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Facultad de Ingeniera
Escuela de Ingeniera Qumica
FACULTAD DE INGENIERA
CONCENTRACIONES DE SOLVENTE.
TRABAJO DE GRADUACIN
AL CONFERRSELE EL TTULO DE
INGENIERO QUMICO
1. ANTECEDENTES 1
2. MARCO TERICO 3
2.1. Sustancias naturales puras y productos fitoteraputicos 3
2.2. Laurel 3
2.2.1. Nombre 3
2.2.2. Sinonimias 4
2.2.3. Otros nombres populares 4
2.2.4. Descripcin botnica 4
2.2.5. Hbitat 5
2.2.6. Historia 5
2.2.7. Agricultura 6
2.2.8. Fuentes 6
2.2.9. Atributos sensoriales 7
2.2.10. Usos medicinales atribuidos 7
2.2.11. Otros usos populares 7
2.2.12. Farmacologa 8
I
2.2.13. Composicin qumica 8
2.2.14. Extractos 9
2.2.15. Farmacognosia 10
2.2.16. Toxicologa 10
2.2.17. Indicaciones teraputicas 11
2.3. Oleorresinas 11
2.3.1. Clasificacin de las Oleorresinas 15
2.3.2. Extraccin de Oleorresinas 16
2.3.2.1. Seleccin de solvente 16
2.3.2.2. Lixiviacin 18
2.3.2.3. Maceracin 21
2.3.2.4. Percolacin 22
2.3.3. Materia prima 23
2.3.3.1. Cultivo de plantas medicinales 23
2.3.3.2. Recoleccin 24
2.3.3.3. Procesamiento post cosecha 25
2.3.3.4. Almacenamiento 26
2.3.3.5. Molienda 27
2.3.4. Anlisis de la oleorresina 29
2.3.5. Cromatografa en fase gaseosa 29
2.3.6. Cromatografa lquida de alta resolucin 30
2.3.6.1. Tipos de HPLC 32
2.3.6.1.1. Cromatografa de fase
normal 32
2.3.6.1.2. Cromatografa de fase
reversa 33
2.3.6.1.3. Cromatografa de
exclusin molecular 35
2.3.6.1.4. Cromatografa de
II
intercambio inico 35
2.3.6.1.5. Cromatografa basada en
bioafinidad 36
2.3.6.2. Cromatografa gas lquido 36
2.3.6.3. Anlisis cualitativo 38
2.4. Aceites esenciales 39
2.4.1. Mtodos de obtencin de aceites esenciales 40
2.4.1.1. Destilacin por arrastre con vapor
de agua 41
2.4.1.2. Destilacin con vapor 41
2.4.1.3. Extraccin con disolventes voltiles 42
2.4.1.4. Extraccin con fluidos supercrticos 43
2.4.1.5. Enflorado 44
2.4.1.6. Maceracin 45
2.4.1.7. Expresin 45
2.4.2. Aceites encapsulados 46
2.4.3. Especies solubles secas y lquidas 46
2.5. Ventajas y desventajas de varios tipos de especies 47
2.5.1. Especies frescas 47
2.5.1.1. Ventajas 47
2.5.1.2. Desventajas 47
2.5.2. Aceites esenciales de especies 48
2.5.2.1. Ventajas 48
2.5.2.2. Desventajas 49
2.5.3. Oleorresinas de especies 49
2.5.3.1. Ventajas 49
2.5.3.2. Desventajas 50
2.5.4. Acuarresinas 51
2.5.4.1. Ventajas 51
III
2.5.4.2. Desventajas 51
2.5.5. Aceites esenciales u oleorresinas
encapsuladas 52
2.5.5.1. Ventajas 52
2.5.5.2. Desventajas 52
3. METODOLOGA 55
3.1. Localizacin 55
3.2. Recursos humanos 55
3.3. Obtencin de las muestras 55
3.4. Diseo de tratamientos 56
3.5. Metodologa experimental 58
3.5.1. Materiales y equipo utilizados en la
experimentacin 58
3.5.1.1. Materia prima 58
3.5.1.2. Cristalera 58
3.5.1.3. Equipo 58
3.5.1.4. Reactivos 60
3.5.2. Mtodo de extraccin de oleorresina a nivel
laboratorio 60
3.5.3. Mtodos para la caracterizacin de la
oleorresina, determinacin de las propiedades
fisicoqumicas de los extractos 61
3.5.3.1. Determinacin de densidad 61
3.5.3.2. Determinacin del ndice de
refraccin 61
3.5.3.3. Anlisis cromatogrfico 61
4. ANLISIS ESTADSTICO 63
4.1. Rendimientos de los extractos de oleorresina de cada
IV
una de las concentraciones utilizadas. 66
4.2. Prpiedades fisicoqumicas de los extractos de
oleorresina de cada una de las concentraciones
utilizadas 67
4.2.1. Densidad de los extractos de oleorresina 67
4.2.2. ndice de refraccin de los extractos de
oleorresina 68
4.2.3. Separacin de medias 69
5. RESULTADOS 71
6. DISCUSIN DE RESULTADOS 77
CONCLUSIONES 81
RECOMENDACIONES 83
REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS 85
BIBLIOGRAFA 87
APNDICE A 89
APNDICE B 91
ANEXO 99
V
VI
NDICE DE ILUSTRACIONES
FIGURAS
VII
de laurel (Litsea guatemalensis Mez.) 91
13. Diagrama de granulometra acumulada de la molienda
de la hoja de laurel (Litsea guatemalensis Mez.) 92
14. Rendimiento porcentual promedio de la oleorresina de laurel
(Litsea guatemalensis Mez.) en funcin de la solucin extractora 97
15. Densidad a 20 C de los extractos de la hoja de laurel promedio
(Litsea guatemalensis Mez.) en funcin de la solucin extractora 98
16. ndice de refraccin a 20 C de los extractos d e la hoja de
laurel promedio (Litsea guatemalensis Mez.) en funcin de
la solucin extractora 99
17. Cromatograma para la primera extraccin de oleorresina
de laurel (Litsea guatemalensis Mez.) utilizando etanol al 35% 101
18. Cromatograma para la segunda extraccin de oleorresina
de laurel (Litsea guatemalensis Mez.) utilizando etanol al 35% 102
19. Cromatograma para la tercera extraccin de oleorresina
de laurel (Litsea guatemalensis Mez.) utilizando etanol al 35% 102
20. Cromatograma para la primera extraccin de oleorresina
de laurel (Litsea guatemalensis Mez.) utilizando etanol al 70% 103
21. Cromatograma para la segunda extraccin de oleorresina
de laurel (Litsea guatemalensis Mez.) utilizando etanol al 70% 103
22. Cromatograma para la tercera extraccin de oleorresina
de laurel (Litsea guatemalensis Mez.) utilizando etanol al 70% 104
23. Cromatograma para la primera extraccin de oleorresina
de laurel (Litsea guatemalensis Mez.) utilizando etanol al 95% 104
24. Cromatograma para la segunda extraccin de oleorresina
de laurel (Litsea guatemalensis Mez.) utilizando etanol al 95% 105
25. Cromatograma para la tercera extraccin de oleorresina
de laurel (Litsea guatemalensis Mez.) utilizando etanol al 95% 105
VIII
TABLAS
IX
XIV. Estadstica descriptiva del ndice de refraccin de
los extractos etanlicos de la hoja de
laurel (Litsea guatemalensis Mez.) 94
XV. Medias y desviaciones estndar obtenidas en el rendimiento
de la oleorresina de laurel (Litsea guatemalensis Mez.) 95
XVI. Medias y desviaciones estndar de la densidad obtenidos
en los extractos etanlicos de la hoja de
laurel (Litsea guatemalensis Mez.) 95
XVII. Medias y desviaciones estndar del ndice de refraccin
obtenidos en los extractos etanlicos de la hoja de
laurel (Litsea guatemalensis Mez.) 96
XVIII. Prueba de Tukey Kramer para el rendimiento de la
oleorresina de laurel (Litsea guatemalensis Mez.) 96
XIX. Prueba de Tukey Kramer para la densidad de los extractos
etanlicos de la hoja de laurel (Litsea guatemalensis Mez.) 96
XX. Prueba de Tukey Kramer para el ndice de refraccin
de los extractos etanlicos de la hoja
de laurel (Litsea guatemalensis Mez.) 97
XXI. Prueba de homogeneidad de rendimiento, densidad e
ndice de refraccin para los extractos de la hoja de
laurel (Litsea guatemalensis Mez.) 99
X
LISTA DE SMBOLOS
Smbolo Descripcin
A Amperio
CG Cromatografa gaseosa
da Dimetro de agitador
dt Dimetro de tanque
g Gramos
h Horas
hp Caballo de fuerza
Hz Hertz
Ho Hiptesis nula
H1 Hiptesis alternativa
2
km Kilmetro cuadrado
L Litro
lb Libra
mg Miligramos
g Microgramos
mm Milmetro
min Minuto
mL Mililitros
N Norte
No Nmero
O Oeste
pH Potencial de hidrgeno
XI
rpm Revoluciones por minuto
SST Suma total de cuadrados
SSA Suma de cuadrados en tratamiento
SSE Suma de cuadrados del error
s21 Cuadrado medio del tratamiento
2
S Cuadrado medio del error
v Volumen (mL)
V Voltio
w Masa (g)
W Watt
% (v/v) Porcentaje en volumen
C Grados Celsius
Desviacin estndar
XII
GLOSARIO
XIII
Extracto Producto slido o espeso obtenido por
evaporacin de un zumo o de una disolucin
de sustancias vegetales o animales.
XIV
Saporfero Sustancia que produce sabor.
XV
XVI
RESUMEN
XVII
XVIII
OBJETIVOS
GENERAL
ESPECFICOS:
XIX
XX
HIPTESIS
HIPTESIS ESTADSTICA
Hiptesis nula
1 = 2 = 3
Hiptesis alternativa
1 2 3
XXI
Hiptesis nula
1 = 2 = 3
Hiptesis alternativa
1 2 3
Hiptesis nula
1 = 2 = 3
Hiptesis alternativa
1 2 3
XXII
INTRODUCCIN
XXIII
Se realizaron experimentos a nivel laboratorio, combinando los
tamaos de partculas y distintas concentraciones de solventes llegando a
determinar que el rendimiento de la oleorresina de laurel por extraccin con
lixiviacin utilizando el mtodo de maceracin dinmica depende
fundamentalmente de la concentracin y del solvente que se utilice y al
mismo tiempo esto tambin afecta la cantidad de componentes presentes en
la oleorresina as como sus propiedades fisicoqumicas.
XXIV
1. ANTECEDENTES
1
confirm presencia del Eugenol, como el compuesto mayoritario, en las nueve
extracciones; adems que se determin que no existe diferencia significativa en
el rendimiento porcentual de oleorresina de clavo (Eugenia cariophyllata,
Thunb) a diferentes tiempos de maceracin.
En 2006 Deulofeu, Nora, quien fue asesorada por Inga. Telma Cano, de
la Facultad de Ingeniera de la Universidad de San Carlos de Guatemala,
realiz la investigacin de tesis titulada Determinacin del rendimiento de la
oleorresina de tres distintas clases de de cardamomo (Elattaria cardamomum
Maton) cultivado en Alta Verapaz, extrada por maceracin dinmica y dos
solventes distintos, a nivel laboratorio en esta investigacin se determin a
travs de un anlisis cromatogrfico de capa fina, los componentes mayoritarios
de la oleorresina y a partir de cromatografa de gases acoplada con
espectrometra de masa la cantidad de componentes mayoritarios de la
oleorresina. Se utiliz como mtodo de extraccin maceracin dinmica. Se
obtuvo el mayor rendimiento con un valor de 6.3% utilizando como solvente
etanol.
2
2. MARCO TERICO
2.2. Laurel
2.2.1. Nombre
3
2.2.2. Sinonimias
4
2.2.5. Hbitat
2.2.6. Historia
5
Dioscorides afirma que las hojas son tiles para tratar enfermedades de
la vejiga, picaduras de abeja y avispa y en inflamaciones en general.
2.2.7. Agricultura
2.2.8. Fuentes
6
con la California Bay (Umbelleleria California Nott) o con la variedad china que
tienen un olor fenlico similar a las West Indian Bay.
7
2.2.12. Farmacologa
Monoterpenos oxigenados
1,8 cineol
Linalol
Terpinen 4 ol
Trans dihidrocarvona
Cis dihidrocarvona
Carvona
l carvona
Borneol
8
Hidrocarburos monoterpnicos
Limoneno
pineno
terpineno
pineno
Canfeno
p cimeno
Fraccin sesquiterpnica
Nerolidol
cariofileno
Cis bisaboleno
Otros
eudesmol
eudesmol
Acetato de bornilo
xido de linalol (2)
2.2.14. Extractos
9
y Phellandrene. En su aceite esencial se han identificado setenta y cuatro
compuestos diferentes. De estos los compuestos mayoritarios son el 1,8 cineol
con un 26.8%, el -terpineol con un 14.5% y el linalool con un 10.8%. (Badui,
1993)
2.2.15. Farmacognosia
La materia mdica son las hojas secas, las que deben tener las
caractersticas botnicas, fisicoqumicas y organolpticas que caracterizan a la
especie oficial. El aceite esencial de Litsea glaucescens tiene el olor
caracterstico pero difiere en su composicin qumica, contiene 10 compuestos
ms que Laurus nobilis y hay 17 compuestos comunes a ambos. La presencia
de limoneno en el aceite esencial reduce la dismenorrea por inhibicin de la
biosntesis de prostaglandina. (Ortz, 2005)
2.2.16. Toxicologa
10
2.2.17. Indicaciones teraputicas
2.3. Oleorresinas
11
disolvente es uno de los factores ms importantes en la extraccin de la
oleorresina. Despus de la separacin de las materias sobrantes se libera el
extracto de su disolvente voltil mediante la destilacin al vaco, lo que deja
como residuo la oleorresina deseada.
12
la pimienta negra y el jengibre eran solamente curiosidades de laboratorio en
los aos 30. Los tecnlogos comenzaron a explorar y descubrir formas de
mejorarlas y de utilizarlas en alimentos como si stas fueran las especies
originales de las cuales se derivan.
13
si lo que se desea es un sabor completo a pimienta negra. Los compuestos
deben de estar en la misma proporcin en la que estn en la especie original.
Las resinas y los aceites grasos actan como conectores naturales de los
compuestos ms voltiles del aceite esencial.
14
Estas acuaresinas son estandarizadas con mono, di y triglicridos, lecitina
y cido lctico, todos derivados de fuentes naturales. La produccin de
oleorresinas, superresinas, acuaresinas y otros productos similares no esta
limitada a estas dos compaas solamente. Otros productores calificados
abastecen productos comparables a la industria alimenticia y no deben pasarse
por alto.
15
que tpicamente se preparan por extraccin con alcohol acuoso y no con
disolventes. Se utilizan principalmente como agente saporfero en la
industria de elaboracin de alimentos.
16
extraccin, as como la permanencia en la composicin qumica de la materia
vegetal, representan dos aspectos de suma importancia.
Segn Lpez (2004) puesto que disolventes distintos pueden dar como
resultados productos de diferentes caractersticas de olor a partir de la misma
sustancia, la eleccin del disolvente es uno de los factores ms importantes en
la extraccin de la oleorresina.
17
En conclusin el proceso de extraccin esta compuesto de tres etapas: la
penetracin del solvente en la clula, la disolucin de las sustancias extrables y
la difusin de la solucin fuera de la clula vegetal. Este proceso de extraccin
involucra la remocin del componente deseado del material vegetal con un
menstruo apropiado, la evaporacin de todo o casi todo el disolvente y el ajuste
de los fluidos residuales, masa o polvos a estndares prescritos. Sustancias
inertes apropiadas pueden ser agregadas como vehculos o diluyentes para
mejorar las caractersticas fsicas. Se pueden aadir antimicrobianos y otros
preservativos apropiados para mantener la integridad. Los extractos pueden ser
sometidos a procesos que incrementen el contenido de constituyentes
caracterizados, disminuyan el contenido de compuestos no deseados, o ambos.
Los extractos a los que no se les han aadido sustancias inertes y no ha sido
sometido a ningn proceso, excepto el de la extraccin, se les conoce como
extractos nativos o crudos. (Deulofeu, 2006).
2.3.2.2. Lixiviacin
18
Debido a su gran variedad de aplicaciones y su importancia para
diferentes industrias antiguas, la lixiviacin tiene otros nombres. Entre los que
se encuentran en la ingeniera qumica estn la extraccin, la extraccin de
slido lquido, la percolacin, la infusin, el lavado y la decantacin por
sedimentacin. La corriente de slidos lixiviados y el lquido que la acompaa
se denominan lodos; en hidrometalurgia tambin se conoce como pulpa. El
contenido en slidos de las corrientes es denominado, en algunas ocasiones,
como marca (en particular en los procesos de separacin de aceites). La
corriente de lquido contenido en la solucin lixiviada es el clarificado. Como
abandona el proceso de lixiviacin, tiene otros nombres opcionales: extracto,
solucin, lixiviado o miscelado.
19
adecuada). La interpretacin prctica del equilibrio de lixiviacin es el estado
en que las corrientes de lodos y clarificado tiene la misma composicin.
20
2.3.2.3. Maceracin
21
combinan y concentran a la consistencia deseada, bajo presin reducida y
temperatura controlada. (Deulofeu, 2006)
2.3.2.4. Percolacin
22
2.3.3. Materia prima
23
Las plantas medicinales se diferencian de los dems productos
agrcolas. Mientras en un cultivo tradicional de plantas alimenticias la
productividad es medida por la cantidad producida en una determinada rea, en
un cultivo de plantas medicinales lo ms importante es la cantidad de principios
activos presentes en la planta, o sea que la productividad es medida
multiplicando la cantidad de materia vegetal producido por el contenido de los
principios activos y expresando el resultado en cantidad de principios activos
producidos por unidad de rea.
2.3.3.2. Recoleccin
24
En general, los glicsidos alcanzan su mayor concentracin en la tarde,
mientras los aceites esenciales alcanzan su mxima concentracin alrededor
del medioda, a excepcin de la manzanilla (Matricaria recutita), que alcanza
durante la noche la mxima concentracin y una calidad mejor de su aceite
esencial.
25
pueden presentarse prdidas de aceites esenciales y de sustancias voltiles,
as como el riesgo de degradacin de las sustancias termolbiles. La mayora
de las plantas medicinales pueden ser secadas a temperaturas que varan entre
30 C y 60 C. Las plantas que contienen aceites es enciales o sustancias
voltiles deben ser secadas a temperaturas inferiores a 40C. Debe
garantizarse una buena circulacin de aire para facilitar el proceso de secado.
2.3.3.4. Almacenamiento
26
perodos prolongados de tiempo depende de las condiciones de
almacenamiento; las condiciones apropiadas impiden que el producto tenga
contacto con el sol, el polvo, los roedores, los insectos y otros factores de
degradacin impidiendo la prdida de principios voltiles.
2.3.3.5. Molienda
27
En el caso de la droga previamente dividida, tales membranas se
encuentran parcialmente destruidas, lo que facilita la disolucin de los
constituyentes celulares en el lquido externo. Sin embargo, la divisin excesiva,
con formacin de polvos muy finos, puede causar problemas en el transcurso
de la extraccin.
28
2.3.4. Anlisis de la oleorresina
Entre las propiedades fsicas que se analizan para las oleorresinas estn
la densidad, el ndice de refraccin, solubilidad entre otros.
29
picogramos. Los resultados son cuantitativos y se obtienen en un espacio de
tiempo relativamente corto. Las desventajas son: los componentes de las
muestras deben ser estables a la temperatura de operacin, las muestras
tienen que ser voltiles; es necesario hacer un tratamiento preliminar de las
muestras, lo que convierte el proceso en difcil y complejo, adems que su
eficacia no es muy alta, como tcnica para las identificaciones cualitativas.
30
mediante el bombeo de lquido (fase mvil) a alta presin a travs de la
columna. La muestra a analizar es introducida en pequeas cantidades y sus
componentes se retrasan diferencialmente dependiendo de las interacciones
qumicas o fsicas con la fase estacionaria a medida que adelantan por la
columna. El grado de retencin de los componentes de la muestra depende de
la naturaleza del compuesto, de la composicin de la fase estacionaria y de la
fase mvil. El tiempo que tarda un compuesto a ser eluido de la columna se
denomina tiempo de retencin y se considera una propiedad identificativa
caracterstica de un compuesto en una determinada fase mvil y estacionaria.
La utilizacin de presin en este tipo de cromatografas incrementa la velocidad
lineal de los compuestos dentro la columna y reduce as su difusin dentro la
columna mejorando la resolucin de la cromatografa. Los disolventes ms
utilizados son el agua, el metanol y el acetonitrilo. El agua puede contener
tampones, sales, o compuestos como el cido trifluoroactico, que ayudan a la
separacin de los compuestos.
31
2.3.6.1. Tipos de HPLC
32
2.3.6.1.2. Cromatografa de fase reversa
La HPLC de fase reversa (RP HPLC) consiste en una fase inmvil apolar
y una fase mvil de polaridad moderada. Una de las fases estacionarias ms
comunes de este tipo de cromatografa es la slica tratada con RMe2SiCl,
dnde la R es una cadena alquil tal como C18H37 C8H17. El tiempo de
retencin es mayor para las molculas de naturaleza apolar, mientras que las
molculas de carcter polar eluyen ms rpidamente.
33
El tiempo de retencin aumenta con el rea de superficie hidrofbica que suele
ser inversamente proporcional al tamao del compuesto. Los compuestos
ramificados suelen eluir ms rpidamente que sus ismeros lineales puesto que
la superficie total se ve reducida.
Las columnas de fase reversa se echan a perder con menor facilidad que
las columnas de slica normales. Aun as, muchas columnas de fase reversa
estn formadas por slica modificada con cadenas alquil y no se deben utilizar
nunca con bases en medio acuoso puesto que stas podran daar el esqueleto
de slica subyacente. Las columnas se pueden utilizar en cidos en medio
acuoso pero no deberan estar expuestas demasiado tiempo al cido porque
puede corroer las partes metlicas del aparato de HPLC.
34
2.3.6.1.3. Cromatografa de exclusin molecular
35
intercambiadores inicos son: i) Resinas de poliestireno, ii) intercambiadores
inicos de celulosa y dextranos (geles) y iii) Slica porosa o vidrio de tamao de
poro controlado. En general los intercambiadores inicos favorecen la unin de
iones elevada carga y radio pequeo. Un incremento en la concentracin del
contrain (respeto a los grupos funcionales de la resina) reduce el tiempo de
retencin. Un incremento en el pH reduce el tiempo de retencin en las
cromatografas de intercambio catinico mientras que una disminucin del pH
reduce el tiempo de retencin en las cromatografas de intercambio aninico.
Este tipo de cromatografa es ampliamente utilizado en las siguientes
aplicaciones: purificacin de agua, concentracin de componentes traza,
cromatografa de protenas de intercambio inico, etc.
36
gobernado por la particin del soluto entre la fase gaseosa en movimiento y la
fase lquida estacionaria. Por tanto la velocidad de transporte para un soluto a
travs de una columna depende de la velocidad de flujo del gas transportador,
de la temperatura y de la fase lquida estacionaria. Hay un gran nmero de
choques entre la fase en movimiento y la fase estacionaria para cada molcula
de soluto, con el resultado de que aun los compuestos que son casi idnticos
pueden ser separados.
La fase mvil debe tener bajo costo, ser compatible con el detector y
tener alta pureza. Para dar mayor reproducibilidad al anlisis, la saturacin del
gas debe ser constante y debe ser controlada a travs de vlvulas de gas. La
inyeccin se realiza generalmente con microjeringas que contienen la muestra.
El volumen inyectado no debe superar la capacidad de la columna, y entre ms
pequeo sea el volumen usado de la muestra mayor ser la eficiencia y la
reproducibilidad del anlisis. La temperatura aplicada debe ser suficiente para la
volatilizacin de la muestra.
37
utilizadas porque presentan mejor eficiencia en la separacin ya que
proporcionan un nmero mayor de platos tericos. Estas columnas permiten la
aplicacin de una menor presin en el sistema. Una mayor longitud da como
resultado mayor rapidez en los anlisis y mejor resolucin de los picos, con un
menor volumen de la muestra inyectada.
Con el paso adicional de algn otro gas, adems del gas transportador
por un lado del detector, la conductividad trmica de ese lado cambia y el
puente queda fuera de balance. La seal de desbalanceo se amplifica y se
alimenta a un registrador grfico (Sharapin, 2000).
38
fragmentos inicos que sern analizados de manera cualitativa. Se obtiene un
espectro de masa caracterstico de la sustancia fragmentada que permite su
identificacin a partir de la comparacin con una base de datos espectrales. El
cromatgrafo generalmente es de columna capilar para la reduccin de la
presin en la cmara de ionizacin (1 5 mL/min), y posee una interfase de tipo
conexin directa o de divisor abierto, para la conexin de los dos sistemas, la
cual tiene como funcin concentrar y separar las molculas de la muestra del
gas de arrastre y de la fase mvil.
39
parcialmente en etanol, en cloroformo y en aceites fijos y es insoluble en agua.
(Lpez, 2004)
40
2.4.1.1. Destilacin por arrastre con vapor de agua
Los extractores constan de las siguientes partes: una fuente de calor que
genera vapor, un recipiente para alojar la hierba con agua, un colector del
aceite esencial separado y un refrigerante para los vapores. En los laboratorios
se utilizan balones de 1 y 5 litros, mientras que los equipos industriales pueden
llegar a tener una capacidad de hasta 8,000 10,000 litros en el recipiente para
colocar la hierba. El vapor de agua atraviesa la hierba colocada en el
recipiente, extrae y arrastra el aceite esencial que tiene bajo punto de
volatilizacin y lo lleva hasta el refrigerante, donde al enfriarse se condensa y se
separa el agua del aceite por densidad. Si el aceite es menos denso queda en
la superficie y si es ms denso que el agua, va al fondo. De esta manera es fcil
separarlo. Coobacin es el proceso mediante el cual el agua condensada
regresa al proceso, despus de ser separada del aceite. El retorno del agua
condensada tiene por objeto minimizar las prdidas de componentes polares,
principalmente de los fenoles, disueltos en el agua. Sin embargo, la
permanencia de componentes solubles en el agua durante ms tiempo da como
resultado una mayor posibilidad de hidrlisis o la descomposicin trmica,
principalmente en el caso de la destilacin con agua.
41
frecuentemente a una mayor presin que la atmosfrica, es introducido
atravesando el material colocado sobre un soporte. La gran ventaja de este
proceso consiste en que la cantidad de vapor de agua puede ser controlada.
42
Si el procedimiento se hace en fro a temperatura menor a 50 C el aceite
llevar el nombre de aceite virgen, si la temperatura es mayor a 50 C los
cidos grasos se envician.
43
cambian qumicamente los componentes de la esencia, sin embargo el equipo
requerido es relativamente costoso, ya que se requieren bombas de alta presin
y sistemas de extraccin tambin resistentes a las altas presiones.
2.4.1.5. Enflorado
44
de Europa, es restringido a las flores que despus de cortadas continan su
actividad fisiolgica formando y emitiendo perfume.
2.4.1.6. Maceracin
2.4.1.7. Expresin
45
se prensa contra una esponja y el aceite se absorbe en ella, que se exprime
peridicamente. Una persona puede preparar slo 680 gramos de aceite de
limn por da siguiendo este mtodo, an se practica, especialmente en Silicia.
Este mtodo de extraccin est prcticamente limitado a los aceites obtenidos
de frutas ctricas. (Sharapin, 2000)
46
vehculo. El solvente es el factor limitante probable en el uso de este tipo de
especie soluble que es utilizada principalmente para salmueras y sopas
enlatadas.
2.5.1.1. Ventajas
2.5.1.2. Desventajas
47
Las hierbas de las especies ya secas pierden aroma y sabor.
La presencia de enzimas de lipasa puede afectar el sabor de
productos en almacenaje.
Fcilmente adulterables con material extrao o con especies
de calidad inferior.
Sujetos de contaminacin en la fuente, en el transporte y en el
almacenaje.
Se necesitan grandes espacios en bodega para su
almacenaje.
La bodega, planta y oficinas se contaminan con polvillo de la
especie durante la operacin de molienda.
Algunas especies presentan recuentos de bacterias
extremadamente altos.
Las especies molidas contribuyen negativamente en las
especificaciones del producto terminado.
Distribucin pobre del sabor en algunos productos terminados.
Incluso las especies esterilizadas contienen restos de
insectos muertos, larvas o huevos.
2.5.2.1. Ventajas
48
Presentan buena estabilidad bajo condiciones normales de
almacenaje.
2.5.2.2. Desventajas
2.5.3.1. Ventajas
49
Bajo contenido de humedad, relativamente insignificante.
Vida til prolongada en condiciones normales y semi adversas
de almacenaje.
Minimizacin de la volatilidad de aceites esenciales gracias a la
presencia de resinas.
Requerimientos de menor espacio en bodega comparados con
los necesarios para almacenar cantidades equivalentes de
especie natural.
2.5.3.2. Desventajas
50
2.5.4. Acuarresinas
2.5.4.1. Ventajas
2.5.4.2. Desventajas
51
2.5.5. Aceites esenciales u oleorresinas encapsuladas
2.5.5.1. Ventajas
2.5.5.2. Desventajas
52
Figura 1. Oleorresinas y especies solubles obtenidas de especies frescas
Especies en su
estado natural
1. Se evala muestra de especie, para verificar que cumpla con las especificaciones.
2. Limpieza de la especie para remover cualquier materia extraa
3. Trituracin y/o pulverizacin de la especie para facilitar la extraccin de la parte
soluble
4. Determinacin del mejor solvente para la extraccin.
Recuperacin Desechos de
del solvente materia inerte
Aceites Oleorresinas
esenciales
1. Anlisis analtico al extracto para validar que cumpla con las especificaciones
establecidas
2. Pruebas sensoriales al extracto para determinar su equivalencia con al especie original
53
54
3. METODOLOGA
3.1. Localizacin
55
Repblica, tiene una extensin territorial de 201 km2. Est situado a 88
kilmetros de distancia de la Ciudad de Guatemala. Se ubica a unos 2,286
metros sobre el nivel del mar con coordenadas 14 4 5 39 N, 90 59 54 O. Su
clima es de templado a fro, llegando a tener temperaturas entre los 10 y 23 C.
Colinda al norte de Joyabaj (Quich), al este con Santa Apolonia y Comalapa
(Chimaltenango), al sur con Santa Cruz Balanza y Patzn (Chimaltenango), al
oeste con Chichicastenango (Quich), y San Andrs Semetabaj y San Antonio
Palop (Solol), entronca con la carretera interamericana CA 1
aproximadamente a km.
56
concentraciones antes mencionadas se pretendi saber cual era la mejor
opcin para la extraccin de la oleorresina (Lpez, 2004). El tamao del
tratamiento de lixiviacin en funcin de la relacin hoja seca/solvente fue de
1:10 (w/v) debido a que relaciones con menor cantidad de solvente no cubren
en su totalidad a la materia prima con lo cual no se crea una humectacin total
de la misma, a la vez que no permita la agitacin constante de la solucin; para
esto se utiliz una relacin de dimetro de agitador (da) y dimetro de tanque
(dt) de 1:2.5 (Treybal, 1993).
57
3.5. Metodologa experimental
3.5.1.2. Cristalera
3.5.1.3. Equipo
Plancha de calentamiento
Marca: CORNING
Modelo: PC-620
Voltaje: 120 V
Frecuencia: 60 Hz.
Potencia: 1113 W.
Hecha en Estados Unidos Figura 2. Plancha de calentamiento
58
Bomba de vaco
Marca: Gast
Modelo: O523-VAFG588DX
Voltaje: 100 -115 V
Frecuencia: 50 Hz.
Potencia: Hp.
Revoluciones: 1725/1425 rpm Figura 3. Bomba de vaco
Balanza
Marca: Adventurer
Serie: G1231202040133
Voltaje: 8 -14.5 V
Frecuencia: 50/60 Hz.
Mxima Capacidad: 150 g.
Lectura Mnima: 0.001 g
Hecha en Estados Unidos Figura 4. Balanza
Refrigeradora
Marca: Daewoo
Modelo: FR-147RV
Voltaje: 115 - 120 V
Frecuencia: 60 Hz.
Amperaje1.1 A
Refrigerante: R-134
Hecha en Korea Figura 5. Refrigeradora
59
Rotavapor
Marca: Bchi
Modelo: R-200
No. Fabricacin: 414191030002
Voltaje: 120 V
Frecuencia: 50/60 Hz.
Potencia: 120 W
Hecho en Flawil, Suiza. Figura 6. Rotavapor
3.5.1.4. Reactivos
60
recuperando de esta forma el solvente del producto deseado ya en forma
concentrada realizndola a un vaco de 20 pulgadas de mercurio. Al finalizar la
destilacin al vaco se recogi el producto en frascos color mbar. Este
procedimiento se repiti para cada uno de los experimentos.
61
62
4. ANLISIS ESTADSTICO
a) Porcentaje de etanol/agua
b) El numero de extracciones
63
Tabla I. Organizacin de datos de ANDEVA
Tratamientos
1 2 3
Repeticiones
1 Y11 Y21 Y31
2 Y12 Y22 Y32
3 Y13 Y23 Y33
Total T1* T2* T3* T**
Fuente: Walpole, 1999.
Grados
Fuente de Suma de Cuadrados F F
de
Variacin Cuadrados Medios calculada tabulada
Libertad
SSA
Tratamientos k-1 SSA S12 =
k 1
S12
SSE
Error k(n - 1) SSE S2 = S2
k (n 1)
Total nk 1 SST
Fuente: Walpole, 1999
T*2*
FC = [Ec. No. 1]
kn
SSA =
k
Ti 2
FC
[Ec. No. 2]
i =1 ni
[Ec. No. 3]
k ni
SST = Yij2 FC
i =1 j =1
64
SSE = SST SSA
[Ec. No. 4]
S12 =
SSA [Ec. No. 5]
k 1
S2 =
SSE [Ec. No. 6]
k (n 1)
Y la regla de decisin:
F tabulada:
Donde:
v1 = k (n 1) [Ec. No. 7]
v2 = n 1 [Ec. No. 8]
65
4.1. Rendimientos de los extractos de oleorresina de cada una de las
concentraciones utilizadas.
Hiptesis:
66
Tabla IV. ANDEVA de rendimientos de los extractos de oleorresina de cada
una de las concentraciones utilizadas.
Grados
Fuente de Suma de Cuadrados F F
de Probabilidad
variacin cuadrados medios Calculada Tabulada
libertad
Tratamientos 156.27 2.00 78.13
Error 3.87 6.00 0.65 120.99 5.14 1.4164E-05
Total 160.14 8.00
Fuente: Anlisis estadstico (Programa PHSTAT)
Tratamientos
Etanol Etanol Etanol
Repeticiones 35% 70% 95%
67
Hiptesis:
Grados
Fuente de Suma de Cuadrados F F
de Probabilidad
variacin cuadrados medios Calculada Tabulada
libertad
Tratamientos 0.02289 2.00 0.01144
Error 0.00010 6.00 0.00002 686.58 5.14 8.23398E-08
Total 0.02299 8.00
Fuente: Anlisis estadstico (Programa PHSTAT)
68
Hiptesis:
Grados
Fuente de Suma de Cuadrados F F
de Probabilidad
variacin cuadrados medios Calculada Tabulada
libertad
Tratamientos 0.00242 2.00 0.001209
Error 0.00008 6.00 0.000014 86.36 5.14 3.78422E-05
Total 0.00250 8.00
Fuente: Anlisis estadstico (Programa PHSTAT)
69
a. Diferencia mnima significativa
b. Prueba de Tukey - Kramer
c. Prueba de Scheffe
70
5. RESULTADOS
1 5.55 11.09
Etanol 35% 2 5.39 10.79 10.85 +/- 0.2199
3 5.33 10.66
1 7.74 15.47
Etanol 70% 2 7.48 14.96 15.38 +/- 0.2235
3 7.86 15.72
1 11.02 22.03
Etanol 95% 2 10.77 21.53 21.03 +/- 1.3187
3 9.77 19.54
Fuente: Datos Calculados
71
Figura 7. Porcentaje de rendimiento de la oleorresina de laurel (Litsea
guatemalensis Mez.) en funcin de la solucin extractora
25
20
15
Rendimiento (%)
10
5
Etanol al 95%
Etanol al 70%
0
1 Etanol al 35%
2
3
Nmero de extraccin
72
Figura 8. Densidad a 20 C de los extractos etanli cos de la hoja de laurel
(Litsea guatemalensis Mez.) en funcin de la solucin extractora
0.980
0.960
0.940
0.920
Densidad (g/mL)
0.900
0.880
0.860
0.840
0.820
0.800 Etanol al 95%
0.780
Etanol al 70%
0.760
1 Etanol al 35%
2
3
Nmero de extraccin
Fuente: Tabla IX
73
Figura 9. ndice de refraccin a 20 C de los extra ctos etanlicos de la hoja
de laurel (Litsea guatemalensis Mez.) en funcin de la solucin
extractora
1.530
1.520
1.510
ndice de refraccin
1.500
1.490
1.480
1.470
Etanol al 95%
1.460
Etanol al 70%
1.450
1 Etanol al 35%
2
3
Nmero de extraccin
Fuente: Tabla IX
74
Tabla X. Sntesis del anlisis de cromatografa de gas acoplada con
espectrometra de masa (CG EM) de oleorresina de laurel
(Litsea guatemalensis Mez.)
rea (%)
Etanol 35% Etanol 70% Etanol 95%
No. Componente No. CAS 1 2 3 1 2 3 1 2 3
75
76
6. DISCUSIN DE RESULTADOS
77
utilizaron 3 concentraciones de etanol (95%, 70% y 35% v/v) y un tamao de
partcula que pas el tamiz No. 5 (4 mm) y fue retenido por un tamiz No. 200
(75 m), con 3 repeticiones para cada concentracin de solvente resultando 9
unidades experimentales en total.
78
Otro de los puntos evaluados en la investigacin fue la determinacin de la
densidad teniendo como resultado que la densidad aument en comparacin
con las densidades de los solventes puros (Etanol al 95% 0.810 g/mL, Etanol al
70% 0.866 g/mL, Etanol al 35% 0.943 g/mL). Para los valores de densidad
obtenidos, hay un efecto significativo del solvente utilizado ya que se puede
observar que la densidad de los extractos de oleorresina tienen un
comportamiento inverso en comparacin con la concentracin de solvente
utilizada; teniendo tambin en cuenta que ningn extracto segn el solvente
sobrepasa la densidad de otro solvente con densidad mayor.
79
80
CONCLUSIONES
81
7. Para los valores de densidad de los extractos etanlicos obtenidos de
la hoja de laurel (Litsea guatemalensis Mez.) en funcin de la
concentracin de la solucin extractora se tiene que si hay diferencia
significativa.
82
RECOMENDACIONES
83
84
REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS
85
86
BIBLIOGRAFA
87
6. Standley, Paul C. & Steyermark, Julian. Flora of Guatemala. Fieldiana:
Botany. 24 (4): 314-317.
88
APNDICE A
Figura 10. Requisitos acadmicos para la elaboracin de tesis en ingeniera qumica relativa a la
extraccin de oleorresina de laurel (Litsea guatemalensis Mez.).
1 e r p a so 2 d o p a so 3 e r p a so 4 to p a so 5 to p a so 6 to p a so 7 m o p a so 8vo p aso
T em a P ro b le m a a
C a rre ra re a T e m a g e n ric o E s p e c ific a c i n H ip te s is T e m a rio te n ta tiv o
e s p e c ific o re so lv e r
M to d o s
T a m iz a je
Q u im ica Q u m ica O rg n ica cu a lita tiv o s y
fito q u m ico
p re cip ito m trico s
Licenciatura en Ingeniera Qumica
A d so rci n
C ie n cia s b sica s y
co m p le m e n ta ria s
O p e ra cio n e s
U n ita ria s
M a n e jo d e S lid o s G ra n u lo m etra
C o m p le m e n ta ria s
(IQ -6 )
89
Figura 11. Diagrama de evaluacin del proceso de lixiviacin para la extraccin de oleorresina de laurel
(Litsea guatemalensis Mez.).
Agua
Fluido
Compresible Animal
Sin
Temperatura Biolgico
Coadyudante 25 C
Fluido Vegetal
Incompresible Lixiviacin
Otros
Fluido
Con Masa
Supercrtico Orgnico
Coadyudante 1
Mezcla:
Etanol - Agua Presin Temperatura Volumen
60 C 10
1 atm. Inorgnico Evaluacin del
Recuperacin proceso de
Extraccin
lixiviacin
Slido-Lquido Relaciones
Regular Tiempo de extraccin de Diseo a nivel
Hexagonal Lixiviacin
Esfrica
3 horas Maceracin
Calentamiento / agitacin
laboratorio
Cbica Maceracin Dinmica Requerimientos
Geometra Esttica Del Equipo
Dinmica
Tcnica de Vidrio
No
Dispersin Extraccin
Irregular
Poroso
Agitacin Material
Y Mezcla Percolacin
Agotamiento Earlenmeyer
Porosidad Tipo de
Extraccin Lavado
Geometra
Poro
Abierto
Neutro
Esttica Acido
Tamao Poro
Enchaquetamiento
Cerrado Medio de Agitador magntico
Poroso
nica Extraccin
Tamiz 5 - 200 Diseo de
Etapas de
Etanol 95% Base Agitador
Extraccin
Caracterizacin Mltiples
Diseo del
de Partcula Proceso de equipo
Extraccin
90
Tabla XI. Granulometra de la molienda de la hoja de laurel (Litsea
guatemalensis Mez.)
45
40
35
Retencin (%)
30
25
20
15
10
5
0
0 1 2 3 4 5 6 7 8
Tamiz
Fuente: Tabla XI
91
Figura 13. Diagrama de granulometra acumulada de la molienda de la hoja
de laurel (Litsea guatemalensis Mez.)
450
400
350
300
Peso (g)
250
200
150
100
50
0
0 1 2 3 4 5 6 7 8
Tamiz
Fuente: Tabla XI
92
APNDICE B
93
Tabla XIII. Estadstica descriptiva de la densidad de los extractos
etanlicos de la hoja de laurel (Litsea guatemalensis Mez.)
94
Tabla XV. Medias y desviaciones estndar obtenidas en el rendimiento de
la oleorresina de laurel (Litsea guatemalensis Mez.)
95
Tabla XVII. Medias y desviaciones estndar del ndice de refraccin
obtenidos en los extractos etanlicos de la hoja de laurel
(Litsea guatemalensis Mez.)
96
Tabla XX. Prueba de Tukey Kramer para el ndice de refraccin delos
extractos etanlicos de la hoja de laurel (Litsea guatemalensis
Mez.)
23
21
19
Rendimiento (%)
17
15
13
11
9
Etanol 35% Etanol 70% Etanol 95%
97
Figura 15. Densidad a 20 C de los extractos de la hoja de laurel promedio
(Litsea guatemalensis Mez.) en funcin de la solucin
extractora
0.97
0.95
0.93
0.91
0.89
0.87
0.85
0.83
Etanol 35% Etanol 70% Etanol 95%
98
Figura 16. ndice de refraccin a 20 C de los extr actos de la hoja de laurel
promedio (Litsea guatemalensis Mez.) en funcin de la
solucin extractora
1.53
1.52
1.51
1.50
1.49
1.48
1.47
Etanol 35% Etanol 70% Etanol 95%
99
100
ANEXO
Abundance
TIC: 4574R.D
19.80
600000
550000
500000
450000
400000
350000
13.04
300000
250000
9.13 17.26
200000
150000
13.24
12.36 17.19
100000 14.7316.19
13.17
13.14
12.93
12.31 16.88
17.97
11.30 13.65 17.13 18.97
9.91 11.95
11.51 15.93 20.17
21.64
50000 7.68
7.35 9.34
8.57 12.05 14.12
10.70 15.52 17.69
0
6.00 8.00 10.00 12.00 14.00 16.00 18.00 20.00 22.00 24.00 26.00 28.00
Time-->
Fuente: Informe de laboratorio de toxicologa, Anlisis de CG - EM
101
Figura 18. Cromatograma para la segunda extraccin de oleorresina de
laurel (Litsea guatemalensis Mez.) utilizando etanol al 35%.
Abundance
TIC: 4575.D
13.06
200000
12.96
180000
160000
11.29
140000
9.91
120000 9.34
13.29
9.12 13.19
100000 11.50
80000 7.68 9.71 11.94
7.46 12.0313.65
14.12
7.41 8.57 11.68
11.45
60000 8.17 10.22 12.42
12.30
6.92 9.8211.08 13.97
12.74
7.34 10.70
40000
20000
0
6.00 8.00 10.00 12.00 14.00 16.00 18.00 20.00 22.00 24.00 26.00 28.00
Time-->
Fuente: Informe de laboratorio de toxicologa, Anlisis de CG - EM
Abundance
TIC: 4576.D
13.06
220000
200000
180000
12.95
11.29
160000
140000
120000
100000 13.29
13.23
80000 13.19
9.12
9.34
12.05
11.49 14.12
60000 8.57 12.38
11.67
11.45
8.309.70
7.67 9.91 11.94
11.08
8.16
8.779.81 12.78
40000 10.70
20000
0
6.00 8.00 10.00 12.00 14.00 16.00 18.00 20.00 22.00 24.00 26.00 28.00
Time-->
Fuente: Informe de laboratorio de toxicologa, Anlisis de CG - EM
102
Figura 20. Cromatograma para la primera extraccin de oleorresina de
laurel (Litsea guatemalensis Mez.) utilizando etanol al 70%.
Abundance
TIC: 4577.D
200000
12.95
9.12
190000
180000
170000
160000
150000
11.29
140000
130000
12.38
120000
110000 7.46
13.05 15.11
100000
90000 14.73
13.29
80000
30000
20000
10000
0
6.00 8.00 10.00 12.00 14.00 16.00 18.00 20.00 22.00 24.00 26.00 28.00
Time-->
TIC: 4578R.D
11.29
190000
180000
170000
160000
12.95
150000
140000
130000
13.06
120000
9.34
110000
100000
13.30
90000
80000 9.71
13.20
13.23
70000 14.12
8.57 12.40
11.50
60000 9.91
7.67 11.68
12.06
12.45
50000 7.43 10.26 11.9413.66
11.46
10.06
9.83
10.22
11.07 14.45
14.31
40000 7.378.18
6.90 8.81
30000
20000
10000
0
6.00 8.00 10.00 12.00 14.00 16.00 18.00 20.00 22.00 24.00 26.00 28.00
Time-->
103
Figura 22. Cromatograma para la tercera extraccin de oleorresina de
laurel (Litsea guatemalensis Mez.) utilizando etanol al 70%.
Abundance
TIC: 4578B.D
380000 13.01
360000
11.30
340000
320000
9.34
300000
280000
260000
240000
220000 13.12
200000
180000
8.59
160000
140000
13.30
120000 9.71
14.13
11.4613.19
11.50 13.24
9.91 12.83
100000 7.48
10.2711.72 13.67
13.78
14.31
80000 14.47
8.18 10.09
7.69 10.33 11.95
12.06
9.83 11.99
11.09 13.98
60000 10.00
9.23
10.51
10.69 14.87
6.91 8.38
40000
20000
0
6.00 8.00 10.00 12.00 14.00 16.00 18.00 20.00 22.00 24.00 26.00 28.00
Time-->
Abundance
TIC: 4579.D
12.59
360000
340000
320000
300000
280000
260000
240000
220000
200000 9.87
180000 13.29
160000
140000
9.95 13.59
15.10
120000 11.29
100000
14.66
80000
9.70
13.46
12.78
13.70
60000 13.23
12.48
13.01
11.79
40000
20000
0
6.00 8.00 10.00 12.00 14.00 16.00 18.00 20.00 22.00 24.00 26.00 28.00
Time-->
104
Figura 24. Cromatograma para la segunda extraccin de oleorresina de
laurel (Litsea guatemalensis Mez.) utilizando etanol al 95%.
Abundance
TIC: 4580.D
150000 9.87
140000
12.59
130000
120000
110000
9.95
100000
90000 9.12
80000
13.29
70000
60000 15.11
50000 13.23
13.70
9.70 14.66
40000 12.79
12.49
11.7913.43
13.59
30000
20000
10000
0
6.00 8.00 10.00 12.00 14.00 16.00 18.00 20.00 22.00 24.00 26.00 28.00
Time-->
Fuente: Informe de laboratorio de toxicologa, Anlisis de CG - EM
Abundance
TIC: 4581.D
1000000 12.59 15.11
900000
9.87
800000
700000
600000
500000
9.96
400000 13.30
105