ESCUELA SUPERIOR POLITCNICA DEL LITORAL

FACULTAD DE INGENIERA MARTIMA, CIENCIAS

BIOLGICAS, OCENICAS Y RECURSOS
NATURALES

FORMULARIO PARA LA PRESENTACIN DE PROYECTO DE

TITULACIN DE LA CARRERA DE BIOLOGA

Ttulo del Evaluacin de tres mtodos de marcaje en las especies de pepino de mar
anteproyecto Isostichopus fuscus y Holothuria theeli

Duracin Un trmino acadmico

[tiempo de
ejecucin]

Alumno Proponente 1
Nombre completo: MIGUEL ANGEL HERRERA VIVAR
Nmero de cdula: 0940978349
Matrcula: 201118856
Email: migaherr@espol.edu.ec
Telfono: 0981243154

Alumno Proponente 2
Nombre completo: N/A
Nmero de cdula:
Matrcula:
Email:
Telfono:

Profesor Gua (Director de Proyecto de Titulacin)

Nombre completo: DR. JORGE IGNACIO SONNENHOLZNER VARAS
Nmero de cdula: 0911840510
Departamento de CENTRO NACIONAL DE ACUICULTURA E
afiliacin: INVESTIGACIONES MARINAS (CENAIM)
Email: sonnenhol@espol.edu.ec
Telfono: 0969776126

Firma Alumno 1 Firma Alumno 2 Firma Profesor Gua

 FORMULACIN DEL PROYECTO DE TITULACIN

Debe contener la exposicin general del problema, sealando los enfoques y procedimientos
actualmente en uso referidos a la investigacin (estado del arte), su fundamentacin terica,
las hiptesis de trabajo, los objetivos generales y especficos y la bibliografa que sustenta su
presentacin. Se presentara de acuerdo al siguiente formato:

Introduccin: Los pepinos de mar, al igual que las otras clases de equinodermos, ocupan un rol
relevante en los ecosistemas marinos por su desempeo ecolgico (Purcell, 2010). La
pesquera de pepinos de mar a nivel mundial se ha expandido y, en consecuencia, el
agotamiento de las poblaciones silvestres de especies de alto valor comercial (Purcell et
al., 2013). La mayora de las especies comerciales pertenecen a la familia Holothuroidae y
Stichopodidae, y han sido particularmente vulnerables a la sobrepesca por su alta
demanda en el mercado y por las caractersticas de su historia de vida, tales como: baja
tasa de reclutamiento, elevada longevidad y denso-dependencia para lograr xito
reproductivo (Conand & Byrne, 1993). Algunas de estas especies presentan dos formas de
reproduccin: sexual y asexual por fisin. Ambas estrategias reproductivas son clave para
el mantenimiento numrico y viabilidad de las poblaciones naturales (Conand, 2006). Sin
embargo, muy pocos estudios han abordado estos dos procesos reproductivos y su efecto
sobre las poblaciones para el manejo de pesqueras y recuperacin poblacional (Purcell et
al., 2014).

En Ecuador, la pesquera del pepino de mar tiene lugar principalmente en las Galpagos
con la especie Isostichops fuscus, pero actualmente sus poblaciones se ven seriamente
reducidas. En la costa continental, desde 1989 las poblaciones de I. fuscus han disminuido
y hasta han desaparecido de algunas localidades a causa de su pesca ilegal. A esto se
suma la explotacin de otras especies sin registro en las estadsticas de pesca (por
ejemplo, Holothuria theeli). H. theeli es el foco de una pesquera emergente en el
Ecuador. A travs de informacin secundaria procedente del sector pesquero artesanal del
Ecuador, se seala que H. theeli es una de las especies de pepinos de mar comercial
(despus de I. fuscus) que tiene (al igual que I. fuscus) potencial para la acuicultura y
repoblacin (para fines de comercializacin productos alimenticios y farmacuticos).

Pese a la importancia que poseen estas dos especies de holoturias tanto en lo ambiental
como en lo econmico, la informacin bsica sobre su biologa y ecologa es bastante
limitada (Sonnenholzner et al., 2012). La generacin de este tipo de informacin permitir
determinar parmetros poblacionales fundamentales, como edad, crecimiento, patrones de
movimiento, migracin, estimaciones de mortalidad natural, entre otros). Sin embargo, la
falta de una tcnica sencilla y fiable para marcar individuos ha dificultado el seguimiento
y captura-recaptura al momento de dirigir esfuerzos para el manejo y conservacin desde
un enfoque de repoblacin de animales de edad conocida (pepinos de mar cultivados en
laboratorio). El mtodo de marcaje y recaptura es relevante para evaluar poblaciones
naturales y el estado de la repoblacin (liberacin y seguimiento in situ de animales). Por
este motivo, desarrollar una tcnica validada de marcaje eficaz con elevada retencin de
marcas, permitir minimizar el dao del tejido, estrs y riesgo de infecciones (que
pudieran provocar la muerte, retraso en el crecimiento o alteracin en la alimentacin y/o
reproduccin) y ser de gran valor en los prximos aos, ya que la pesquera de pepinos
de mar se expande hacia generar una acuicultura comunitaria y ambientalmente
responsable, a gran escala (Mercier & Hamel 2013).
 Esta herramienta beneficiar a la industria del pepino de mar a nivel regional al permitir
que los estudios de la pesca y ecolgicos (a travs del marcaje y recaptura) estn
orientados hacia medir los cambios temporales en las tasas de crecimiento, supervivencia
y mortalidad, as como las migraciones diarias y estacionales, la localizacin de las
poblaciones de cra y determinacin de preferencia de habitar en el campo (Rodriguez-
Barreras 2014, Gianasi et al. 2015). No obstante, antes de proceder con el marcado
masivo de animales y liberacin en el mar es necesario determinar y validar
experimentalmente que: 1) el marcaje no tiene algn efecto sobre el animal; 2) la
supervivencia post-marcaje es muy alta y 3) no hay prdida de marcas (Sonnenholzner et
al. 2010).

La literatura reporta el uso de distintos tipos de marcas en pepinos de mar; para marcaje
externo (T-bars), marcaje interno (CWTs, PIT-tags) y marcaje qumico (elastmeros,
fluorocromos), entre otros (Gianasi et al. 2015). Dado lo invasivo de algunos mtodos de
marcaje y la alta variabilidad en los resultados post-marcaje, existe dificultad en la
evaluacin del crecimiento individual de los pepinos de mar, lo que ha impedido obtener
respuestas favorables a travs del marcaje con diferentes mtodos (Conand 1991, Shiel
2006). Esta variabilidad es producto al efecto de la especie de estudio y la falta de inter-
calibracin entre el investigador responsable y los laboratorios. Esto se puede corregir con
la produccin de estudios experimentales que validen los procedimientos de marcaje
previo a la liberacin de animales en el mar.

El presente estudio evaluar el efecto de tres mtodos de marcado: 1) calcena, 2) PIT y 3)

T-bar, as como la combinacin de estos en los pepinos de mar I. fuscus y H. theeli para
medir el crecimiento somtico, la supervivencia, el trazado de estrs, capacidad de ingerir
alimento y la prdida de marcas, en condiciones de laboratorio.

Nuestro inters en evaluar el efecto de la combinacin en pares del marcaje con el

fluorocromo de calcena con las marcas PIT o T-bar, se debe en que pretendemos utilizar
ambas tcnicas de marcado en los estudios de determinacin de la edad para validar la
periodicidad de las lneas de crecimiento naturales de los pepinos de mar en las placas de
la corona tentacular. Para el uso de la calcena se requerira recapturar un pequeo
nmero de individuos que posean una marca visible o junto con una marca
electromagntica interna que hace que se reconozca fcilmente al animal sin matar a los
animales. Esto reducira el nmero de ejemplares que se deben recoger para cada
campaa de muestreo.

Determinar el efecto de tres mtodos de marcaje en el crecimiento y supervivencia de los

Objetivos pepinos de mar Holothuria theeli e Isostichopus fuscus en condiciones de laboratorio.

- Realizar marcaje individual y combinado de pepinos de mar adultos I. fuscus y H.

theeli (individuos de reproduccin sexual y asexual) con tres tipos de marcas: PIT-
tag, T-bar y FC, en relacin a su ubicacin y parte del cuerpo del animal.
- Realizar marcaje de pepinos de mar juveniles H. theeli de edad conocida con
marcaje qumico de FC.
- Realizar marcaje de pepinos de mar juveniles I. fuscus de edad conocida con
marcaje qumico de FC con la combinacin de marcas PIT tags y T-bar.
- Medir el efecto post-marcaje en la supervivencia, tasa de crecimiento en talla y
 peso, medicin de estrs y capacidad de alimentacin de individuos adultos y
juveniles de los pepinos de mar I. fuscus y H. theeli.
- Determinar el mtodo de marcaje ms efectivo e inocuo para los pepinos de mar I.
fuscus y H. theeli.

Los mtodos de marcaje individual o combinados de los pepinos de mar I. fuscus y H.

Hiptesis theeli para adultos y juveniles son efectivos y no tienen ningn efecto colateral sobre el
crecimiento, supervivencia y no se registra prdida de marcas.

Previo al marcaje, se crearn dos grupos de animales por las categoras: adulto y joven y,
Metodologa por la procedencia de las especies I. fuscus y H. theeli, sean: 1) adultos recolectados del
mar y 2) juveniles cultivados en el laboratorio.

El experimento con animales adultos requiere dos subgrupos segn su proceso

reproductivo: 1.1) adultos de generacin sexual y 1.2) adultos de generacin asexual
fisionados (clones).

Para iniciar el experimento con adultos fisionados, se realizarn cortes transversales en

individuos previamente aclimatados y medidos. Sus fracciones (boca-ano) sern
separadas en diferentes tanques para su regeneracin parcial (cicatrizacin de la zona
cortada, aproximadamente 3 semanas) y completa (rganos internos completamente
regenerados, aproximadamente 3 meses), las cuales constituirn dos dimensiones del
experimento.

Los individuos fraccionados y cicatrizados pero sin vsceras, sern marcados con los tres
mtodos individualmente, y con combinaciones de marcas (T-bars con PIT, T-bars con
calcena, y PIT con calcena). Se realizar su seguimiento post-marcaje durante 10
semanas.

Los adultos de generacin asexual o clones sern categorizados por la regin del cuerpo
que se regenere: 1.2.1) regin anterior o bucal y 1.2.2) regin posterior o anal. Los
animales juveniles sern categorizados por tamao: grandes y pequeo. Todos los
animales seleccionados sern mantenidos y alimentados en condiciones ptimas. La
duracin del experimento son 10 semanas.

El procedimiento de marcaje ser basado en adaptaciones de las metodologas

previamente establecidas para equinodermos (pepinos de mar y erizos de mar) propuestas
por Purcell y Blockmans 2009, Sonnenholzner et al. 2010, Rodriguez-Barreras et al. 2014
y Giannasi et al. 2015. Se utilizarn tres tipos diferentes de marcas: 1) Transpondedor
Integrado Pasivo (PIT); 2) Cables de Plstico Codificados (T-bar) y 3) Fluorocromo de
Calceina (FC).

Referencias Conand, C. (1990). The fishery resources of Pacific island countries. Part 2: Holothurians.
FAO Fisheries Technical Paper (272.2). 143 pp.
Conand, C. (2006). Sea cucumber biology, taxonomy, distribution and conservation
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Conand, C. (1991). Long-term movement and mortality of some tropica sea cucumbers
monitored by tagging and recapture. In: T. Yanagisawa; I. Yasamasu, C. Oguro, N.
Suzuki, T. Motokawa (Eds.). Biology of Echinodermata (pp. 169174). Rotterdam:
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Gianasi, B.L.; Verkaik K.; Hamel, J.F.; Mercier, A. (2015). Novel use of PIT tags in sea
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Lauzon-Guay, J.; Scheibling, R.E. (2008). Evaluation of passive integrated transponder

(PIT) tags in studies of sea urchins: Caution advised. Aquatic Biology (2), 105112.

Purcell, S.W., Blockmans, B.F.; Nash, W.J. (2006). Efficacy of chemical markers and
physical tags for large-scale release of an exploited holothurian. Journal of Experimental
Marine Biology and Ecology (334), 283293.

Shiell, G.R. (2006). Effect of invasive tagging on the activity of Holothuria whitmaei
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Sonnenholzner, J.; Brandt, M., Francisco, V.; Hearn, A.; Luzuriaga, M.; Guarderas, P.;
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Sonnenholzner, J.; Lawrence, J.M. (2002). A brief survey of the echinoderms

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Sonnenholzner, J.; Montao-Moctezuma, G.; Searcy-Bernal, R. (2010). Effect of three

tagging methods on the growth and survival of thepurple sea urchin Strongylocentrotus
purpuratus. Panamerican Journal of Aquatic Sciences (5), 414-420.
Cronograma 1-30 Pasantas de vinculacin con la comunidad Estudiante
de trabajo OCTUBRE 1-15 Coordinacin logstica para experimentos Estudiante, tutor
19-23 Inicio clases Estudiante
4-14 Fase de campo/laboratorio Estudiante
15-21 Experimentos en laboratorio Estudiante

NOVIEMBRE 22-28 Experimentos en laboratorio Estudiante

1-23 Experimentos en laboratorio Estudiante
DICIEMBRE
14-18 Exmenes parciales Estudiante

24
diciembre- Vacaciones institucionales
03 enero

Experimentos en laboratorio/anlisis resultados/Redaccin

3-12 Estudiante, tutor
metodologa
ENERO 15-26 Experimentos en laboratorio/anlisis resultados Estudiante, tutor
29-10
Experimentos en laboratorio/anlisis resultados
febrero
29-10
Revisin metodologa y resultados por parte del tutor Estudiante, tutor
FEBRERO febrero
22-26
Exmenes finales/Experimentos en laboratorio/Correcciones Estudiante, tutor
febrero
27-28 Redaccin borrador final Estudiante
1-4 Revisin del borrador final Tutor, estudiante

MARZO
7-11 Consejeras acadmicas/ Entrega de borradores a FIMCBOR Estudiante, tutor

FIMCBOR,
1-16 Espera de correcciones
estudiante
ABRIL 18-29 Fecha esperada de sustentacin