
irarlosresiduosdep lumasnodisueltasysea lmacena4 C( Schrooyen
y Oberthu
r;2007).Elprocedimientofuee lmismoquee lrea l
izadoconH1yH2 .

Todaslassolucionespro
te
casobten
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icionados.Seus memb ranadecelulosade16 mmded imetroconretenc
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 3ras Jornadas ITE - 2015 -Facultad de Ingeniera - UNLP

Extraccin de Queratina: Las soluciones dializadas se llevaron a pH 4.2 correspondiente al

punto isoelctrico de la protena, usando cido clorhdrico (HCl; 2N) con el fin de precipitarla
(Schrooyen y col., 2007; Wrzesniewska-Tosik y col., 2007). Luego, se centrifug por 15
minutos a 10C y 6500 rpm; los pellets obtenidos se lavaron con agua destilada y se
liofilizaron.

Modificacin Qumica de Queratina: La modificacin qumica de las protenas se utiliza

con el fin de mejorar las propiedades funcionales. La reaccin de reduccin para obtener
derivados de queratina es reversible y por lo tanto se puede producir la reformacin de
enlaces disulfuro (-S-S-) a nivel inter e intramolecular formando agregados de protena
insolubles. La modificacin parcial de los grupos SH libres, generalmente involucra una
conversin qumica de dichos grupos en otros. Uno de los propsitos de la modificacin es
impedir que los grupos SH modificados vuelvan a formar los enlaces disulfuro inter e
intramoleculares, minimizando la formacin de agregados insolubles de queratina. La
oxidacin de la cistena a cido cisteco usando cido perfrmico o la conversin de cistena
a S-sulfocisteina por sulfitolisis han sido usadas para obtener productos solubles.
Se realizaron 2 tipos de modificaciones qumicas, acetilacin y sulfitolisis oxidativa, con el fin
de prevenir la reformacin de los puentes disulfuros en los diferentes productos de queratina
obtenidos por las 3 hidrlisis.

1. Acetilacin de Queratina (Ac): Esta modificacin se basa en la alquilacin de los

grupos sulfhdricos con un compuesto rgano-halogenado para evitar la reformacin de los
puentes disulfuro. Se utiliz cido Monocloroacetico (MCA; ClCH 2COOH), el grupo -COOH
de ste reacciona con los grupos SH libres de la queratina reducida dando como producto
S-Carboximetil-queratina (SCMQ).

Se adicion 0.5 g de MCA por cada 100 ml de solucin de queratina, ajustando el pH a 9, se

agit constantemente por 1 hora a una temperatura de 25C. Las soluciones de queratina
modificada (H1Ac, H2Ac y H3Ac) se dializaron, precipitaron, centrifugaron y liofilizaron en
las mismas condiciones mencionadas anteriormente para H1, H2 y H3.

2. Sulfitolisis Oxidativa (Sox): La queratina solubilizada fue oxidada con un agente

oxidante como el perxido de hidrogeno. Por este proceso se oxidan los residuos
cistina/cistena a grupos cidos cisteicos, obteniendo una queratina completamente
modificada. (Schrooyen y col, 2007; Florido Rodrguez, 2008). En la sulfitolisis el ion sulfito
reacciona por medio de un ataque nucleofilico al puente disulfuro, producindose un mol de
mercaptano y una mol de SO3Na.

Se adicionaron 2 ml de perxido de hidrgeno (H202) a 100 ml de cada solucin de queratina

(H1, H2 y H3), se agito constantemente por 24 hs a 37C. Posteriornente se agrego 2 g de
Sulfito de Sodio, ajustando el pH a 9 y se agit por 1 h ms. A las 3 soluciones de queratina
modificada (H1So, H2So y H3So) obtenidas se les realiz el mismo procedimiento usado
para obtener los derivados liofilizados H1, H2 y H3.

En la Figura 2 se muestra un esquema de la obtencin de los 9 derivados liofilizados de

queratina a partir de plumas de pollo.

Calorimetra Diferencial de Barrido: Las plumas, las Barbas, Raquis y Calamus

previamente adecuados y los derivados de queratina liofilizados obtenidos se analizaron en
un equipo DSC 2010, TA Instruments. Entre 1-5 mg de muestra fueron colocados dentro de
una cpsula hermtica de aluminio, estas fueron calentadas a 10C/min de 30 a 300C. Se
us una capsula vaca como referencia. Despus de terminar las corridas, las cpsulas se
perforaron sobre la tapa y se llevaron a estufa a 130C por 3 hs o hasta peso constante.

505 Departamento de Qumica 2015 - Ao Internacional de la Luz

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con una resolucin de 4 cm-1 quefueron acumu lado s. Pa ra gene rare lp romedio
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H3Sox )sesu spendieron(0.5%p /v
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to(0 ,3,5 ,8,10,15 ,20 ,30,45y60
das).Paralade terminac
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ifugaron a13000rpm ,por10 m in
.Setom0 .3 mldelsobrenadante seadicion0.2 m
l
deaguade s
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t,seag i
tenvo rtex30seg ,despu sde15 m in
derea ccinse m id
ilaabso rbanciaa550nm .

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inalio
fi
l
izados a par
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r de pluma s de po l
lo.Los
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mercaptoetanolsin mod i
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iones (H1 ).E
lporcen
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izadosen med iosa cuososparaelpH7 ,8y9va r
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ivados mod i
f
icados. H1Sox
presente lporcentaje mayordep rotenapara pH7(13.18%); H2Acpa rapH8(13 .25% )y
H1Sox pa ra pH 9 (9 .61% ), mo st
rando quelas mod if
icac
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aumen tanlaso lubi
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il
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inaobtenidos(H1 ,H1A c
, H1Sox , H2,
H2Ac, H2Sox , H3, H3A c y H3So x )p resentando tempera turas de desna tura
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te s(Barbas,Calamu s
y Raquis) y se ob
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ivados de que rat
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obser
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ra s
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ficaciones qu micas (H1, H1Ac y H1So x
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der
ivado s
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in CH3(P ieleszycol
.,2000; Mar
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.,2005)
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coinc
idenc iaconMa rt
nez- Hernndez ,ycol
.(2005 ) quienesrepo rtaronunafue rtebandaa
1652cm-1 re lac
ionadaconlav ibracindelabanda C=O , mostrandocon forma cin -
hl
ice.
Wo
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iechow skaycol.,(1999 ),tamb inreportaronquelabandaAm idaIes tre lac ionadacon
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(1535 -1536 cm
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rrespond ien te ala
conformac indeho jap legada;labandaquep resentanlosde r
i vadosdeque ra t
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cm-1 puedese ras ignadaa laAm idaII
I queseen cuentraene lrango1236- 1240cm
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Mart
nez- He rnndez, y co l
.(2005 ) repo r
to quelareg in en tre 1230-1240 puede se r
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I,m ien
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CONCLUS
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tualmente con el estudi
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l
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