Está en la página 1de 10

ANLISIS FITOQUMICO PRELIMINAR DE HOJAS, TALLOS Y SEMILLAS DE

CUPAT (STRYCHNOS SCHULTESIANA KRUKOFF)


Preliminary phytochemical analysis of Cupat (Strychnos schultesiana
krukoff) stems and seeds

Palabras clave: Strychnos, anlisis fitoqumico preliminar,


Lyndon Carvajal Rojas
alcaloides.
Yoshie Hata Uribe
Keywords: Strychnos, preliminary phytochemical study, Noralba Sierra Martnez
alkaloids. Diana Rueda Nio

RESUMEN les como primera aproximacin a la ampliacin


del conocimiento qumico y a la posible utilidad
Con el fin de ahondar en el conocimiento de la flora de las especies presentes en esta zona de Colom-
colombiana, particularmente aquella presente en bia con caractersticas agronmicas ptimas para
la regin de los llanos orientales, se eligi la espe- el establecimiento de cultivos, que permitan una
cie Strychnos schultesiana Krukoff para profundi- utilizacin racional de los recursos naturales de
zar en su composicin qumica y as establecer una nuestro pas, como fuente de desarrollo regional y
potencial utilidad medicinal o industrial. Para ello nacional.
se realiz un anlisis fitoqumico preliminar de tres
de sus rganos tallos, hojas y semillas, en el que ABSTRACT
se evalu la presencia de los principales grupos de
metabolitos secundarios asociados con actividad In order to improve the knowledge of Colombian
biolgica, a saber: alcaloides, flavonoides, taninos, flora, particularly that belonging to the llanos
saponinas, derivados antracnicos, esteroides y/o orientales region, Strychnos schultesiana Krukoff
triterpenoides, cumarinas, glicsidos cardiotni- was chosen for a chemical composition indepth
cos y lactonas terpnicas. Se detect la presencia study to establish a potential utility in medicinal
de alcaloides en gran concentracin, lo cual era or industrial fields. For this analysis, a preliminary
de esperarse al tratarse de una especie del gnero phytochemical study of three organs of the plant
Strychnos, ampliamente conocida por su contenido steams, seeds and leafs was made; the purpose
de alcaloides. Es notable tambin la presencia de was to find the main secondary metabolites asso-
flavonoides en los tres rganos. Estos compuestos ciated with biological activities: alkaloids, flavo-
son ampliamente conocidos por sus propiedades noids, tannins, saponins, antracenic derivates, ste-
antioxidantes, tiles en la prevencin de mltiples roids, coumarins, cardiotonic glycosides and terpe-
enfermedades asociadas a los procesos oxidativos. nic lactones. The main compounds were alkaloids.
Los resultados de este trabajo son realmente ti- This fact was expected, as this species belongs to

 Ingeniera Forestal, Facultad del Medio Ambiente y Recursos Naturales, Universidad Distrital Francisco Jos de Caldas.
Correspondencia: lcarvajal@udistrital.edu.co.
 Departamento de Farmacia, Facultad de Ciencias, Universidad Nacional de Colombia, Sede Bogot. yahatau@unal.edu.co
 Departamento de Farmacia, Facultad de Ciencias, Universidad Nacional de Colombia, Sede Bogot. nsierram@unal.edu.co
 Grupo Bsqueda de Principios Bioactivos, Departamento de Farmacia, Facultad de Ciencias, Universidad Nacional de Co-
lombia, Sede Bogot. dcruedan@unal.edu.co

Recepcin: 4 de julio de 2009 / Aprobacin: 1 de septiembre de 2009 Revista Colombia Forestal Vol. 12: 161-170 / Diciembre 2009 161

FORESTAL 12.indd 161 5/18/10 4:53:04 PM


Anlisis fitoqumico preliminar de hojas, tallos y semillas de cupat (Strychnos schultesiana Krukoff)

the genus Strhychnos, widely known because of its nar hasta estudios qumicos sistemticos bioguia-
high alkaloid content. In addition, the existence of dos. Puesto que este ltimo tipo de estudio requiere
flavonoids in the studied organs of the plant is very una inversin considerable de tiempo y recursos,
remarkable. These compounds are well known as lo ideal es iniciar con estudios fitoqumicos pre-
scavengers, useful in prevention of diseases rela- liminares que permitan hacer una discriminacin
ted with oxidative processes. Finally, the results de las plantas a estudiar en trminos de su com-
of this work are very useful as a first approach to posicin qumica, con el fin de seleccionar nica-
the knowledge and utility of the vegetal species mente aquellas ms interesantes para posteriores
found in this location. Furthermore, this plant has estudios sistemticos. El objetivo de un estudio
big agronomical advantages related with the cultu- fitoqumico preliminar es determinar la presencia o
re establishment, which improves the rational use ausencia de los principales grupos de metabolitos
of natural resources in our country, as a means of en una especie vegetal, a saber: alcaloides, antra-
regional and national development. quinonas y naftoquinonas, esteroides y triterpenos,
flavonoides, taninos, saponinas, cumarinas, lacto-
INTRODUCCIN nas terpnicas y cardiotnicos. Dado que cada uno
de estos grupos de compuestos est relacionado
El hombre utiliza las plantas con propsitos medici- con actividades biolgicas especficas, partiendo
nales desde tiempos prehistricos y an hoy tienen de los resultados obtenidos en el estudio fitoqu-
un papel clave en el mantenimiento de la salud de mico preliminar es posible orientar investigaciones
la mayor parte de la poblacin mundial, pese a los posteriores para determinar la actividad biolgica
avances de la medicina moderna. Esto si se tienen de las especies en cuestin y los principios activos
en cuenta las diversas formas en que se utilizan, que involucrados.
van desde la preparacin de decocciones e infusio-
nes en zonas rurales y pases pobres, pasando por En el caso del presente anlisis fitoqumico preli-
los productos fitoteraputicos, hasta la obtencin minar se parti del extracto etanlico de tres rga-
de principios activos en pases desarrollados para nos hojas, semillas y tallos de Strychnos schul-
la elaboracin de medicamentos. Se estima que en tesiana (Loganiaceae) (Missouri Botanical Garden
el mundo se utilizan cerca de 10000 especies vege- 2008), en los cuales se evalu la presencia de los
tales con fines medicinales, la mayor parte en sis- principales grupos de metabolitos secundarios pre-
temas de medicina tradicional (who 1993, Calixto viamente mencionados, mediante pruebas de tubo
2000, Caigueral 2002, Newman et al. 2003). y/o cromatografa en capa delgada que se descri-
ben de manera detallada en el siguiente apartado.
En los pases en vas de desarrollo, donde vive el
75% de la poblacin mundial, se consume menos Las especies del gnero Strychnos han sido utili-
del 15% del mercado total de medicamentos. Las zadas tradicionalmente por muchas comunidades
plantas medicinales representan, por tanto, el ni- indgenas para la preparacin de venenos conoci-
co recurso teraputico disponible para los sectores dos como curares. Strychnos schultesiana es una
ms desfavorecidos de esta poblacin. Por lo ante- especie trepadora que presenta un comportamiento
rior, las autoridades de salud a nivel mundial han muy favorable para su manejo y propagacin en vi-
aumentado considerablemente su atencin a dichos vero, de igual manera comienza entre los 3 y 4 aos
medicamentos, ya que por un lado constituyen la de edad la produccin de frutos, muy abundantes
nica medicina disponible en los pases en vas de en el sitio de recoleccin y conocidos en la pobla-
desarrollo y, por otro, se han convertido en una po- cin con los nombres de cupat, castaa espinosa o
pular alternativa en los pases desarrollados (Sha- solita. Al no conocerse mucho de su composicin
rapin 2002). qumica, se plante la necesidad de realizacin de
un anlisis fitoqumico preliminar para ahondar en
Para determinar la composicin qumica de las su conocimiento qumico.
plantas medicinales y conocer sus constituyentes
biolgicamente activos pueden seguirse metodolo- El cupat es una planta trepadora de hojas simples,
gas que van desde un anlisis fitoqumico prelimi- opuestas, sin estipula ni exudado. La corteza exter-

162 Revista Colombia Forestal Vol. 12 - Diciembre 2009

FORESTAL 12.indd 162 5/18/10 4:53:05 PM


Lyndon Carvajal Rojas / Yoshie Hata Uribe / Noralba Sierra Martnez / Diana Rueda Nio

na es de color caf y la viva, amarilla. Las ramas curares tiles para capturar las presas fcilmente;
tienen espinas opuestas con las cuales asciende. para ello untan la punta del dardo o de la flecha
Flores de color amarillo estn dispuestas en cimas con la cual van a herir al animal. Aunque los frutos
axilares. Los frutos son bayas grandes de color poseen una pulpa carnosa de un sabor muy agrada-
amarillo y con numerosas semillas de color curuba ble, las semillas no se deben consumir ya que con-
que presentan una fragancia muy agradable. En la tienen estricnina. Con respecto a la propagacin,
Figura 1 se pueden observar fotografas de los di- se puede utilizar la semilla de manera exitosa y la
ferentes rganos de la especie. planta es de lento crecimiento en sus primeros esta-
dos de desarrollo, en los que requiere sombra. Por
La especie se distribuye en Per, Ecuador y Vene-
su carcter ascendente tiende a trepar sobre rboles
zuela. En Colombia la encontramos en el Choc
biogeogrfico, Orinoqua, regin Andina y piede- hasta alcanzar las copas. Se han realizado ensayos
monte llanero y es usada por los indgenas de las de propagacin vegetativa que presentan buenos
regiones donde se encuentra para la preparacin de resultados en vivero. La especie presenta rebrotes.

A. B.

C. D.

Figura 1. Fotografas de muestras de Strychnos schultesiana A. Hojas, B. Flores, C. Frutos, D. Semillas.

Revista Colombia Forestal Vol. 12 - Diciembre 2009 163

FORESTAL 12.indd 163 5/18/10 4:53:22 PM


Anlisis fitoqumico preliminar de hojas, tallos y semillas de cupat (Strychnos schultesiana Krukoff)

METODOLOGA otros. En la Figura 2 se describe detalladamente el


procedimiento de purificacin de alcaloides en las
El material vegetal de cupat fue recolectado en el muestras evaluadas.
mes de junio del ao 2008, en la finca El Alcara-
vn, vereda Los Maracos, km 1 va al Ri Ariari, Nafto y antraquinonas: Para la deteccin de este
Granada, Meta. Para realizar el anlisis fitoqumico tipo de metabolitos secundarios se emple la re-
preliminar se utiliz la metodologa corrientemen- accin de Borntrger-Kraus. Para ello, el extracto
te utilizada en el Departamento de Farmacia para etanlico seco fue extrado con una solucin etan-
tal propsito (Sanabria 1983), la cual se divide en lica en agua (1:7), a la cual se adicion perxido de
tres etapas: procesamiento del material vegetal, hidrgeno y cido sulfrico y se procedi a calen-
obtencin del extracto etanlico y realizacin de tar; bajo estas drsticas condiciones, se hidrolizan
la prueba de identificacin de cada uno de los me- los enlaces glicosdicos y se oxidan las antronas y
tabolitos. los antranoles hasta antraquinonas, las cuales fue-
ron extradas con tolueno y agitadas en presencia
Procesamiento del material vegetal: Hojas, tallos
de una solucin de hidrxido de sodio al 5% que
y semillas de S. schultesiana fueron sometidos a un
contiene hidrxido de amonio al 2%. En caso de
proceso de secado en una estufa de aire circulante a
presencia de nafto o antraquinonas, al dejar separar
50 C por 48 horas, trabajando cada uno de los r-
las fases la capa alcalina (inferior) toma una co-
ganos de la planta por separado. Posteriormente, el
loracin que va del rosado al rojo intenso, depen-
tamao de partcula se disminuy pasando el mate-
diendo de la concentracin de estos compuestos en
rial seco por un molino de discos (hojas y tallos) o
la muestra.
un molino de cuchillas (semillas), segn el caso.
Esteroides y triterpenoides libres: Para su an-
Obtencin del extracto etanlico: 100 g del ma-
lisis preliminar en plantas la prueba ms comn-
terial vegetal seco y molido de cada uno de lo r-
ganos a estudiar fueron sometidos separadamente mente usada es la de Liebermann-Burchard. Para
a maceracin, en un baln de fondo plano por un realizar esta prueba, fue necesario hacer un proce-
tiempo de 24 horas, utilizando como solvente de dimiento de separacin previo en el cual se obtuvo
extraccin etanol del 96% en cantidad suficiente un extracto en ter de petrleo a partir del extracto
para cubrir el material vegetal. Posteriormente se etanlico seco. Este extracto etreo se extrajo de
llev a reflujo por una hora, se dej enfriar a tem- nuevo con una mezcla de metanol - agua 9:1, se
peratura ambiente y se filtr y concentr para eli- recuper la capa superior y se someti a cromato-
minar el solvente y proceder a realizar las pruebas grafa en capa delgada, empleando gel de slice F254
para cada uno de los metabolitos. como fase estacionaria y una fase mvil compuesta
por una mezcla hexano - acetato de etilo (95:5).
Alcaloides: La mayora de los alcaloides, con ex- La cromatografa desarrollada se dej secar antes
cepcin de los alcaloides de amonio cuaternario y de revelarla, se asperj con el reactivo de Lieber-
N-xidos de amina, son solubles en solventes or- mann-Burchard (solucin etanlica de anhdrido
gnicos poco polares, como cloroformo y mezclas actico en presencia de cido sulfrico) y se some-
de ste, pero pueden formar sales solubles en agua ti a calentamiento (110 C) durante 5 a 10 min. Se
en presencia de cidos minerales diluidos, como considera resultado positivo si bajo estas condicio-
el cido clorhdrico al 5% en agua. Esta propiedad nes aparecen manchas en cualquier tonalidad del
cido-base se aprovech para su purificacin a par- rojo, azules o verdes.
tir de extractos totales. Luego de este paso inicial
se realizaron pruebas de precipitacin en medio Flavonoides: Para su deteccin se emplea princi-
cido, utilizando para ello sales de metales pesa- palmente la reaccin de la cianidina, conocida tam-
dos como el ioduro de potasio (reactivo de Dragen- bin como reaccin de Shinoda. Para ello el extracto
dorff), el ioduro de potasio y mercurio (reactivo de etanlico seco se extrajo con una solucin etanli-
Mayer) y la sal de Reineckato de amonio, entre ca en agua (1:7) y se filtr. Este filtrado, denomina-

164 Revista Colombia Forestal Vol. 12 - Diciembre 2009

FORESTAL 12.indd 164 5/18/10 4:53:23 PM


Lyndon Carvajal Rojas / Yoshie Hata Uribe / Noralba Sierra Martnez / Diana Rueda Nio

do A, se puso en un tubo de ensayo con 0.5 g de de magnesio, evaporando a sequedad y extrayendo


magnesio en polvo. Seguidamente se adicion hcl luego con etanol al 96%. Una vez eliminados los
concentrado, gota a gota, hasta el desprendimiento taninos, 1 ml de esta solucin se puso en un tubo de
de hidrgeno. Si en estas condiciones se observa la ensayo en presencia de 5 ml de suspensin norma-
aparicin de coloracin rojiza, violeta o naranja, se lizada de glbulos rojos. Como patrn de hemlisis
considera positivo para compuestos con el ncleo positiva se emplearon 0.5 ml de una solucin de
de la -benzopirona (flavonas, flavonoles, flavano- digitonina (10 mg en 100 ml de etanol del 80%)
nas, flavanonoles, isoflavonoides y xantonas). en presencia de 5 ml de suspensin normalizada
de glbulos rojos y como blanco se emplearon 5ml
Tambin existe otro tipo de flavonoides denomi- de la misma suspensin con 1 ml de agua. La prue-
nados leucoantocianidinas, las cuales por cambio ba de hemlisis es considerada positiva cuando en
en el pH se tornan de incoloras a intensamente 10 min se presenta hemlisis en el patrn y en la
coloreadas de rojo. Para detectar la presencia de muestra, mientras que el blanco permanece sin he-
este tipo de compuestos en la muestra, el filtrado molizar.
A fue transferido a un tubo de ensayo, se adicion
cido clorhdrico concentrado y se someti a calen- La prueba de formacin de espuma consiste en
tamiento en un bao mara hirviendo durante 10-15 agitar vigorosamente la solucin acuosa (7:1), ob-
min. La aparicin de coloracin rojiza bajo estas tenida del extracto etanlico total, en un tubo de
condiciones indica la presencia de leucoantociani- ensayo y observar la espuma formada. sta debe
dinas. ser estable por lo menos 30 minutos para poder es-
tablecer la presencia de saponinas.
Taninos: Estos polifenoles tienen la propiedad
de unirse a las protenas y precipitarlas. Por esta Glicsidos cardiotnicos: Estos compuestos po-
razn, la prueba ms empleada para la deteccin seen caractersticas estructurales similares a las de
de este grupo de metabolitos secundarios emplea las saponinas, con una estructura compuesta por
el reactivo de gelatina-sal, el cual produce un pre- un ncleo esteroidal glicosilado (2 desoxiazcares)
cipitado blanco en presencia de taninos, luego de y una lactona insaturada de 5 o 6 miembros. Para
haber extrado el extracto etanlico total con una la deteccin de stos pueden emplearse pruebas
solucin acuosa de etanol (7:1). Estos precipitados en tubo de ensayo especficas para cada una de
formados como consecuencia de la presencia de ta- las partes que componen la molcula, o tcnicas
cromatogficas. El presente anlisis fitoqumico
ninos deben ser solubles en urea 10 M y producir
preliminar emple cromatografa en capa delga-
coloraciones verdes, azules o negras tras la adicin
da (ccd), sirvindose de dos placas cromatogrfi-
de cloruro frrico al 10% en agua.
cas eludas en la misma fase mvil (cloroformo:
Saponinas: Son glicsidos cuya aglicona consiste metanol: agua 82:17:1) con el fin de comparar los
en un ncleo esteroidal o triterpnico; esta carac- valores de Rf de los compuestos revelados. Una de
terstica estructural les confiere un carcter anf- ellas se revel con el reactivo de vainillina - cido
tero que les permite actuar como tensioactivos. ortofosfrico (1% vainillina y 10% de cido en eta-
Aprovechando esta propiedad, las dos pruebas ms nol), especfico para esteroides y triterpenos, con
empleadas en la deteccin de saponinas son la de el fin de detectar el ncleo esteroidal de los car-
hemlisis y la de formacin de espuma, puesto que diotnicos. La otra placa se revel con la reaccin
al ser tensioactivas las saponinas inestabilizan la de Raymond, la cual utiliza m-dinitrobenceno (2%
membrana celular de los eritrocitos, induciendo su en etanol) y naoh al 20%; en estas condiciones, las
ruptura. -lactonas - insaturadas producen coloraciones
violeta que desaparecen rpidamente. De esta ma-
Para realizar la prueba de hemlisis el extracto eta- nera, slo aquellas manchas que revelan en las dos
nlico fue extrado con la solucin acuosa (7:1). En placas pueden considerarse cardiotnicos pues po-
caso de ausencia de taninos, se procedi a realizar seen el ncleo esteroidal adems de la lactona insa-
las pruebas; de lo contrario, con el fin de eliminar- turada. Esto se evidencia claramente con un patrn
los, se adicionaron aproximadamente 2 g de xido de digitoxina.

Revista Colombia Forestal Vol. 12 - Diciembre 2009 165

FORESTAL 12.indd 165 5/18/10 4:53:24 PM


Anlisis fitoqumico preliminar de hojas, tallos y semillas de cupat (Strychnos schultesiana Krukoff)

Practicar las 4
reacciones de
precipitacin

Figura 2. Anlisis preliminar de alcaloides.

Previo a la realizacin de la cromatografa es ne- porador rotatorio, se dej enfriar y se extrajo en


cesario eliminar las clorofilas del extracto, ya que un embudo de decantacin con 2 volmenes de 30
intervienen con el ensayo. Es necesario hacer lo ml de cloroformo. Se combinaron las capas cloro-
mismo en el caso del anlisis de cumarinas y lacto- frmicas, se adicion sulfato de sodio anhidro, se
nas sesquiterpnicas. Para ello el extracto etanlico filtr y se concentr a 3 ml aproximadamente, ob-
seco fue tratado con un volumen aproximadamente teniendo as la solucin a ser utilizada en las prue-
igual de una solucin de acetato de plomo al 4% bas cromatogrficas.
que contena 0.5% de cido actico, con el fin de
Cumarinas: Son compuestos derivados de la -
precipitar las clorofilas presentes. Esta mezcla se benzopirona. Dado que en su estructura presentan
dej en reposo durante aproximadamente 15 min y un gran nmero de instauraciones, estos compues-
se filtr a presin atmosfrica. El filtrado as obte- tos exhiben una fuerte fluorescencia azul o verde
nido fue concentrado a 3/4 de su volumen en eva- al ser irradiados con luz ultravioleta, propiedad

166 Revista Colombia Forestal Vol. 12 - Diciembre 2009

FORESTAL 12.indd 166 5/18/10 4:53:31 PM


Lyndon Carvajal Rojas / Yoshie Hata Uribe / Noralba Sierra Martnez / Diana Rueda Nio

que se aprovecha para su deteccin. Adicional- DISCUSIN


mente, puesto que todas las cumarinas poseen en
su estructura una -lactona, pueden identificarse En el presente anlisis fitoqumico preliminar de
mediante las reacciones propias para lactonas. Por hojas, tallos y semillas de la especie S. schultesia-
este motivo, con el fin de determinar la presencia na se parti de extractos etanlicos puesto que este
solvente tiene la capacidad de extraer compuestos
de cumarinas en la muestra, se desarroll una cro-
de una amplia gama de polaridades, adems de ser
matografa en capa delgada empleando gel de slice
menos costoso y txico que otros solventes orgni-
F254 como fase estacionaria y una mezcla clorofor-
cos. La metodologa seguida para este anlisis fue
mo-cetona 9:1 como fase mvil. Una vez eluda la la previamente estandarizada por Sanabria (1983),
placa, se observ a la luz uv (365 y 254 nm) antes y contempla la deteccin de los metabolitos secun-
de revelarse con la reaccin del hidroxamato frri- darios generalmente relacionados con actividades
co, especfica para lactonas. Esta reaccin consiste biolgicas.
en asperjar la placa con una mezcla de volmenes
iguales de clorhidrato de hidroxilamina al 2% en A continuacin se presenta la discusin de los re-
etanol y naoh 2N, calentar por 5-10 min a 100 C sultados consignados en la Tabla 1, en relacin a los
y, al cabo de este tiempo, dejar enfriar y asperjar rganos de la especie S. schultesiana evaluados.
con volmenes iguales de hcl 2N y FeCl3 al 1% en
Con respecto a los alcaloides, fue el grupo de meta-
etanol. Aquellos compuestos con fluorescencia al
bolitos secundarios ms abundante encontrado en
ultravioleta que luego de la aplicacin del reactivo los tres rganos. Sin embargo, dado que la cantidad
revelador exhiben coloracin anaranjada al visible de precipitado obtenido es proporcional a la con-
son considerados cumarinas. Una placa cromato- centracin de alcaloides en la muestra, puede infe-
grfica adicional puede asperjarse con koh al 5%, rirse que las hojas son el rgano de la planta donde
el cual acenta fuertemente la fluorescencia de es- tiene lugar la mayor acumulacin de alcaloides,
tos compuestos al ser expuestos a la luz uv. aunque cabe aclarar que en tallos y semillas tam-
bin se encuentran en concentracin apreciable.
Lactonas sesquiterpnicas: Estos compuestos,
como su nombre lo indica, son terpenos con un es- Es conocido que las especies del gnero Strychnos
queleto de 15 tomos de carbono, que tienen ade- presentan una alta concentracin de alcaloides de
ms en su estructura una lactona. Para identificar tipo indlico (estricnina, Yang & Yang 1993, San-
estos compuestos se hicieron dos cromatografas tos et al. 2006), los cuales son solubles principal-
en capa delgada (fase estacionaria: gel de slice mente en solventes de baja polaridad. Por este mo-
F254) eludas con una fase mvil compuesta por tivo, los extractos obtenidos con este tipo de sol-
cloroformo y acetona (9:1). Una de las cromato- ventes durante el proceso de purificacin (filtrados
grafas fue revelada para terpenos, como se indic A y B) presentaron una mayor concentracin de
en el caso de los glicsidos cardiotnicos, y la otra alcaloides, tal como se muestra en la Tabla 1. Ade-
se derivatiz para lactonas con el reactivo de hi- ms de alcaloides de tipo indlico, puede inferirse
droxamato frrico, como se indic en el caso de la presencia de alcaloides de amonio cuaternario o
las cumarinas. Ambas pruebas deben ser positivas N-xidos de amina en las semillas y las hojas de
para poder concluir que la muestra presenta este esta planta, puesto que se obtuvo resultado positivo
con el Reineckato de amonio, tanto en el extracto
tipo de metabolitos secundarios.
inicial como en la fase ms polar del proceso de
RESULTADOS purificacin, donde se encuentra concentrado este
tipo de alcaloides. Sin embargo, se deduce que
En la Tabla 1 se presentan los resultados obtenidos la concentracin de stos es muy baja, lo que se
luego de hacer el anlisis fitoqumico preliminar de evidencia en la reducida cantidad de precipitado
los tres rganos seleccionados de S. schultesiana. obtenido.

Revista Colombia Forestal Vol. 12 - Diciembre 2009 167

FORESTAL 12.indd 167 5/18/10 4:53:32 PM


Anlisis fitoqumico preliminar de hojas, tallos y semillas de cupat (Strychnos schultesiana Krukoff)

Tabla 1. Resultados de los anlisis fotoqumicos preliminares de hojas, tallos y semillas de Strychnos schultesiana.

rgano
Metabolito
Hojas Tallos Semillas
Filtrado A +++ + ++
Filtrado B +++ + ++
Filtrado C ++ + +
Alcaloides
Filtrado D ++ - +
Capa acuosa 3 + - +
Capa Cloroformo - - -
Nafto/Antraquinonas - - -
Esteroides y/o triterpenoides libres ++ ++ ++
Flavonoides ++ ++ ++
Taninos + - -
Saponinas + - -
Glicsidos cardiotnicos - - -
Cumarinas - - -
Lactonas sesquiterpnicas - - +

+ Presencia escaza, ++ Presencia relativamente abundante, +++ Presencia abundante, - No detectado.

La cromatografa realizada para la deteccin de dado que el precipitado obtenido es soluble en urea
esteroides y/o triterpenos permite determinar la y produce coloracin verde tras la adicin de cloru-
presencia de estos compuestos en las tres muestras ro frrico, se infiere que estos taninos son del tipo
evaluadas, lo que se evidencia en la aparicin de catquico o condensados. Sin embargo, la reducida
diversas manchas de tonalidades azulosas y roji- cantidad de precipitado obtenido indica una baja
zas. Las hojas presentan un mayor nmero de estos concentracin de taninos en la muestra.
compuestos en comparacin con semillas y tallos.
Segn lo observado, el lupeol no se encuentra pre- Respecto al anlisis de saponinas, slo el extracto
sente en esta planta puesto que en ninguno de los etanlico de las hojas de la especie evaluada pro-
rganos evaluados se observan manchas con un va- dujo hemlisis comparable a la observada con el
lor de Rf similar al obtenido para este patrn. patrn, mientras que con los extractos de tallos y
semillas los eritrocitos permanecieron intactos,
El anlisis fitoqumico preliminar de hojas, tallos lo que se evidenci por la turbidez de la suspen-
y semillas de S. schultesiana permiti comprobar sin de glbulos rojos. De lo anterior se infiere
tambin la presencia de flavonoides en la especie, que de los tres rganos analizados, slo las hojas
ya que en los tres rganos evaluados se obtuvie- contienen saponinas. Por otro lado, los resultados
ron resultados positivos con la reaccin de Shi- de la prueba de espuma para semillas y tallos con-
noda y con la del cido clorhdrico. Lo anterior cuerdan con esta conclusin, puesto que al agitar
indica la presencia de flavonoides tipo flavona, la muestra no se observ la formacin de espuma
flavonol, flavanona, flavanonol, isoflavonoide y abundante ni estable; sin embargo, a pesar de los
leucoantocianidinas. resultados obtenidos en la prueba de hemlisis para
el extracto de hojas, el ensayo de espuma arroj
Por otra parte, puesto que slo las hojas de S. schul- resultados negativos, lo cual puede deberse a que,
tesiana ocasionaron precipitacin del reactivo ge- como se expuso anteriormente, no todas las sapo-
latina - sal, puede concluirse que en este rgano se ninas tienen la capacidad de producir espuma. Aun
concentran los taninos producidos por la planta, y con estos resultados a simple vista contradictorios

168 Revista Colombia Forestal Vol. 12 - Diciembre 2009

FORESTAL 12.indd 168 5/18/10 4:53:33 PM


Lyndon Carvajal Rojas / Yoshie Hata Uribe / Noralba Sierra Martnez / Diana Rueda Nio

para el extracto de hojas, puede inferirse la presen- observada en el extracto de tallos no revel, por lo
cia de saponinas en l, pues la prueba ms conclu- que puede concluirse que aunque los tallos poseen
yente para la determinacin de saponinas es la de lactonas, no son de tipo terpnico.
hemlisis.
Para esta especie no se encuentran reportes sobre
En cuanto a la deteccin de glicsidos cardiotni- composicin qumica. Sin embargo, los resultados
cos, ninguno de los esteroides observados tras re- obtenidos del presente anlisis fitoqumico preli-
velar una de las placas con vainillina present co- minar de hojas, tallos y semillas de esta planta co-
loracin violeta similar a la del patrn en la placa inciden con los reportados para otras especies del
revelada con la reaccin de Raymond, por lo cual gnero Strychnos. Ejemplo de lo anterior son los
puede deducirse que la especie S. schultesiana no reportes de la presencia de alcaloides en las hojas
contiene glicsidos cardiotnicos en hojas, tallos de S. pseudoquina y en semillas de S. nux-vomica
ni semillas. Por su parte, el patrn de digitoxina (Nicoletti & Colus 1984, Yang & Yang 1993, San-
produjo coloraciones violetas, al ser revelado tanto tos et al. 2006), flavonoides en hojas de S. pseudo-
con el reactivo de vainillina en cido o-fosfrico quina y S. spinosa (Nicoletti et al. 1984, Hoet et al.
como con el de Raymond, tal como se esperaba. 2004, Santos et al. 2006) y esteroides y cidos gra-
sos en races y tallos de S. nitida (Gu et al. 1997).
Para la deteccin de cumarinas se emplearon tres Adicionalmente, se reporta la presencia de otros
fases mviles, de las cuales aquella constituida por grupos de metabolitos no analizados en esta opor-
tolueno-ter etlico (1:1), saturada con cido ac-
tunidad, como lignanos en tallos de S. vanprukii
tico al 10%, permiti una mejor separacin de los
(Thongphasuk et al. 2004), glicsidos fenlicos,
componentes de cada extracto, encontrndose as
iridoides en madera y corteza de S. axillaris (Itoh
una mancha fluorescente bien definida en el ex-
y Colus 2008) y cidos orgnicos como el qunico
tracto de tallos, otra en el extracto de semillas y
y el lognico y steres de los mismos en corteza y
cuatro en el de hojas; sin embargo, al revelar con la
madera de S. lucida (Itoh et al. 2008).
reaccin del hidroxamato frrico, ninguna de ellas
present coloracin caf similar a la del patrn,
descartando as la presencia de cumarinas en los A pesar de no haber detectado cumarinas en el pre-
extractos. sente anlisis fitoqumico preliminar de S. schulte-
siana, se ha reportado la presencia de este tipo de
Para confirmar lo anterior, se asperj una de las metabolitos secundarios en las races de S. catha-
placas desarrolladas en acetato de etilo, con koh al yensis (Luo 2006). Sin embargo, este es un grupo
5%, con lo cual no se intensific la fluorescencia de de compuestos cuya presencia no se haya amplia-
las manchas observadas, que incluso desapareci, mente descrita en la literatura de otras plantas del
confirmando que no se trata de cumarinas sino de gnero Strychnos, por lo que puede tratarse de un
otros compuestos poliinsaturados que pueden fluo- grupo poco difundido en estas especies y presen-
rescer tambin al uv. te en estos rganos (races). Adems, cabe aclarar
que la presencia de un tipo de metabolito en una
Por otro lado, si bien los compuestos fluorescentes planta no condiciona su presencia en otras especies
presentes en semillas y hojas de S. schultesiana no del mismo gnero.
se colorearon tras revelar la placa con la reaccin
del hidroxamato frrico, los extractos de tallos y Grupos de metabolitos secundarios como los gli-
semillas presentaron manchas de color caf que no csidos antracnicos, los cardiotnicos, saponinas
fluorescan al uv, lo que indica la presencia de lac- y taninos, los cuales no fueron detectados en el
tonas. Sin embargo, al revelar con el reactivo de presente estudio o slo fueron detectados en uno
vainillina, slo las lactonas presentes en el extrac- de los rganos evaluados, no se encuentran repor-
to de semillas poseen una parte terpnica que se tados en la literatura consultada para otras especies
observa de color violeta, mientras que la mancha del gnero Strychnos.

Revista Colombia Forestal Vol. 12 - Diciembre 2009 169

FORESTAL 12.indd 169 5/18/10 4:53:34 PM


Anlisis fitoqumico preliminar de hojas, tallos y semillas de cupat (Strychnos schultesiana Krukoff)

CONCLUSIONES Luo, T. 2006. Studies on the chemical consti-


tuents and biological activities from the stem
Los resultados del anlisis fitoqumico preliminar
of Pourthiaea lucida and the root of Strych-
efectuado sobre la muestra de hojas de S. schul-
nos cathayensis. Masters Thesis. Gradua-
tesiana Krukoff evidencian la presencia de alca-
te Institute of Pharmaceutical Technology,
loides, taninos, flavonoides, saponinas, esteroides
Tajen University. Taiwan. Disponible en:
y/o triterpenoides. Los tallos y las semillas de la
http://192.192.215.232/ETD-db/ETD-search/
misma especie presentan alcaloides, flavonoides,
view_etd?URN=etd-0717107-162042
lactonas y esteroides. En estos rganos no se de-
tect la presencia de saponinas ni taninos. Las se- Missouri Botanical Garden. 2008. Disponible en:
millas contienen lactonas terpnicas, mientras que http://www.tropicos.org/
en los tallos se encuentran lactonas pero no de tipo Nicoletti, M., M. Goulart., R. de Lima, A.
esteroidal. En ninguno de los rganos evaluados se Goulart, F. Delle Monache & G. Marini
encontr la presencia de cumarinas ni glicsidos Bettolo. 1984. Flavonoids and alkaloids from
cardiotnicos o antraquinnicos. Strychnos pseudoquina. J. Nat. Prod. 47 (6):
953-957.
AGRADECIMIENTOS
Newman, D. J., G. M. Cragg & K. M. Snader.
A la Corporacin para el Desarrollo del rea del 2003. Natural products as sources of new drugs
Manejo Especializado la Macarena CORMACA- over the period 1981 - 2002. Journal of Natural
RENA, por la financiacin de este proyecto el Products 66: 1022-1037.
cual se desarroll en el marco del convenio 05 de Sanabria, A. 1983. Anlisis fitoqumico prelimi-
2001 suscrito con la Universidad Distrital Francis- nar. Metodologa y su aplicacin en la evalua-
co Jos de Caldas. cin de 40 plantas de la familia Compositeae.
Facultad de Ciencias, Departamento de Far-
REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS
macia, Universidad Nacional de Colombia.
Calixto, J. B. 2000. Efficacy, safety, quality con- Bogot.
trol, marketing and regulatory guidelines for Santos, F., I. Colus, M. Silva, W. Villegas & E.
herbal medicines (phytotherapeutic agents). Varanda. 2006. Assessment of dna damage by
Brazilian Journal of Medical and Biological extracts and fractions of Strychnos pseudoqui-
Research 33: 179-189. na, a Brazilian medicinal plant with antiulcero-
Caigueral, S. 2002. La fitoterapia: una terapu- genic activity. Food and Chemical Toxicology
tica para el tercer milenio? Revista de Fitotera- 4 (9): 1585-1589.
pia (2): 101-121. Sharapin, N. 2002. Materias primas vegetales
Gu, Z., T. Li, P. Xiao, J. Chen & W. Lian. 1997. para la industria de productos fitofarmacuti-
Chemical constituents of Strychnos nitida G. cos. Revista de Fitoterapia 1 (3): 23-28.
Don. Zhongguo Zhong Yao Za Zhi 22 (1): 40- Thongphasuk, P., R. Suttisri, R. Bavovada & R.
41. Verpoorte. 2004. Antioxidant lignan gluco-
Hoet, S., F. Opperdoes, R. Brun, V. Adjakidj & sides from Strychnos vanprukii. Fitoterapia 75
J. Quetin-Leclercq. 2004. In vitro antitrypa- (7-8): 623-628.
nosomal activity of ethnopharmacologically World Health Organization (WHO). 1993. Re-
selected Beninese plants. Journal of Ethno- search guidelines for evaluating the safety and
pharmacology 91 (1): 37-42. efficacy of herbal medicines. Geneva. Pg. 57.
Itoh, A., Y. Tanaka, N. Nagakura, T. Nishi & Yang, X. & Z. Yan. 1993. Studies on the chemical
T. Tanahashi. 2006. A quinic acid ester from constituents of alkaloids in seeds of Strychnos
Strychnos lucida. J. Nat. Med 60: 146-148. nux-vomica L. Zhongguo Zhong Yao Za Zhi
18 (12): 739-40, 763-764.

170 Revista Colombia Forestal Vol. 12 - Diciembre 2009

FORESTAL 12.indd 170 5/18/10 4:53:35 PM