Tcnicas de Caracterizao dos Materiais II

Experimento 1: Espectrofotmetro

Alunos:
Hortncia Noronha dos Santos
Jaderson Gonalves
Renato Camponogara Panziera

Professor: Jacson Weber de Menezes

Setembro de 2017
Sumrio

1 Introduo terica .................................................................................................................... 5

2 Procedimento experimental ..................................................................................................... 6

2.1 Ensaio de absorbncia e transmitncia ........................................................................... 7

3 Resultados e Discusses ........................................................................................................... 7

Concluso ................................................................................................................................... 16

Referncias Bibliogrficas ........................................................................................................ 17

2
Objetivos

Objetivo geral:
O objetivo deste experimento determinar a concentrao em percentual de massa
de azul de metileno diludo em gua utilizando o espectrofotmetro modelo V-M5,
fazendo uso de quatro concentraes conhecidas, atravs da utilizao da curva de
concentrao determinada.
Objetivos especficos:
Determinar o espectro de transmitncia do azul de metileno em gua (maior
concentrao) tendo gua como referncia (500-800 nm);
Determinar o espectro de absorbncia do azul de metileno em gua (maior
concentrao) tendo gua como referncia (500-800 nm);
Fazer a curva de calibrao utilizando o comprimento de onda em que a absoro
mxima considerando concentraes conhecidas;
Encontrar o fator de proporcionalidade F atravs do grfico Concentrao (C) x
Absorbncia (A), onde C = FA;
Determinar a concentrao do azul de metileno de uma amostra desconhecida
utilizando a curva de calibrao determinada.

3
Resumo

Este relatrio descreve o procedimento experimental para o uso de um equipamento de

espectrofotometria. Com o auxlio de um espectrofotmetro da marca Bel Photonic,
modelo V-M5, foi possvel comparar a radiao absorvida e transmitida por uma soluo
que contm uma quantidade determinada e outra desconhecida de uma substncia, no
caso, azul de metileno diludo em diferentes concentraes. Alm do espectrofotmetro,
foram utilizadas ferramentas grficas a fim de determinar a curva de calibrao e ento
determinar o fator de proporcionalidade, ferramenta essa Software Excel.

4
1 Introduo terica

A espectrofotometria uma tcnica analtica que utiliza um mtodo de anlise

ptico para medir a concentrao de espcies qumicas. Este mtodo baseia-se na
interao, absoro e ou emisso, da matria com a energia radiante, ou seja, radiao
eletromagntica quando os eltrons se movimentam entre nveis energticos. A absoro
da radiao luminosa acontece nos comprimentos de onda entre o ultravioleta e o
infravermelho, 400 nm a 750 nm respectivamente, no espectro da radiao
eletromagntica. Uma vez que diferentes substncias tm diferentes padres de absoro,
a espectrofotometria permite-nos, por exemplo, identificar substncias com base no seu
espectro. Permite tambm quantific-las, uma vez que a quantidade de luz absorvida est
relacionada com a concentrao da substncia.
Nas aplicaes espectrofotomtricas, quando se usa energia monocromtica (de
uma s cor) em um simples comprimento de onda (), a frao de radiao absorvida pela
soluo, ignorando perdas por reflexo, ser funo da concentrao da soluo e da
espessura da soluo. Portanto, a quantidade de energia transmitida diminui
exponencialmente com o aumento da espessura atravessada Lei de Lambert e o
aumento da concentrao ou da intensidade de cor da soluo Lei de Beer. A relao
entre e a intensidade da luz transmitida pela amostra a ser medida (I) e a intensidade da
luz transmitida pela referncia (I0), indica a transmitncia (T) da soluo que deve estar
entre 0 e 1 (T=I/I0). Em espectrofotometria, utiliza-se a absorbncia (A) como a
intensidade de radiao absorvida pela soluo que diretamente proporcional a
concentrao c da espcie absorvente na amostra. Para os parmetros supracitados, temos
a formulao da lei de Lambert-Beer:
A= - log(I/I0) (1)
Alm disso, de acordo com a lei, a absorbncia pode ser relacionada com a
concentrao do analito de acordo com a seguinte expresso: A=alC onde a o
coeficiente de absoro, l a espessura ptica e C a concentrao do analito. O
instrumento permite determinar o fator de proporo entre a concentrao e a absorbncia,
denominado fator F, ou seja:
C=F.A (2)
Na espectrofotometria, a fonte de radiao emite at a regio ultravioleta do
espectro. Desta radiao selecionam-se comprimentos de onda definidos que constituem

5
bandas, com largura menor que 1nm. O instrumento utilizado para este procedimento o
espectrofotmetro.
O espectrofotmetro um aparelho que faz passar um feixe de luz monocromtica
atravs de uma soluo, e mede a quantidade de luz que foi absorvida e a luz transmitida
por essa soluo. Usando um prisma (difrator), o aparelho separa a luz em feixes com
diferentes comprimentos de onda. Para se obter informao sobre a absoro de uma
amostra, ela inserida no caminho ptico do aparelho. Ento, luz UV e/ou visvel em
certo comprimento de onda (ou uma faixa de comprimentos de ondas) passada pela
amostra o que nos permite sabe a quantidade de luz absorvida ou transmitida pela amostra
em determinado comprimento de onda.
Para determinao da concentrao de um soluto em uma amostra por
espectrofotometria, temos a comparao da absorbncia da amostra com uma soluo
padro, na qual j conhecida a concentrao do soluto. Em geral, utilizada uma
soluo-padro com diferentes concentraes (padres de referncia), que tem sua
absorbncia determinada.

2 Procedimento experimental

No espectrofotmetro, depois das devidas instrues de manuseio e operao, foi

feita a seleo de um par de cubetas. Uma delas padro e outra com concentrao
conhecida de azul de metileno de 0,0010%, que foram utilizadas para realizar as medidas
de transmitncia e absorbncia para os comprimentos de onda que variam de 500 nm a
800 nm com passos de 10 nm.

6
 (a) (b)
Figura 1 - Espectrofotmetro Bel Photonics V-M5 (a) e porta cubetas (b).

Fonte: Autoria prpria.

2.1 Ensaio de absorbncia e transmitncia

Inicialmente ajustou-se o comprimento de onda do espectrofotmetro em 500 nm,

inseriu-se a cubeta padro e a cubeta de concentrao de 0,0010% no equipamento. Afim
de ajustar o 0% de absorbncia foi realizada a leitura da cubeta padro, lembrando que
esse procedimento deve ser conferido e ajustado para cada nova medio a ser realizada,
e ento mudava-se a posio das cubetas para leitura da cubeta de concentrao conhecida
para medir a absorbncia (A) e a transmitncia (T). Para a medio do novo comprimento
de onda, deve-se repetir os passos citados acima.
A partir disso, foi obtido o espectro de absoro e transmitncia do azul de
metileno na faixa de 500 nm a 800 nm com passos de 10 nm. Sendo anotadas todas as
medidas.

3 Resultados e Discusses

A partir do procedimento experimental realizado, a Tabela 1 mostra a

transmitncia e absorbncia medida para cada comprimento de onda da cubeta de
concentrao de azul de metileno em percentual de massa relativa a gua de 0,0010%.

7
 Tabela 1 Espectro de transmitncia e absorbncia de azul de metileno.
Concentrao de azul de metileno em percentual de massa
relativa a gua
Comprimento de onda (nm) T% (medida) A% (medida)
500 85,5 0,067
510 85,3 0,069
520 84,8 0,071
530 82,3 0,08
540 79,7 0,098
550 73,8 0,131
560 67,7 0,161
570 59,8 0,223
580 50,6 0,295
590 40,7 0,389
600 29,7 0,527
610 21,8 0,663
620 19,4 0,711
630 19,4 0,712
640 16,2 0,791
650 12,3 0,947
660 7,3 1,138
670 6,2 1,204
680 13,3 0,875
690 36,7 0,436
700 67 0,174
710 85,2 0,069
720 91,6 0,038
730 94,1 0,026
740 95,7 0,018
750 96,5 0,015
760 97,5 0,02
770 97,3 0,012
780 97,6 0,011
790 97,7 0,01
800 98 0,009
Fonte: Autoria prpria.

Com os dados obtidos, pode-se fazer o grfico entre transmitncia e comprimento

de onda como mostra a Figura 2.

8
 Tx
110
100
90
80
T% (medida)
70
60
50
40
30
20
10
0
500 550 600 650 700 750 800
Comprimento de onda (nm)

Figura 2 - Grfico T x .

Fonte: Autoria prpria.

possvel verificar que no comprimento de onda de 670 nm obteve-se o valor

mnimo de transmitncia de 6,2% indicando a quantidade de energia que chega ao
receptor do equipamento.
De acordo com a seguinte pergunta do roteiro: Se no tivesse o boto de calibrao
"0Abs.", a absorbncia total poderia ser medida tomando a absoro da referncia bem
como a absoro da amostra, ambas tendo como intensidade inicial a luz que sai da fonte.
Neste caso, como deveria ser calculada a absorbncia total da amostra, levando em
considerao a luz transmitida pela amostra bem como a luz transmitida pela referncia?
Matematicamente, a partir da equao 1, pode-se determinar a absorbncia
utilizando as propriedades logartmicas como:

= log ( ) = (log log 0 ) = log 0 log
0
Desta forma obtm-se:
= 2 1
A determinao da T em funo do pode ser obtida matematicamente a partir
dos valores de absorbncia, atravs da seguinte relao:
= log() (3)
Onde: A absorbncia e T transmitncia.
Desta relao obtm-se:
= 10 (4)

9
 O resultado dessa relao, equao 4, demonstrado na Tabela 2 onde possvel
perceber que os valores calculados so muito prximos dos medidos.

Tabela 2 - Transmitncia calculada.

Comprimento de onda (nm) T% (medida) A% (medida) T% (calculada)

500 85,5 0,067 85,704
510 85,3 0,069 85,310
520 84,8 0,071 84,918
530 82,3 0,08 83,176
540 79,7 0,098 79,799
550 73,8 0,131 73,961
560 67,7 0,161 69,024
570 59,8 0,223 59,841
580 50,6 0,295 50,699
590 40,7 0,389 40,832
600 29,7 0,527 29,717
610 21,8 0,663 21,727
620 19,4 0,711 19,454
630 19,4 0,712 19,409
640 16,2 0,791 16,181
650 12,3 0,947 11,298
660 7,3 1,138 7,278
670 6,2 1,204 6,252
680 13,3 0,875 13,335
690 36,7 0,436 36,644
700 67 0,174 66,988
710 85,2 0,069 85,310
720 91,6 0,038 91,622
730 94,1 0,026 94,189
740 95,7 0,018 95,940
750 96,5 0,015 96,605
760 97,5 0,02 95,499
770 97,3 0,012 97,275
780 97,6 0,011 97,499
790 97,7 0,01 97,724
800 98 0,009 97,949
Fonte: Autoria prpria.

Da mesma forma, com os dados obtidos, foi plotado o grfico entre absorbncia
em funo do comprimento de onda como mostra a Figura 3.

10
 Ax
1.300

1.100

Absorbncia % (medida) 0.900

0.700

0.500

0.300

0.100

-0.100 500 550 600 650 700 750 800

Comprimento de onda (nm)

Figura 3 - Grfico A x .

Fonte: Autoria prpria.

Verificou-se que no comprimento de onda de 670 nm obteve-se um valor de

absorbncia mxima de 1,204%, o qual demonstra que para esse valor mximo de A do
azul de metileno corresponde a regio do vermelho no espectro visvel, de 600 nm a 700
nm, pois esse composto absorve a regio do vermelho.
Atravs da equao 3, de posse dos valores da transmitncia, pode-se calcular
matematicamente os valores de absorbncia para cada comprimento de onda conforme
mostra a Tabela 3.

Tabela 3 - Absorbncia calculada.

Comprimento de onda (nm) T% (medida) A% (medida) A% (calculada)
500 85,5 0,067 0,0680
510 85,3 0,069 0,0691
520 84,8 0,071 0,0716
530 82,3 0,08 0,0846
540 79,7 0,098 0,0985
550 73,8 0,131 0,1319
560 67,7 0,161 0,1694
570 59,8 0,223 0,2233
580 50,6 0,295 0,2958
590 40,7 0,389 0,3904
600 29,7 0,527 0,5272
610 21,8 0,663 0,6615

11
 Continuao Tabela 3
620 19,4 0,711 0,7122
630 19,4 0,712 0,7122
640 16,2 0,791 0,7905
650 12,3 0,947 0,9101
660 7,3 1,138 1,1367
670 6,2 1,204 1,2076
680 13,3 0,875 0,8761
690 36,7 0,436 0,4353
700 67 0,174 0,1739
710 85,2 0,069 0,0696
720 91,6 0,038 0,0381
730 94,1 0,026 0,0264
740 95,7 0,018 0,0191
750 96,5 0,015 0,0155
760 97,5 0,02 0,0110
770 97,3 0,012 0,0119
780 97,6 0,011 0,0106
790 97,7 0,01 0,0101
800 98 0,009 0,0088
Fonte: Autoria prpria.

Diante do exposto possvel perceber que os valores calculados so muito

prximos dos valores medidos.
Atravs do comprimento de onda de 670 nm, o qual demonstrou um maior valor
de absorbncia, realizou-se a anlise de outras trs amostras com concentraes de azul
de metileno de 0,0001, 0,0004 e 0,0005, conforme a Tabela 4.

Tabela 4 - Valor de absorbncia para diferentes concentraes.

A (%) Concentraes (%)
1,204 0,0010
0,544 0,0005
0,498 0,0004
0,086 0,0001
Fonte: Autoria prpria.

De posse destes valores, plotou-se o grfico absorbncia em funo da

concentrao, como mostra a Figura 4.

12
 A (%) X C (%)
y = 1232,9x - 0,0334
1.3
R = 0,9953
1.2
1.1
1
0.9
0.8
0.7
0.6
0.5
0.4
0.3
0.2
0.1
0
0.0000 0.0001 0.0002 0.0003 0.0004 0.0005 0.0006 0.0007 0.0008 0.0009 0.0010 0.0011

Figura 4 - Grfico A x C.

Fonte: Autoria prpria.

possvel observar atravs do grfico, Fig. 4, que o valor referente a absorbncia

cresce com o aumento da concentrao das solues, como descreve a lei de Lambert-
Beer, uma vez que o aumento da concentrao implica em um maior nmero de partculas
que interagem com a radiao, ou seja, quanto maior a concentrao, maior a
probabilidade dos ftons serem absorvidos e consequentemente uma maior absorbncia.
Alm disso, de acordo com o mesmo princpio observou-se a relao linear entre
a absorbncia e a concentrao, podendo assim determinar a equao da reta da curva de
calibrao. A obteno da reta, mostrada na Figura 4, se deu atravs da linearizao pelos
mtodos dos mnimos quadrados utilizando a ferramenta do Software Excel.
De acordo com a Lei de Lambert-Beer, a absorbncia pode ser relacionada com a
concentrao do analito de acordo com a expresso:
= (5)
Onde: o coeficiente de absoro, l a espessura ptica da cubeta e C a
concentrao.
Desde modo, o coeficiente de absoro pode ser calculado, conforme a Tabela 5.
Tabela 5 - Coeficiente de absoro.

C% A% = A/lC (mdio)
0,0010 1,204 1204
0,0005 0,544 1088
1099,25
0,0004 0,498 1245
0,0001 0,086 860
Fonte: Autoria prpria.

13
 Comparando a equao da reta, dada pela Figura 4, com o coeficiente calculado
na Tabela 5 possvel perceber a aproximao dos valores que so: 1232,9 e 1099,25
respectivamente, mostrando a semelhana dos valores tericos com os prticos.
Sabendo que o fator de proporo pode ser dado por F=1/l, obteve-se o valor de
F=0,91 utilizando =1099,25.
Deste modo, foi possvel determinar a concentrao de uma amostra X
desconhecida a partir da absorbncia medida no equipamento. A Tabela 6 mostra os
resultados.

Tabela 6 - Concentrao da amostra X.

A% (medida) F C=F.A C (Equao)

0,134 0,00091 0,000122 0,000136
Fonte: Autoria prpria.

Com isso, descobriu-se o valor da concentrao de 0,000136% para a amostra X

que inicialmente era desconhecida.
A Tabela 7 mostra a ordem decrescente das concentraes de azul de metileno em
percentual de massa relativa a gua das cubetas analisadas.

Tabela 7 - Concentrao de todas as amostras.

C% A%
0,0010 1,204
0,0005 0,544
0,0004 0,498
X = 0,000136 0,134
0,0001 0,086
Fonte: Autoria prpria.

Para melhor entendimento visual, a Figura 5 mostra a tonalidade do contedo das

cubetas que encontram-se na mesma ordem da Tabela7.

14
 Figura 5 - Cubetas com concentrao de azul de metileno.

Fonte: Autoria prpria.

15
Concluso

O mtodo da curva analtica nos permitiu encontrar, atravs da curva de

calibrao, a concentrao de azul de metileno diludo em gua. Esse mtodo mostrou-se
relativamente eficiente, j que os erros das medidas foram de certa forma pequenos
quando comparados as medidas coletadas no espectrofotmetro e analiticamente.
Vale ressaltar que o uso do fator de calibrao requer a preparao de apenas um
padro, reduzindo assim o tempo e o custo da anlise. A escolha do mtodo far-se- de
acordo com a necessidade que surgir.
Comprovou-se experimentalmente que medida que aumenta a concentrao de
uma soluo aumenta a sua absorbncia, como descrito pela Lei de Lambert-Beer e que
atravs de processos fsicos, realizados pelo aparelho de espectrofotometria, podemos
analisar as propriedades das solues como exemplo a concentrao. E com a utilizao
de clculos juntamente com os resultados obtidos atravs do equipamento possvel
definir a concentrao de solues no conhecidas.
Como forma de exemplificao da anlise quantitativa por mtodos pticos, pode-
se dizer que tanto a obteno da absorbncia quanto a determinao da concentrao de
uma amostra desconhecida foram conduzidas de forma satisfatria, levando concluso
de que o experimento pode ser considerado como bem-sucedido.

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Referncias Bibliogrficas

[1] Pavia. D. L, Lampman. G. M. Kriz. G. S, Vyvyan. J. R. Introduo espectroscopia.

Ed. Cengage Learning. Traduo da 4 ed. 2014.

[2] VOGEL, Arthur Israel. [traduo por GIMENO, Antnio da] Qumica Analtica
Qualitativa 5 Edio So Paulo: Editora Mestre Jou, 1981.

17