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Biologa molecular y celular

Practica NO 1
MANEJO Y CUIDADO DEL MICROSCOPIO

Miembros de equipo:
Jess Castaeda Snchez
Monserrat Ros Garca
Juan Carlos Montero Domnguez
Axel Ayrton Lara Ponce
Eduardo Montiel Enrquez
Josu Alejandro Rodrguez Lopez

Titular de la materia:
Dra. Nayali A. Lpez Balderas

Fecha de entrega: 14/09/17

BLOQUE 105
PRACTICA No 1.
MANEJO Y CUIDADO DEL MICROSCOPIO
INTRODUCCION:
Propiedades Bsicas De La Luz: Algunas propiedades de la luz dependen del tipo
de fuente luminosa que las emita, como el color, la intensidad, etc.
Propiedades Fsicas: La luz es una radiacin electromagntica visible para nuestros
ojos. Esta radiacin la podemos describir bien considerando un modelo corpuscular,
bien considerando un modelo ondulatorio. En el primer caso podemos considerar
que la luz esta compuesta por pequeas partculas denominadas fotones, cuya
masa en reposo es nula y que representan unidades o cuantos de energa. En el
segundo caso, la luz al igual que cualquier otra onda, puede ser caracterizada en
trminos:
Longitud De Onda: distancia sucesiva entre dos ondas.

Amplitud De Onda: diferencia entre los picos mximos y mnimos.

Frecuencia: nmero de ondas por espacio de tiempo.

Leyes pticas: La luz no es ms que una radiacin electromagntica. En el vacio


las radiaciones electromagnticas viajan en linea recta y as pueden ser descritas
como rayos de luz. En nuestro medio, los rayos de luz viajan tambin en linea recta
hasta que interaccionan con los tomos o molculas de la atmosfera y otros objetos.
Estas interacciones dan lugar a los fenmenos de reflexin, absorcin y refraccin.

Reflexin: La reflexin de la luz es el cambio de direccin que experimenta


la luz cuando choca contra un cuerpo.
Los espejos son cuerpos opacos, con una superficie lisa y pulimentada,
capaces de reflejar la luz que reciben.
Los espejos pueden ser planos o esfricos. Los planos forman imgenes
igual de grandes que los objetos que las originan, mientras que los
espejos esfricos forman imgenes distorsionadas.
Espejo Plano Espejo Convoca Espejo Convexo

Refraccin: La refraccin es el cambio de direccin que experimenta la


luz cuando pasa de un medio a otro diferente, por ejemplo, cuando pasa
del aire al agua.
La refraccin de la luz sirve para ver los objetos con un tamao diferente
del real. Esto se consigue con el uso de lentes.
Las lentes son cuerpos trasparentes con la superficie curva que refractan
la luz. Pueden ser.

Absorcin: Existen superficies y objetos que absorben la mayor parte de


las radiaciones luminosas que les llegan. Estos objetos se ven de color
negro. Otros tipos de superficies y objetos absorben slo unas
determinadas gamas de longitudes de onda, reflejando el resto.
Esto sucede por ejemplo con los pigmentos que se utilizan en las tcnicas
de pintura. Por ejemplo, un pigmento rojo absorbe longitudes de onda
cortas pero refleja un determinado rango de longitudes de onda larga,
cuyo pico se centra alrededor de los 680 nm, por lo que se percibe como
rojo. Como veremos ms adelante, las clulas sensibles a la luz de la
retina, los fotorreceptores, contienen pigmentos visuales que utilizan esta
propiedad para generar cambios en su potencial de membrana. Distintos
tipos de pigmentos a nivel de los fotorreceptores dan lugar a la visin en
color propia de muchos animales.

Propiedades De Las Lentes De Aumento:


Refraccin:
Las propiedades de las lentes se deben gracias a los fenmenos de refraccin que
experimentan los rayos luminosos que las atraviesan. Cuando una radiacin
electromagntica en la forma de rayo luminoso, denominado incidente, viaja de un
medio o una superficie y atraviesa otro medio, las ondas luminosas sufren el
fenmeno conocido como refraccin, el cual se manifiesta mediante una desviacin
en la direccin de la luz
Reflexin:
Cuando la luz (u otro tipo de radiacin electromagntica) incide sobre la superficie
de un medio (gas, lquido o slido) algunos rayos no son absorbidos, por el contrario
son rebotados y se dispersan lejos de la superficie del medio en cuestin. El rayo
que llega es denominado incidente y el que se desva es denominado reflejado. La
direccin en que sale reflejada la luz ser determinada por el tipo de superficie. Si
es una superficie brillante o pulida (espejo) se produce la reflexin regular en la que
toda la luz sale en una nica direccin denominndose reflexin regular o especular.
Si la superficie es mate la luz sale esparcida en todas direcciones y se llama
reflexin difusa. Sin embargo tambin puede ser reflexin mixta, en la que
predomina una direccin sobre las dems

Refraccin en las lentes:


En las lentes convexas la refraccin se produce de acuerdo a las mismas leyes. El
estudio resumido de esos fenmenos es indispensable para comprender las
propiedades de las lentes y la formacin de las imgenes.
Se tomar primero como ejemplo una lente plano-convexa. Obsrvense tres rayos
a, b, y c, cuya incidencia es normal (perpendicular) en relacin a la cara plana de la
lente. Al inicio, estos rayos no sern refractados; atravesarn la lente, llegaran a la
cara convexa en donde si se refractan y su destino ser diferente

El rayo bn coincide con el eje de la lente y no se refracta: se comporta como si al


salir lo hiciera de una cara paralela a la cara de entrada. Los rayos a y c son por el
contrario, oblicuos en relacin a la cara curva de la lente. Ellos sern refractados
porque pasan del vidrio al aire y se aproximan al eje de la lente, cortando el rayo
bn en el punto f. Dos leyes resultan de estas consideraciones:
Todo rayo que pasa por el centro de la lente NO es refractado.
Todo rayo que no pasa por el centro de la lente ES refractado. Mientras
ms lejos del centro, la desviacin ser mayor. Los rayos refractados
convergen todos en un punto que es el foco o punto focal de la lente.

Refraccin en las lentes:


En las lentes convexas la refraccin se produce de acuerdo a las mismas leyes. El
estudio resumido de esos fenmenos es indispensable para comprender las
propiedades de las lentes y la formacin de las imgenes.
Se tomar primero como ejemplo una lente plano-convexa. Obsrvense tres rayos
a, b, y c, cuya incidencia es normal (perpendicular) en relacin a la cara plana de la
lente. Al inicio, estos rayos no sern refractados; atravesarn la lente, llegaran a la
cara convexa en donde si se refractan y su destino ser diferente

El rayo bn coincide con el eje de la lente y no se refracta: se comporta como si al


salir lo hiciera de una cara paralela a la cara de entrada. Los rayos a y c son por el
contrario, oblicuos en relacin a la cara curva de la lente. Ellos sern refractados
porque pasan del vidrio al aire y se aproximan al eje de la lente, cortando el rayo bn
en el punto f. Dos leyes resultan de estas consideraciones:
Todo rayo que pasa por el centro de la lente NO es refractado.
Todo rayo que no pasa por el centro de la lente ES refractado. Mientras ms
lejos del centro, la desviacin ser mayor. Los rayos refractados convergen
todos en un punto que es el foco o punto focal de la lente.
Los Sistemas De Los Cuales Est Compuesto Un Microscopio:
El microscopio de luz, compuesto u ptico est integrado por 3 sistemas, los cuales
son:
Sistema Mecnico
Sistema ptico
Sistema de Iluminacin

Sistema Mecnico:
El sistema mecnico es el esqueleto o armazn del microscopio, el cual proporciona
soporte y estabilidad al equipo. Est integrado por:
El tubo de microscopio: El cual es de forma cilndrica, en su parte superior sostiene
a la lente o lentes oculares y en la parte inferior se encuentra el sistema de lentes
objetivos.
Revlver: Es la parte circular en la que se encuentran atornilladas las diferentes
lentes objetivos, al girar el revolver cambian las lentes objetivos sin que se
desenfoque la preparacin.
Platina: Pieza metlica cuadrada o circular, con un orificio central sobre el que se
colocan las preparaciones a observar y por el que atraviesa el rayo luminoso. Puede
ser fija o estar provista de tornillos de desplazamiento que nos permiten centrar la
preparacin o buscar diferentes campos de observacin.
Base o Pie: Es la base sobre la que descansa el aparato y le da estabilidad.
Brazo o columna: Esla parte que sostiene el tubo y su mecanismo de
desplazamiento vertical formado por los tornillos macromtrico y micromtrico.
Sistema ptico:
El sistema ptico est formado por 2 sistemas de lentes: Oculares y Objetivos.
Los lentes oculares van montados en la parte superior del tubo del microscopio. Su
nombre se debe a la cercana de la pieza con el ojo del observador y sus poderes
de aumento van desde 4x hasta 20x.
Los lentes objetivos se encuentran en el revlver y quedan cerca del objeto a
observar. Hay 2 tipos de objetivos: Objetivos secos y de Inmersin
Los objetivos secos se utilizan sin colocar alguna sustancia entre ellos y la
preparacin, nicamente el aire. Proporcionan poco aumento que va desde 10x ,
20x,40x hasta incluso 60x; dicho aumento se encuentra grabado en el exterior de
cada objetivo, en este caso encontramos 10x o tambin llamado seco dbil y 40x o
seco fuerte.
Los objetivos de inmersin se utilizan colocando una sustancia entre ellos y la
preparacin, por lo general, se emplea el aceite de cedro. Proporcionan un mayor
aumento y definicin, de 100x; los podemos identificar ya que son los ms largos y
traen grabada en el exterior la palabra oil (aceite).

Sistema de Iluminacin
El sistema de Iluminacin est formado por la fuente de iluminacin, Espejo,
Condensador, y Diafragma.
La fuente de iluminacin consta generalmente de una lmpara incandescente de
tungsteno.
El espejo es necesario si la fuente de iluminacin no est dentro del microscopio
tiene una cara plana y una es cncava.
El condensador de luz est formado por un sistema de lentes cuya funcin es captar
los rayos luminosos y dirigirlos hacia la preparacin que se va a enfocar.
El Diafragma es una abertura que controla la cantidad de luz que debe pasar por el
condensador, que se regula por una palanca lateral.

OBJETIVO: Identificar los componentes y sistemas del microscopio ptico


compuesto. Aprender cmo se realizar la iluminacin de Khler y examinar
diferentes preparaciones con diferentes aumentos.
Fundamento: Debido a que la mayora de las clulas son demasiado
pequeas para ser observadas y estudiadas a simple vista, el origen y
avance de la biologa celular dependi de los avances tecnolgicos y de
la creacin de un instrumento en particular, el microscopio. Los
microscopios son instrumentos que producen una imagen aumentada de
un objeto, su desarrollo permiti la identificacin y estudio de las clulas,
y posteriormente la explicacin de fenmenos vivientes, tanto en
condiciones normales como patolgicas. Actualmente ciertos tipos de
microscopios pueden brindar un anlisis altamente detallado de las
estructuras celulares. Por lo tanto, conocer los componentes y
particularidades de los diferentes tipos de microscopios les permitir a los
alumnos comprender sus aplicaciones clnicas y en investigacin.

MATERIAL:
Microscopio
Papel seda
Aceite de inmersin
Preparaciones (las proveer el profesor)
PROCEDIMIENTO.
1. Identificar los principales componentes del microscopio
2. Realizar la iluminacin de Khler.
3. Abrir el diafragma de iris y el diafragma de campo
4. Subir el condensador, utilizando el tornillo portacondensador
5. Colocar el objetivo 10X
6. Ajustar la distancia interpupilar. Enfocar una preparacin
7. Cerrar el diafragma de campo completamente se observa una luz difusa
8. Con el tornillo porta condensador ajustar la altura, descender hasta
observar el diafragma de campo, se ver un polgono
9. Centrar el polgono con los tornillos posteriores
10. Abrir el diafragma lentamente hasta que los vrtices del polgono
desaparezcan y el rea iluminada cubra todo el campo
11. Contrastar con el diafragma de iris del condensador
12. Observar las preparaciones en 40X y 100X (usando aceite de inmersin)
13. Registrar sus observaciones con las diferentes preparaciones

RESULTADOS.

Frotis Sanguneo
DRIGTH - Giemsa
Identificar cromosomas
40X
Se ven varios grupos de
cromatides, de manera circular
y lineal, como rayitas rosadas.
Frotis Sanguneo

DRIGTH - Giemsa
Identificar cromosomas
100X

Se aprecian las cromtides en


unin circular y de color ms
rosado.

Frotis Sanguneo

DRIGTH - Giemsa
Identificar linfocitos entre eritrocitos

40X
Se ven ramificaciones con
pequeos espacios de
separacin y puntos morados
los linfocitos.

Frotis Sanguneo
DRIGTH - Giemsa
Identificar linfocitos entre eritrocitos

100X

Se logran observar las


separaciones y los linfocitos
de manera mas cercana como
puntos morados

ANLISIS DE RESULTADOS:
1. Se logr el objetivo planteado?
Se acudi al laboratorio del hospital regional y all la profesora, primeramente,
nos seal las partes que conforman el microscopio preparo la muestra para
ser observada en el microscopio y nos la mostr a diferentes objetivos.

2. Qu es amplificacin, resolucin y cul es el lmite de resolucin del


microscopio ptico?
Se refiere a la cantidad o el grado en el que se ampla el objeto observado.
Se mide por mltiplos, como 2x, 4x y 10x, lo que indica que el objeto se
agranda para el doble de grande, cuatro veces tan grande o 10 veces ms
grande, respectivamente.
La resolucin de un microscopio es la capacidad para determinar con claridad
dos puntos separados, u objetos como entidades individuales y distinguibles.
Tpicamente, en un microscopio ptico compuesto estndar hay tres lentes
objetivas que son una lente de exploracin (5 ), lente de la energa baja (10
) o a veces lente de la energa media (20 x), y lente de alta potencia (40 ).
Los microscopios pticos avanzados tienen a menudo una cuarta lente
objetiva, llamada lente de inmersin de aceite. Para utilizar este objetivo, se
coloca una gota de aceite de inmersin sobre el cubreobjetos, y la lente se
baja muy cuidadosamente hasta que el elemento objetivo delantero se
sumerge en la pelcula de aceite. Tales lentes se disean de modo que el
ndice de refraccin del aceite y la cubierta se empareje de cerca de modo
que la luz sea transmitida de la muestra a la cara externa de la lente objetiva
con la refraccin mnima y tiene una potencia de x100.
La potencia real o magnificacin de un microscopio ptico es el producto de
las potencias del ocular generalmente de alrededor de x10, y de la lente
objetiva que se utiliza. Los microscopios pticos compuestos pueden
producir una imagen magnificada de un espcimen hasta x1000

3. Cul es la importancia de realizar la iluminacin de Khler?


El conocimiento y aplicacin de los principios del sistema de iluminacin de
Khler constituye el elemento de mayor importancia en el correcto y
adecuado uso y manejo de un microscopio, con objeto de extraer al mximo
las potencialidades del microscopio como sistema formador de imgenes de
alta calidad.

4. Por qu se requiere el uso del aceite de inmersin?


La mayor resolucin ganada a travs del uso de aceite de inmersin habilita
a los usuarios a enfocar objetos muy pequeos que no se resolvera usando
objetivos secos. Los objetivos de aceite inmersin son usados para la
observacin objetivos muy pequeos, como las bacterias individuales y
aplicaciones de alta resolucin, como el TIRF y las aplicaciones de
fluorescencia con focal.

5. Mencione cuales son las diferencias entre las clulas observadas y ente los
objetivos empleados. Mencionando las estructuras observadas.

Se observaron cromosomas: La diferencia es muy notoria en cuanto al


tamao. En 40 x los cromosomas se logran observar muy unidos haciendo
un circulo y se ven como un punto que abarca de la imagen y no se logran
casi diferenciar unos de otros. En 100 x se ve mucho ms cercano, aqu ya
se logran diferenciar unos de otro se ve como 1/8 de la imagen y solo se logra
apreciar un conjunto de estos, no como en la anterior que se vean varios
grupos.

Se observaron linfocitos: se ven ramificaciones que se logran identificar en


40 x, se ven pequeos puntitos morados que son los linfocitos. En 100 x ya
se logran ver los linfocitos de mayor tamaa, y las ramificaciones ya
previamente visualizadas, se ven como puntos grises y los espacios entre
ellos son mas notorios.

Actividad Complementaria:

Investigar las caractersticas de los diferentes tipos de microscopia y sus


aplicaciones:
Microscopio
La palabra microscopio proviene de la combinacin de dos palabras griegas:
micrs (pequeo) y scopo (mirar). El microscopio ptico es uno de los inventos que
ha marcado un antes y un despus en la historia de la ciencia, especialmente en el
campo de la biologa y la medicina. Esencialmente se puede definir como un
instrumento que permite observar en un tamao aumentado elementos que son
imperceptibles a simple vista.

Existen varios tipos de microscopio, cada uno con diferentes caractersticas y


principios de funcionamiento. El microscopio ptico fue el que inaugur la era de la
microscopa en el siglo XVII. Es el tipo ms bsico de microscopio, su
funcionamiento est basado en un juego de lentes y el uso de luz visible para
aumentar la imagen de una muestra.
En un microscopio ptico podemos distinguir entre el sistema ptico y el sistema
mecnico.

El sistema ptico incluye el conjunto de lentes y elementos de manipulacin


de la luz necesarios para generar una imagen aumentada.
El sistema mecnico proporciona el soporte estructural a los anteriores
elementos

Dentro del sistema ptico se incluye un foco (tambin denominado fuente de luz)
que emite rayos de luz dirigidos hacia la muestra. Antes de llegar a la muestra los
rayos atraviesan un condensador, la funcin del cual es concentrar los rayos de luz
sobre la preparacin a observar. Habitualmente el condensador est acoplado con
un diafragmapara regular la cantidad de luz incidente. El siguiente elemento ptico
es el objetivo. Esta parte del microscopio consiste bsicamente en un conjunto de
lentes que reciben la luz proveniente de la muestra y permiten aumentar la imagen
observada. Por ltimo, el ocularampla la imagen proveniente del objetivo y es a
travs de l que se puede observar finalmente la muestra. En cuanto al sistema
mecnico hay en primer lugar una base o pie que permite mantener el microscopio
en posicin estable. El brazo es la estructura principal del microscopio y conecta la
base con el sistema ptico. El sistema mecnico incluye tambin la platina, es decir,
la pieza horizontal donde se coloca la muestra. La platina no est conectada de
forma fija con el brazo sino que su posicin se puede regular mediante los tornillos
macromtrico y micromtrico. El revlver es la parte del microscopio donde estn
montados los objetivos, normalmente 3 o 4, y que puede girar para seleccionar el
objetivo deseado. Finalmente, el tubo conecta los objetivos con el ocular.
Tipos de microscopia y sus aplicaciones

Campo Claro:
En campo claro toda la luz desde el espcimen y sus alrededores es
colectada por el objetivo para formar una imagen contra un fondo brillante.
En aplicaciones biolgicas, las observaciones de campo claro son usadas
ampliamente para tinciones o pigmentos naturales o especmenes
altamente contrastados montados en una porta objetos. El espcimen es
iluminado desde abajo y observado desde arriba. El espcimen aparece
brillante, pero ms oscuro que el brillante fondo. Esta tcnica es
ampliamente usada en patologa para ver secciones de tejidos fijos o
pelculas celulares/frotis. El campo claro no es muy til para clulas vivas
sin teir o secciones de tejido sin teir, como en la mayora de los casos,
la luz pasa a travs de muestras transparentes o traslucida con poca o
sin definicin de la estructura.
La luz es reflejada desde muestras opacas y esto es explotado en los
ambientes industriales donde las imgenes de campo claro son usadas
para la inspeccin de obleas (WAFERS) y tarjetas de cristal lquido.

Campo Obscuro:
La microscopia de campo oscuro es una tcnica de contraste donde solo
la luz difractada desde el espcimen se usa para formar la imagen. El
espcimen aparece brillante contra un fondo oscuro.

En microscopa de campo oscuro, el contraste se crea por un espcimen


brillante sobre fondo oscuro. Esta es ideal para revelar contornos, bordes,
fronteras y gradientes de ndice de refraccin, pero no brinda mucha
informacin sobre la estructura interna. Los objetos ideales incluyen
clulas vivas sin tincin (donde el campo oscuro brinda informacin no
visible con otras tcnicas), aunque tambin se pueden observar
exitosamente clulas fijas teidas. Las imgenes de campo oscuro son
particularmente tiles en hematologa para examinar sangre fresca. Los
especimenes no biolgicos incluyen minerales, cristales qumicos,
partculas coloidales, inclusiones y porosidad en vidrio, cermicas, y
secciones delgadas de polmeros.

Contraste De Fases:
La microscopia de contraste de fases es una tcnica ptica que explota
los cambios en el ndice de refraccin para producir imgenes de alto
contraste de especimenes transparentes.
La imagen de contraste de fases es aplicable a varios objetos
transparentes, como clulas vivas en cultivos, micro-organismo,
rebanadas delgadas de tejido, patrones litogrficos, vibras, dispersiones
de ltex, fragmentos de vidrio, y partculas subcelulares (incluyendo
ncleos y otros organelos) donde la tcnica revela estructuras que no son
visibles en campo claro. Una ventaja de la microscopia de contraste de
fases es que las clulas vivas pueden ser observadas en detalle sin la
necesidad de teirlas o usar fluorforos.

Fluorescencia:
La fluorescencia es el fenmeno donde la absorcin de luz de una
longitud de onda dada por una molcula es seguida por la emisin a
longitudes de onda ms largas (visible).
La obtencin de imgenes auto fluorescentes permite visualizar
molculas que estn ms all del lmite de resolucin de la microscopia
de luz. La microscopia fluorescente es una tcnica clave en el diagnstico
clnico (por ejemplo, inmunologa, patologa, microbiologa, citogentica)
y ambientes de investigacin. La microscopia fluorescente confocal, en
particular, se ha vuelto una herramienta esencial para estudiar las
dinmicas estructurales y moleculares en clulas vivas. La fluorescencia
habilita tcnicas de imagen como el TIRF, FRET, FLIM, FLIP y FRAP.
La microscopia de fluorescencia tambin es importante para identificar
minerales fluorescentes, contaminantes e impurezas en ciencias de
materiales, geologa, inspeccin de semiconductores, y proteccin
ambiental.

Luz Polarizada:
La microscopia de polarizacin explota las propiedades de la luz
polarizada para identificar y caracterizar la estructura y propiedades de
los materiales.
La microscopia de luz polarizada es tal vez mejor conocida por sus
aplicaciones geolgicas principalmente por el estudio de minerales en
secciones delgadas de rocas pero tambin se puede usar para estudiar
varios materiales ms incluyendo minerales naturales e industriales
(refinados, extrados o fabricados), compuestos como cementos,
cermicas, fibras minerales y polmeros, y molculas biolgicas
cristalinas o altamente ordenadas como el DNA, almidn, madera y urea.
La tcnica puede ser usada tanto cualitativamente como
cuantitativamente en las ciencias de materiales, geologa, qumica,
biologa, metalurgia y medicina.

Luz UV:
La microscopia (UV) Ultravioleta es un tipo de microscopia plida que
utilice la luz UV para generar una imagen magnificada de la muestra que
es analizada. Como resultado de la longitud de onda ms corta de la luz
UV que luz visible, es posible ver muestras con la mayores magnificacin
y resolucin.
Hay dos ventajas primarias que el uso de la microscopia ULTRAVIOLETA
puede ofrecer; resolucin de imagen mejorada y aumento creciente del
contraste.
La resolucin de un microscopio ptico depende de la longitud de onda
de la fuente de luz. La longitud de onda corta de la luz UV ayuda a mejorar
la resolucin de imagen ms all del lmite de difraccin de microscopios
pticos usando luz blanca normal.
La reaccin de la muestra a la luz UV es mayor que lo lograda por medio
de la luz blanca, por lo que se refiere a los alrededores. Como
consecuencia, hay un contraste creciente en la imagen creada por el
microscopio de modo que sea ms fcil ver las muestras.

Interferencia De Nomarsky:
La ptica Nomarski u ptica de Contraste Interdiferencial (DIC, por sus
siglas en ingls) es una tcnica de microscopa de luz que emplea filtros
polarizantes y prismas para producir imgenes impresionantes con
bastante tridimensionalidad. Este tipo de microscopa se caracteriza por
su buena resolucin y contraste que ayudan a discernir tanto detalles
superficiales como estructuras internas. Adems, el uso de prismas
permite obtener imgenes de colores brillantes sin necesidad de aplicar
protocolos de tincin, ni de preparacin de muestras.

Estereoscpico:
El microscopio estereoscpico es un tipo de microscopio ptico que
permite observar la muestra generando una imagen en tres dimensiones.
Esta es su caracterstica principal que lo distingue del resto de
microscopios donde la muestra siempre es observada en dos
dimensiones.
Los microscopios estereoscpicos son en general microscopios de luz
reflejada. Es decir, un foco ilumina la muestra y la luz reflejada por la
muestra es observada a travs de los objetivos y oculares. De este modo
se pueden observar muestras sin necesidad de laminarlas como en el
caso de los microscopios de luz transmitida, donde la luz atraviesa la
muestra antes de llegar al objetivo. Este es el motivo por el cual
generalmente los microscopios estereoscpicos tampoco tienen ni
condensador ni diafragma.
Este tipo de microscopio es por lo tanto adecuado para observar de forma
aumentada todo tipo de objetos sin necesidad de llevar a cabo un proceso
de preparado de la muestra. Esto los hace muy tiles en todo tipo de
campos y aplicaciones incluyendo el control de calidad de materiales, la
construccin de microcircuitos, el montaje de relojes o procedimientos de
microciruga. En general, los microscopios estereoscpicos son muy
utilizados en campos donde debe manipularse la muestra mientras se
observa.
En este tipo de microscopio la fuente de luz es un lser que ilumina el
preparado a diferentes alturas, generando secciones pticas. Uno de sus
componentes fundamentales es el pinhole, que filtra la luz proveniente de
planos fuera de foco.

Confocal:
El funcionamiento del microscopio lser confocal es muy similar al del
microscopio de epifluorescencia. Su principal ventaja es que permite
obtener imgenes de mayor
calidad mediante tcnicas de filtrado espacial que eliminan la luz que
proviene de planos fuera de foco. Esto permite controlar la profundidad
de campo y, adems, obtener series de imgenes del espcimen
cambiando el plano de foco. Se pueden obtener secciones pticas de 0.5
a 1.5 micras de especimenes fluorescentes de un espesor de
aproximadamente 50 micras o ms.
En este tipo de microscopio la fuente de luz es un lser que ilumina el
preparado a diferentes alturas, generando secciones pticas. Uno de sus
componentes fundamentales es el pinhole, que filtra la luz proveniente de
planos fuera de foco.

Electrnico De Transmisin:
El microscopio electrnico de transmisin (TEM) es un instrumento que
aprovecha los fenmenos fsico-atmicos que se producen cuando un
haz de electrones suficientemente acelerado colisiona con una muestra
delgada convenientemente preparada. Cuando los electrones colisionan
con la muestra, en funcin de su grosor y del tipo de tomos que la
forman, parte de ellos son dispersados selectivamente, es decir, hay una
gradacin entre los electrones que la atraviesan directamente y los que
son totalmente desviados. Todos ellos son conducidos y modulados por
unas lentes para formar una imagen final sobre una CCD que puede tener
miles de aumentos con una definicin inalcanzable para cualquier otro
instrumento. La informacin que se obtiene es una imagen con distintas
intensidades de gris que se corresponden al grado de dispersin de los
electrones incidentes.

Electrnico De Barrido:
La microscopia electrnica de barrido o SEM se basa en el principio de la
microscopia ptica en la que se sustituye el haz de luz por un haz de
electrones. Con esto conseguimos hasta los 100 , resolucin muy
superior a cualquier instrumento ptico.
Su funcionamiento consiste en hacer incidir un barrido de haz de
electrones sobre la muestra. La muestra (salvo que ya sea conductora)
est generalmente recubierta con una capa muy fina de oro o carbn, lo
que le otorga propiedades conductoras. La tcnica de preparacin de las
muestras se denomina sputtering o pulverizacin catdica.
Conclusiones:

Jess Castaeda Snchez


Monserrat Ros Garca: Existen distintos tipos de clulas, todas y cada una
de ellas son invisibles al ojo humano. Es por esto que los desarrollos
tecnolgicos incluyen los "Microscopios". Gracias a estos, nos fue posible
observar las muestras preparadas en el laboratorio con 3 distintos tipos de
acercamiento : x10, x40 y x100. Con cada acercamiento se pudieron apreciar
caractersticas ms especificas de las distintas muestras.
Juan Carlos Montero Domnguez: Esta platica me hizo consciente de la
importancia de los microscopios en el estudio de la biologa, y como en el
caso particular de nuestra prctica nos permitio ver cromosomas, asi mismo
es curioso como al cambiar de aumento las estructuras observadas cambian,
de modo que sino te dicen que son las mismas clulas no lo creeras.
As como de la importancia de tener sus lentes limpios y saberlos utilizar
apropiadamente, ya que sus instrumentos delicados y pueden estropearse
sino se manejan adecuadamente
Axel Ayrton Lara Ponce:
Eduardo Montiel Enrquez
Josu Alejandro Rodrguez Lopez

Bibliografa

http://www.tecnicaenlaboratorios.com/Nikon/Info_campo_claro.htm
http://www.tecnicaenlaboratorios.com/Nikon/Info_campo_oscuro.htm
http://www.tecnicaenlaboratorios.com/Nikon/Info_contraste_de_fases.htm
http://www.tecnicaenlaboratorios.com/Nikon/Info_fluorescencia.htm
http://www.tecnicaenlaboratorios.com/Nikon/Info_polarizacion.htm
https://www.news-medical.net/life-sciences/What-is-Ultraviolet-Microscopy-
(Spanish).aspx
https://microscopico.wordpress.com/nomarski/
https://iie.fing.edu.uy/investigacion/grupos/gti/timag/trabajos/2007/proteus/c
onfocal.html
https://www.mundomicroscopio.com/microscopio-estereoscopico/
http://www.upv.es/entidades/SME/info/753329normalc.html
https://www.patologiasconstruccion.net/2012/12/la-microscopia-electronica-
de-barrido-sem-i-concepto-y-usos/
http://retina.umh.es/webvision/spanish/fisicaluz.html
http://www.aitanatp.com/nivel6/luz/propied.htm

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